黃酮2溶劑提取法課件

三黃酮的提取與分離黃酮的提取與分離提取

分離pH梯度萃取法溶劑萃取法柱色譜法HPLC色譜法溶劑提取法檢識理化檢識色譜檢識知識鏈接與拓展溶劑提取法基本原理

操作形式影響因素浸漬法煎煮法滲漉法回流法連續(xù)回流法基本原理

根據(jù)中藥化學(xué)成分與溶劑間“極性相似相溶”的原理，依據(jù)各類成分溶解度的差異，選擇對所提成分溶解度大、對雜質(zhì)溶解度小的溶劑，依據(jù)“濃度差”原理，將所提成分從藥材中溶解出來的方法。影響因素---溶劑、方法、粉碎度、溫度、時(shí)間等1藥材粉碎度：藥粉越細(xì)、表面積越大，提取效率越高。但太細(xì)，藥粉對成分的吸附也越強(qiáng)。因此水提取宜用粗粉；用有機(jī)溶劑可細(xì)些,以20目為好。2提取溫度：一般熱提效率高，但要考慮有些成分溫度高易破壞，應(yīng)選擇適宜溫度。3提取時(shí)間：一般提取時(shí)間長提出量大。但被提成分在細(xì)胞內(nèi)外溶解一旦平衡，時(shí)間長即無意義。一般熱水提以1/2hr為宜，乙醇提1hr為宜。4提取溶劑的選擇:遵循“相似者相溶”規(guī)律，選擇對有效成分溶解度大，對無效成分溶解度小的溶劑做為提取溶劑;溶劑沸點(diǎn)要適中、低毒安全、環(huán)保。5提取方法的選擇:見后面常見基團(tuán)極性大小順序如下：酸＞酚＞醇＞胺＞醛＞酮＞酯＞醚＞烯＞烷。舉例：判斷下列各組化合物極性大小。

ABC常見中藥化學(xué)成分類型的極性：

極性較大的：苷類、生物堿鹽、糖類、蛋白質(zhì)、氨基酸、鞣質(zhì)、小分子有機(jī)酸、親水性色素。

極性小的：游離生物堿、苷元、揮發(fā)油、樹脂、脂肪、大分子有機(jī)酸、親脂性色素。

溶劑的選擇1、溶劑的分類水：極性大，滲透力強(qiáng)，介電常數(shù)大；親水性溶劑：極性較大，介電常數(shù)較大，常用的有甲醇、乙醇、丙酮；與水任何比例互溶；親脂性溶劑：極性較小，介電常數(shù)小，常用的有乙酸乙酯、氯仿、乙醚、苯、石油醚。不溶或微溶于水。問題：1、比水重的有？2、不溶于水的有？3、不溶于水極性最大的是？4、與水互溶的有？5、極性最大的有機(jī)溶劑是？6、極性最小的有機(jī)溶劑是？7、溶解范圍最廣的是？8、是混合物的有？9、不同濃度乙醇極性大小比較？（1）水：最常用?？扇芙廛疹?、生物堿鹽、糖類、蛋白質(zhì)、氨基酸、鞣質(zhì)、小分子有機(jī)酸、有機(jī)酸鹽、親水性色素、無機(jī)鹽。其中蛋白質(zhì)不溶于熱水。缺點(diǎn)：用水提取易酶解苷類成分，且易霉壞變質(zhì)。某些含果膠、粘液質(zhì)類成分的中草藥，其水提取液常常很難過濾。沸水提取時(shí)，中草藥中的淀粉可被糊化，而增加過濾的困難。故含淀粉量多的中草藥，不宜磨成細(xì)粉后加水煎煮。（2）親水性的有機(jī)溶劑：以乙醇最常用。乙醇的溶解性能比較好。親水性的成分除蛋白質(zhì)、粘液質(zhì)、果膠、淀粉和部分多糖等外，大多能在乙醇中溶解。優(yōu)點(diǎn)：應(yīng)用范圍廣，易過濾，不霉變，易濃縮回收。缺點(diǎn)：價(jià)高、不安全，需回流設(shè)備。（3）親脂性的有機(jī)溶劑：這些溶劑的選擇性能強(qiáng)，用于親脂性成分的提取，如游離生物堿、苷元、揮發(fā)油等。

優(yōu)點(diǎn)：提取專屬性強(qiáng)，易回收濃縮。缺點(diǎn)：價(jià)高、易燃、有毒，穿透性差；對設(shè)備要求高。

提取溶劑的選擇原則：（1）要對所提取成分溶解度大；對雜質(zhì)溶解度小。（2）要與所提取成分不起意外的化學(xué)變化。（3）要廉價(jià)、易得、安全。溶劑提取過程提取過程：指溶劑進(jìn)入藥材組織，溶解其中的化學(xué)成分，并將其提出的過程。通過擴(kuò)散、滲透、細(xì)胞內(nèi)外的濃度差，使細(xì)胞內(nèi)的濃溶液不斷向外擴(kuò)散，細(xì)胞外的溶劑不斷滲透進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，如此反復(fù)。1.浸漬法：常用溶劑：水、乙醇儀器裝置：有蓋的容器操作過程：將藥材粗粉置容器中加入適量的溶劑常溫或加熱（40~80℃）浸泡（浸泡時(shí)應(yīng)將容器蓋嚴(yán)，并經(jīng)常攪拌振搖），一般浸泡3—5日或按規(guī)定時(shí)間傾取上清液過濾得提取液。（藥材可重復(fù)浸泡2-3次）。藥材粗粉置于有蓋的容器中，加入適量溶劑（水或有機(jī)溶劑）每次浸泡一日以上，提取2-3次使有效成分大部分浸出傾取上清液，過濾藥液提取范圍：適宜含淀粉、樹膠等成分較多的藥材以及含揮發(fā)性成分，或遇熱不穩(wěn)定易分解或被破壞成分的提取。提取優(yōu)缺點(diǎn)：操作簡便。缺點(diǎn)：提取時(shí)間長、溶劑用量大，提取效率不高，水為溶劑易發(fā)霉、變質(zhì)，必要時(shí)加適量防腐劑。

藥材粗粉加入適量溶劑，裝入滲漉筒內(nèi)在滲漉筒上端不斷添加溶劑，在滲漉筒的上端不斷添加溶劑，使其滲過藥粉，溶出可溶性成分提取液

滲漉法（1）溶劑：水、乙醇（2）儀器裝置及操作：滲漉裝置（3）適于：成分易揮發(fā)或受熱不穩(wěn)定藥材。不適于：無組織結(jié)構(gòu)的藥材：乳香、沒藥、兒茶等。（4）特點(diǎn)：溶劑用量大，提取時(shí)間長，但提取效率較浸漬法高。裝筒時(shí)注意：①先用脫脂棉墊底部防藥粉泄漏②分次裝筒，層層壓平，約2/3容積③上部覆蓋濾紙或紗布加重物壓住防藥粉浮沖④開活塞加溶劑至流出，排除筒內(nèi)空氣再關(guān)活塞，加溶劑至高出藥粉數(shù)cm操作：藥材粉碎→潤濕→裝筒→排氣→浸漬→滲漉。3.煎煮法常用溶劑：水儀器裝置：砂鍋、鋁鍋等。操作范圍：對含揮發(fā)性即遇熱不穩(wěn)定的成分的藥材不宜用此法。提取優(yōu)缺點(diǎn)：本法簡便易行，提取效率比冷浸法高，但水溶性雜質(zhì)多，易發(fā)霉。步驟：將中藥飲片或粗粉置適當(dāng)容器中，加水浸過藥面，直火加熱2~3次，每次煎煮的時(shí)間可根據(jù)藥材量而定。注意：煎煮中要不斷攪拌。少量藥材可用砂鍋、搪瓷器具，忌用鐵鍋或鐵器。4.回流提取法常用溶劑：有機(jī)溶劑。儀器裝置：回流加熱裝置。提取范圍：不適用于對熱不穩(wěn)定及易分解的成分。提取優(yōu)缺點(diǎn)：提取效率比冷浸法高。但裝置較復(fù)雜。操作過程：將藥材粗粉裝于園底燒瓶中加入適量溶劑水浴中加熱回流提取1h過濾（殘?jiān)貜?fù)提取兩次，合并提取液）提取液。

回流提取裝置圖常用溶劑：有機(jī)溶劑。儀器裝置：連續(xù)回流提取裝置提取范圍：不適于對熱不穩(wěn)定成分的提取。提取優(yōu)缺點(diǎn)：溶劑用量少，提取效率高。但裝置設(shè)備要求高。5.連續(xù)回流提取法操作過程：將藥材置于鋁紙袋中，放入提取器內(nèi)連接裝置水浴加熱回流提取適當(dāng)時(shí)間提取液。提取器冷凝管虹吸管冷凝管提取器燒瓶電熱套操作形式方法常用溶劑優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)浸漬法水和醇室溫提取不易破壞成分，設(shè)備簡單，適合提取含淀粉或黏液質(zhì)多的藥材?？膳浜铣暡ㄌ幚硖岣咛崛⌒?。時(shí)間長次多，提取效率低。提取液易發(fā)霉?jié)B漉法水和醇室溫提取不易破壞成分，設(shè)備簡單，保持較高濃度差提取效率高。溶劑用量較多煎煮法水設(shè)備簡單，提取較全面加熱提取易破壞成分，揮發(fā)性成分易損失，不適合提取含淀粉或黏液質(zhì)多的藥材回流法有機(jī)溶劑加熱提取效率較高易破壞熱敏性成分，操作較繁連續(xù)回流法有機(jī)溶劑保持較高濃度差提取效率高，操作簡便，溶劑用量少提取液受熱時(shí)間長，成分易破壞黃酮類成分提取方法—溶劑法

溶劑法關(guān)鍵溶劑的選擇選擇依據(jù)黃酮類成分的存在狀態(tài)（游離、苷）及溶解性

溶劑的溶解性能

提取方法（煎煮法、滲漉法、回流法等）的選擇

溶劑提取原理游離黃酮黃酮苷備注

乙醇溶解范圍廣++（甲醇）苷、苷元均可溶（90~95%）(60%）甲醇毒性大沸水多糖苷易于水+成本低、安全,水溶性雜質(zhì)多

堿性水或稀氫氧化鈉溶出能力強(qiáng)

堿性乙醇酚羥基的酸性 ++石灰水除雜質(zhì)效果好堿溶酸沉法注意：（1）堿性不宜過強(qiáng)，尤其在加熱時(shí)易破壞黃酮。（2）酸沉淀時(shí)，酸性不宜過強(qiáng)，否則，黃酮形成烊鹽而損失。（3）用Ca(OH)2,可沉淀雜質(zhì)，有利于純化。

稀NaOH：浸