1138生物技術(shù)制藥概論20年春季西南大學(xué)作業(yè)答案

西南大學(xué)網(wǎng)絡(luò)與繼續(xù)教育學(xué)院課程代碼：1138學(xué)年學(xué)季：202011、生物催化和化學(xué)催化相比的弱點(diǎn)是選擇性高安全環(huán)境友好催化高效性反應(yīng)溫度更嚴(yán)格2、下列那個(gè)不屬于基因組計(jì)劃需要繪制的圖蛋白圖轉(zhuǎn)錄圖物理圖遺傳圖3、促紅細(xì)胞生長素（EPO）基因能在大腸桿菌中表達(dá)，但卻不能用大腸桿菌的基因工程菌生產(chǎn)人的促紅細(xì)胞生長素，這是因?yàn)?大腸桿菌內(nèi)毒素與人的促紅細(xì)胞生長素特異性結(jié)合并使其滅活人的促紅細(xì)胞生長素對(duì)大腸桿菌有毒性作用人促紅細(xì)胞生長素基因在大腸桿菌中極不穩(wěn)定大腸桿菌不能使人的促紅細(xì)胞生長素糖基化4、人類第一個(gè)基因工程藥物是重組鏈激酶C、促紅細(xì)胞生成素重組人胰島素乙型肝炎疫苗5、人抗鼠抗體（HAMA）參考答案：人抗鼠抗體是指鼠源性抗體應(yīng)用于人身上而產(chǎn)生的一種人抗鼠的抗體,導(dǎo)致排斥反應(yīng)，使藥物在體內(nèi)清除速度時(shí)間.6、細(xì)胞因子參考答案：由細(xì)胞分泌的能調(diào)節(jié)生物有機(jī)體生理功能，參與細(xì)胞的增殖、分化和凋亡的小分子多肽物質(zhì)7、治療性疫苗參考答案:治療性疫苗是指在已感染病原微生物或已患有某些疾病的機(jī)體中，通過誘導(dǎo)特異性的免疫應(yīng)答，達(dá)到治療或重組技術(shù)表達(dá)的產(chǎn)品或制品。8、基因表達(dá)參考答案:

基因表達(dá)是指目的基因在生物體中的轉(zhuǎn)錄、翻譯以及所有加工過程。9、生物藥物參考答案：利用生物體、生物組織或其成分，綜合應(yīng)用生物學(xué)、生物化學(xué)、微生物學(xué)、免疫學(xué)、物理化學(xué)、生物技術(shù)和而成的一大類用于預(yù)防、治療和診斷疾病的制品10、SDS(十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳)參考答案：SDS是帶負(fù)電的陰離子去污劑，使用SDS時(shí),蛋白質(zhì)樣品需經(jīng)樣品溶解液處理.樣品溶解液含B-巰基乙再與SDS結(jié)合形成帶負(fù)電的SDS-蛋白復(fù)合物，以在PAGE中按分子量大小分離。11、亞單位疫苗參考答案：不含病原體核酸，選用能誘發(fā)宿主產(chǎn)生中和抗體的微生物蛋白或表面抗原而制成的疫苗。12、包涵體參考答案：包涵體是指細(xì)菌表達(dá)的蛋白在細(xì)胞內(nèi)凝集，形成無活性的難溶性固體顆粒。13、生物技術(shù)制藥參考答案：生物技術(shù)制藥是指運(yùn)用微生物學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物化學(xué)等的研究成果，從生物體、生物組織、細(xì)胞、體學(xué)、生物技術(shù)、藥學(xué)等科學(xué)的原理和方法進(jìn)行藥物制造的技術(shù)。14、疫苗參考答案：疫苗：用于人工主動(dòng)免疫的生物制品15、簡(jiǎn)述發(fā)酵工程的基本含義參考答案：發(fā)酵工程(fermentationengineering)又稱為微生物工程，是利用微生物制造工業(yè)原料與工業(yè)產(chǎn)品并提供用16、簡(jiǎn)述抗體藥物的研發(fā)歷史參考答案：16、簡(jiǎn)述抗體藥物的研發(fā)歷史參考答案：第一階段以1890年Behring發(fā)現(xiàn)白喉抗毒素為代表，其特點(diǎn)是用抗原免疫動(dòng)物來獲得多克隆抗體。第二階段以1975年Kohler創(chuàng)建雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體為代表。1986年，美國FDA批準(zhǔn)了世界上第一個(gè)單抗治療性藥物一一抗CD3單抗OKT3進(jìn)入市場(chǎng)，用于器官移植時(shí)t用達(dá)到了頂點(diǎn)第三階段以1994年Winter以基因工程方法制備人源化抗體為代表17、以近年來多次發(fā)生的疫苗事件為例，分析生物藥物的類型、藥物制備和質(zhì)量控制的特殊性。參考答案：簡(jiǎn)要回顧總結(jié)某一個(gè)案例即可,如長春長生疫苗事件。此次的疫苗事件簡(jiǎn)單說來是2018年7月15日長春長，通報(bào)。緊接著7月18日，長春長生又公告公眾：食藥監(jiān)局對(duì)其下達(dá)的處罰決定書，決定書中提及其批次為格。主要原因是疫苗生產(chǎn)記錄作假。生物藥物制備的特殊性需要特別注意原料中的有效物質(zhì)含量低導(dǎo)致的提取等制備方法的特殊性，穩(wěn)定性差等的真實(shí)性等。流通管理包括但不限于低溫冷藏和運(yùn)輸管理、批簽發(fā)制度、原始證據(jù)等。18、簡(jiǎn)述生物藥物的用途參考答案：作為治療藥物，作為預(yù)防藥物，作為診斷藥物，其他生物醫(yī)藥用品19、如何控制基因工程藥物質(zhì)量？參考答案：基因工程藥物的質(zhì)量控制要點(diǎn)如下。1蛋白質(zhì)含量的測(cè)定。2蛋白質(zhì)純度檢測(cè)。3蛋白質(zhì)Mr測(cè)定。4蛋白質(zhì);分析，宿主蛋白液和酸殘留分析20、簡(jiǎn)述單克隆抗體的制備過程。參考答案：經(jīng)篩選和克隆化的雜交瘤細(xì)胞僅能合成及分泌單一抗原表位的特異性抗體，是單克隆抗體。單抗的制作過程與骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞，篩選雜交瘤細(xì)胞，篩選能產(chǎn)生某種特異性單抗的雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)培養(yǎng)特異性雜交瘤細(xì)胞克隆，單抗的純化及鑒定。21、簡(jiǎn)述生物藥物的藥理學(xué)特性參考答案：1、活性強(qiáng)：體內(nèi)存在的天然活性物質(zhì)。2、治療針對(duì)性強(qiáng)，基于生理生化機(jī)制。3、毒副作用一般較少，營反應(yīng)。22、簡(jiǎn)述生物技術(shù)藥物的概念，并討論與化學(xué)藥物的主要區(qū)別。參考答案：生物技術(shù)藥物是指采用DNA重組技術(shù)或其他創(chuàng)新生物技術(shù)生產(chǎn)的治療、預(yù)防藥物，如細(xì)胞因子、纖溶酶原激白、受體、疫苗和單抗等蛋白質(zhì)和核酸藥物。生物技術(shù)藥物與化學(xué)藥物的主要區(qū)別包括原料來源不同、技術(shù)不同。23、根據(jù)真核基因在原核細(xì)胞中表達(dá)的特點(diǎn)，表達(dá)載體必須具備那些條件？參考答案：（1）能夠獨(dú)立的復(fù)制；（2）具有靈活的克隆位點(diǎn)和方便的篩選標(biāo)記，以利于外源基因的克隆、鑒定和篩選;（3）應(yīng)具有很強(qiáng)的啟動(dòng)子，能為大腸桿菌的RAN聚合酶所識(shí)別；（4）應(yīng)具有阻遏子（5）應(yīng)具有很強(qiáng)的終止子（6）所產(chǎn)生的mRNA必須具有翻譯的起始信號(hào)。24、簡(jiǎn)述發(fā)酵工程制藥的基本過程參考答案：答案：1.菌種的選育2,培養(yǎng)基的配置3滅菌4.擴(kuò)大培養(yǎng)和接種5.發(fā)酵過程6.分離提純

抗體的發(fā)展階段大致可分為什么？25、簡(jiǎn)述基因工程的基本含義參考答案：又稱基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)，是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生26、基因工程在抗生素生產(chǎn)中有那些應(yīng)用？參考答案：通過基因工程明確抗生素合成基因的典型特點(diǎn)和克隆的方法，解析合成基因的結(jié)構(gòu)，深入了解微生物的生長為人類的健康提供更多更有效的產(chǎn)品，主要體現(xiàn)在以下幾方面：（1）提高抗生素的產(chǎn)量（2）改善抗生素的組分（3）改進(jìn)抗生素的生產(chǎn)工藝；（4）產(chǎn)生雜合抗生素，提供新的藥物來源（5），用組合生物合成方法合成復(fù)雜化合物27、 單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)與缺點(diǎn)分析參考答案：27、 單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)與缺點(diǎn)分析參考答案：優(yōu)點(diǎn)：①M(fèi)cAb為高純度單一抗體，在氨基酸序列以及特異性方面均為一致，檢測(cè)靈敏度極高；②可以通過，瘤細(xì)胞可以用液氮深凍法進(jìn)行長期保存；④可在分子水平上解析存在于病毒表面的抗原或受體；⑤可以用彳缺點(diǎn)：①M(fèi)cAb特異性太強(qiáng)，有時(shí)不能檢出微生物突變株；②有時(shí)不能產(chǎn)生與抗原交聯(lián)的功能；③易受pl半衰期短；④McAb制備程序復(fù)雜、工作量大。因此，可以采用常規(guī)抗體解決的問題就無須制備McAb。28、簡(jiǎn)述生物技術(shù)在制藥領(lǐng)域的應(yīng)用。參考答案：利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)多肽/蛋白質(zhì)類藥物或疫苗；利用蛋白質(zhì)工程制造新型活性多肽/蛋白類藥物；利用細(xì)技術(shù)獲得活性藥物分子或藥物中間體；利用發(fā)酵工程提高生產(chǎn)工藝水平；現(xiàn)代生物技術(shù)在新藥研發(fā)中的作用蛋白質(zhì)含量測(cè)定的方法有哪些？參考答案：蛋白含量主要用于原液比活性計(jì)算和成品規(guī)格控制，測(cè)定方法主要有Folin-酚試劑法（Lowry法）、染色法HPLC法、熒光法和凱氏定氮法等，其中Lowry法和Bradford法是質(zhì)量檢定中常用方法30、簡(jiǎn)述基因工程在傳統(tǒng)制藥行業(yè)中的可能應(yīng)用。參考答案：基因重組提高產(chǎn)量改善組分改進(jìn)生產(chǎn)工藝產(chǎn)生新的品種31、質(zhì)粒參考答案:質(zhì)粒（plasmid）是染色體外能獨(dú)立自主復(fù)制并遺傳的環(huán)狀雙鏈DNA分子。單克隆抗體：由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對(duì)某一特定抗原表位的抗體，稱為單克隆抗體。32、PCR參考答案：在四種脫氧核甘三磷酸（dNTP）存在下，以寡聚核甘酸為引物及單鏈DNA為模板，經(jīng)DNA聚合酶催化合成DNA上互補(bǔ)鏈的過程稱為黑技術(shù)。GLP參考答案：GLP（Goodlaboratorypracticeofdrug）藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范。指對(duì)從事實(shí)驗(yàn)研究的規(guī)劃設(shè)計(jì)、執(zhí)行實(shí)施、管理監(jiān)］件提出的法規(guī)性文件。34、列舉出3種以大腸桿菌表達(dá)的生物技術(shù)藥物，并分析該類藥物的特點(diǎn)。參考答案：重組人胰島素rhinsulinhumulin2重組人甲狀旁腺激素rhPTHForteo3重組人粒細(xì)胞集落刺激因子rhG-CSFNeupogen特點(diǎn)：.遺傳背景清楚，轉(zhuǎn)化效率高，研究費(fèi)用少.生長快，可以短時(shí)間獲得目的蛋白.目的基因表達(dá)水平高4,不能進(jìn)行糖基化修飾35、抗體藥物參考答案：用于治療的單克隆抗體、抗體片段、基因工程改造的抗體、免疫偶聯(lián)物以及融合蛋白均可統(tǒng)稱為抗體藥物（antibody-baseddrugs）。36、簡(jiǎn)述生物藥物的分類參考答案：1）按藥物的結(jié)構(gòu)分類：氨基酸及其衍生物類藥物；多肽和蛋白質(zhì)類藥物；酶和輔酶類藥物；核酸及其降解，細(xì)胞生長因子；生物制品類；2）按來源分類；人體組織來源；動(dòng)物組織來源；植物組織來源；微生物來源；海洋生物來源；3）按生理功能和用途分類：治療藥物；預(yù)防藥物；診斷藥物；其它（生化試劑、保健品、化妝品、食品、查閱并分析你所知道的至少四種生物技術(shù)藥物（至少含重組蛋白藥物、抗體藥物、疫苗各一種等）的藥學(xué)知上市公司概況、應(yīng)用分析等）。參考答案：查閱藥品批準(zhǔn)信息或者網(wǎng)站信息，分析每一種藥物相關(guān)資料得5分（名稱、、適應(yīng)癥、作用機(jī)理、上市公司系統(tǒng)分析你掌握的幾種重組陽性克隆子的篩選和鑒定方法參考答案：（1）根據(jù)重組子遺傳重組表型改變的篩選法1）利用抗生素抗性基因進(jìn)行篩選2）通過a互補(bǔ)使菌產(chǎn)生顏色來篩選3）利用報(bào)告基因篩選克隆子（2）根據(jù)重組子結(jié)構(gòu)特征的篩選法1）瓊脂糖凝膠電泳比較重組DNA的大小2）限制性內(nèi)切酶分析3）印跡雜交方法PCR法（3）根據(jù)目的基因表達(dá)產(chǎn)物采用免疫化學(xué)方法篩選。蛋白質(zhì)含量測(cè)定的方法有哪些？參考答案：蛋白含量主要用于原液比活性計(jì)算和成品規(guī)格控制，測(cè)定方法主要有Folin-酚試劑法（Lowry法）、染色法HPLC法、熒光法和凱氏定氮法等，其中Lowry法和Bradford法是質(zhì)量檢定中常用方法.生物技術(shù)藥物與化學(xué)藥物的主要區(qū)別是什么？參考答案：答案：原料來源不同；技術(shù)方法不同；活性檢測(cè)不同；質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)不同。生物技術(shù)藥物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究的主要內(nèi)容是什么？參考答案：答案：研究生物技術(shù)藥物產(chǎn)品的均一性；研究建立生物技術(shù)藥物產(chǎn)品生物學(xué)活性或者免疫學(xué)活性測(cè)定方法;品或參考品;建立生物技術(shù)藥物目標(biāo)產(chǎn)品生產(chǎn)相關(guān)雜質(zhì)限量分析方法和標(biāo)準(zhǔn);在以上研究的基礎(chǔ)上制定出保證標(biāo)準(zhǔn)相一致的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)和藥物分析方法。如何進(jìn)行發(fā)酵工藝的控制？參考答案：答案：包括培養(yǎng)基，溶氧，pH和溫度等多參數(shù)的控制。單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)與缺點(diǎn)分析參考答案：優(yōu)點(diǎn)：①M(fèi)cAb為高純度單一抗體，在氨基酸序列以及特異性方面均為一致，檢測(cè)靈敏度極高；②可以通手交瘤細(xì)胞可以用液氮深凍法進(jìn)行長期保存；④可在分子水平上解析存在于病毒表面的抗原或受體；⑤可以缺點(diǎn)：①M(fèi)cAb特異性太強(qiáng)，有時(shí)不能檢出微生物突變株；②有時(shí)不能產(chǎn)生與抗原交聯(lián)的功能；③易受pl半衰期短；④McAb制備程序復(fù)雜、工作量大。因此，可以采用常規(guī)抗體解決的問題就無須制備McAb。舉出三種當(dāng)前流行的單克隆抗體藥物名稱和適應(yīng)癥參考答案：阿達(dá)木單抗：商品名修美樂（Humira），是抗人腫瘤壞死因不TNF）的人源化單克隆抗體，是人單克隆D2E7CambridgeAntibodyTechnology（CAT）與美國雅培公司聯(lián)合研制，2003年1月首次在美國上市，隨后相繼在德國風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和強(qiáng)直性脊柱炎。利妥昔單抗：利妥昔單抗（rituximab,RTX,商品名美羅華）是1997年被批準(zhǔn)用于治療腫瘤的抗CD20人鼠嵌I中已顯示出優(yōu)越的療效和良好的治療耐受性。隨著對(duì)B細(xì)胞及其作用機(jī)制認(rèn)識(shí)的深入，利妥昔單抗的治療范【關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、特發(fā)性血小板減少性紫瘢等自身免疫性疾病。曲妥珠單抗：曲妥珠單抗（Herceptin/赫賽汀）是一種人源化針對(duì)HER-2受體的單克隆抗體，2002年美國拮抗腫瘤細(xì)胞生長信號(hào)傳導(dǎo)從而抑制腫瘤生長、影響細(xì)胞周期、下調(diào)腫瘤細(xì)胞表面HER-2蛋白表達(dá)及減少V表達(dá)的乳腺癌。目的基因的制備方法有哪些？參考答案：答案：從基因組中直接分離；通過RNA合成DNA；基因的化學(xué)合成；聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）釣取。46、查閱資料綜述生物藥物阿單木單抗（修美樂）能成為連續(xù)多年世界銷售額排名第一的藥物特征和市場(chǎng)應(yīng)用，并提出開發(fā)抗體類藥物的觀點(diǎn)。參考答案：簡(jiǎn)要描述阿單木單抗的名稱、藥物性質(zhì)、適應(yīng)癥。羅列該藥物在最近五年的市場(chǎng)應(yīng)用分析。對(duì)開發(fā)的抗體類藥物的啟示和前景分析。47、簡(jiǎn)述或者圖示基因工程制藥的基本流程參考答案：基因工程藥物的生產(chǎn)涉及DNA重組技術(shù)的產(chǎn)業(yè)化設(shè)計(jì)與應(yīng)用，包括上游技術(shù)和下游技術(shù)兩大部分。上游技術(shù)與構(gòu)建(狹義基因工程)；下游技術(shù)則包括含有重組外源基因的生物細(xì)胞(基因工程菌或細(xì)胞)的大規(guī)模培品質(zhì)量控制等過程。廣義的基因工程是一個(gè)高度統(tǒng)一的整體，上游DNA重組的設(shè)計(jì)必須以簡(jiǎn)化下游操作工藝工程藍(lán)圖的體現(xiàn)和保證，這是基因工程產(chǎn)業(yè)化的基本原則。簡(jiǎn)述生物技術(shù)在制藥領(lǐng)域的應(yīng)用參考答案：利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)多肽/蛋白質(zhì)類藥物或疫苗；利用蛋白質(zhì)工程制造新型活性多肽/蛋白類藥物；利用細(xì)術(shù)獲得活性藥物分子或藥物中間體；利用發(fā)酵工程提高生產(chǎn)工藝水平；現(xiàn)代生物技術(shù)在新藥研發(fā)中的作用.簡(jiǎn)述發(fā)酵工程制藥的基本過程參考答案：.菌種的選育2.培養(yǎng)基的配置3滅菌4.擴(kuò)大培養(yǎng)和接種5.發(fā)酵過程6.分離提純。50、如何進(jìn)行發(fā)酵工藝的控制？參考答案：包括培養(yǎng)基，溶氧，pH和溫度幾個(gè)方面進(jìn)行控制。51、GMP參考答案：藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范，其英文名稱為goodmanufacturingpracticesfordrugs,簡(jiǎn)稱GMP，于1962年首先由美國食品藥品管理52、比較轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)染三種不同方式基因?qū)胨拗鞯姆椒ǎ繀⒖即鸢福恨D(zhuǎn)化作用(transformation)：將攜帶某種遺傳信息的DNA引入宿主細(xì)胞，通過DNA之間同源重組作用，；化作用。轉(zhuǎn)化是生物界客觀存在的自然現(xiàn)象。轉(zhuǎn)導(dǎo)作用(transduction)：自然界中，通過噬菌體或病毒的一個(gè)細(xì)胞的過程稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)(transduction)。即通過噬菌體(病毒)顆粒感染，把DNA導(dǎo)入被感染的宿主細(xì)轉(zhuǎn)染作用是將外源DNA分子導(dǎo)入真核細(xì)胞的過程，原核生物中轉(zhuǎn)化的同義詞。53、發(fā)酵工程參考答案：發(fā)酵工程(fermentationengineering)又稱為微生物工程，是利用微生物制造工業(yè)原料與工業(yè)產(chǎn)品并提供服務(wù)的技術(shù)，是生物54、生物技術(shù)藥物參考答案：生物技術(shù)藥物(biopharmaceutics)是利用生物體、生物組織、細(xì)胞或其成分，綜合應(yīng)用生物學(xué)、生物化學(xué)與分子生物學(xué)、微生物學(xué)與造而成的一大類用于預(yù)防、診斷、治療和康復(fù)保健的制品。55、基因工程參考答案：又稱基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)，是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因(I分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品。分子，56、簡(jiǎn)述培養(yǎng)基的基本含義參考答案：培養(yǎng)基（Medium）是供微生物、植物組織和動(dòng)物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有碳水化合以及維生素和水等。57、比較蛋白和多肽藥物的差異，并分別列舉