鉤端螺旋體病1課件

第四節(jié)鉤端螺旋體病簡稱鉤體病，是由致病性鉤體引起的一種重要人畜共患病和自然疫源性傳染病。家畜中主要發(fā)生于豬，其次是牛、犬、馬、羊，臨診表現(xiàn)多樣，主要有發(fā)熱、黃疸、血紅蛋白尿、出血性素質，流產、皮膚及粘膜壞死，水腫等。但大多數(shù)病畜都呈隱性感染，缺乏明顯臨床癥狀第一章多種動物共患細菌病

一、病原鉤端螺旋體病

1、分類：鉤體目前公認的只有一個種，再根據(jù)物生物學特點不同，可分為兩大群：（1）雙曲鉤體，為非致病性或腐生性鉤體。（2）問號狀鉤體，為致病性鉤體；

2、形態(tài)特點：鉤體形態(tài)纖細，螺旋整齊而致密，一端或兩端彎曲如鉤，不易為普通細菌染色劑著色，常用鍍銀染色和姬姆薩染色法，最容易觀察的方法是將活菌置暗視野顯微鏡下觀察，可見鉤體象一串發(fā)亮的微細珠粒，運動活潑而特殊，沿長軸方向旋轉，旋轉時兩端柔軟，中段僵硬，由此可確認。菌形態(tài)

4．培養(yǎng)：對營養(yǎng)要求不嚴格，但初次分離的菌株需用要含兔血清的培養(yǎng)基，最常用的為柯索夫氏和希夫納氏培養(yǎng)基。在人工培養(yǎng)基上生長較一般細菌為慢，如在上述培養(yǎng)基上，置28-30℃需5-7天，最長在一月以上才能生長良好，此時液體呈半透明、云霧狀混濁，（1%）瓊脂固體培養(yǎng)基上，有些菌株生長不好。鉤端螺旋體培養(yǎng)基一柯少夫（Korthof）培養(yǎng)基[配法]蛋白胨400mg，氯化鈉700mg，碳酸氫鈉10mg，氯化鉀20mg，氯化鈣20mg，磷酸二氫鉀120mg，磷酸氫二鈉44Omg，蒸餾水500ml，無菌兔血清（滅活）8-10ml。將各成分溶于蒸餾水內煮沸20min，以濾紙濾，調至pH為7.2，分裝燒瓶內每瓶100ml，121℃滅菌20min;無菌采取兔心血分離血清，置56℃水浴箱中30min以破壞補體；上述蛋白胨鹽溶液每100ml中加入無菌兔血清8-10ml；混合后，用無菌分裝中號試管中，每管5ml；置56℃水浴箱30min;37℃溫箱中孵育2天，剔去污染者。4．實驗動物：以50-60g金地鼠和100-200g豚鼠最敏感。5．抵抗力：對理化（如日光、高溫、干燥，酸堿、一般消毒劑、抗生素）很敏感，但對低溫抵抗力較強，如可在-20℃可存活100天，但在中性到偏弱堿性（pH7.0-7.6）較適宜，可在pH7.2-7.4水中生存1-2月，弱堿性濕土中生存達279天，這在流行病學上有一定意義。二、流行病學

幾乎所有溫血動物都可感染鉤體。流行病學上意義最大的是鼠、豬、犬、蛙；動物種類帶菌率帶菌時間黑線鼠14.6-28.0%

黃胸鼠2.4-4.8%

1-2年，甚至終身黃毛鼠8.1-34.6%豬（但放養(yǎng)豬）5-7%（45.9%）371天

犬高700天

蛙46天不詳主要以消化道、還可通過交配、損傷皮膚粘膜、乳汁、精液、尿分別傳給仔豬、母豬，也可以吸血昆蟲傳播，有明顯季節(jié)性（7-10月為高峰）。圖2下頷水腫圖3病豬全身黃膽和水腫圖4眼炎

馬：體溫升高，出血，黃疸。皮膚干裂、壞死，血紅蛋白尿，妊娠馬流產；也有報道腦膜腦炎型；周期性眼炎：多半兩眼同時受害，病馬常失明。

犬：以犬型最多見，發(fā)熱、黃疸，厭食嘔吐，腹瀉，齒齦口粘膜常見到小潰瘍、扁桃體炎，呼出惡臭氣體，許多犬表現(xiàn)腹壁緊張，同時腎區(qū)有壓痛。五、病變急性病例，主要為黃疸、出血，血紅蛋白尿、肝腎損害，慢性或輕型病例，則以腎的變化為突出。皮膚、皮下、粘膜、漿膜，臟器表面有出血、黃疸，胸腔有黃色積液，膀胱積有血紅蛋白尿或濃茶樣尿，肝腫大，棕黃色，腎腫大淤血，慢性者有散在灰白色病灶，有的皮膚壞死，有的還在身體各部，（頭、頸、背、胃壁）等處出現(xiàn)水腫。六、診斷

1．微生物學檢查：發(fā)熱期、未出現(xiàn)黃疸前，采取血液，發(fā)病中后期用尿液（脊髓液不常用），要求在發(fā)病后6-10天，死后立即采?。ú怀^1-3小時，）肝、腎、脾、腦等組織，進行處理后，作暗視野檢查或熒光抗體染色鏡檢，病理組織可用姬姆薩染色或鍍銀染色后檢查。3．動物接種：采用幼齡豚鼠或地鼠，腹腔接種被檢材料2-3ml，隔離飼養(yǎng)觀察，污水和尿可用浸泡感染法，動物感染后3-14日發(fā)病，應于發(fā)熱時采取心血檢查，或瀕死前剖檢，觀察病變并取腎、肝組織盲傳三代。

4．血清學診斷：①凝溶試驗：本試驗適于鉤體病診斷和菌型鑒定。一般先定性（初篩），將血清作低倍稀釋，查明被檢血清是否有鉤體抗體及群別，后定量，即將血清作進一步稀釋，測定凝溶效價及型別，作出診斷。②補反：血清效價在1：20以上有診斷價值，本試驗所用抗原具有屬特異性，陽性結果只能證明是鉤體感染，不能定型，故常用于流行病學調查（感染3天即出現(xiàn)，4周達高峰，持續(xù)一年）。

鉤端螺旋體的顯微鏡凝集（顯凝）實驗【原理】

鉤端螺旋體顯凝實驗是一種血清學反應，可用已知的抗原（標準菌株）來測定患者血清中的未知抗體及其效價來進行輔助診斷；也可用已知的抗體（標準免疫血清）來鑒定未知菌株的型別作血清學鑒定。鉤體運動活潑，在暗視野顯微鏡下，明顯可見，若遇到相應抗體時可發(fā)生凝集。如血清中的補體未滅活，時間過久出現(xiàn)凝集的鉤體發(fā)生溶解，則為鉤體的凝（集）溶（解）實驗。

【方法】

1、用0.95氯化鈉溶液將鉤端螺旋體免疫血清自1:50開始，做50倍系列稀釋，直到1:1600。

2、取各稀釋度免疫血清0.1ml分別加入塑料凹孔板中，最后1孔加0.1ml0.9%氯化鈉溶液作對照。

3、每孔加0.1ml鉤端螺旋體純培養(yǎng)物，搖勻，置28—30℃溫箱。

4、2小時后用接種環(huán)

自各孔中取1—2環(huán)于載玻片上，置暗視野顯微鏡下觀察。

【結果】

先觀察陰性對照孔，該孔如出現(xiàn)凝集則實驗失敗。該孔無凝集時方能觀察實驗孔，根據(jù)凝集程度以“+”記錄結果，結果判定參照如下標準進行。

-：完全無凝集，與對照管相同。

+：25%

以上鉤端螺旋體凝集呈小蜘蛛狀，大多數(shù)游離且運動活潑。

+

+：50%以上鉤端螺旋體凝集呈蜘蛛狀，約有半數(shù)未凝集。

+

+

+：75%以上鉤端螺旋體凝集呈蜘蛛狀，其間有少數(shù)游離。

+

+

+

+：幾乎全部鉤端螺旋體凝集呈巨大蜘蛛狀，偶見極少數(shù)游離鉤端螺旋體存在。

效價判定：出現(xiàn)“+

+”的血清最高稀釋度（終末稀釋度———加入等量抗原后的稀釋度）為該血清的凝集效價。測定患者血清時，單份血清效價1：300以上有診斷意義，雙份血清呈4倍以上升高時，更有診斷價值。

七、防制

1.做好防鼠、滅鼠和家畜管理工作，消除帶菌、排菌的各種動物；清理污染的水源，污水、淤泥、牧地，飼養(yǎng)場、舍，用具，以防擴散傳染。2.選用與當?shù)亓餍芯鸵恢碌木?/p>