cesi8000plus在生物藥領域的論證報告

前言及部門迫睫的關點。I0Plus是一款具細管電‐譜聯(lián)功S水CESI8000對單抗藥的多層次表征（肽段水平、二硫鍵水平、完整蛋白水平CESI-MS技術的原理和優(yōu)CESI-MS質譜是生物樣品表征不可或缺的。如何提升質譜的靈敏度，降低離子抑制效應一直是人們關注的重點。Biex公司推出了全新的質譜前分離和離子化系統(tǒng)CESI8000lus，將毛細管電泳（E）的高效分離和超低流速的特性與電噴霧離子源（SI）完美結合，從而顯著提升靈敏度，降低離子抑制效應，我們稱這一無鞘液的、靈敏度的CE和MS聯(lián)用技術為CEI-MS技術。CESI-MS提供了更高的靈敏度。對于ESI-MS來說，流速越低，離子化效率越高，也越容易得到高的質譜靈敏度。研究結果顯示：流速越低，質譜上的響應值越高，在CESI-MS（nL/min流速）上能夠得到比傳統(tǒng)LC-MS（mL～μL/min流速）更高的靈敏度結果。CESI-MS降低了離子抑制效應。流速越低，ESI的離子抑制效應越小，同時進樣的不OptiMSOptiMSCESI8000Plus高效毛細管電泳分離和電噴霧離子化系統(tǒng)采用OptiMS技術。將分離離得到的分析物可以直接進入ESI離子化源，沒有鞘液的稀釋和干擾作用，能夠保證分析方法（LC-MS）正交的分析結果。CESI8000PlusOptiMS卡盒由分離毛細管，導電液輸送毛細管，冷卻液循環(huán)套管，電噴霧噴針保護裝置等幾部分組成。OptiMS卡盒帶有保護裝置，可以在、存OptiMSCESI8000TripleTOFCESI8000PlusMS聯(lián)用對蛋白藥的多水平表肽段水平的表征：對蛋白藥進行的單次酶解和單次分析，即可實現(xiàn)對汀進行單次胰蛋白酶酶解，會得到63個氨基酸序列的長肽段以及3個氨基酸段均得以分析鑒定，進而獲得100%覆蓋率的重鏈和輕鏈肽譜序列（下圖）。肽段的遷移RSD0.83%。建立生物藥的單一酶解方案，將簡化樣品前處理，節(jié)約成本和時間，化、天冬酰胺去酰胺化以及C

CESI‐MS分離鑒定出的Asn300結構特點。這些糖基雖然只占蛋白本身質量的2‐3%，但卻對單抗藥的藥效、穩(wěn)定性和免疫原性起著重要的影響。毛細管電泳技術是糖基分析的最佳技術，依靠“電荷/質量”的分離機制為不同糖型提供了新一維度的分離。下表中顯示了單次酶解后的SMS分析中同時分離鑒定出的14種豐度范圍分布0%‐9范圍的糖肽信息。其中有一半的糖肽處于極低的豐度水平，但均可以對他們進行準確定量。CS‐S技術在分析單抗藥糖肽分布及含量的優(yōu)勢在于：（1）在Lmin的極低流速下，糖肽的離子化效率高于其他的非糖基化肽段，獲得更高的靈敏度；（2）由于電泳的分離，通常在‐S‐S得以分離，可以提供更準確的鑒定信息。利用CESI‐MS即可避免此問題，對蛋白藥的二硫鍵進行分析。生物藥分子具有多種的蛋白異構體:氧化，脫酰胺化，糖基化等等。這些蛋白的異質性影響藥物的安全性和穩(wěn)定性。當前的PTM和糖基的分析方法需要酶解，會損失部分PTM信息，因此對完整蛋白藥分子的分析十分必要。然而高異質性蛋白藥的Top‐down分析方法具有很大的。要求對蛋白的微小結構變化進行高分CESI結合高分辨的質譜可實現(xiàn)對完整蛋白異構體的高效分離，提供全面CESI8000Plus結合光學檢測器對蛋白藥的表CESI8000Plus系統(tǒng)除了可通過靈敏度的接術實現(xiàn)與MS的聯(lián)用，還可切換至蛋白藥物的分子量和純度分采用毛細管電泳技術實現(xiàn)全自動的蛋白質分子量的測定、純度測定和紫外檢測進準備過程與SDS‐PAGE大體相同，而分離和檢測在毛細管電泳中進行。采用了優(yōu)化的膠分析試劑盒（SDS‐MWGel ysisKit),對分離凝膠介質進行了優(yōu)化,并將操作方法和數(shù)據(jù)處理做了標準化,使分子量的測定更加簡單、方便、自動和準確。該試劑盒內包括標準操作SDS‐PAGE方法對蛋白藥物進行純度分析，不僅穩(wěn)定性不佳，而且分辨率不夠，已經(jīng)不能滿足生物制藥研發(fā)和質量控制的要求。IgG純度/異質性分析試劑盒（IgGPurity/HeterogeneityAssayKit）IgG是市場上獨一無二的。例如對于下圖的單克隆抗體藥物的純度測定，SDS‐PAGE并沒有將peak2（非糖基化重鏈）。而毛細管電泳不僅分別率高，而且速度也很快，只需要20幾分鐘即可完成。蛋白質等電點的精確測定和蛋白質異質根據(jù)蛋白質電荷特性的差異可區(qū)分鑒別蛋白因此通過測定蛋白質的等電點,可以部分蛋白質。cIEF0.01pH。而且可以作為代表糖蛋白的有用的圖譜。糖標記和分析試劑盒（Carbohydratelabelingandysiskit可用于寡糖和單糖的分析或糖蛋白中糖基的分析和糖譜的制作，提供快速的糖基釋放、快速分離（15分鐘內