臨床微生物課件寇曉霞-葡萄球菌

第七章：球菌

寇曉霞

kouxiaoxia163@163.com

廣州醫(yī)科大學(xué)金域檢驗(yàn)學(xué)院2?球菌（coccus）：

指?jìng)€(gè)體形狀呈球形或橢圓形的一大類細(xì)菌，臨床上通常引起機(jī)體化膿性炎癥，故又稱化膿性球菌（pyogeniccoccus）

球菌

重點(diǎn)掌握內(nèi)容1、臨床常見(jiàn)化膿性球菌的種類，金葡菌的主要鑒定要點(diǎn)有哪些?2、金葡菌的主要致病物質(zhì)和所致的疾病有哪些，什么是SPA?3、葡萄球菌的生物學(xué)特性和主要鑒定特征CNS致病條件和所致疾病主要包括哪些?4、什么是MRSA?4葡萄球菌屬(Staphylococcus)鏈球菌屬(Streptococcus)腸球菌屬(Enterococcus)奈瑟菌屬(Neisseria)革蘭陽(yáng)性球菌革蘭陰性球菌常見(jiàn)球菌莫拉菌屬(Moraxcella)第一節(jié)葡萄球菌屬（Staphylococcus）

葡萄球菌屬是一大類鏡下多呈葡萄串樣成堆不規(guī)則排列的革蘭氏染色陽(yáng)性球菌

概念海南島，某部官兵準(zhǔn)備在端午節(jié)作一次實(shí)彈演習(xí)。

為鼓舞士氣，過(guò)好節(jié)日，炊事員在端午節(jié)前夜將面和好，蓋上籠布。第二天早晨做成糖糕，上籠蒸了30min。官兵們吃完蒸熟的糖糕，列隊(duì)出發(fā)，到靶場(chǎng)訓(xùn)練。

二個(gè)小時(shí)后，吃過(guò)糖糕的士兵出現(xiàn)嘔吐，繼之腹痛、腹瀉，訓(xùn)練不得不終止。

病例分析●

化學(xué)性食物中毒●

生物性食物中毒●

細(xì)菌性食物中毒食物中毒

病例分析

病例分析1、神經(jīng)型食物中毒（肉毒毒素）

臨床表現(xiàn)以神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，如眼肌及咽肌癱瘓為主要特征。

潛伏期短，以急性胃腸炎為主要表現(xiàn)。常見(jiàn)致病菌有：沙門菌、副溶血弧菌、大腸埃希菌、蠟樣芽胞桿菌、金黃色葡萄球菌等。2、胃腸型食物中毒

病例分析（1）最有可能由什么細(xì)菌引起的食物中毒？為什么？（2）如何證實(shí)你的推測(cè)？（3）從此次事件中應(yīng)吸取哪些教訓(xùn)？

問(wèn)題

分類有39個(gè)種21個(gè)亞種引起人類疾病的3.腐生葡萄球菌（S.saprophyticus）1.金黃色葡萄球菌（S.aureus）2.表皮葡萄球菌（S.epidermidis）4.頭狀葡萄球菌（S.capitis）5.人葡萄球菌（S.hominis）

分類有39個(gè)種21個(gè)亞種凝固酶

凝固酶陽(yáng)性菌株(coagulasepositivestaphylococcus)凝固酶陰性菌株(CNS)coagulasenegativestaphylococcus)

各種化膿性感染

食物中毒皮膚燙傷綜合征毒性休克綜合征

葡萄球菌引起的疾病凝固酶陽(yáng)性菌：

以金葡菌為代表醫(yī)院內(nèi)感染的主要病原菌泌尿系感染細(xì)菌性心內(nèi)膜炎菌血癥術(shù)后及植入醫(yī)用器械引起的感染

葡萄球菌引起的疾病凝固酶陰性菌：

以表皮葡萄球菌為代表

醫(yī)學(xué)特性-致病物質(zhì)凝固酶陽(yáng)性菌凝固酶陰性菌各種侵襲性酶類多種毒素血漿凝固酶葡萄球菌溶素細(xì)菌胞壁外粘質(zhì)耐熱核酸酶腸毒素溶血素透明質(zhì)酸酶毒性休克綜合征毒素殺白細(xì)胞毒素表皮剝脫性毒素金黃色葡萄球菌表皮、腐生、人、頭狀等30余種鑒別葡萄球菌有無(wú)致病性的重要指標(biāo)1）凝固酶(coagulase)：使血漿發(fā)生凝固。●結(jié)合型和游離型

●抵抗吞噬細(xì)胞吞噬●保護(hù)細(xì)菌不受血清中殺菌物質(zhì)的破壞●易于局限化●易形成血栓1、主要致病物質(zhì)—凝固酶

醫(yī)學(xué)特性-致病性

金黃色葡萄球菌主要引起皮膚粘膜、多種組織器官的化膿性炎癥（膿腫），是最常見(jiàn)的化膿性球菌。毛囊炎癤癰

醫(yī)學(xué)特性-致病性

內(nèi)臟器官感染：氣管炎、肺炎、血源性肺膿腫、膿胸、中耳炎、腦膜炎等。蜂窩組織炎傷口化膿敗血癥：新生兒敗血癥最為常見(jiàn)

醫(yī)學(xué)特性-致病性2、主要致病物質(zhì)—表皮剝脫毒素●彌漫性紅斑和水泡●表皮大片脫落●引起燙傷樣皮膚綜合征●多見(jiàn)于新生兒、幼兒和免

疫力低下的成人?！袷删wⅡ型金葡菌產(chǎn)生。

醫(yī)學(xué)特性-致病性治療后治療前金葡菌性燙傷樣皮膚綜合癥

醫(yī)學(xué)特性-致病性3、主要致病物質(zhì)—腸毒素●

耐熱：100℃30min不被破壞●抵抗胃和腸道內(nèi)蛋白酶的水解●刺激嘔吐中樞，引起以嘔吐為主的食物中毒●產(chǎn)生條件：含淀粉及水份較多的食品，

溫度在20℃以上，生長(zhǎng)繁殖8～10h后

醫(yī)學(xué)特性-致病性●

細(xì)胞毒素—破壞白細(xì)胞●攻擊中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞●抵抗宿主吞噬細(xì)胞，增強(qiáng)細(xì)菌侵襲力

醫(yī)學(xué)特性-致病性4、主要致病物質(zhì)—?dú)准?xì)胞素●系噬菌體Ⅰ群金黃色葡萄球菌產(chǎn)生●可引起發(fā)熱，增加對(duì)內(nèi)毒素的敏感性●增強(qiáng)毛細(xì)血管通透性，致微循環(huán)紊亂而休克?！窨梢鸲鄠€(gè)器官系統(tǒng)的功能紊亂或毒性休克綜合征（TSS）

醫(yī)學(xué)特性-致病性5、主要致病物質(zhì)—毒性休克綜合毒素Ⅰ●

致病性葡萄球菌產(chǎn)生●有α/β/γ/δ/ε五種●α溶素：致病，外毒素，抗原性好，脫毒可制成類毒素●損傷細(xì)胞膜：RBC，WBC,肝細(xì)胞，皮膚細(xì)胞等

醫(yī)學(xué)特性-致病性6、主要致病物質(zhì)—葡萄球菌溶血素

生物學(xué)特性生物學(xué)特性染色性：G+形態(tài)：球菌排列：呈葡萄串狀特殊結(jié)構(gòu)：無(wú)鞭毛，無(wú)芽胞1、形態(tài)與染色

生物學(xué)特性營(yíng)養(yǎng)需求：營(yíng)養(yǎng)要求不高（基礎(chǔ)培養(yǎng)基）氣體環(huán)境：需氧或兼性厭氧最適溫度：35℃最適pH：7.4耐鹽性：多數(shù)菌株耐高鹽2、培養(yǎng)特性

生物學(xué)特性菌落：圓形，光滑，不透明色素：脂溶性色素（金黃色、白色、檸檬色）溶血環(huán)：大多具有致病性

金葡菌一般產(chǎn)生完全透明β溶血環(huán)2、培養(yǎng)特性29金葡菌透明溶血環(huán)

生物學(xué)特性3、生化反應(yīng)多數(shù)葡萄球菌能分解葡萄糖、麥芽糖和蔗糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣致病性菌株能分解甘露醇耐高鹽（10%--15%）觸酶陽(yáng)性（與鏈球菌區(qū)分標(biāo)準(zhǔn)）31金葡菌在高鹽甘露醇平板菌落32(1)葡萄球菌A蛋白（SPA）

存在于細(xì)胞壁的蛋白質(zhì)，完全抗原。

(2)莢膜多糖：

有利于細(xì)菌粘附

SPAcapsuleteichoicacidpeptidoglycan4、抗原結(jié)構(gòu)(3)多糖抗原（磷壁酸）

生物學(xué)特性

生物學(xué)特性4、抗原結(jié)構(gòu)1）葡萄球菌A蛋白（SPA）

化學(xué)成分：蛋白質(zhì)

存在部位：細(xì)胞壁（90%的金葡菌表面）

完全抗原，具有屬特異性

免疫學(xué)作用：與人及多種哺乳動(dòng)物血清中的lgG的Fc段非特異結(jié)合，IgG的Fab段仍可與相應(yīng)抗原結(jié)合（體外）

生物學(xué)特性

體內(nèi)作用SPA與IgG結(jié)合后所形成的復(fù)合物具有抗吞噬、促細(xì)胞分裂、引起超敏反應(yīng)、損傷血小板等多種生物活性。SPAIgGFcreceptorPHAGOCYTEBACTERIUM

生物學(xué)特性

體外作用用于多種微生物抗原檢測(cè)應(yīng)用于免疫球蛋白制備和分析應(yīng)用于免疫細(xì)胞化學(xué)

生物學(xué)特性4、抗原結(jié)構(gòu)2）多糖抗原（磷壁酸）具有群特異性存在細(xì)胞壁3）莢膜多糖（多數(shù)金葡菌在體內(nèi)可形成）

抗吞噬

利于細(xì)菌黏附

生物學(xué)特性為無(wú)芽胞菌中抵抗力最強(qiáng)者

1）耐熱：加熱60℃1h或80℃30min才可殺死

2）耐干燥：2-3個(gè)月

3）耐鹽：10-15%NaCl培養(yǎng)基中可生長(zhǎng)

4）對(duì)堿性染料敏感（龍膽紫）

5）耐藥性強(qiáng)：尤其對(duì)青霉素，MRSA5、抵抗力

回顧病例

海南島，某部官兵準(zhǔn)備在端午節(jié)作一次實(shí)彈演習(xí)。

為鼓舞士氣，過(guò)好節(jié)日，炊事員在端午節(jié)前夜就忙碌開(kāi)了，先和面，然后做成糖糕，蓋上籠布，第二天早晨將糖糕上籠蒸了30min。官兵們吃完蒸熟的糖糕，就列隊(duì)出發(fā)，到靶場(chǎng)上訓(xùn)練。

二個(gè)小時(shí)過(guò)去了，突然，一個(gè)士兵開(kāi)始出現(xiàn)嘔吐，繼之腹痛、腹瀉，其他人也陸續(xù)出現(xiàn)同樣癥狀，訓(xùn)練不得不終止。小貓?jiān)囼?yàn)標(biāo)本膿汁，血液，剩余食物，嘔吐物等分離培養(yǎng)血漿凝固酶發(fā)酵甘露醇耐熱核酸酶直接涂片鏡檢G+葡萄球菌生長(zhǎng)現(xiàn)象色素，溶血，生化反應(yīng)腸毒素檢查藥敏實(shí)驗(yàn)

葡萄球菌檢驗(yàn)程序

葡萄球菌檢驗(yàn)程序膿汁、分泌物、尿、痰直接涂片血平板腦脊液、血糞便、嘔吐物肉湯增菌高鹽甘露醇革蘭氏染色鏡檢初步報(bào)告可疑菌落藥敏試驗(yàn)涂片、G+C,觸酶（+）耐熱核酸酶生化鑒定血漿凝固酶實(shí)驗(yàn)

金黃色葡萄球菌鑒定主要試驗(yàn)分離培養(yǎng)和鑒定●鏡下形態(tài)●金黃色色素●

β溶血●凝固酶(結(jié)合型，游離型）●甘露醇發(fā)酵●耐熱核酸酶●觸酶試驗(yàn)●乳膠凝集試驗(yàn)42金葡萄DNA酶試驗(yàn)（+）葡萄球菌腸毒素檢查—小貓實(shí)驗(yàn)

葡萄球菌檢驗(yàn)44

觸酶葡萄糖發(fā)酵動(dòng)力對(duì)桿菌肽耐藥對(duì)呋喃唑酮耐藥

試驗(yàn)試驗(yàn)0.04U紙片100ug紙片葡萄球菌屬++

-+-微球菌屬+---+口腔球菌屬V+--V游動(dòng)球菌屬+-+未定-觸酶陽(yáng)性革蘭陽(yáng)性球菌各屬的主要鑒別點(diǎn)45葡萄球菌屬內(nèi)各菌種鑒定方法

三種葡萄球菌鑒別的主要性狀菌落色素金黃色

白色白色或檸檬色

分解甘露醇

＋

－

－

血漿凝固酶＋

－

－

耐熱核酸酶＋

－

－溶血性＋－

－SPA

＋－

－

致病性強(qiáng)

弱或無(wú)無(wú)

性狀金葡菌表葡菌腐生葡萄球菌

生物學(xué)特性47抗生素的選擇：A組（常規(guī)首選藥物）：阿奇霉素、克林霉素、苯唑西林、青霉素、頭孢西丁、復(fù)方磺胺甲噁唑B組（臨床使用主要藥物）：頭孢洛林、多西環(huán)素、米諾環(huán)素、四環(huán)素、萬(wàn)古霉素、利福平C組（對(duì)A、B組耐受、過(guò)敏或無(wú)反應(yīng)者）：環(huán)丙沙星、慶大霉素、氯霉素U組（尿道中分離的細(xì)菌）：諾氟沙星、呋喃妥因葡萄球菌抗生素敏感試驗(yàn)：2023/4/348何為MRS?？2023/4/349MRS：即對(duì)甲氧西林或苯唑西林或頭孢西丁耐藥的葡萄球菌。包括：MRSA（methicillinresistantstaphylococci)MRCNS(methcillinresistantcoagulasenegativestaphylococci)2023/4/350

特點(diǎn)：MRS對(duì)所有β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物耐藥，常表現(xiàn)為多重耐藥。51

耐藥機(jī)制：細(xì)菌攜帶ＭecA基因細(xì)菌細(xì)胞膜產(chǎn)生與β-內(nèi)酰胺類抗生素親合力低的PBP2a細(xì)菌對(duì)所有的β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥（青霉素、頭孢菌素、碳青霉烯類、單環(huán)β-內(nèi)酰氨類抗素等）52防

注意消毒隔離注意個(gè)人衛(wèi)生

防止醫(yī)源性感染

防止耐藥性產(chǎn)生治

抗菌藥物藥敏試驗(yàn)自身菌苗療法

防治原則3、MRSA已成為醫(yī)院感染最常見(jiàn)的致病菌，應(yīng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果選擇用藥。1、皮膚有化膿性感染者，尤其是手部感染，未治愈前不宜從事食品制作或飲食服務(wù)行業(yè)。2、醫(yī)務(wù)人員鼻咽部帶菌率高達(dá)70%以上，防止醫(yī)院感染。

防治原則