《青蒿素類抗瘧藥》

掌握青蒿素類抗瘧疾藥物的基本結(jié)構(gòu)和主要性質(zhì)

第十二章

第二節(jié)青蒿素類藥物的分析熟悉青蒿素類抗瘧疾藥物的鑒別試驗(yàn)和純度檢查方法了解青蒿素類抗瘧疾藥物的雜質(zhì)檢查方法編輯ppt是繼乙氨嘧啶、氯喹、伯喹之后最有效的抗瘧特效藥，尤其是對(duì)于腦型瘧疾和抗氯喹瘧疾，具有高效、速效和低毒的特點(diǎn)，曾被世界衛(wèi)生組織稱做是“世界上唯一有效的瘧疾治療藥物”。

(3R,5aS,6R,8aS,9R,12S,12aR)-八氫-3,6,9-三甲基-3,12-氧橋-12H-吡喃并[4,3-j]-1,2-苯并二塞平-10(3H)-酮

青蒿素簡(jiǎn)介編輯ppt2011年9月，中國(guó)女藥學(xué)家屠呦呦因創(chuàng)制新型抗瘧藥———青蒿素和雙氫青蒿素的貢獻(xiàn)，獲得被譽(yù)為諾貝爾獎(jiǎng)“風(fēng)向標(biāo)”的拉斯克獎(jiǎng)。這是中國(guó)生物醫(yī)學(xué)界迄今為止獲得的世界級(jí)最高級(jí)大獎(jiǎng)。

編輯ppt基本結(jié)構(gòu)基本性質(zhì)鑒別含量測(cè)定重點(diǎn)內(nèi)容倍半萜過氧橋內(nèi)酯氧化性易水解旋光性無共軛碘化鉀-淀粉羥戊酸鐵反應(yīng)香草醛酸-硫酸水解后UV法HPLC編輯ppt一、青蒿素類藥物的基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)青蒿素將青蒿素結(jié)構(gòu)中C-10位羰基還原成羥基得到雙氫青蒿素(dihydroartemisinin)，進(jìn)一步烷氧基化得到蒿甲醚(artemether)，而進(jìn)行酯化可得到青蒿琥酯(artesunate)。編輯ppt藥物名稱物理性質(zhì)鑒別檢查含量青蒿素Artemisine無色針狀結(jié)晶，味苦。在丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷中易溶，在甲醇、乙醇、稀乙醇、乙醚及石油醚中溶解，在水中幾乎不溶；在冰醋酸中易溶。熔點(diǎn)為150～153℃[]D(無水乙醇)+75o～+78o。1.碘化鉀試液-淀粉2.羥肟酸鐵反應(yīng)3.HPLC4.IR1.有關(guān)物質(zhì)(TLC)2.干燥失重HPLC法雙氫青蒿素Dihydroartemisinin白色針狀結(jié)晶；無臭，味苦。在三氯甲烷中易溶，在丙酮中溶解，在甲醇或乙醇中略溶，在水中幾乎不溶。熔點(diǎn)為145～150℃，熔融時(shí)同時(shí)分解。1.碘化鉀試液-淀粉2.香草醛硫酸反應(yīng)3.旋光4.IR1.有關(guān)物質(zhì)(TLC)2.干燥失重3.水分4.熾灼殘?jiān)?.重金素HPLC法青蒿琥酯Artesunate白色結(jié)晶性粉末；無臭，幾乎無味。在乙醇、丙酮或三氯甲烷中易溶，在水中極微溶解。熔點(diǎn)為131～136℃(口服用)或132～137℃(注射用)[]D(二氯甲烷)+4.5o～+6.5o。1.香草醛硫酸反應(yīng)2.羥肟酸鐵反應(yīng)3.HPLC4.IR1.酸度2.溶液的澄清度3.氯化物4.有關(guān)物質(zhì)(HPLC)5.水分6.熾灼殘?jiān)?.重金素HPLC法蒿甲醚Artemether白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；無臭；味微苦。在丙酮或三氯甲烷中極易溶解，在乙醇或乙酸乙酯中易溶，在水中幾乎不溶。熔點(diǎn)為86～90℃。[]D(無水乙醇)+168o～+173o。1.碘化鉀試液-淀粉2.香草醛硫酸反應(yīng)3.HPLC4.IR1.氯化物2.有關(guān)物質(zhì)(TLC)3.殘留溶劑(GC)4.干燥失重5.熾灼殘?jiān)麳PLC法青蒿素類藥物的物理性質(zhì)、鑒別、檢查及含量測(cè)定

(一)典型藥物的結(jié)構(gòu)與物理性質(zhì)

編輯ppt由于青蒿素類藥物分子結(jié)構(gòu)中母核，不具有共軛體系，其紫外吸收光譜的主要是末端吸收。但C-10由于取代基的不同具有一定吸收特征。

(二)主要化學(xué)性質(zhì)

由于青蒿素類是具有過氧橋的倍半萜內(nèi)酯類化合物，這類化合物具有氧化性。

青蒿素類藥物都均有旋光性，均為右旋體藥物。青蒿素其比旋度為+75°～+78°，蒿甲醚其比旋度為+168°～+173°。

青蒿素結(jié)構(gòu)中由于有內(nèi)酯，在堿性條件下，發(fā)生水解，但其他藥物由于母核中沒有內(nèi)酯，沒法發(fā)生水解。氧化性旋光性水解反應(yīng)UV吸收特性編輯ppt二、鑒別試驗(yàn)(一)、呈色反應(yīng)(二)、吸收光譜特征(三)、色譜法編輯ppt(一)呈色反應(yīng)

ChP2010青蒿素的鑒別：取本品約5mg，加無水乙醇0.5ml溶解后，加碘化鉀試液0.4ml，稀硫酸2.5ml與淀粉指示液4滴，立即呈紫色。ChP2010雙氫青蒿素片的鑒別：取本品的細(xì)粉適量(約相當(dāng)于雙氫青蒿素20mg)，加無水乙醇2ml使雙氫青蒿素溶解，濾過，濾液中加碘化鉀試液2ml與稀硫酸4ml，搖勻，加淀粉指示液數(shù)滴，溶液即顯藍(lán)紫色。由于青蒿素類是具有過氧橋的倍半萜內(nèi)酯類化合物，這類化合物具有氧化性。在酸性條件能將I-氧化成I2與淀粉指示液，生成藍(lán)紫色。

1.碘化鉀試液-淀粉反應(yīng)(過氧橋的氧化反應(yīng))

編輯ppt

含有內(nèi)酯的化合物、羧酸衍生物和一些酯類化合物在堿性條件與羥胺作用，生成羥肟酸；在稀酸中與高鐵離子呈色。ChP2010收載了青蒿素和青蒿琥酯的羥肟酸鐵鑒別反應(yīng)。

2.

羥肟酸鐵反應(yīng)

ChP2010青蒿素的鑒別：取本品約5mg，加無水乙醇0.5ml溶解后，加鹽酸羥胺試液0.5ml與氫氧化鈉試液0.25ml，置水浴中微沸，放冷后，加鹽酸2滴和三氯化鐵試液1滴，立即顯深紫紅色。ChP2010青蒿琥酯的鑒別：取本品約50mg，加含7％鹽酸羥胺的乙醇溶液(80→100)1ml，再加乙醇制氫氧化鉀試液3ml，置水浴中加熱至沸，放冷，加稀鹽酸至呈酸性，再加三氯化鐵試液l滴，即顯紫紅色。編輯ppt香草醛-硫酸溶液又稱硫酸香蘭素顯色劑，很多的物質(zhì)如有機(jī)酸、揮發(fā)油、甾醇、萜類等都可以顯色。

3.香草醛-硫酸反應(yīng)

ChP2010青蒿琥酯的鑒別：取本品約50mg，加三氯甲烷1ml溶解后，取3～4滴置白瓷板上，待三氯甲烷揮發(fā)后，加2％香草醛硫酸溶液1滴，顯紅色。

硫酸香草醛溶液顯色原理:使羧基脫水，增加雙鍵結(jié)構(gòu)，再經(jīng)雙鍵位移，雙分子縮合等反應(yīng)生成共軛雙鍵系統(tǒng)，又在酸作用下形成陽(yáng)碳離子鹽而顯色。是一種通用顯色劑。

編輯ppt(二)、吸收光譜特征青蒿素類抗瘧原料藥在ChP2010中均采用紅外光譜的方法進(jìn)行鑒別。1.紅外吸收光譜特征

ChP2010青蒿琥酯片的鑒別：取本品的細(xì)粉適量(約相當(dāng)于青蒿琥酯0.1g)，加15ml丙酮振搖使溶解，濾過，濾液揮干，殘?jiān)霉枘z為干燥劑減壓干燥。殘?jiān)募t外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與青蒿琥酯的對(duì)照?qǐng)D譜一致。

但是制劑的紅外光吸收?qǐng)D譜鑒別須經(jīng)提取分離，殘?jiān)稍锖?，進(jìn)行紅外光吸收?qǐng)D譜與對(duì)照的圖譜比較。要求所得的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜一致。編輯ppt

由于青蒿素類藥物分子結(jié)構(gòu)中母核，不具有共軛體系，其紫外吸收光譜的主要是末端吸收。但C-10由于取代基的不同具有一定吸收特征。ChP2010均未采用本法鑒別所收載青蒿素類藥物。

2.紫外吸收光譜特征

編輯ppt(三)、色譜法

1.利用比較供試品溶液主峰與對(duì)照品溶液主峰的保留時(shí)間(tR)是否一致或比較供試品溶液所顯主斑點(diǎn)的位置和顏色與對(duì)照品溶液主斑點(diǎn)的位置和顏色是否相同進(jìn)行鑒別。2.HPLC法一般都規(guī)定在含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品溶液主峰的保留時(shí)間一致。3.青蒿素類抗瘧原料藥在ChP2010中均采用HPLC的方法進(jìn)行鑒別。但制劑中也有采用TLC法進(jìn)行鑒別。編輯ppt三、純度檢查

目前青蒿素的制備仍以天然藥材分離提取為主，并用于其衍生藥物的生產(chǎn)，所以藥品中通常都存在結(jié)構(gòu)類似的有關(guān)物質(zhì)，主要通過TLC和HPLC進(jìn)行檢查控制。

ChP2010青蒿素有關(guān)物質(zhì)的TLC檢查：取本品適量，加丙酮溶解制成每1ml中含15mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取供試品溶液0.5ml，置100ml量瓶中，加丙酮稀釋至刻度，作為對(duì)照溶液(1)；精密量取對(duì)照溶液(1)5ml，置10ml量瓶中，加丙酮稀釋至刻度，作為對(duì)照溶液(2)；另取青蒿素對(duì)照品和雙氫青蒿素對(duì)照品，加丙酮溶解并釋稀制成每1ml中含青蒿素10mg和雙氫青蒿素0.1mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液。吸取上述四種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(沸程60～90℃)-丙酮-冰醋酸(8:2:0.1)為展開劑，展開15cm以上，取出，晾干，噴以含2%香草醛的20%硫酸乙醇溶液，在85℃加熱10～20分鐘至斑點(diǎn)清晰，對(duì)照品溶液應(yīng)顯青蒿素與雙氫青蒿素各自的清晰斑點(diǎn)。供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，顏色深于對(duì)照溶液(2)主斑點(diǎn)(0.25%)且不深于對(duì)照溶液(1)主斑點(diǎn)(0.5%)的斑點(diǎn)不得多于1個(gè)，其他雜質(zhì)斑點(diǎn)的顏色均不得深于對(duì)照溶液(2)的主斑點(diǎn)(0.25%)。編輯ppt四、含量測(cè)定

ChP2010雙氫青蒿素片的紫外分光光度法測(cè)定：取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于雙氫青蒿素10mg)，置50ml量瓶中，加乙醇，振搖使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，靜置2小時(shí)，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；另精密稱取雙氫青蒿素對(duì)照品約10mg，置50ml量瓶中，加乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻后，靜置2小時(shí)，作為對(duì)照品溶液。精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各1ml，