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第八章微生物的遺傳和變異微生物的獨(dú)特生物學(xué)特性個(gè)體的體制極其簡(jiǎn)單營(yíng)養(yǎng)體一般都是單倍體繁殖速度快易于積累不同的中間代謝產(chǎn)物或終產(chǎn)物菌落形態(tài)特征的可見性和多樣性環(huán)境條件對(duì)微生物群體中各個(gè)個(gè)體作用的直接性和均一性易于形成營(yíng)養(yǎng)缺陷型各種微生物一般都有相應(yīng)的病毒存在多種處于進(jìn)化過程中的原始有性生殖方式.研究微生物遺傳的意義

微生物是研究現(xiàn)代遺傳學(xué)和其它許多主要的生物學(xué)基本理論問題中最熱衷的研究對(duì)象對(duì)微生物遺傳規(guī)律的深入研究促進(jìn)了現(xiàn)代分子生物學(xué)和生物工程學(xué)的發(fā)展為育種工作提供了豐富的理論基礎(chǔ),促使育種工作從不自覺到自覺、從低效到高效、從隨機(jī)到定向、從近緣雜交到遠(yuǎn)緣雜交的方向發(fā)展第二節(jié)微生物的遺傳物質(zhì)細(xì)胞水平細(xì)胞核水平染色體水平核酸水平基因水平密碼子水平核苷酸水平基因組測(cè)序技術(shù)雙脫氧末端終止法測(cè)序

核外遺傳物質(zhì)原核微生物真核微生物細(xì)胞質(zhì)2μm質(zhì)粒R因子COL質(zhì)粒巨大質(zhì)粒Ti質(zhì)粒降解性質(zhì)粒線粒體葉綠體等F因子把在染色體組中或染色體組間能改變自身位置的一段DNA順序稱作轉(zhuǎn)座因子(transposibleelement),也稱作跳躍基因(jumpinggene)或可移動(dòng)基因(moveablegene)。

轉(zhuǎn)座因子主要有三類,即插入序列(IS,insertionsequence)、轉(zhuǎn)座子(Tn,transposon,又稱轉(zhuǎn)位子,易位子)和Mu噬菌體(即mutatorphage,誘變噬菌體)第三節(jié)細(xì)菌的基因轉(zhuǎn)移和重組大腸桿菌的接合F因子(fertilityfactor)是一種獨(dú)立于染色體的小型環(huán)狀DNA具有自主的與染色體進(jìn)行同步復(fù)制和轉(zhuǎn)移到其它細(xì)胞中去的能力凡有F因子的菌株稱為雄性菌株,其細(xì)胞表面產(chǎn)生1~4條中空而細(xì)長(zhǎng)的絲狀物,稱為性菌毛根據(jù)F因子的有無,將E.coli分為四種F+菌株、F-菌株、Hfr菌株和F’菌株

大腸桿菌的接合F因子與接合菌株F+菌株雄性菌株,細(xì)胞內(nèi)存在游離F因子,細(xì)胞表面有與F因子數(shù)相當(dāng)?shù)男跃哂信c雌性菌株相結(jié)合且使其獲得F因子F-菌株雌性菌株,胞內(nèi)無F因子和胞表面無性菌毛,但可獲得F因子F+菌株和F-菌株結(jié)合過程還可接受來自Hfr菌株的一部分或全部染色體信息

大腸桿菌的接合F因子與接合菌株Hfr菌株雄性高頻重組菌株,胞內(nèi)存在與染色體整合的F因子與雌性菌株接合可產(chǎn)生高頻重組子而得名

Hfr菌株和F-菌株結(jié)合過程F’菌株由不正常切割而形成特殊F因子,即攜帶有小段染色體基因F因子傳導(dǎo):利用F’菌株與F–接合可將供體染色體DNA傳入F–

菌株

轉(zhuǎn)化(transformation)轉(zhuǎn)化發(fā)生的條件轉(zhuǎn)化因子同源性分子質(zhì)量大小適宜受體菌需處于感受態(tài)感受態(tài)出現(xiàn)的因素菌齡感受態(tài)因子出現(xiàn)培養(yǎng)條件

轉(zhuǎn)化(transformation)轉(zhuǎn)化發(fā)生的過程感受態(tài)細(xì)胞的建立吸附切割入胞重組復(fù)制轉(zhuǎn)化子形成DNA的結(jié)合與攝取轉(zhuǎn)化子與染色體重組轉(zhuǎn)導(dǎo)(transduction)轉(zhuǎn)導(dǎo)以缺陷噬菌體為媒介,把供體細(xì)胞的DNA小片段攜帶到受體細(xì)胞中,通過交換與整合,使后者獲得前者部分遺傳形狀的現(xiàn)象稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)轉(zhuǎn)導(dǎo)子(transductant):獲得新遺傳性狀的受體細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體:攜帶供體部分遺傳物質(zhì)的噬菌體轉(zhuǎn)導(dǎo)種類普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)(generalizedtransduction)

完全普遍傳導(dǎo)(completetransduction)進(jìn)入受體菌的供體菌的DNA片段(誤包)與受體菌染色體同源區(qū)段配對(duì),通過雙交換整合在染色體上,隨受體菌的分裂,每個(gè)子細(xì)胞都含有這個(gè)片段特點(diǎn)以其野生型菌株作為供體菌營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株作為受體菌噬菌體作為轉(zhuǎn)導(dǎo)媒介,對(duì)供體菌是烈性噬菌體,對(duì)受體菌是溫和噬菌體普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)(generalizedtransduction)

流產(chǎn)普遍傳導(dǎo)(abortivetransduction)進(jìn)入受菌體的供體菌DNA片段不與受菌體染色體整合,也不能復(fù)制,僅能轉(zhuǎn)錄而得到表達(dá)特點(diǎn)細(xì)胞進(jìn)行分裂時(shí),只能將這段DNA分配給一個(gè)子細(xì)胞,另一子細(xì)胞只獲得供體基因的產(chǎn)物--酶

能在選擇性培養(yǎng)基平板上形成微小菌落

供體菌DNA片段不與受體菌染色體整合不可自我復(fù)制局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)(specializedtransduction

)

定義通過某些部分缺陷的溫和噬菌體(脫落宿主染色體時(shí)錯(cuò)誤切割),將供體菌的少數(shù)特定基因攜帶到受體菌的轉(zhuǎn)導(dǎo)當(dāng)它感染宿主細(xì)胞并整合在宿主的核基因組上時(shí),可使宿主細(xì)胞成為一個(gè)局限轉(zhuǎn)導(dǎo)子(即獲得了供體菌的gal或bio基因),而不是一個(gè)溶源菌,因而對(duì)λ噬菌體不具有免疫性。局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)(specializedtransduction

)

根據(jù)轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率的高低可分為低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)(lowfrequancytransduction,LFT)通過溶原菌釋放的噬菌體所進(jìn)行的轉(zhuǎn)導(dǎo),只能形成極少數(shù)的轉(zhuǎn)導(dǎo)子

高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)(highfrequancytransduction,HFT)通過雙重溶原菌(正常噬菌體或者輔助噬菌體+缺陷噬菌體)釋放的噬菌體所進(jìn)行的轉(zhuǎn)導(dǎo),形成的轉(zhuǎn)導(dǎo)子的頻率很高比較項(xiàng)目普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)轉(zhuǎn)導(dǎo)的基因供體染色體或染色體外的任何基因供體染色體上與原噬菌體緊密連鎖的少數(shù)幾個(gè)個(gè)別基因噬菌體寄生的位置不結(jié)合在寄主染色體特定位置上結(jié)合在寄主染色體特定位置上獲得轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體的方法通過敏感菌的裂解或容源菌的誘導(dǎo)紫外線誘導(dǎo)容源菌轉(zhuǎn)導(dǎo)子的區(qū)別一般穩(wěn)定,非溶原性(不表現(xiàn)出任何噬菌體的性狀,包括免疫性)一般不穩(wěn)定,呈缺陷溶原性(對(duì)同源噬菌體具有免疫性,但不表現(xiàn)出其它噬菌體的性狀)普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)和局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)的比較準(zhǔn)性生殖(parasexualeproduction)定義同種生物的兩個(gè)不同的體細(xì)胞發(fā)生融合,不經(jīng)減數(shù)分裂的方式而導(dǎo)致低頻率的基因重組并產(chǎn)生重組子的雜交方式基本過程菌絲連接形成異核體核融合體細(xì)胞交換第三節(jié)微生物的突變概念基因突變體的主要類型基因突變的特點(diǎn)基因突變的機(jī)制一、概念突變(mutation)指生物體內(nèi)遺傳物質(zhì)發(fā)生數(shù)量或結(jié)構(gòu)變化的現(xiàn)象變異由突變導(dǎo)致遺傳性狀改變叫變異突變率指每個(gè)細(xì)胞在每一世代中發(fā)生突變的概率

常用的基因突變符號(hào)his+,his-一、概念突變的類型基因突變(genemutation):是由于DNA鏈上的一對(duì)或少數(shù)幾對(duì)堿基發(fā)生改變而引起的染色體畸變(chromosomalaberration):是DNA的大段變化(損傷)現(xiàn)象表型(phenotype)是指可以觀察或檢測(cè)到的個(gè)體性狀或特征,是特定的基因型在一定環(huán)境條件下的表現(xiàn)一、概念基因型(genotype)指儲(chǔ)存在遺傳物質(zhì)中的信息,即DNA堿基序列野生型未發(fā)生突變的從自然界分離到菌株突變體野生株經(jīng)突變后帶有新的遺傳性狀的菌株(增加或缺失)自發(fā)突變與誘發(fā)突變自發(fā)突變?cè)谧匀粭l件下自發(fā)進(jìn)行的突變(10-9——10-6)誘發(fā)突變是通過物理、化學(xué)或生物的因素而引起的加速突變隨機(jī)性各種性狀的突變可以在沒有任何人為的誘變因素處理的情況下,可以發(fā)生在生物的任何個(gè)體的發(fā)育時(shí)期及任何基因上特點(diǎn)自發(fā)性、隨機(jī)性和不對(duì)應(yīng)性.三個(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn)變量試驗(yàn)涂布試驗(yàn)平板影印培養(yǎng)試驗(yàn)自發(fā)突變的原因自發(fā)突變引起自發(fā)突變的原因由背景輻射和環(huán)境因素引起由微生物自身有害代謝產(chǎn)物引起由DNA復(fù)制過程中堿基配對(duì)錯(cuò)誤引起低劑量誘變因素的長(zhǎng)期綜合誘變效應(yīng)誘發(fā)突變的原因誘發(fā)突變誘變劑:凡具有誘變效應(yīng)的任何因素誘變劑的種類物理因素:UV、激光、離子束、X射線、γ射線、快中子化學(xué)因素:亞硝酸、烷化劑、堿基類似物、吖啶類化合物二、突變體的主要類型形態(tài)突變型生化突變型條件致死突變型致死突變型二、突變體的主要類型形態(tài)突變型指突變引起細(xì)胞形態(tài)變化或引起菌落形態(tài)改變形態(tài)變化:細(xì)菌的鞭毛、芽孢或莢膜的有無菌落形態(tài):外形的光滑、粗糙和顏色的變異生化突變型指一類發(fā)生代謝途徑變異但沒有明顯形態(tài)變化的突變型常見有:營(yíng)養(yǎng)缺陷型、抗性突變型發(fā)酵突變型、毒力突變型生化突變型營(yíng)養(yǎng)缺陷型由基因突變而引起代謝過程中某種酶合成能力喪失的突變型,必須在原有培養(yǎng)基中添加細(xì)胞不能合成的營(yíng)養(yǎng)成分才能正常生長(zhǎng)類型:氨基酸、維生素和嘌呤嘧啶缺陷型抗性突變型是一類能抵抗有害理化因素的突變型

類型:抗藥性、抗紫外線和抗噬菌體等.

生化突變型發(fā)酵突變型指從不能利用到能夠利用某種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的突變型毒力突變型指突變后致病能力增強(qiáng)或減弱的突變型.產(chǎn)量突變型指產(chǎn)生某種代謝產(chǎn)物的能力增強(qiáng)或減弱的突變型二、突變體的主要類型條件致死突變型指在某種條件下具有致死效應(yīng),而在另一條件沒有致死效應(yīng)的突變型如溫度敏感突變株致死突變型由于基因突變?cè)斐删w死亡或生活能力下降雙倍體生物能夠以雜合子的形式存活下來,一旦形成純合子,則發(fā)生死亡

第六節(jié)微生物遺傳變異的應(yīng)用誘變育種原生質(zhì)體融合育種基因工程誘變育種自發(fā)突變與育種誘變育種營(yíng)養(yǎng)缺陷型的篩選自發(fā)突變與育種生產(chǎn)中選育菌種自發(fā)突變與豐富實(shí)際經(jīng)驗(yàn)和細(xì)致觀察及抓住良機(jī),選育優(yōu)良的生產(chǎn)菌株定向選育p235選用某一特定因素,長(zhǎng)期處理某一微生物的培養(yǎng)物,同時(shí)不斷地連續(xù)傳代,以達(dá)到累積相應(yīng)自發(fā)突變株被動(dòng)的育種方法,費(fèi)時(shí)費(fèi)力,而且結(jié)果難以預(yù)測(cè),育種過程緩慢誘變育種誘變育種是通過人工的方法處理微生物使之發(fā)生突變,并運(yùn)用合理的篩選程序和方法,把適合人類需要的優(yōu)良菌種篩選出來的過程實(shí)踐意義提高生產(chǎn)性能與改善產(chǎn)品質(zhì)量擴(kuò)大品種與簡(jiǎn)化生產(chǎn)工藝方法簡(jiǎn)便易行、條件和設(shè)備要求簡(jiǎn)單誘變育種的一般方法出發(fā)菌株的誘變處理出發(fā)菌株的挑選、敏感期和合適對(duì)象的選擇、誘變劑的選擇、誘變劑量的選擇突變體的篩選初篩、復(fù)篩出發(fā)菌株的誘變處理出發(fā)菌的選擇原則具有優(yōu)良性狀的菌株對(duì)誘變劑敏感的菌株以單倍體純種為出發(fā)菌誘變劑的選擇原則在同樣效果下選用最方便的在同樣方便的情況下選擇最高效的因素充分利用復(fù)合處理的協(xié)同作用出發(fā)菌株的誘變處理選用最適的誘變劑量劑量:一般指強(qiáng)度與作用時(shí)間的乘積表示方法:常采用殺菌率來作各種誘變劑的相對(duì)劑量誘變劑的劑量對(duì)產(chǎn)量變異的影響

正變較多地出現(xiàn)在偏低的劑量中而負(fù)變則較多地出現(xiàn)于偏高的劑量中經(jīng)多次誘變而提高產(chǎn)量的菌株中,更容易出現(xiàn)負(fù)變突變體的篩選初篩目的:刪去明確不符合要求的大部分菌株,把生產(chǎn)性狀類似的菌株盡量保留下來方法:一般通過平板稀釋法獲得單個(gè)菌落,然后對(duì)菌落進(jìn)行相關(guān)性狀的初步篩選復(fù)篩目的:對(duì)初篩出的菌株的有關(guān)性狀作精確的定量測(cè)定,然后經(jīng)過小試、中試,才能用于生產(chǎn)方法:一般是將微生物搖瓶培養(yǎng),然后再對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行分析測(cè)定營(yíng)養(yǎng)缺陷型的篩選營(yíng)養(yǎng)缺陷型是指通過誘變產(chǎn)生的,在某些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的合成能力上出現(xiàn)缺陷,必須在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分才能生長(zhǎng)的變異菌株?duì)I養(yǎng)缺陷型突變株的應(yīng)用科學(xué)研究生物測(cè)定生產(chǎn)菌株與營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變有關(guān)的三類遺傳型個(gè)體野生型從自然界分離到的任何微生物在其發(fā)生營(yíng)養(yǎng)缺陷突變前的原始菌株?duì)I養(yǎng)缺陷型經(jīng)誘變產(chǎn)生的一些合成能力出現(xiàn)缺陷,而必須在培養(yǎng)基內(nèi)加入相應(yīng)有機(jī)養(yǎng)分才能正常生長(zhǎng)的變異菌株原養(yǎng)型營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變經(jīng)回變或重組后產(chǎn)生的菌株,營(yíng)養(yǎng)要求在表型上與野生型相同與營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株篩選有關(guān)培養(yǎng)基基本培養(yǎng)基(M.M,minimalmedium)含有能滿足野生型菌株?duì)I養(yǎng)要求的最低成分的合成培養(yǎng)基“用[-]”表示完全培養(yǎng)基(C.M,completemedium)滿足一切營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株生長(zhǎng)的天然或半合成培養(yǎng)基。用“[+]”表示補(bǔ)充培養(yǎng)基(S.M,supplementalmedium)在MM中有針對(duì)性地加入一或幾種營(yíng)養(yǎng)成分以滿足相應(yīng)營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株生長(zhǎng)的合成培養(yǎng)基。用[A]或[B]表示營(yíng)養(yǎng)缺陷型的篩選方法中間培養(yǎng)分離突變核和未突變核選擇合適的培養(yǎng)基淘汰野生型抗生素法菌絲過濾法梯度培養(yǎng)法差別殺菌法營(yíng)養(yǎng)缺陷型的篩選方法檢出缺陷型點(diǎn)種法夾層培養(yǎng)法限量補(bǔ)充培養(yǎng)法影印接種法原生質(zhì)體融合育種(protoplastfusion)原生質(zhì)體融合通過人為的方法,使遺傳性狀不同的兩細(xì)胞的原生質(zhì)體發(fā)生融合,并進(jìn)而發(fā)生遺傳重組以產(chǎn)生同時(shí)帶有雙親性狀的遺傳性穩(wěn)定的融合子的過程

所獲得的重組子叫融合子(fusant)適用范圍原核生物和各種真核微生物和高等植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合育種(protoplastfusion)原生質(zhì)體融合的優(yōu)點(diǎn)可以實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣菌株間的基因重組雜交頻率較高

可進(jìn)行多親本融合遺傳物質(zhì)的傳遞更為完整

通過原生質(zhì)體融合提高產(chǎn)量原生質(zhì)體融合育種的步驟1原生質(zhì)體的制備在高滲溶液中選擇適當(dāng)?shù)姆椒ㄈコ?xì)胞壁細(xì)菌和放線菌主要采用溶菌酶酵母菌和霉菌一般用蝸牛酶和纖維素酶影響原生質(zhì)的制備的因素

菌體的前處理、培養(yǎng)時(shí)間、酶濃度、酶降解的溫度、酶降解的時(shí)間、滲透壓穩(wěn)定劑

蝸牛酶是從蝸牛的嗦囊和消化道中制備的混合酶,它含有纖維素酶,果膠酶,淀粉酶,蛋白酶等20多種酶原生質(zhì)體融合育種的步驟2原生質(zhì)體的再生使原生質(zhì)體恢復(fù)細(xì)胞壁,并能進(jìn)行生長(zhǎng)和繁殖原生質(zhì)體再生率的計(jì)算影響因素本身的再生特性原生質(zhì)的制備條件再生培養(yǎng)基的成分再生的培養(yǎng)條件原生質(zhì)體再生率=破壁前菌數(shù)-剩余菌數(shù)再生菌數(shù)-剩余菌數(shù)×100%原生質(zhì)體融合育種的步驟3原生質(zhì)體的融合選擇親本,親株均要有一定的遺傳標(biāo)記、標(biāo)記必須穩(wěn)定選用恰當(dāng)?shù)姆椒ǎ偈乖|(zhì)的融合化學(xué)助融:加入助融劑

物理助融:離心、電脈沖、激光等方法

生物助融:生物提取物

原生質(zhì)體融合育種的步驟融合子的檢出與鑒定檢出直接檢出法間接檢出法鑒定形態(tài)學(xué)生理生化遺傳學(xué)生產(chǎn)性能

第七節(jié)基因工程和合成生物學(xué)基因工程是指在基因水平上的遺傳工程(geneticengineering),它是用人為方法將所需要的某一供體生物的遺傳物質(zhì)—DNA大分子提取出來,在離體條件下用適當(dāng)?shù)墓ぞ呙高M(jìn)行切割后,把它與作為載體(vector)的DNA分子連接起來,然后與載體一起導(dǎo)入某一更易生長(zhǎng)、繁殖的受體細(xì)胞中,以讓外源遺傳物質(zhì)在其中“安家落戶”,進(jìn)行正常的復(fù)制和表達(dá),從而獲得新物種的一種嶄新的育種技術(shù)。菌種的保藏(一)基因分離與克隆目的基因的取得:在進(jìn)行基因工程操作時(shí),首先必須取得有生產(chǎn)意義的目的基因,一般有三條途徑:①?gòu)倪m當(dāng)?shù)墓w細(xì)胞(各種動(dòng)、植物及微生物均可選用)的DNA中分離;②通過反轉(zhuǎn)錄酶的作用由mRNA合成cDNA(complementaryDNA,即互補(bǔ)DNA);③由化學(xué)方法合成特定功能的基因。第六節(jié)菌種的衰退復(fù)壯和保藏菌種的衰退與復(fù)壯菌種的保藏國(guó)內(nèi)外菌種保藏部分情況

菌種的衰退與復(fù)壯衰退(degeneration)菌種在培養(yǎng)或保藏過程中,由于自發(fā)突變的存在,出現(xiàn)某些原有優(yōu)良生產(chǎn)性狀的劣化、遺傳標(biāo)記的丟失等現(xiàn)象,稱為菌種的衰退衰退的原因基因突變對(duì)菌種工作放任自流盲目傳代不搞純化與復(fù)壯育種等菌種的衰退與復(fù)壯菌種衰退的現(xiàn)象菌落和細(xì)胞形態(tài)的改變生長(zhǎng)速度緩慢,產(chǎn)孢子越來越少抵抗力、抗不良環(huán)境能力減弱等代謝產(chǎn)物生產(chǎn)能力或其對(duì)宿主寄生能力下降菌種的衰退與復(fù)壯菌種衰退的防止控制傳代次數(shù)創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件利用不同類型的細(xì)胞進(jìn)行接種傳代采用有效的菌種保藏方法菌種的衰退與復(fù)壯菌種的復(fù)壯復(fù)壯使衰退的菌種恢復(fù)原來的優(yōu)良性狀復(fù)壯的類型狹義的復(fù)壯從衰退的群體中找出未衰退的個(gè)體,以達(dá)到恢復(fù)該菌原有典型性狀的措施廣義的復(fù)壯在尚未衰退前經(jīng)常進(jìn)行菌種分純、性能測(cè)定或利用選擇性培養(yǎng)基等措施確保菌種性狀保持與日益鞏固菌種的衰退與復(fù)壯菌種的復(fù)壯的措施純種的分離把退化菌種細(xì)胞群體中一部分仍保持原有典型性狀的單細(xì)胞分離出來,經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng),就可恢復(fù)原菌株的典型性狀常用的分離純化的方法:平板稀釋法、單細(xì)胞或單孢子分離法等通過寄主體進(jìn)行復(fù)壯對(duì)于寄生性的退化菌株,可回接到相應(yīng)寄主體,以恢復(fù)或提高其寄生性能淘汰已衰退的個(gè)體菌種的保藏原理選典型菌種的優(yōu)良純種,創(chuàng)造降低微生物代謝活動(dòng)強(qiáng)度、生長(zhǎng)繁殖受抑制及難以發(fā)生突變的環(huán)境條件環(huán)境要素:干燥、低溫、缺氧、無營(yíng)養(yǎng)、避光以及添加保護(hù)劑等任務(wù)收集實(shí)驗(yàn)與生產(chǎn)菌種、菌株;確保其不死、不衰、不亂及便于研究、交換和使用的目的菌種保藏的方法低溫保藏法冷藏法斜面菌種:4~5℃,一般3~6個(gè)月移植一次半固體穿刺接種:于普通冰箱,可6~12個(gè)月移植一次低溫法-20℃左右超低溫法-70℃、-150~-196℃保藏期長(zhǎng)達(dá)數(shù)年至數(shù)十年菌種保藏的方法隔絕空氣保藏法石蠟油封藏法

在培養(yǎng)好的菌種管內(nèi)加上滅菌石蠟油可保存1~2年橡皮塞密封保藏法用橡皮塞代替棉塞用固體石蠟封口,4℃保存瓊脂柱穿刺封口穿刺培養(yǎng)石蠟油封閉菌種保藏的方法干燥保藏法原理:斷絕水分、降低代謝活動(dòng)方法砂土管保藏法:將干燥砂粒與細(xì)土混合后滅菌制成砂土管,然后接種保藏,保藏期1~10年

真空冷凍干燥法:在低于-15℃下,快速將細(xì)胞凍結(jié),并保持細(xì)胞完整,然后在真空中使水分升華至干菌種保藏的方法寄主保藏法此法適用于專性活細(xì)胞寄生物方法連續(xù)在培養(yǎng)基上連續(xù)在活宿主上國(guó)內(nèi)菌種保藏部分情況

中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)(CCCCM)普通微生物菌種保藏管理中心(CGMCC)中科院微生物所,北京(AS),真菌、細(xì)菌;中科院武漢病毒研究所,武漢(AS-IV),病毒工業(yè)微生物菌種保藏管理中心(CICC)輕工業(yè)部食品發(fā)酵工業(yè)科學(xué)研究所,南京(ID),真菌;衛(wèi)生部藥品生物制品檢定所,北京(NICPBP),細(xì)菌;中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒研究所,北京(IV),病毒國(guó)內(nèi)菌種保藏部分情況

中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)(CCCCM)農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心(ACCC)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所,北京(ISF)抗菌素菌種保藏管理中心(CACC)中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院抗菌素研究所北京(IA);四川抗菌素工業(yè)研究所,成都(SIA),新抗菌素菌種;華北制藥廠抗菌素研究所,石家莊(IANP),生產(chǎn)用抗菌

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