




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文檔簡(jiǎn)介
基因信息的貯存與表達(dá)第1頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四第十一章基因信息的儲(chǔ)存和表達(dá)
復(fù)習(xí)
基因信息的儲(chǔ)存和表達(dá)的分子基礎(chǔ)第一節(jié)
遺傳的中心法則第二節(jié)
DNA的生物合成第三節(jié)
RNA的生物合成第四節(jié)
蛋白質(zhì)的生物合成第五節(jié)
基因工程第2頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四一、核酸的分類(lèi)與功能基因信息的儲(chǔ)存和表達(dá)的分子基礎(chǔ)復(fù)習(xí)二、DNA的分子組成和結(jié)構(gòu)三、RNA的分子組成和結(jié)構(gòu)四、核酸的變性、復(fù)性與雜交返回主菜單第3頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四核酸的分類(lèi)與功能——核糖核酸(RNA):脫氧核糖核酸(DNA):
mRNA
tRNA
rRNA(信使RNA)(轉(zhuǎn)運(yùn)RNA)(核蛋白體RNA)參與蛋白質(zhì)的生物合成Pr合成的直接模板活化與轉(zhuǎn)運(yùn)AA充當(dāng)裝配機(jī),提供場(chǎng)所遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)
基因就是染色體中帶有遺傳信息的DNA的功能片段(即:DNA分子中特定的堿基排列順序——堿基序列)返回主菜單第4頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四二、DNA的分子組成和結(jié)構(gòu)(一)分子組成A、G、T、C和脫氧核糖及磷酸Chargff規(guī)律
一種生物體所有體細(xì)胞DNA的堿基組成均相同
同一種生物體內(nèi),DNA分子的A=T/G=C(親緣相近的生物,其堿基組成相似;反之亦然)
(同一生物的DNA分子中嘌呤堿與嘧啶堿總量相等)(二)分子結(jié)構(gòu)1、一級(jí)結(jié)構(gòu)——DNA鏈中A、T、C、G的序列
脫氧核糖核苷酸之間以磷酸二酯鍵相連返回主菜單第5頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四2、空間結(jié)構(gòu)(二級(jí)結(jié)構(gòu))——雙螺旋結(jié)構(gòu)(1)結(jié)構(gòu)要點(diǎn):
逆向平行雙螺旋
兩鏈之間有特定的堿基互補(bǔ)規(guī)律(堿基配對(duì))A—TG—C(通過(guò)兩個(gè)氫鍵相連)(通過(guò)三個(gè)氫鍵相連)
雙螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定依靠堿基對(duì)間的氫鍵(2)生物學(xué)意義:
提出了遺傳信息的貯存方式、DNA的復(fù)制機(jī)理
是DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯的分子基礎(chǔ)返回主菜單第6頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四示意圖ATGC第7頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四示意圖腺嘌呤(A)鳥(niǎo)嘌呤(G)胸腺嘧啶(T)尿嘧啶(C)返回主菜單第8頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四三、RNA的分子組成和結(jié)構(gòu)(一)分子組成與結(jié)構(gòu)特點(diǎn):A、G、U、C
及少量稀有堿基(m7-G)核糖、磷酸RNA鏈中A、G、U、C的序列2、一級(jí)結(jié)構(gòu):1、組成:3、組成與結(jié)構(gòu)特點(diǎn):
含有稀有堿基(由主要堿基修飾而來(lái))
多為單鏈結(jié)構(gòu),且堿基組成較不規(guī)律返回主菜單第9頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四(二)三種RNA分子組成與結(jié)構(gòu)特點(diǎn)1、tRNA(1)一級(jí)結(jié)構(gòu)的共同特點(diǎn)
(2)二級(jí)結(jié)構(gòu)
3-末端:CCA-OH
反密碼環(huán)頂端:反密碼子(攜帶AA的部位)(識(shí)別mRNA上特定的密碼子)——三葉草形——活化與轉(zhuǎn)運(yùn)AA返回主菜單第10頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四示意圖5’-末端反密碼環(huán)3’-末端氨基酸臂返回主菜單第11頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四2、mRNA——蛋白質(zhì)合成的直接模板(1)mRNA分子從5-端起讀,每三個(gè)相鄰的核苷酸(堿基)所組成的一個(gè)三連碼,決定某種AA,稱(chēng)為密碼子。(2)mRNA分子的首尾結(jié)構(gòu)
5’-端(首部):m7Gppp
3’-端(尾部):poly-A(7-甲基尿苷三磷酸)(多聚腺苷酸)3、rRNA——蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所,起“裝配機(jī)”的作用
RNA中含量最多(80%)
是RNA與多種蛋白質(zhì)結(jié)合生成的核蛋白體
在胞漿中起“裝配機(jī)”的作用返回主菜單第12頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四三、核酸的變性、復(fù)性與雜交(一)變性1、概念核酸雙鏈間氫鍵斷裂,雙鏈結(jié)構(gòu)解開(kāi)形成兩條單鏈的的過(guò)程變性因素:加熱及化學(xué)處理(有機(jī)溶劑等)2、特性——伴有高色(增色)效應(yīng)
高色效應(yīng)在260nm的紫外吸收增強(qiáng)
熔點(diǎn)(Tm)
DNA達(dá)到50%變性時(shí)的溫度DNA分子中G-C組份愈多,Tm值就愈高DNA分子就愈穩(wěn)定。反之亦然。返回主菜單第13頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四(二)復(fù)性1、概念因變性而解開(kāi)的兩條單鏈,在溫度緩慢下降時(shí)重又聚合成雙鏈結(jié)構(gòu),這一過(guò)程叫作復(fù)性2、特性
復(fù)性時(shí)伴有低(減)效應(yīng)(即在260nm的紫外吸收減弱)
復(fù)性又稱(chēng)“退火”
變性后若溫度迅速下降,則不發(fā)生復(fù)性(三)分子雜交1、概念分子雜交是以核酸的變性和復(fù)性為基礎(chǔ)
不同來(lái)源的兩條核酸單鏈,若有大致相同的堿基互補(bǔ)順序,經(jīng)退火處理,可形成雜交雙鏈。
分子雜交可發(fā)生在DNA-DNA、DAN-RNA
和RNA-RNA返回主菜單第14頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四第一節(jié)遺傳的中心法則第二節(jié)DNA的生物合成(一)復(fù)制(二)逆轉(zhuǎn)錄(三)DNA的損傷和修復(fù)主菜單第15頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四DNADNAmRNA蛋白質(zhì)復(fù)制轉(zhuǎn)錄翻譯逆轉(zhuǎn)錄
復(fù)制
以DNA為模板,指導(dǎo)DNA合成的過(guò)程
酶DNA指導(dǎo)的DNA聚合酶(DDDP)
原料dNTP基因遺傳基因表達(dá)
轉(zhuǎn)錄
以DNA為模板,指導(dǎo)RNA合成的過(guò)程
酶DNA指導(dǎo)的RNA聚合酶(DDRP)
原料NTP第一節(jié)遺傳的中心法則返回主菜單第16頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四第二節(jié)DNA的生物合成一、復(fù)制——DNA的復(fù)制是以半保留復(fù)制方式進(jìn)行的1、半保留復(fù)制
概念和模式
實(shí)驗(yàn)證明——同位素15N實(shí)驗(yàn)
應(yīng)具備的條件母鏈DNA:作為模板(3’5’
)四種dNTP:作為原料相應(yīng)的酶類(lèi):DDDP等一小段RNA:作為DNA聚合引物
模板鏈的走向(3’5’
)
新鏈合成的方向(5’3’
)概念和模式返回主菜單第17頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四2、參與復(fù)制的酶類(lèi)——DNA聚合酶、DNA連接酶解旋和解鏈酶類(lèi)、引物酶等(1)引物酶
一種特殊的RNA聚合酶
該酶以DNA為模板、NTP為原料,催化一段引物RNA的合成
RNA引物:為DNA合成提供3'-OH(2)解旋和解鏈酶類(lèi)
解鏈酶:
解旋酶(拓?fù)洚悩?gòu)酶):
單鏈結(jié)合蛋白:沿著復(fù)制叉,促進(jìn)兩條互補(bǔ)鏈分離解旋,克服扭結(jié)現(xiàn)象固定已分離解旋的單鏈,便于復(fù)制返回主菜單第18頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四
DNA聚合酶Ⅰ
DNA聚合酶Ⅲ——聚合、填空、修補(bǔ)——聚合、填空、修補(bǔ)(復(fù)制時(shí)起主要作用的酶)(3)DNA聚合酶DNA聚合酶Ⅰ是一種多功能酶——聚合、填空、修補(bǔ)
填空充填岡崎片段之間的間隙
修補(bǔ)具有5’3’
外切酶的作用(切除引物和損傷部位)(4)DNA連接酶連接岡崎片段返回主菜單第19頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四3、復(fù)制的過(guò)程模板DNA先解鏈解旋引物酶作用,以NTP為原料合成RNA引物dNTP存在下由DNA聚合酶Ⅲ催化,在RNA引物基礎(chǔ)上合成DNA新鏈DNA聚合酶Ⅰ外切作用切除引物(空缺部位再由該酶發(fā)揮填補(bǔ)作用)DNA連接酶連接岡崎片段形成完整的DNA分子(解鏈酶、解旋酶和單鏈結(jié)合蛋白)(引物酶、NTP)(DNA聚合酶Ⅲ、dNTP)(DNA聚合酶Ⅰ、dNTP)(DNA連接酶)參與的物質(zhì)返回主菜單第20頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四
岡崎片段
前導(dǎo)鏈
隨后鏈合成方向與復(fù)制叉移動(dòng)方向相同,進(jìn)行連續(xù)復(fù)制的這一條新鏈合成方向與復(fù)制叉移動(dòng)方向相反,進(jìn)行不連續(xù)復(fù)制的另一條新鏈隨后鏈上所進(jìn)行不連續(xù)復(fù)制而成的DNA片段
模板鏈的走向(3’5’
)
新鏈合成的方向(5’3’
)返回主菜單第21頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四二、逆轉(zhuǎn)錄
概念
模式——以病毒RNA為模板,指導(dǎo)合成含有全部病毒遺傳信息的DNA
酶與原料RDDP/dNTP
逆轉(zhuǎn)錄(酶)的意義(1)逆轉(zhuǎn)錄酶存在于所有致癌RNA病毒中(與病毒致癌有關(guān))(2)對(duì)中心法則進(jìn)行了必要的補(bǔ)充(3)有助于基因工程的實(shí)施(用于獲得目的基因)模式返回主菜單第22頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四(三)DNA的損傷和修復(fù)1、DNA的損傷2、DNA的修復(fù)
概念
因素
修復(fù)方式
主要修復(fù)機(jī)制——切除修復(fù)——紫外線(xiàn)照射堿基和核苷類(lèi)似物抗菌素及其類(lèi)似物——切除修復(fù)、SOS修復(fù)重組修復(fù)、光修復(fù)切除修復(fù)返回主菜單第23頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四第三節(jié)RNA的生物合成一、轉(zhuǎn)錄的概念和條件三、轉(zhuǎn)錄的過(guò)程四、轉(zhuǎn)錄后的加工和修飾二、轉(zhuǎn)錄與復(fù)制的區(qū)別主菜單第24頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四第三節(jié)RNA的生物合成——轉(zhuǎn)錄)一、轉(zhuǎn)錄的概念和條件1、概念以DNA為模板,指導(dǎo)RNA合成的過(guò)程
酶DNA指導(dǎo)的RNA聚合酶(DDRP)
原料NTP2、條件
模板鏈DNA二、轉(zhuǎn)錄與復(fù)制的區(qū)別轉(zhuǎn)錄是基因表達(dá)的第一步,也是最關(guān)鍵的一步通過(guò)轉(zhuǎn)錄把DAN的信息傳遞給RNA(RNA的生物合成DDRP區(qū)別返回主菜單第25頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四三、轉(zhuǎn)錄的過(guò)程酶與DNA模板的結(jié)合轉(zhuǎn)錄的起始RNA鏈的延長(zhǎng)RNA鏈的終止與釋放亞基、NTPDNA模板鏈、因子、亞基蛋白返回主菜單第26頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四四、轉(zhuǎn)錄后的加工和修飾(真核細(xì)胞)——以mRNA轉(zhuǎn)錄后的加工為例hnRNAmRNA加帽連尾剪輯加工(核不均一RNA)
加帽連尾5’-端(首部):m7Gppp3’-端(尾部):poly-A
剪輯加工連接外顯子切除內(nèi)含子(具有編碼功能的序列)(不具編碼功能的序列)
示意圖示意圖返回主菜單第27頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四三、蛋白質(zhì)合成的過(guò)程第四節(jié)蛋白質(zhì)的生物合成一、概念二、參與翻譯所需的物質(zhì)四、蛋白質(zhì)生物合成與醫(yī)學(xué)的關(guān)系主菜單第28頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四翻譯蛋白質(zhì)的生物合成——一、概念以mRNA為模板,在其它RNA及因子的參與下,合成蛋白質(zhì)的過(guò)程二、參與翻譯所需的物質(zhì)1、三類(lèi)RNA(
mRNA、tRNA、rRNA)2、20種編碼氨基酸3、參與翻譯的酶類(lèi)4、其它因子(合成蛋白質(zhì)的原料)起始因子、延長(zhǎng)因子、終止和釋放因子K+
、Mg+ATP、GTPmRNAtRNA
rRNA返回主菜單第29頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四
mRNA在蛋白質(zhì)合成中的作用
提供直接模板
密碼子(64種,分三類(lèi))起始密碼終止密碼AA信息碼1個(gè)(AUG,兼蛋AA)3個(gè)(UGA,UAA,UAG)61個(gè)
密碼子的特點(diǎn)密碼的簡(jiǎn)并性密碼無(wú)標(biāo)點(diǎn)符號(hào)密碼的通用性密碼的擺動(dòng)性?返回主菜單密碼子第30頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四
tRNA在蛋白質(zhì)合成中的作用
活化與轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸t(yī)RNA的兩個(gè)專(zhuān)用部位
3-末端:CCA-OH
反密碼環(huán)頂端:(攜帶AA的部位)(識(shí)別mRNA上特定的密碼子)
擺動(dòng)現(xiàn)象3'5'5'3'mRNAtRNAUG反密碼子(識(shí)別mRNA上特定的密碼子)IUICIA31返回主菜單第31頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四
rRNA在蛋白質(zhì)合成中的作用
核蛋白體由RNA和多種蛋白質(zhì)復(fù)合而成是蛋白質(zhì)生物合成的場(chǎng)所和裝配機(jī)由大小兩個(gè)亞基組成(rRNA)
大亞基
小亞基有轉(zhuǎn)肽酶活性和兩個(gè)tRNA結(jié)合部位
給位(P位)受位(A位)有mRNA結(jié)合部位返回主菜單第32頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四參與蛋白質(zhì)合成的酶類(lèi)
氨基酰-tRNA合成酶
轉(zhuǎn)肽酶返回主菜單第33頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四三、蛋白質(zhì)合成的過(guò)程1、AA的活化AA+tRNA氨基酰-tRNA酶、Mg+
ATP2、核蛋白體循環(huán)
起始
延長(zhǎng)
終止進(jìn)位轉(zhuǎn)肽移位3、后期的加工與修飾核蛋白體循環(huán)
切除N-端的蛋氨酸部分肽段的水解
氨基酸殘基的修飾二硫鍵的形成返回主菜單第34頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四
四、蛋白質(zhì)生物合成與醫(yī)學(xué)的關(guān)系
1、干擾素對(duì)蛋白質(zhì)合成的影響
2、抗生素對(duì)蛋白質(zhì)合成的影響
鏈霉素:抑制原核細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的起始并導(dǎo)致錯(cuò)誤閱讀mRNA密碼。
四環(huán)素:與原核細(xì)胞30S亞基結(jié)合,抑制氨基酰-tRNA的結(jié)合。
氯霉素:抑制原核細(xì)胞50S大亞基的轉(zhuǎn)肽酶活性。
紅霉素:與原核細(xì)胞50S大亞基結(jié)合并抑制移位作用。
環(huán)己亞氨:抑制真核生物60S大亞基的轉(zhuǎn)肽酶活性。
嘌呤霉素:是氨基酰-tRNA的類(lèi)似物,結(jié)合在A位,造成未成熟肽鏈的終止,對(duì)真、原核細(xì)胞均有效。返回主菜單第35頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四核蛋白體循環(huán)m7Gppppoly-AAUGACUGCACGAUAAUAC蛋UAC蛋UGA蘇CGU丙UGA蘇進(jìn)位核蛋白體循環(huán)(延長(zhǎng))
第36頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四核蛋白體循環(huán)m7Gppppoly-AAUGACUGCACGAUAAUAC蛋蛋UGA蘇CGU丙UGA蘇UACUAC進(jìn)位核蛋白體循環(huán)(延長(zhǎng))
轉(zhuǎn)肽第37頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四核蛋白體循環(huán)m7Gppppoly-AAUGACUGCACGAUAAUAC蛋蛋UGA蘇CGU丙UGA蘇進(jìn)位核蛋白體循環(huán)(延長(zhǎng))
轉(zhuǎn)肽第38頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四核蛋白體循環(huán)m7Gppppoly-AAUGACUGCACGAUAAUAC蛋UGA蘇CGU丙蛋蘇CGU丙UGA進(jìn)位核蛋白體循環(huán)(延長(zhǎng))
移位轉(zhuǎn)肽進(jìn)位第39頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四核蛋白體循環(huán)m7Gppppoly-AAUGACUGCACGAUAAUAC蛋UGA蘇CGU丙CGU丙蛋蘇UGA核蛋白體循環(huán)(延長(zhǎng))
進(jìn)位移位轉(zhuǎn)肽轉(zhuǎn)肽第40頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四核蛋白體循環(huán)m7Gppppoly-AAUGACUGCACGAUAAUAC蛋UGA蘇CGU丙CGU丙蛋蘇核蛋白體循環(huán)(延長(zhǎng))
進(jìn)位移位轉(zhuǎn)肽第41頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四核蛋白體循環(huán)m7Gppppoly-AAUGACUGCACGAUAAUAC蛋UGA蘇CGU丙CGU丙蛋蘇核蛋白體循環(huán)(延長(zhǎng))
進(jìn)位移位轉(zhuǎn)肽移位返回主菜單第42頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四返回主菜單第43頁(yè),共47頁(yè),2023年,2月20日,星期四
第五節(jié)基因工
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