醫(yī)學(xué)科研實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本要素正稿

醫(yī)學(xué)科研實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本要素正稿現(xiàn)在是1頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二醫(yī)學(xué)科研的基本要素講授提要

一、被試因素1、被試因素的確定2、水平的確定3、因素與水平的組合4、被試因素的施加

二、受試對(duì)象

受試對(duì)象的（確立、條件、純化）受試對(duì)象影響因素的控制受試對(duì)象的依從性三、試驗(yàn)效應(yīng)科研指標(biāo)的要求與注意事項(xiàng)現(xiàn)在是2頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

何謂醫(yī)學(xué)科研的基本要素？下面看一個(gè)事例：《腫瘤壞死因子對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞組織因子和凝血酶調(diào)制素表達(dá)的影響》研究課題。仔細(xì)分析這一研究課題它由三要素組成，即：被試因素（腫瘤壞死因子），受試對(duì)象（人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞），試驗(yàn)效應(yīng)（組織因子和凝血酶調(diào)制素表達(dá)的改變）?，F(xiàn)在是3頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

通常將這三個(gè)組成部分稱(chēng)為科研的三要素，涉及醫(yī)學(xué)科方面的研究即為醫(yī)學(xué)科研的三要素。如何正確選擇三要素，這是科研設(shè)計(jì)的關(guān)鍵問(wèn)題。下面分別介紹：現(xiàn)在是4頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二一、被試因素現(xiàn)在是5頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二1、被試因素的確定被試因素簡(jiǎn)稱(chēng)因素(factor)或處理(treatment)。被試因素是由外界施加于受試對(duì)象的各種處理內(nèi)容。來(lái)源：⑴生物的、化學(xué)的或物理的。⑵受試對(duì)象本身的某些特征(如性別、年齡、遺傳特性、心理因素等)。例如《性別和年齡與心肌梗死患者死亡的關(guān)系》課題，性別和年齡就是被試因素?，F(xiàn)在是6頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二《ABO血型與成人男性血液流變性的關(guān)系》課題，ABO血型就是被試因素。怎樣選擇被試因素：取決于試驗(yàn)?zāi)康?。如：研究刺激與平滑肌機(jī)械反應(yīng)的關(guān)系，無(wú)疑刺激是被試因素；研究藥物對(duì)某病的療效，必然藥物是被試因素，研究危險(xiǎn)因素與某病病情和預(yù)后的關(guān)系，必然危險(xiǎn)因素是被試因素。假說(shuō)被試因素本身含糊不清或張冠李戴，那么整個(gè)科研工作就會(huì)從根本上被否定?，F(xiàn)在是7頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

注意區(qū)分非被試因素：如：對(duì)于反應(yīng)、療效、病情和預(yù)后等情況，除被試因素起作用外，同時(shí)還有若干其他因素也會(huì)影響這些效應(yīng)和結(jié)果的非被試因素。

如何處理非被試因素：⑴確定被試因素的同時(shí)，還須明確哪些是非被試因素。⑵將非被試因素，作為誤差來(lái)源嚴(yán)格控制。減小非被試因素影響。⑶不能減小的非被試因素應(yīng)使試驗(yàn)組與對(duì)照組保持均衡一致。

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例如《異搏定對(duì)大鼠肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞黃嘌呤氧化酶活性的影響》研究。

異搏定是被試因素，但是細(xì)胞數(shù)量、細(xì)胞外鈣離子濃度、氧分壓、次黃嘌呤含量、pH、溫度等均可影響黃嘌呤氧化酶的活性，因此試驗(yàn)組與對(duì)照組除被試因素不同以外，所有這些非被試因素都應(yīng)當(dāng)保持齊同?，F(xiàn)在是9頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二2、水平的選定被試因素作用于受試對(duì)象引起的效應(yīng)與水平(1evel)有著依賴(lài)關(guān)系。

如：以藥物作為被試因素，劑量就是水平。在科研中，被試因素水平的選擇，取決于試驗(yàn)?zāi)康摹?/p>

注意：被試因素不能過(guò)大、過(guò)小。被試因素過(guò)大可能引起損害或中毒，過(guò)小則不可能觀察到應(yīng)有的效應(yīng)?，F(xiàn)在是10頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

例如觀察一個(gè)新的藥物效應(yīng)，必須確定劑量—效應(yīng)關(guān)系的存在；如果沒(méi)有劑量—效應(yīng)關(guān)系，那么這是一種非特異性作用。在最小有效量與最大安全量范圍內(nèi)，研究目的不同，使用劑量也應(yīng)有所不同。現(xiàn)在是11頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

例如：進(jìn)行藥效篩選試驗(yàn)，希望不要漏掉有效藥物，那么應(yīng)選擇最大安全量，通常采用半致死量(LD50)的l／10左右。若研究藥效的影響因素，則應(yīng)采用半數(shù)有效量(ED50)，因?yàn)樵谶@個(gè)水平藥效曲線(xiàn)的斜率最大，如某因素對(duì)藥效有影響，則可明顯的反映出來(lái)?，F(xiàn)在是12頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

假如進(jìn)行毒性試驗(yàn)(如：烹調(diào)油煙毒性試驗(yàn)），則應(yīng)選擇超過(guò)最大安全量的不同劑量，以分別找出半數(shù)致死量(LD50)與最大致死量(LDloo)。但若進(jìn)行兩種藥物的藥效比較試驗(yàn)，則兩者均應(yīng)采用多個(gè)不同劑量，以便對(duì)兩個(gè)藥物的劑量—效應(yīng)曲線(xiàn)進(jìn)行較全面的分析。由此可見(jiàn)，正確選定被試因素的水平是十分重要的。現(xiàn)在是13頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二3、因素與水平的組合依照研究因素與水平的數(shù)目，可產(chǎn)生四個(gè)不同類(lèi)型組合，實(shí)際也就是四類(lèi)不同的實(shí)驗(yàn)。

⑴、單因素單水平科研中最常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)類(lèi)型。如“夏枯草提出物對(duì)原發(fā)性高血壓患者降壓作用的觀察”就屬單因素單水平試驗(yàn)。優(yōu)點(diǎn)：這類(lèi)實(shí)驗(yàn)的條件較易控制，相對(duì)簡(jiǎn)單易行。缺點(diǎn)：若有多個(gè)因素待試時(shí)，則進(jìn)度太慢?，F(xiàn)在是14頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二⑵、單因素多水平屬單因素多群組的試驗(yàn)。如：比較同一刺激不同強(qiáng)度的反應(yīng)，比較不同劑量藥物對(duì)某病的療效觀察，屬于這類(lèi)試驗(yàn)。特別是珍貴藥物、毒性較大的藥物或新藥劑量的最佳選擇，往往需要采用這類(lèi)試驗(yàn)。如“不同分子量肝素對(duì)大鼠內(nèi)毒素血癥的療效比較”，便屬于這類(lèi)試驗(yàn)。現(xiàn)在是15頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二⑶、多因素單水平比較不同藥物、不同療法、不同復(fù)方、同一復(fù)方中的不同單味中藥、同一單味中藥中不同有效成分的療效，或者比較不同因素在某一疾病中的作用，通常需要采用這類(lèi)試驗(yàn)。如中西醫(yī)結(jié)合研究中，比較中藥與西藥聯(lián)合的療效，屬于這類(lèi)試驗(yàn)?，F(xiàn)在是16頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二⑷、多因素多水平事物之間的聯(lián)系是復(fù)雜的，生物效應(yīng)更是如此。在許多情況下，應(yīng)當(dāng)考慮多個(gè)因素聯(lián)合作用。在多因素聯(lián)合作用中，到底哪個(gè)或哪幾個(gè)因素是主要的?哪個(gè)或哪幾個(gè)因素是次要的?現(xiàn)在是17頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

它們彼此之間有無(wú)交互作用?回答這些問(wèn)題，就應(yīng)當(dāng)采用多因素多水平實(shí)驗(yàn)。例如：研究酶學(xué)試驗(yàn)的最佳反應(yīng)條件、探索聯(lián)合用藥方案、研究中藥復(fù)方等等，多因素、多水平便是常用的試驗(yàn)類(lèi)型?，F(xiàn)在是18頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二4、被試因素的施加⑴、確保被試因素被施加確保被試因素被施加是保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確的重要環(huán)節(jié)。為此要考慮到以下方面：①被試因素如藥物注射法較易控制，但要注意取量的準(zhǔn)確性。現(xiàn)在是19頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二②對(duì)口服被試藥物，病人是否真正服用試驗(yàn)藥物，應(yīng)以觀察者親眼見(jiàn)到受試對(duì)象服下為準(zhǔn)。③在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，慢性實(shí)驗(yàn)應(yīng)當(dāng)采用空腹灌胃，急性實(shí)驗(yàn)最好采用十二指腸給藥。現(xiàn)在是20頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二⑵施加條件標(biāo)準(zhǔn)化

被試因素的強(qiáng)度、頻率、持續(xù)時(shí)間與施加方法等，都應(yīng)通過(guò)查閱文獻(xiàn)和預(yù)備試驗(yàn)找出各自的最適條件,然后訂出有關(guān)規(guī)定和制度，使之相對(duì)固定。一旦進(jìn)入正式實(shí)驗(yàn)，不允許輕易改變；如確需改變，一般應(yīng)將被試因素實(shí)驗(yàn)條件改變前后的實(shí)驗(yàn)結(jié)果分別予以處理?，F(xiàn)在是21頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

如:被試因素是藥物，應(yīng)當(dāng)在科研全過(guò)程使用同一批藥物，以防批間差異干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如被試因素系中藥，則應(yīng)正確選擇藥物劑型，并使之標(biāo)準(zhǔn)化和相對(duì)固定化?，F(xiàn)在是22頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

同一中藥或復(fù)方，不同劑型的有效成分及其含量是不同的；即使同一煎劑，由于煎法不同，其有效成分與含量也會(huì)有所差異。因此煎煮方法與時(shí)間都應(yīng)選擇最佳條件，并將其固定下來(lái)。現(xiàn)在是23頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二⑶、給藥時(shí)間固定化在臨床醫(yī)學(xué)科研中，藥物是最常見(jiàn)的被試因素。由于生物節(jié)律的存在，不同時(shí)間藥物的毒副作用與療效是不一致的。例如相同劑量的尼可剎米，下午2點(diǎn)給藥可使67％小鼠死亡，而凌晨2點(diǎn)給藥小鼠死亡率僅33％。現(xiàn)在是24頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

普萘洛爾(心得安)的半致死量在下午7點(diǎn)為98.5ng／kg，上午11點(diǎn)則為129.4ng／kg。由于給藥時(shí)間不同，相同劑量藥物的作用強(qiáng)度可有很大的差異。例如同劑量洋地黃，夜間給藥可比白天給藥敏感性高約40倍；糖尿病人凌晨4時(shí)左右對(duì)胰島素最敏感。因此每天給藥時(shí)間應(yīng)當(dāng)固定。現(xiàn)在是25頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

藥物毒副作用與療效的大小，不僅有晝夜節(jié)律，而且還存在季節(jié)性節(jié)律的影響。例如苯丙胺的LD50，一月份明顯小于七月份。環(huán)磷酰胺與氮芥的致畸作用在春夏季較高，冬季最低?，F(xiàn)在是26頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

吲哚美辛(消炎痛)的抗炎作用在二月份表現(xiàn)為上午8點(diǎn)作用較強(qiáng)，下午8點(diǎn)作用較弱，但在六月份用藥，晝夜節(jié)律就變得不明顯了。考慮到時(shí)間因素影響，故對(duì)比性實(shí)驗(yàn)應(yīng)當(dāng)強(qiáng)調(diào)平行進(jìn)行，絕不能實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組分別在不同時(shí)間與季節(jié)進(jìn)行?，F(xiàn)在是27頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二⑷、正確選擇給藥途徑與劑量給藥途徑不同，藥物吸收速度與作用方式也不同。一般說(shuō)來(lái)，就藥物的吸收速度而言，肌肉≈腹腔>皮下>胃腸道。口服由腸道吸收，相當(dāng)一部分有效成分首先在肝受到生物轉(zhuǎn)化作用；現(xiàn)在是28頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

皮下、肌肉與靜脈注入后，一部分有效成分首先在肺受到生物轉(zhuǎn)化作用；動(dòng)脈內(nèi)給藥則主要作用于被灌流器官。因此，同一藥物口服與非胃腸道給藥，其作用可能并不完全相同。所以，正確選擇給藥途徑，對(duì)于醫(yī)藥科研是十分重要的。現(xiàn)在是29頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

此外，不同途徑給藥的用量亦應(yīng)不同。

若以口服量為100％時(shí)，灌胃亦為100％，灌腸(直腸)為100％～200％，皮下注射為30％～50％，肌內(nèi)注射為25％～30％，腹腔注射為25％～30％，靜脈注射20％～25％.

假如觀察的藥物是新研制的，或是由某中藥新提出的有效成分；試用時(shí)的靜脈注入量一般為L(zhǎng)D50的l／15～l／50。

現(xiàn)在是30頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二二、受試對(duì)象現(xiàn)在是31頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二1、受試對(duì)象的確定2、受試對(duì)象的條件3、受試對(duì)象的純化4、受試對(duì)象影響因素的控制5、受試對(duì)象的依從性

現(xiàn)在是32頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二1、受試對(duì)象的確定醫(yī)學(xué)科研的受試對(duì)象(object)：

人或動(dòng)物，植物（藥物研究）。根據(jù)具體情況可采用整體作受試對(duì)象，在體內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)(invivo)；也可采用器官、組織、細(xì)胞、亞細(xì)胞或分子作為受試對(duì)象，在體外進(jìn)行試驗(yàn)(invitro)；現(xiàn)在是33頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

也可采用先體內(nèi)后體外的方式進(jìn)行試驗(yàn)，這類(lèi)試驗(yàn)屬半體內(nèi)試驗(yàn)(exvivo)。

在醫(yī)學(xué)科研中究竟在什么層次上進(jìn)行試驗(yàn)，這服從于工作假說(shuō)檢驗(yàn)的需要。現(xiàn)在是34頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二怎樣確定受試對(duì)象：

受試對(duì)象的確定取決于試驗(yàn)?zāi)康?。譬如研究參考?正常值)范圍，應(yīng)當(dāng)選擇健康人作為受試對(duì)象，通常需要在不同性別與不同年齡分別選擇較多的健康人或“相對(duì)健者”(指未患有影響該指標(biāo)的疾病和未患有重要臟器疾病的人)。

現(xiàn)在是35頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

假如研究病因?qū)W，往往需要將暴露于與未暴露于某危險(xiǎn)因素的人進(jìn)行比較。倘若研究某病診斷方法，通常需要選擇確診本病的患者與未患本病的人，以便了解該方法的敏感度與特異度。現(xiàn)在是36頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

如果觀察某藥與某療法對(duì)某一疾病或某病癥的療效，需選擇確診為本病或本病癥的患者。假如進(jìn)行計(jì)劃生育研究，則應(yīng)以具有較強(qiáng)生育能力的青壯年作為受試對(duì)象。

現(xiàn)在是37頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

倘使觀察藥物的毒性與副作用及藥物代謝動(dòng)力學(xué)過(guò)程，則可采用志愿者(volunteer)；但是志愿者由于心理與經(jīng)濟(jì)等多種因素的影響，可能影響研究結(jié)果，甚至易于出現(xiàn)假陽(yáng)性，所以采用志愿者，應(yīng)持慎重態(tài)度?，F(xiàn)在是38頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二2、受試對(duì)象的條件在醫(yī)學(xué)科研中，作為受試對(duì)象的前提是所選對(duì)象必須同時(shí)滿(mǎn)足兩個(gè)基本條件：①必須對(duì)被試因素敏感②反應(yīng)必須比較穩(wěn)定例如：臨床上觀察某個(gè)藥物對(duì)高血壓病的療效，Ⅲ期高血壓患者對(duì)藥物不敏感，I期患者，本身血壓波動(dòng)范圍較大，因此一般應(yīng)選擇Ⅱ期高血壓病患者作為觀察對(duì)象?！，F(xiàn)在是39頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

其次，受試對(duì)象必須具有可能性，

不僅易于取樣，安全性好，而且應(yīng)當(dāng)以有利于病人診治為原則。此外，在臨床療效科研中，應(yīng)當(dāng)選擇具有明顯變化的客觀指標(biāo)患者作為受試對(duì)象。例如，冠心病不宜選擇僅有心前區(qū)不適癥狀的患者，而應(yīng)選擇有缺血性心電圖改變的患者現(xiàn)在是40頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二不宜作為一般臨床科研的受試對(duì)象（存在以下情況之一者）：①存在影響反應(yīng)結(jié)果的并發(fā)癥。②危重狀態(tài)。③多種療法無(wú)效(機(jī)體反應(yīng)性和或致病因素與二般病例不同)。④不能配合者。

但若專(zhuān)門(mén)研究合并癥、危重病癥或頑固性(難治性)病癥時(shí)，理所當(dāng)然地應(yīng)以這類(lèi)患者作為受試對(duì)象。現(xiàn)在是41頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二3、受試對(duì)象的純化受試對(duì)象的疾病應(yīng)是確診的，且表現(xiàn)具有典型性。非典型的特殊病例不宜作為受試對(duì)象，因?yàn)樘厥獠±崾緳C(jī)體或致病因素與一般病例存在差異。

現(xiàn)在是42頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

受試對(duì)象的病情一般不宜過(guò)重或過(guò)輕，因病情過(guò)重，死亡率很高，不易反映被試因素的療效；若病情過(guò)輕，稍加處理即可痊愈，難以區(qū)分不同被試因素的優(yōu)劣?，F(xiàn)在是43頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

因此，只有通過(guò)對(duì)病情中等病例得到肯定結(jié)論后，才宜擴(kuò)大觀察輕、中、重三類(lèi)不同病情患者。病人的既往史也很重要，如第二、第三次心肌梗死患者的死亡率明顯高于初次發(fā)作者，因此，它亦應(yīng)作為純化分層的依據(jù)之一。

現(xiàn)在是44頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

疾病診斷與病情分級(jí)的標(biāo)準(zhǔn)務(wù)必按照全國(guó)有關(guān)專(zhuān)業(yè)學(xué)術(shù)會(huì)議的規(guī)定；如無(wú)統(tǒng)一規(guī)定，則可邀請(qǐng)三個(gè)以上外單位專(zhuān)家參加集體討論制定，切忌個(gè)人主觀臆斷。中醫(yī)臨床科研受試對(duì)象的診斷除應(yīng)有中醫(yī)診斷外，還必須有西醫(yī)診斷?，F(xiàn)在是45頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二4、受試對(duì)象影響因素的控制

試驗(yàn)組與對(duì)照組性別和年齡均衡。不同性別與年齡的人，他們的激素、代謝與器官功能均有一定的差異，這些因素對(duì)許多疾病的療效都有一定的影響。

現(xiàn)在是46頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

一般試驗(yàn)首先選擇中青年人作為受試對(duì)象，只有肯定療效后才能擴(kuò)大到兒童與老年進(jìn)行觀察。除非專(zhuān)門(mén)研究妊娠有關(guān)課題，一般不應(yīng)選擇孕婦作受試對(duì)象?，F(xiàn)在是47頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

試驗(yàn)組與對(duì)照組生活習(xí)慣與嗜好要均衡。

生活習(xí)慣與嗜好也可以影響試驗(yàn)結(jié)果。首先，吸煙可使PGI2合成減少，明顯影響動(dòng)脈粥樣硬化與慢性阻塞性肺疾患的治療效果。現(xiàn)在是48頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

其次，居住條件與家庭負(fù)擔(dān)等因素也可影響療效，尤其是發(fā)病與精神因素有關(guān)的疾病更是如此。此外，飲食因素與許多疾病的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，如刺激性強(qiáng)的食物易使胃部疾病復(fù)發(fā)；食用大量黑木耳可能導(dǎo)致出血傾向?，F(xiàn)在是49頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

控制這些影響因素，住院病人較易做到，門(mén)診病人往往難以實(shí)現(xiàn)。所以，臨床療效科研最好以住院病人為受試對(duì)象，將用藥的種類(lèi)、劑量、次數(shù)與服藥時(shí)間嚴(yán)格控制，使之一致，這樣試驗(yàn)才真正具有可比性。只有無(wú)法對(duì)住院病例進(jìn)行觀察時(shí)，才能選用門(mén)診病人作為觀察對(duì)象?，F(xiàn)在是50頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

5、受試對(duì)象的依從性

受試對(duì)象的依從性——指他們按預(yù)定計(jì)劃接受被試因素的合作程度.

絕對(duì)的依從只有在麻醉動(dòng)物實(shí)驗(yàn)才能見(jiàn)到。一般患者由于心理、社會(huì)、經(jīng)濟(jì)等多方面原因而可能出現(xiàn)忘記服藥、中途退出實(shí)驗(yàn)或換組。這些不依從性表現(xiàn)必然干擾實(shí)驗(yàn)計(jì)劃的完成?，F(xiàn)在是51頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

因此，必須充分關(guān)心體貼病人，做好病人思想工作，使病人建立對(duì)醫(yī)務(wù)人員的充分信任與依賴(lài)的心理狀態(tài)，從而提高病人的依從性。還應(yīng)當(dāng)控制試驗(yàn)時(shí)間，試驗(yàn)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，病人往往依從性減低。此外，在設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)制定一旦出現(xiàn)不依從情況的補(bǔ)救措施現(xiàn)在是52頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二三、試驗(yàn)效應(yīng)現(xiàn)在是53頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二三、試驗(yàn)效應(yīng)試驗(yàn)效應(yīng)(effect)——被試因素作用于受試對(duì)象所引起的試驗(yàn)反應(yīng)(reaction)。試驗(yàn)效應(yīng)總是通過(guò)具體試驗(yàn)指標(biāo)來(lái)反映的，因此效應(yīng)指標(biāo)的正確選定是非常重要的。下面著重介紹科研指標(biāo)的選擇：

現(xiàn)在是54頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二1、科研指標(biāo)的要求：⑴、指標(biāo)的關(guān)聯(lián)性⑵、指標(biāo)的客觀化⑶、指標(biāo)的靈敏度⑷、指標(biāo)的可用性⑸、測(cè)定的精確性現(xiàn)在是55頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二⑴指標(biāo)的關(guān)聯(lián)性選用的指標(biāo)必須與所研究的題目具有本質(zhì)性聯(lián)系，且能確切反映被試因素的效應(yīng)。所選指標(biāo)是否符合關(guān)聯(lián)性要求，這往往反映科研工作者的專(zhuān)業(yè)知識(shí)與技術(shù)水平?，F(xiàn)在是56頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

在指標(biāo)選擇中，切忌“想當(dāng)然”的作法。一般說(shuō)來(lái)，功能性指標(biāo)應(yīng)與所反映的功能存在本質(zhì)聯(lián)系。對(duì)于血糖測(cè)定，若用班氏試驗(yàn)，易受體內(nèi)還原物質(zhì)影響，讀數(shù)往往偏高，應(yīng)采用特異性高的葡萄糖氧化酶方法。但是必須明確，人類(lèi)科學(xué)技術(shù)是不斷發(fā)展的，科研工作者應(yīng)當(dāng)及時(shí)了解最新信息，（不斷查新）以使自己的科研工作應(yīng)用的指標(biāo)更好地具有高度關(guān)聯(lián)性。

現(xiàn)在是57頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

如：長(zhǎng)期以采以丙二醛(MDA)作為反映體內(nèi)活性氧造成脂質(zhì)過(guò)氧化的指標(biāo)，其實(shí)MDA不僅脂質(zhì)過(guò)氧化可以產(chǎn)生，它也可以是血小板正常代謝產(chǎn)物。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)異構(gòu)前列腺素(isoprostane)是活性氧直接催化脂質(zhì)生成的脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物，它的生成既不要酶參與，也不需花生四烯酸脫下，因此就活性氧引起脂質(zhì)過(guò)氧化的指標(biāo)而言，目前也出現(xiàn)了以異構(gòu)前列腺素取代丙二醛的趨向?，F(xiàn)在是58頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二⑵、指標(biāo)的客觀化指標(biāo)分：主觀指標(biāo)和客觀指標(biāo)。主觀指標(biāo)和客觀指標(biāo)的劃分，這是由指標(biāo)數(shù)據(jù)來(lái)源決定的。

主觀指標(biāo)：指標(biāo)數(shù)據(jù)是由觀察者或受試對(duì)象根據(jù)主觀感受程度判定的。如，中醫(yī)診病，望、聞、問(wèn)、切是靠受試者的回答和觀察者憑借感受而加以判斷。

現(xiàn)在是59頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

特點(diǎn)：主觀指標(biāo)較易受觀察者與被試者兩方面的主觀因素的影響，其指標(biāo)易受心理狀態(tài)與暗示程度的影響，并且感覺(jué)器官的感受往往由于背景條件與對(duì)比誘導(dǎo)可發(fā)生較大的差異。因此在科研中應(yīng)盡量少用主觀指標(biāo)。現(xiàn)在是60頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二客觀指標(biāo)：指標(biāo)數(shù)據(jù)由儀表指示的。

如：心電圖、血細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)等就屬于客觀指標(biāo)。特點(diǎn)：①目前生物科學(xué)技術(shù)還不夠發(fā)達(dá)，有些反應(yīng)尚無(wú)適當(dāng)?shù)目陀^指標(biāo)。（上述中醫(yī)的四診尚未無(wú)確切的客觀存指標(biāo)）②有些客觀指標(biāo)靈敏度遠(yuǎn)不如主觀感受。

現(xiàn)在是61頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二科研中要正確運(yùn)用主觀、和客觀指標(biāo)。

對(duì)于主觀指標(biāo)，在可能范圍內(nèi)應(yīng)盡量消除觀察者的主觀因素影響。例如，X線(xiàn)胸片中的陰影，雖照片本身是客觀的，但描述與取值則是主觀的，故仍屬主觀指標(biāo)。如：兩名醫(yī)師分別讀同一批片子共8931張，結(jié)果不一致的占30．1％(2686張)。同一醫(yī)師在兩個(gè)不同時(shí)間分別閱同一批片子(893張)，結(jié)果不一致的占21．5％(192張)。

現(xiàn)在是62頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

由此可見(jiàn)，對(duì)于這類(lèi)指標(biāo)應(yīng)采取多人、分別觀察、盲法判定，而后采用加權(quán)平均值法，從而消除主觀因素的影響。因?yàn)槎嗳丝梢苑乐蛊嫘?，分別觀察可以消除彼此之間的干擾與影響，盲法可以防止偏見(jiàn)?，F(xiàn)在是63頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二⑶、指標(biāo)的靈敏度指標(biāo)的靈敏度通常是由該指標(biāo)所能正確反映的最小數(shù)量級(jí)或水平來(lái)確定。在形態(tài)學(xué)方面，光學(xué)顯微鏡可判斷組織和細(xì)胞水平的改變，電子顯微鏡可判斷亞細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變，細(xì)胞分光光度計(jì)可以測(cè)定細(xì)胞內(nèi)某些物質(zhì)含量的改變。現(xiàn)在是64頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

對(duì)于溶液中物質(zhì)含量的測(cè)定，除檢出下限外，尚可用檢出的最低改變濃度來(lái)反映靈敏度。最低濃度常以mg／L和μg／L等單位表示。現(xiàn)在是65頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

正確選擇靈敏度：作為科研指標(biāo)，要求其靈敏度能正確反映被試因素對(duì)受試對(duì)象所引起的反應(yīng)，并不是靈敏度越高越好。譬如，測(cè)定全血的血紅蛋白含量，則可用氰正鐵血紅蛋白法，以g／l為單位；現(xiàn)在是66頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

測(cè)定血漿游離血紅蛋白可采用苯息丁法，以g／L為單位。再如,測(cè)定小鼠體重，以感量為0.5g的藥物天平即可，若采用感量為0.1mg的分析天平，顯然是不必要的，也是不應(yīng)該的。現(xiàn)在是67頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二⑷、指標(biāo)的可用性

指標(biāo)的可用性是由該指標(biāo)的敏感性(敏感度)與特異性(特異度)來(lái)決定的。在醫(yī)學(xué)上，理想的試驗(yàn)是陽(yáng)性只出現(xiàn)在本病存在的條件下，本病不存在時(shí)試驗(yàn)是陰性。

現(xiàn)在是68頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

可是絕大多數(shù)生物學(xué)與醫(yī)學(xué)試驗(yàn)，由于生物個(gè)體之間存在差異與試驗(yàn)結(jié)果呈正態(tài)分布或拖尾的偏態(tài)分布，故從試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，患本病者與未患本病者通常在分布上存在不同程度的交錯(cuò)重疊現(xiàn)象(圖5—2)。

現(xiàn)在是69頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二現(xiàn)在是70頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二如以a為真陽(yáng)性數(shù)，b為假陽(yáng)性數(shù)，c·為假陰性數(shù)，d為真陰性數(shù)。試驗(yàn)的敏感性(se)就是真陽(yáng)性率，試驗(yàn)的特異性(sp)就是真陰性率。它們的求取公式如下：

從臨床角度考慮，(1一Se)就是漏診率，

(1—Sp)就是誤診率?，F(xiàn)在是71頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

對(duì)于大多數(shù)試驗(yàn)而言，在樣本含量確定的條件下，敏感性與特異性存在反變關(guān)系。因此，選擇指標(biāo)時(shí)不能只考慮敏感性或特異性一方，而應(yīng)將二者綜合起來(lái)考慮。試驗(yàn)指標(biāo)的綜合評(píng)價(jià)常用以下兩個(gè)辦法：作為科研指標(biāo)，一般要求診斷指數(shù)≥150，診斷效率≥0.75，可用度≥0.500若有多個(gè)試驗(yàn)指標(biāo)可供選擇時(shí)，應(yīng)選診斷指數(shù)高的試驗(yàn)。如幾個(gè)試驗(yàn)的診斷指數(shù)相近時(shí)，則應(yīng)選用其中可用度高的試驗(yàn)。現(xiàn)在是72頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二⑸、測(cè)定的精確性

精確性包括：指標(biāo)的精密度與準(zhǔn)確度。

準(zhǔn)確度：是測(cè)定值與真實(shí)值接近的程度。即：測(cè)定正確性的量度。通常以偏差系數(shù)(CB)來(lái)表示。精密度：是各次測(cè)定值集中的程度。它與變異系數(shù)(CV)成反比。重復(fù)性：在相同條件下多次取樣測(cè)定結(jié)果的精密度?，F(xiàn)在是73頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

平時(shí)強(qiáng)調(diào)試驗(yàn)結(jié)果的可重復(fù)性，就是在相同條件下多次取樣測(cè)定結(jié)果的精密度。從科研的要求來(lái)看，第一位必須準(zhǔn)確，第二位要求精密。既準(zhǔn)確又精密最好，準(zhǔn)確但精密度不很高尚可，但精密度高而準(zhǔn)確度差則不行?，F(xiàn)在是74頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二以R代表回收率(％)，x代表測(cè)定均值，s代表測(cè)定值標(biāo)準(zhǔn)差，則偏差系數(shù)與變異系數(shù)：偏差系數(shù)CB(％)＝∣100％—R∣

變異系數(shù)CV(％)＝s/x×100％對(duì)于不同指標(biāo)，偏差系數(shù)與變異系數(shù)的要求是不同。即不同指標(biāo)的精確性要求也是不一致的。指標(biāo)的精確性與檢測(cè)指標(biāo)的方法、儀器、試劑及試驗(yàn)條件有關(guān)外，還取決于技術(shù)水平及操作情況。因此，在固定其他條件后，以此來(lái)考核科研人員的技術(shù)情況。

現(xiàn)在是75頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二2、科研指標(biāo)的注意事項(xiàng)作為科研指標(biāo)，除指標(biāo)應(yīng)當(dāng)符合以上五個(gè)條件要求外，還應(yīng)注意以下幾個(gè)問(wèn)題：⑴、標(biāo)本采集與貯運(yùn)標(biāo)準(zhǔn)化⑵、實(shí)驗(yàn)方法必須標(biāo)準(zhǔn)化與固定化⑶、不能搞“單打一”⑷、從實(shí)際出發(fā)、盡量爭(zhēng)取高、精、尖、新⑸、高度重視實(shí)驗(yàn)方法的可靠性⑹、避免其它因素對(duì)指標(biāo)的干擾

現(xiàn)在是76頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二⑴標(biāo)本采集與貯運(yùn)標(biāo)準(zhǔn)化標(biāo)本的采集方法、部位、時(shí)間、保存與運(yùn)輸?shù)雀鱾€(gè)環(huán)節(jié)都應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)化。例如：測(cè)定血小板TXB2，除要求患者采血前一周未服過(guò)非類(lèi)固醇抗炎藥外，抽血必須使用硅化或塑料管和注射器；抽血時(shí)采用肘靜脈，以較大針頭，力爭(zhēng)一針見(jiàn)血.現(xiàn)在是77頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

使用EDTA-Na2抗凝，抗凝液中還應(yīng)含消炎痛與抑肽酶；運(yùn)輸過(guò)程中應(yīng)避免強(qiáng)烈震動(dòng)；離心制備貧血血小板血漿，而后貯存于一20℃以下待測(cè)。總之，多個(gè)環(huán)節(jié)都應(yīng)避免凝血酶的形成與血小板活化，使測(cè)得的TXB2的確是體內(nèi)抽血前已形成的，而不是抽血后血小板活化產(chǎn)生的?，F(xiàn)在是78頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二⑵、實(shí)驗(yàn)方法必須標(biāo)準(zhǔn)化與固定化

第一，同一指標(biāo)用不同方法，其結(jié)果的差別往往是很顯著的。例如，血小板計(jì)數(shù)以枸櫞酸鈉抗凝，由于存在一定程度血小板聚集，計(jì)數(shù)結(jié)果往往低于肝素抗凝標(biāo)本；因?yàn)镋DTA螯合鈣離子最完全，故以EDTA—Na2抗凝血液的血小板計(jì)數(shù)又略高于肝素抗凝?，F(xiàn)在是79頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二第二，不同儀器之間也總具有一定的誤差。

不同廠(chǎng)家的產(chǎn)品與不同等級(jí)的試劑有時(shí)也會(huì)使指標(biāo)發(fā)生顯著改變。現(xiàn)在是80頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

第三，其它實(shí)驗(yàn)條件也可能在一定程度上影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。例如，時(shí)間因素等等。因?yàn)樵S多生理指標(biāo)由于生物鐘而呈周期性波動(dòng)。此外，每個(gè)檢測(cè)人員習(xí)慣多少存在一定的偏性，所以，實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的檢測(cè)方法應(yīng)當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)化，儀器、試劑、條件、時(shí)間與人員都應(yīng)固定?，F(xiàn)在是81頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二⑶、不能搞“單打一”

無(wú)論哪種指標(biāo)，不可能絲毫不受其它因素的影響，靈敏度越高的指標(biāo)，影響因素可能越多，越易出現(xiàn)假陽(yáng)性(或假陰性)結(jié)果。因此，在科研中應(yīng)選用一種以上的不同方法與指標(biāo)，以相互驗(yàn)證。只有多方法多途徑全面觀察，才有可能準(zhǔn)確地了解事物的全貌。臨床上總以多項(xiàng)指標(biāo)檢查肝功能，這也是重要原因之一。現(xiàn)在是82頁(yè)\一共有91頁(yè)\編輯于星期二

在肝癌的實(shí)驗(yàn)診斷中，反向間接血凝抑制試驗(yàn)檢查甲胎蛋白(AFP)，這是一個(gè)相當(dāng)敏感的