生物技術(shù)專題基因分離與功能鑒定

生物技術(shù)專題基因分離與功能鑒定第1頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一什么是基因？為什么要研究基因？如何研究？原核體外表達(dá)真核過表達(dá)定量表達(dá)常用方法位置—分類--結(jié)構(gòu)—功能蛋白質(zhì)功能體外鑒定轉(zhuǎn)基因應(yīng)用表達(dá)規(guī)律前言第2頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一植物基因分離克隆的方法同源克?。阂阎蛐蛄斜葘ΡＪ貐^(qū)簡并引物設(shè)計未知物種中分離RACE獲得全長結(jié)構(gòu)解析表達(dá)分析功能比較與驗證等優(yōu)點：簡單，短平快局限：過于簡單，技術(shù)含量低，非新基因，文章水平相對較低后續(xù)試驗內(nèi)容需增加第3頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一蛋白差異分析：性狀差異雙向電泳蛋白點分離氨基酸組成分析序列端部分析DNA信息差異蛋白點過多，測序片段隨機且過短，氨基酸→堿基序列簡并性過高第4頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一高通量基因芯片（諾丁漢大學(xué)—陸春貴博士）：差異性狀基于已知序列高通量表達(dá)差異分析確定大量關(guān)聯(lián)基因新基因價格昂貴數(shù)據(jù)分析處理復(fù)雜第5頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一消減抑制雜交（SSH）性狀差異個體（或不同處理）cDNA酶切分別加接頭與對照兩輪雜交擴增假陽性較多隨機第6頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一圖位克隆群體至關(guān)重要工作量超大獲得基因隨機仍是王道第7頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一尋找性狀差異性狀分離不分離軟件分析初步定位回交-擴大群體圖位克隆策略雜交-F1選擇父母本差異顯著（最好其他性狀差異較?。┳越换蛲蛔凅w單粒傳構(gòu)建群體表型統(tǒng)計分子標(biāo)記SSR等近等基因系第8頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一精細(xì)定位1-5cM甚至更小基因組文庫探針篩選目標(biāo)基因連鎖的分子標(biāo)記疊連克隆群染色體步移外顯子的分離、鑒定功能互補實驗確定基因轉(zhuǎn)基因過表達(dá)、基因敲除第9頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一研究背景及意義氣孔性狀氣孔密度、氣孔長度和氣孔開度水分、氣體交換和光合作用與生長發(fā)育及產(chǎn)量相關(guān)通過葉片較厚、氣孔密度較小的粳稻和葉片較薄、氣孔密度較大的秈稻雜交并進(jìn)行多次回交或復(fù)交，可能是改進(jìn)葉片質(zhì)量的有效途徑之一。氣孔性狀QTL圖位克隆實例第10頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一具體方案秋光七占山重組自交系（RILs）×F1。。。F9（200株系）F10氣孔性狀調(diào)查（200株系）QTL初定位--SSR精細(xì)定位群體（5000株以上）SSR精細(xì)定位（1-5cM甚至更?。┧阉魉净蚪M數(shù)據(jù)建庫—釣基因功能驗證第11頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一1.在父母本之間篩選差異引物（每條染色體10對以上，12*10=120對）2.每對引物上F10群體（120*200=24000）具體操作第12頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一3.A電泳檢測4.與父母本帶型比較分析數(shù)據(jù)理論上：各株系最多可能出現(xiàn)三種帶型：父本，母本及雜合。第13頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一每周一次，堅持的較好進(jìn)展匯報近兩年的文獻(xiàn)總結(jié)，制作PPT交流互動討論氣氛好2.1Seminar的形式第二部分：見聞及感觸2.2教學(xué)形式

討論式教學(xué)，學(xué)生都要做“發(fā)表”弱化應(yīng)試型考試，以主觀題為主第14頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一每個研究室只配一名教授，且權(quán)力較大，去行政化程度較好研究氛圍良好，實驗室24小時開放2.3研究機構(gòu)設(shè)置及管理2.4其他

不注重門臉社會、文化及景點請踩QQ空間日志第15頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一京都大學(xué)正門京大物理、化學(xué)和農(nóng)學(xué)校區(qū)正門第16頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一東京大學(xué)紅門東京大學(xué)第17頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一第18頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一大阪大學(xué)神戶大學(xué)第19頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一Thanksforyourattention!第20頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一培養(yǎng)思維巧于借鑒真打?qū)嵏晒靖簧锟茖W(xué)技術(shù)學(xué)院2010年7月23日青年教師科研工作體會與交流第21頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一科研工作的開展與持續(xù)英文文章的撰寫刊物的選擇提綱第22頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一一、科研工作的開展與持續(xù)“寄人籬下、白手起家”選定合作人后：積極主動、肯干，真正動手做！

用手不用嘴用嘴不用手不計較慷慨（用人家的東西）

付出終有回報堅持反復(fù)調(diào)整一窮二白怎么辦第23頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一多讀文獻(xiàn)Idea來源于文獻(xiàn)，來源于借鑒和變通（重中之重）中文文章碩博論文英文文章<30%>70%借鑒思維和方法第24頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一多交流閉門造車可能會走很多彎路多問,多思考,多討論聽相關(guān)報告網(wǎng)絡(luò)論壇交流第25頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一第26頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一第27頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一材料為王時刻留意特殊材料羊肚菌東北連翹第28頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一雖然四級沒過，但博士畢業(yè)時寫了10多篇SCI論文，IF>20英語應(yīng)用和應(yīng)試是兩碼事二、英文文章的撰寫敢寫培養(yǎng)思維和信心王際睿第29頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一多讀文獻(xiàn)學(xué)會借鑒（英語為母語的文章）精讀選讀

標(biāo)記常用語句和句型，可在旁邊注釋能應(yīng)用在前言、方法還是討論里。勿漢譯英中文意思尋找英文相應(yīng)句子或句型，稍作變通第30頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一三、刊物的選擇搜集并儲存相關(guān)刊物信息借助網(wǎng)絡(luò)、論壇及其強大的搜索功能。如在google中輸入植物SCI論文投稿等字樣第31頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一第32頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一涵蓋遺傳、形態(tài)、分類、分子、進(jìn)化、生理等等第33頁，共36頁，2023年，2月20日，星期一第34頁，共36頁，2023年，2月20日，星