注射用紫杉醇白蛋白結(jié)合型ABRAXANE

靶向藥物定義：根據(jù)病變或靶（腫瘤）組織、細胞、分子的生物學(xué)特征差異，研發(fā)具有命中目標(biāo)的藥物分子統(tǒng)稱為靶向(治療)藥物相關(guān)機制：靶向藥物通過阻斷腫瘤細胞或相關(guān)細胞的信號傳導(dǎo)，控制細胞基因表達的改變，而產(chǎn)生抑制或殺死腫瘤細胞特點：專屬性強，副作用??；風(fēng)險大，機制尚待明確，價格高按藥物作用位置和方式不同分類：1、作用于腫瘤細胞的表皮生長因子（EGF）的藥物：Herceptin等；2、作用于血管細胞的血管表皮生長因子（VEGF）

的藥物：Avastin等；3、抗體引導(dǎo)藥物運送到腫瘤細胞周圍，高效力殺死腫瘤細胞，如：Mylotarg（麥羅塔-惠氏）等

現(xiàn)在是1頁\一共有37頁\編輯于星期二

靶向制劑定義：靶向制劑屬于第四代藥物制劑，系指載體將藥物通過局部給藥或全身血液循環(huán)而選擇性濃集定位于靶組織、靶器官、靶細胞或細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的給藥系統(tǒng)。俗稱導(dǎo)彈藥物歷史：靶向制劑的概念是EhrlichP在1906年提出，至今已100多年。上世紀(jì)70年代末80年代初，相關(guān)人員即開始較全面地研究。特點：最大限度提高治療效果，減少全身性的毒副作用，尤其適用于癌癥化療。成本高，風(fēng)險低（療效明確）現(xiàn)在是2頁\一共有37頁\編輯于星期二納米技術(shù)在腫瘤靶向治療中的應(yīng)用

藥物納米載體：是以納米顆粒（幾十至幾百納米）作為藥物載體，將藥物治療分子包裹在納米顆粒之中或吸附在其表面，通過靶向分子與細胞表面特異性受體結(jié)合，在細胞攝取作用下進入細胞內(nèi)，實現(xiàn)安全有效的靶向藥物輸送和基因治療。研究發(fā)現(xiàn)，納米顆粒由于有足夠小的納米尺寸，從而能夠從高通透性的腫瘤血管中滲出(EPR效應(yīng))，進入腫瘤組織，集中在腫瘤細胞周圍。通過納米技術(shù)開發(fā)具有靶向性、多種功能的藥物傳輸體系，有助于實現(xiàn)腫瘤的靶向治療，并將毒副作用降低到較低的水平。從臨床治療角度而言，實現(xiàn)腫瘤的低毒性治療具有劃時代的意義。

現(xiàn)在是3頁\一共有37頁\編輯于星期二

重要納米載體脂質(zhì)體：磷脂+膽固醇（脂質(zhì)體阿霉素）白蛋白納米粒：人血清白蛋白為載體（內(nèi)源性、提高免疫功能等）☆注射用紫杉醇（白蛋白結(jié)合型）Abraxane高分子膠束：具有雙親分子特征（全合成或天然材料修飾）脂質(zhì)納米粒：脂質(zhì)材料為載體（來源廣泛、價廉易得）其他：納米乳、納米囊、納米球等現(xiàn)在是4頁\一共有37頁\編輯于星期二任何化療藥要起到治療作用都必須能夠離開血循環(huán)到達腫瘤組織及進入腫瘤細胞內(nèi)Abraxane?

主藥成分是紫杉醇，配方改變主要是影響藥物的分布,實現(xiàn)靶向轉(zhuǎn)運，讓更多的藥物能聚集在腫瘤組織中并進入腫瘤細胞內(nèi)Abraxane?獨特轉(zhuǎn)運機制使藥物在腫瘤細胞內(nèi)高度聚集現(xiàn)在是5頁\一共有37頁\編輯于星期二ABRAXANE?轉(zhuǎn)運途徑血漿中的白蛋白-藥物復(fù)合物離開血循環(huán)到達腫瘤組織主要通過兩個途徑經(jīng)過內(nèi)皮細胞間隙（IntercellularJunction)漏出（EPR效應(yīng)）大量激活腫瘤血管內(nèi)皮細胞的GP60受體，經(jīng)過細胞膜上移動小泡胞膜窖蛋白Caveolin）的作用進行轉(zhuǎn)運（VesiclesTrafficking），將白蛋白-藥物-GP60受體從細胞膜一側(cè)轉(zhuǎn)運到細胞膜另一側(cè)（Transcytosis）的腫瘤組織間質(zhì)在腫瘤組織間質(zhì)，白蛋白-藥物-GP60受體與位于腫瘤細胞表面的SPARC結(jié)合白蛋白-藥物-GP60受體-SPARC通過非溶酶體機制被內(nèi)吞(internalized)入腫瘤細胞現(xiàn)在是6頁\一共有37頁\編輯于星期二ABRAXANE如何實現(xiàn)靶向作用的？白蛋白結(jié)合納米技術(shù)靜脈輸注后納米顆粒大量進入腫瘤組織間質(zhì)通過EPR效應(yīng)滲出血管—細胞旁通道利用GP60介導(dǎo)的胞膜窖跨膜轉(zhuǎn)運腫瘤組織分泌的SPARC與白蛋白-藥物-GP60受體復(fù)合物大量結(jié)合后內(nèi)吞進入腫瘤細胞內(nèi)，釋放出的活性成分紫杉醇發(fā)揮細胞毒作用殺死腫瘤細胞現(xiàn)在是7頁\一共有37頁\編輯于星期二納米白蛋白結(jié)合型紫杉醇?轉(zhuǎn)運及在腫瘤內(nèi)聚集的推薦機制。白蛋白/藥物復(fù)合物與gp60受體結(jié)合以及小凹蛋白介導(dǎo)的轉(zhuǎn)運能夠使納米白蛋白結(jié)合型紫杉醇?跨越內(nèi)皮屏障這一過程簡單化。在腫瘤間質(zhì)組織中，白蛋白結(jié)合型紫杉醇與SPARC結(jié)合后經(jīng)由非溶酶體通路迅速被攝入至腫瘤細胞8。NabTechnology--ABRAXANE?的體內(nèi)轉(zhuǎn)運腫瘤間質(zhì)組織gp60受體腫瘤內(nèi)皮細胞紅細胞腫瘤細胞腫瘤細胞表面SPARCgp60胞吞的Alb-藥物復(fù)合物表面SPARC/Alb-藥物復(fù)合物gp60/Alb藥物復(fù)合物腫瘤血管白蛋白-藥物復(fù)合物內(nèi)吞的SPARC/Alb-藥物復(fù)合物白蛋白-藥物復(fù)合物Gp60受體小凹蛋白SPARC白蛋白-藥物聚集8.CarverLA,SchnitzerJE:NatRevCancer.3:571-81,2003.現(xiàn)在是8頁\一共有37頁\編輯于星期二AlbuminMeansize130nmPaclitaxelInjectionintocirculationTumorbloodvesselendothelialcellsPaclitaxelAlbuminSPARCTumorinterstitiumgp60receptorsAlbumintranscytosisbygp60andcaveolaeDissociationintoindividualalbumin-boundpaclitaxelcomplexesatconcentrationbelowthresholdAlbumin-paclitaxelcomplexAlbumin-paclitaxelaccumulationwithSPARCbindingSPARCTumorcellsPaclitaxel-inducedtumorcellapoptosisCaveolaeandvesicles作用機制nabTechnology平臺1.由gp60和窖蛋白介導(dǎo)的跨細胞作用2.白蛋白-紫杉醇復(fù)合物和SPARC在腫瘤細胞表面結(jié)合現(xiàn)在是9頁\一共有37頁\編輯于星期二聚氧乙烯蓖麻油抑制Caveolin介導(dǎo)的轉(zhuǎn)胞吞作用Abraxane紫杉醇穿過量是Taxel的4.2倍，速度是taxel的4.7倍-methylcyclodextrin-甲基環(huán)糊精使囊泡崩解，抑制納米白蛋白結(jié)合型紫杉醇?的轉(zhuǎn)運Taxol(Cremophor)nab-paclitaxelnab+b-methylcyclodextrin4.2XGreaterTransportofNab-Paclitaxel現(xiàn)在是10頁\一共有37頁\編輯于星期二NEM圖5A.NEM抑制紫杉醇的胞轉(zhuǎn)作用紫杉醇胞轉(zhuǎn)量(底層小室Em527)圖5B.兔多克隆抗體通過與gp60受體結(jié)合抑制紫杉醇的胞轉(zhuǎn)作用-Ab+Ab時間(小時)時間(小時)HMVEC/ABI-0070mM1mM5mM10mMGP60受體和囊泡轉(zhuǎn)運抑制物抑制Nab-紫杉醇的轉(zhuǎn)運NEM—泡狀轉(zhuǎn)運的抑制物Ab–gp60受體的抗體現(xiàn)在是11頁\一共有37頁\編輯于星期二SPARC和腫瘤的關(guān)系腫瘤細胞分泌見于多種惡性腫瘤中

乳腺癌 頭頸部癌 食道癌 肺癌 惡性黑色素瘤 肝細胞肝癌 膀胱癌 前列腺癌和腫瘤預(yù)后有關(guān)，SPARC含量越高，預(yù)后越差SecretedProteinthatisAcidicandRichinCysteine富含半胱胺酸酸性分泌型蛋白現(xiàn)在是12頁\一共有37頁\編輯于星期二

BreastTumorSectionstainedforSPARC,20XNormalBreastTissuestainedforSPARC,20XSPARC在乳癌腫瘤細胞高表達現(xiàn)在是13頁\一共有37頁\編輯于星期二瘤體體積(mm3)PC3生理鹽水對照組PC3納米白蛋白結(jié)合型紫杉醇組?PC3/SP生理鹽水對照組PC3/SP納米白蛋白結(jié)合型紫杉醇組?SPARC過表達PC3/SP異種移植瘤比親代PC3系瘤對納米白蛋白結(jié)合型紫杉醇?反應(yīng)更敏感。SPARC過表達腫瘤對ABRAXANE?更敏感現(xiàn)在是14頁\一共有37頁\編輯于星期二納米粒白蛋白結(jié)合型紫杉醇(ABI-007)相對于泰素在乳腺腫瘤內(nèi)分布增加可能與SPARC表達有關(guān)現(xiàn)在是15頁\一共有37頁\編輯于星期二納米微粒白蛋白結(jié)合技術(shù)提高腫瘤內(nèi)藥物濃度紫杉醇(nCi/g)MX-1人乳腺癌異種移植性腫瘤內(nèi)藥物濃度增加Abraxan?(20mg/kg)Taxol?(20mg/kg)白蛋白結(jié)合技術(shù)(Abraxan?；130nm)通過白蛋白受體(gp60)介導(dǎo)的跨內(nèi)皮、胞吞作用這種新型的作用機制提高藥物對腫瘤的滲透，還能夠通過白蛋白介導(dǎo)的與SPARC結(jié)合而提高藥物在腫瘤部位的聚集較其它藥物高33%；現(xiàn)在是16頁\一共有37頁\編輯于星期二Fig4.MX-1細胞的SPARC表達。在發(fā)生乳腺上皮癌變(MX-1)的組織能較正常乳腺上皮(HMEC)檢測到更多的SPARC。盡管大多數(shù)SPARC在細胞內(nèi)，通過聚焦顯微鏡和非透化性細胞的表面染色的觀察，發(fā)現(xiàn)大量SPARC在細胞表面。箭頭表示表面相關(guān)SPARC。HMECMX-1MX-1SPARC表面染色

MX-1細胞的SPARC表達MX-1SPARC共焦現(xiàn)在是17頁\一共有37頁\編輯于星期二AlbuminSPARCTissueCo-LocalizationIntracellularCo-LocalizationSPARC與白蛋白的關(guān)系

在MX-1乳癌組織中SPARC與白蛋白呈現(xiàn)共位點Dataonfile:AmericanBioScience,Inc現(xiàn)在是18頁\一共有37頁\編輯于星期二研究結(jié)論SPARC在人類乳腺癌組織和人乳腺癌異體移植腫瘤(MX-1)中過度表達；SPARC在正常人或鼠組織中不表達；MX-1人類乳腺癌異種移植腫瘤中，SPARC與白蛋白發(fā)生局部相互作用；SPARC在MX-1腫瘤細胞表面和內(nèi)部均能表達；培養(yǎng)的MX-1腫瘤細胞通過非溶酶體通路和細胞內(nèi)SPARC局部作用迅速內(nèi)吞白蛋白；培養(yǎng)的正常細胞(HUVEC、HMCEC和HMEC)表現(xiàn)為較弱的SPARC染色；總之，SPARC在白蛋白聚集于乳腺癌組織和細胞中發(fā)揮著重要的作用，可能為白蛋白結(jié)合型藥物提供重要的藥物作用靶點，如Abraxane?(ABI-007，納米微粒白蛋白結(jié)合紫杉醇)；以上數(shù)據(jù)以及gp60介導(dǎo)的跨內(nèi)皮轉(zhuǎn)運，可能能夠?qū)braxane?在腫瘤部位聚集程度較Taxol?高以及療效優(yōu)于Taxol?作出解釋?，F(xiàn)在是19頁\一共有37頁\編輯于星期二根據(jù)HER2和SPARC狀況，白蛋白結(jié)合型紫杉醇相對于多西他賽對各種異種移植腫瘤療效改善的研究現(xiàn)在是20頁\一共有37頁\編輯于星期二研究背景和研究目的在一項對非腫瘤無胸腺小鼠劑量探索的臨床前研究中，白蛋白結(jié)合型紫杉醇(Abraxan?)的最大治療劑量(MTD)被確定為120-240mg/kg，而多西他賽(泰素帝，Taxotere?)被確定15mg/kg;人類表皮生長因子受體-2(HER2)在很多惡性腫瘤中的過度表達能夠提高腫瘤的存活期并對紫杉醇產(chǎn)生抵抗;本研究在5個異種移植腫瘤模型中證實：白蛋白結(jié)合型紫杉醇(Abraxan?)較多西他賽(泰素帝，Taxotere?)療效提高?，F(xiàn)在是21頁\一共有37頁\編輯于星期二Abraxane?和Taxotere?對HER2陽性異種移植腫瘤的療效

(HT29結(jié)腸癌)移植后天數(shù)移植后天數(shù)Fig1.對HER2陽性HT29異種移植腫瘤的療效。Abraxan?(亞-MTD)的兩個劑量水平(Abraxan?120mg/kg，p<0.001；Abraxan?50mg/kg，p=0.0057)均較Texotere?(15mg/kg，MTD)具有更好的療效。對照組Abraxan?50mg/kgq4d×3Abraxan?120mg/kgq4d×3Texotere?15mg/kgq4d×3對照組Abraxan?50mg/kgq4d×3Abraxan?120mg/kgq4d×3Texotere?15mg/kgq4d×3HT29HER2，得分=2ABHT29SPARC，得分=4+瘤體體積(mm3)重量損失(%)CD現(xiàn)在是22頁\一共有37頁\編輯于星期二Abraxane?和Taxotere?對HER2陽性異種移植腫瘤的療效

(PC3前列腺癌)移植后天數(shù)Fig2.對HER2陽性PC3異種移植腫瘤的療效。Abraxan?(亞-MTD)與Texotere?(15mg/kg，MTD)等效(p=ns)；Abraxan?(50mg/kg)療效低于Texotere?(15mg/kg)(p<0.001)。移植后天數(shù)對照組Abraxan?50mg/kgq4d×3Abraxan?120mg/kgq4d×3Texotere?15mg/kgq4d×3對照組Abraxan?50mg/kgq4d×3Abraxan?120mg/kgq4d×3Texotere?15mg/kgq4d×3瘤體體積(mm3)重量損失(%)ABCDPC3HER2，得分=2PC3SPARC，得分=3現(xiàn)在是23頁\一共有37頁\編輯于星期二

Fig3.對HER2陽性MDA-MB-231異種移植的療效腫瘤。Abraxan?(亞-MTD)的兩個劑量水平(Abraxan?120mg/kg，p<0.0001；Abraxan?50mg/kg，p<0.0001)均較Texotere?(15mg/kg，MTD)l療效差。移植后天數(shù)移植后天數(shù)ABCD瘤體體積(mm3)重量損失(%)對照組Abraxan?50mg/kgq4d×3Abraxan?120mg/kgq4d×3Texotere?15mg/kgq4d×3對照組Abraxan?50mg/kgq4d×3Abraxan?120mg/kgq4d×3Texotere?15mg/kgq4d×3結(jié)果：Abraxan?和Texotere?對HER2陽性異種移植腫瘤的療效

(MDA-MB-231乳腺癌)MDA-MB-231HER2，得分=3MDA-MB-231SPARC，得分=2現(xiàn)在是24頁\一共有37頁\編輯于星期二Abraxane?和Taxotere?對HER2陰性異種移植腫瘤的療效

(LX-1肺癌)Fig4.對HER2陰性LX-1異種移植腫瘤的療效。Abraxan?(亞-MTD)的兩個劑量水平(Abraxan?120mg/kg，p<0.0001；Abraxan?50mg/kg，p=0.0001)均較Texotere?(15mg/kg，MTD)療效好。移植后天數(shù)移植后天數(shù)ABCD瘤體體積(mm3)重量損失(%)對照組Abraxan?50mg/kgq4d×3Abraxan?120mg/kgq4d×3Texotere?15mg/kgq4d×3對照組Abraxan?50mg/kgq4d×3Abraxan?120mg/kgq4d×3Texotere?15mg/kgq4d×3LX-1HER2，得分=0LX-1SPARC，得分=0現(xiàn)在是25頁\一共有37頁\編輯于星期二Abraxan?和Texotere?對HER2陰性異種移植腫瘤的療效

(MX-1乳腺癌)Fig5.對HER2陰性MX-1異種移植腫瘤的療效。同等劑量水平Abraxan?較Texotere?療效好，p<0.0001，ANOVA分析。采用此方案兩種藥物均無毒性。ABCD瘤體體積(mm3)重量損失(%)移植后天數(shù)移植后天數(shù)PBSAbi-00715mg/kg(wkly×3)Texotere?15mg/kg(wkly×3)PBSAbi-00715mg/kg(wkly×3)Texotere?15mg/kg(wkly×3)MX-1HER2，得分=0MX-1SPARC，得分=2現(xiàn)在是26頁\一共有37頁\編輯于星期二HER2/SPARC狀況和相關(guān)療效總結(jié)Fig7.染色得分和腫瘤療效數(shù)據(jù)的總結(jié)。左圖顯示了5種類型腫瘤HER2和SPARC狀況，右圖顯示了Abraxan?和的Texotere?相對療效。利用15mg/kgTexotere?和120mg/kgAbraxan?(15mg/kgAbraxan?用于MX-1型腫瘤)的數(shù)據(jù)來計算相對療效(使用Texotere?的瘤體體積/使用Abraxan?的瘤體體積)。染色得分HER2SPARCHER2negHER2posHER2negHER2pos相對療效現(xiàn)在是27頁\一共有37頁\編輯于星期二研究結(jié)論在4/5異種移植腫瘤模型中，Abraxan?(120mg/kg)與Texotere?(15mg/kg)等效或具有更好的療效；除LX-1肺癌外，所有類型的腫瘤SPARC染色陽性強度為以下順序(由高到低)：HT29>pC3>MX-1=MDA-MB-231>LX-1；對于HER2陰性腫瘤(LX-1肺癌，MX-1乳腺癌)，Abraxan?較Texotere?療效更好；對于HER2陽性腫瘤(HT29結(jié)腸癌，PC3前列腺癌，MDA-MB-231乳腺癌)，隨著SPARC表達的增加，Abraxan?的療效較Texotere?也增加?，F(xiàn)在是28頁\一共有37頁\編輯于星期二紫杉醇含量比例(ABX/Taxol)MX-1荷瘤裸鼠接受20mg/kgAbraxane或Taxol(每組織N=5，用藥后1小時)等劑量Abraxane與Taxol在荷瘤裸鼠組織分布的比較P<.008foralltissues0.00.51.01.5腫瘤

肌肉心臟腎臟肺脾臟血液正常組織現(xiàn)在是29頁\一共有37頁\編輯于星期二MX-1人乳腺癌荷瘤小鼠接受等劑量Abraxane與Taxol（30mg/kg）療效比較現(xiàn)在是30頁\一共有37頁\編輯于星期二等毒性劑量Abraxane與Taxol對不同荷瘤裸鼠的療效比較

(每組N=5，IVqdx5days)LungProstateOvarianDesaiN,YaoZ,Soon-ShiongP,etal.Evidenceofenhancedinvivoefficacyatmaximumtolerateddose(MTD)ofnanoparticlepaclitaxel(ABI-007)andTaxolin5humantumorxenograftsofvaryingsensitivitytopaclitaxel[abstract].ProcAmSocClinOncol.2002;21:116a.Abstract462.現(xiàn)在是31頁\一共有37頁\編輯于星期二溶劑對化療藥物的影響tenTije,etal.ClinPharmacokinet2003;42:665-685;GelderblomH,etal.EurJCancer2001;37:1590-1598;VerweijJ,etal.AnnOncol1994;6:495-505;BattafaranoDF,etal.Cancer.1995;76:110-115;DroriS,etal.EurJBiochem.1995;228:1020-1029.延長輸注時間需要特殊管道系統(tǒng)激素預(yù)處理生長因子支持延長感覺神經(jīng)病變時間增加液體潴留改變生物利用度可能導(dǎo)致抗腫瘤活性缺乏量效關(guān)系影響合用藥物的療效對治療的影響降低療效溶劑包裹紫杉類藥物增加毒性超敏反應(yīng)加重骨髓抑制神經(jīng)細胞內(nèi)顆粒釋放及脫髓鞘改變使用不方便需要常規(guī)支持治療(激素預(yù)處理，等)溶劑造成的塑料容器滲漏現(xiàn)在是32頁\一共有37頁\編輯于星期二Gradisharetal.JClinOncol.2005;23:7794–7803iv,靜脈給藥CA012研究設(shè)計隨機分組

(1:1)

n=460注射用紫杉醇(白蛋白結(jié)合型)260mg/m2靜脈滴注30分鐘每3周給藥一次

無標(biāo)準(zhǔn)預(yù)處理紫杉醇175mg/m2靜脈滴注3小時每3周給藥一次

標(biāo)準(zhǔn)預(yù)處理：地塞米松、抗組胺藥物和H2受體拮抗劑現(xiàn)在是33頁\一共有37頁\編輯于星期二研究者評價療效優(yōu)于對照組獨立評價委員會確認了更好的總有效率

Gradisharetal.JClinOncol.2005;23:7794–7803白蛋白紫杉醇泰素?229225n總有效率(±95%CI)978913213617617517618233.2%42.3%18.7%27.0%26.5%13.2%34.1%18.3%33.5%18.7%P=0.001P=0.029P=0.006P=0.002P=0.002現(xiàn)在是34頁\一共有37頁\編輯于星期二比較白蛋白結(jié)合型紫杉醇和多西他賽

(A,B,C對比D)每周與每3周白蛋白結(jié)合型紫杉醇

(B,C對比A)低劑量與高劑量每周方案白蛋白結(jié)合型紫杉醇(B對比C)ArmA:白蛋白結(jié)合型紫杉醇300mg/m2

，每3周使用ArmB:白蛋白結(jié)合型紫杉醇

100mg/m2

每周，4周中用藥3周ArmC:白蛋白結(jié)合型紫杉醇

150mg/m2

每周