第三章雜質(zhì)檢查

第三章雜質(zhì)檢查第1頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一一、藥物的雜質(zhì)與純度1．藥物純度的概念：藥物的純度是指藥物的純潔程度。藥物中的雜質(zhì)是影響藥物純度的主要因素，雜質(zhì)檢查也稱純度檢查。藥物中所含雜質(zhì)超過質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的純度要求，有可能使藥物的外觀性狀、物理常數(shù)發(fā)生變化，甚至?xí)绊懰幬锏姆€(wěn)定性，使活性降低、毒副作用增加。第一節(jié)藥物雜質(zhì)與限量第2頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一例：青霉素在生產(chǎn)過程中可能引入過敏性雜質(zhì)，可導(dǎo)致過敏性休克，甚至造成心衰死亡。例：阿司匹林中引入水分能促進(jìn)其水解失效例：乙醚在麻醉中的過氧化物及醛對(duì)呼吸道

有刺激性，引起肺水腫及肺炎等，嚴(yán)重時(shí)甚至引起死亡。第3頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

2、藥物純度的要求是不斷提高的：

例如：度冷丁1948年收入BP，1970年經(jīng)GC分離鑒定出兩種無效異構(gòu)體（Ⅱ）和（Ⅲ），有時(shí)高達(dá)20%～30%。

再如：ASA(阿司匹林)中除了SA(水楊酸)外，還存在乙酰水酸酐、乙酰水楊酰、乙酰水楊酸等SA的衍生物，具有致敏作用。

第4頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一3、藥物純度的評(píng)價(jià)：應(yīng)把藥物的外觀性狀、理化常數(shù)、雜質(zhì)檢查、含量測(cè)定等方面作為一個(gè)有聯(lián)系的整體來綜合評(píng)價(jià)。藥品中的雜質(zhì)能否得到合理、有效地控制，直接關(guān)系到藥品質(zhì)量可控性和安全性，在藥物研究與開發(fā)過程中，對(duì)雜質(zhì)的研究備受重視。第5頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一4、化學(xué)試劑的純度與臨床用藥的純度不能相互混淆，藥用規(guī)格與試劑規(guī)格是不一樣的?；瘜W(xué)試劑不考慮雜質(zhì)的生理作用，其雜質(zhì)限量只是從可能引起的化學(xué)變化對(duì)使用的影響來限定的，對(duì)試劑的使用范圍和使用目的加以規(guī)定，不考慮雜質(zhì)對(duì)生物體的生理作用及毒副作用；㎡第6頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一藥物純度主要從用藥安全、有效和對(duì)藥物穩(wěn)定性等方面考慮。例：BaSO4

化學(xué)試劑規(guī)格對(duì)可溶性鋇鹽不做檢查，藥用規(guī)格的硫酸鋇要做酸溶性鋇鹽、重金屬、砷鹽等檢查，如果存在可溶性鋇鹽會(huì)導(dǎo)致醫(yī)療事故。

化學(xué)試劑是不能代替藥品來使用的第7頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一二、藥物雜質(zhì)的來源

了解藥物中的雜質(zhì)的來源，可有針對(duì)性的制定出檢查的項(xiàng)目和方法。藥物中雜質(zhì)主要來源有兩個(gè)：一、由生產(chǎn)中引入；二、在儲(chǔ)藏過程中受外界條件的影響，引起藥物理化性質(zhì)發(fā)生變化而產(chǎn)生。

第8頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

（一）

生產(chǎn)過程中引入的雜質(zhì)主要指藥物（1）所用原料不純而引入其他物質(zhì)；（2）在合成過程中，未反應(yīng)的原料、中間體和副產(chǎn)物；（3）在制作過程中加入一些試劑、溶劑等而在精制時(shí)未完全除凈。例如：藥用NaCl的Br-、I-、SO42-、K+、Ca2+、Mg2+、Fe3+ASA中的SA；地西泮中的去甲安定；嗎啡中的罌粟堿第9頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一如：制劑中生成的雜質(zhì)：ASA片、栓劑中SA的檢查；鹽酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸和二乙氨基乙醇的檢查。

生產(chǎn)過程中殘留有機(jī)溶劑、酸性或堿性雜質(zhì)的檢查。

藥物中無效、低效異構(gòu)體或晶型的檢查例如：無味氯霉素存在A、B晶型，其中B為有效，A為低效。苯甲咪唑有A，B，C三種晶型；20%；40%～60%；90%

第10頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

（二）貯藏過程引入的雜質(zhì)主要指外界條件的變化或微生物的作用可能發(fā)生的水解、氧化、異構(gòu)化、晶型轉(zhuǎn)化、聚合等變化，而產(chǎn)生的有關(guān)雜質(zhì)。如：ASA水解生成SA和醋酸；阿托品水解生成莨菪醇和莨菪酸麻醉乙醚氧化為醛和有毒的過氧化物。第11頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一易發(fā)生水解反應(yīng)的結(jié)構(gòu)：苷類、酯、內(nèi)酯、酰胺、鹵代烴等易發(fā)生氧化反應(yīng)的結(jié)構(gòu)：醚、醛、酚羥基、巰基、亞硝基、雙鍵第12頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一三、藥物雜質(zhì)的分類

按雜質(zhì)的來源分為一般雜質(zhì)和特殊雜質(zhì)；1、一般雜質(zhì)是指在自然界中分布較廣泛，在多種藥物的生產(chǎn)和貯藏過程中容易引入的雜質(zhì)，它們含量高低與生產(chǎn)工藝水平密切相關(guān)，所以也稱信號(hào)雜質(zhì)；ChP附錄中規(guī)定了一般雜質(zhì)的檢查項(xiàng)目的檢查方法第13頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一2、特殊雜質(zhì)是指在個(gè)別藥物的生產(chǎn)和貯藏過程引入的雜質(zhì)。又稱為有關(guān)物質(zhì)，這類雜質(zhì)隨藥物的不同而不同。例：乙酰水楊酸引入水楊酸甲硝唑引入2-甲基-5-硝基咪唑第14頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

按照來源的不同還可將雜質(zhì)分為：1、工藝雜質(zhì)：合成未反應(yīng)完全的反應(yīng)物試劑中間體副產(chǎn)物等2、降解產(chǎn)物：從反應(yīng)物及試劑中混入的其他外來雜質(zhì)等。

第15頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一按照其毒性分類：雜質(zhì)分為毒性雜質(zhì)（重金屬、砷鹽）信號(hào)雜質(zhì)一般無毒，但其含量的多少可反映出藥物的純度情況。如果藥物中信號(hào)雜質(zhì)含量過多，提示該藥的生產(chǎn)工藝或生產(chǎn)控制有問題。如氯化物、硫酸鹽等）

第16頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一按化學(xué)類別和特性分為：無機(jī)雜質(zhì)、有機(jī)雜質(zhì)、殘留溶劑。無機(jī)雜質(zhì)可能來源于生產(chǎn)過程，一般是已知和確定的。由于許多無機(jī)雜質(zhì)直接影響

藥品的穩(wěn)定性，并可反映生產(chǎn)工藝本身的情況，了解藥品中無機(jī)雜質(zhì)的情況對(duì)評(píng)價(jià)藥品生產(chǎn)工藝的狀況有重要意義。有機(jī)雜質(zhì)主要包括合成中未反應(yīng)的原料、中間體、副產(chǎn)品、降解產(chǎn)物等。有機(jī)雜質(zhì)分特定雜質(zhì)非特定雜質(zhì)第17頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一特定雜質(zhì)指在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中分別規(guī)定了明確的限度，并單獨(dú)進(jìn)行控制的雜質(zhì)；特定雜質(zhì)包括結(jié)構(gòu)已知和結(jié)構(gòu)未知的雜質(zhì)非特定雜質(zhì)指在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中未單獨(dú)列出，而僅

采用一個(gè)通用的限度進(jìn)行控制的一系列雜質(zhì)，其在藥品中出現(xiàn)的種類與概率并不固定。如重金屬都以鉛限度來控制第18頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一四、雜質(zhì)的限量

1．雜質(zhì)限量的概念藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量，叫做雜質(zhì)限量。通常用百分之幾或百萬分之幾（ppm）來表示。

藥物中雜質(zhì)限量的控制方法有兩種（1）一種是限量檢查（2）一種是對(duì)雜質(zhì)定量測(cè)定第19頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

限量檢查法：通常不要求測(cè)定其準(zhǔn)確含量，只需檢查是否超過限量。

具體操作方法：對(duì)照法（多數(shù)采用）比較法靈敏法對(duì)照法：取一定量供試品和一定量被檢雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，

--------同條件下處理，比較反應(yīng)結(jié)果

采用該法須注意平行原則，結(jié)果才有可比性（條件一致）第20頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一注意：該法檢查結(jié)果，只能判定藥物所含雜質(zhì)是否符合限量規(guī)定，一般不能測(cè)定雜質(zhì)的準(zhǔn)確含量。第21頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一靈敏度法：供試品溶液中進(jìn)入一定量試劑，在一定反應(yīng)條件下，不得有正反應(yīng)出現(xiàn)，從而判斷供試品中所含雜質(zhì)是否符合雜質(zhì)限量。例：乳酸中草酸、酒石酸等雜質(zhì)檢查，在檢查條件下不得出現(xiàn)渾濁。P100第22頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一比較法：取供試品一定量，測(cè)定待檢雜質(zhì)的參數(shù)（如吸光度等）與規(guī)定限量比較，不得更大。例：維生素B2中感光黃素（此雜質(zhì)溶于三氯甲烷），維生素B2在三氯甲烷中不溶，在400nm下測(cè)定A,不得超過0.016.第23頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一藥物的雜質(zhì)根據(jù)性質(zhì)及危害性不同，限量要求也不一樣。對(duì)危害人體健康、影響藥物穩(wěn)定性的雜質(zhì)，必須嚴(yán)格控制其限量如砷、鉛等；有些雜質(zhì)本身一般無害，但其含量的多少可以反映出藥物的純度水平，如一些信號(hào)雜質(zhì)則只要其不超過規(guī)定含量即可。第24頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

2．雜質(zhì)限量的計(jì)算雜質(zhì)限量的計(jì)算公式：雜質(zhì)限量=雜質(zhì)的最大允許量÷供試品的量×100%

=標(biāo)準(zhǔn)液濃度×體積÷供試品的量×100%

L（%）=C×V/S×100%

第25頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一例1．對(duì)乙?；又械穆然锏臋z查：已知：S=2.0g×25/100；C=10μg/ml；V=5.0ml求：L=？解：L=C×V/S×100%=10×5.0/2.0×106×25/100×100%=0.01%

第26頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

例2．葡萄糖中重金屬的檢查：已知：S=4.0g；C=10μg/ml；L=5×10-6

求：V=？

解：V=L×S/C=5×10-6×4.0/10×10-6=2.0(ml)

第27頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一例3．葡萄糖中砷鹽的檢查：已知：V=2.0ml；C=1μg/ml；L=0.0004%

求：S=？

解：S=C×V/L=1×10-6×2.0/4×10-6=0.5(g)第28頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

例4．磷酸可待因中嗎啡的檢查：已知：V=5.0ml；C=0.02mg/ml；S=0.1g

求：L=？

解：L=C×V/S=5.0×0.02/0.1×1000×100%=0.1%注意點(diǎn)①單位一致②稀釋倍數(shù)③表示方法（%，PPM）第29頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一第二節(jié)雜質(zhì)的檢查方法檢查藥物中存在的微量雜質(zhì)，首要的問題就是選擇一個(gè)專屬性強(qiáng)的方法，使藥物對(duì)其所含微量雜質(zhì)的檢測(cè)不產(chǎn)生干擾

藥物中雜質(zhì)的檢查主要是依據(jù)藥物與雜質(zhì)在物理性質(zhì)或化學(xué)性質(zhì)上的差異來進(jìn)行。物理性質(zhì)差異：指藥物與雜質(zhì)在外觀性狀、分配或吸附以及對(duì)光的吸收等性質(zhì)差別；化學(xué)性質(zhì)差異：指藥物與雜質(zhì)對(duì)某一化學(xué)反應(yīng)的差別，一般是雜質(zhì)與試劑反應(yīng)，而藥物不反應(yīng)。

第30頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一一、雜質(zhì)的研究規(guī)范

制藥企業(yè)應(yīng)該按照經(jīng)國(guó)家藥品監(jiān)督管理部門依法審查批準(zhǔn)的規(guī)定工藝和規(guī)定原輔料進(jìn)行藥品的生產(chǎn)，如果變更生產(chǎn)工藝或原輔料，并因此而帶進(jìn)新的雜質(zhì)，則需對(duì)原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行修訂，并依法向有關(guān)藥品監(jiān)督管理部門申報(bào)批準(zhǔn)。在新藥的研發(fā)中，應(yīng)該對(duì)新藥中的雜質(zhì)進(jìn)行化學(xué)和安全性研究。雜質(zhì)控制要合理地確定雜質(zhì)檢查項(xiàng)目與限度，合理地選擇雜質(zhì)檢查方法。第31頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一（一）有機(jī)雜質(zhì)在藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的項(xiàng)目名稱1、以雜質(zhì)的化學(xué)名稱作為項(xiàng)目名稱

當(dāng)被檢查的雜質(zhì)是已知化合物時(shí)(特定雜質(zhì))，就以該化合物的化學(xué)名稱作為質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的項(xiàng)目名稱；

2、以某類雜質(zhì)的總稱作為項(xiàng)目名稱

當(dāng)雜質(zhì)不能明確為單一物質(zhì)而又為某一類物質(zhì)時(shí)，則以這類物質(zhì)總稱作為項(xiàng)目名稱。3、以檢測(cè)方法作為項(xiàng)目名稱

當(dāng)被檢查雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)未知，亦不屬于具體的類別時(shí)，可用“吸光度”等，與檢查方法相應(yīng)的名稱作為項(xiàng)目名稱。第32頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一（二）雜質(zhì)檢查項(xiàng)目的確定

雜質(zhì)檢查項(xiàng)目的確定要有針對(duì)性。

藥品標(biāo)準(zhǔn)中雜質(zhì)檢查項(xiàng)目應(yīng)包括藥物在質(zhì)量研究和穩(wěn)定性考察中檢出的，并在批量生產(chǎn)中出現(xiàn)的雜質(zhì)和降解產(chǎn)物。第33頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一（三）雜質(zhì)限度的確定P103雜質(zhì)限量的確定要合理，在確保用藥安全有效的前提下，應(yīng)考慮到：①生產(chǎn)的可行性及比與比之間的正常波動(dòng)；②藥品本身的穩(wěn)定性③可根據(jù)原料每日劑量來制訂質(zhì)控限度

第34頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一雜質(zhì)限度制定時(shí)考慮的因素：①雜質(zhì)及含一定量雜質(zhì)的藥品的毒理學(xué)研究結(jié)果②給藥途徑③每日劑量④治療周期⑤給藥人群⑥雜質(zhì)藥理學(xué)可能的研究結(jié)果⑦原料藥的來源⑧在保證安全有效的前提下，藥品生產(chǎn)企業(yè)對(duì)生產(chǎn)高質(zhì)量藥品所需成本和消費(fèi)者對(duì)藥品價(jià)格的承受力，等第35頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

對(duì)于創(chuàng)新藥物，雜質(zhì)限度確定的依據(jù)主要是已進(jìn)行的臨床前安全性研究中獲得的結(jié)果，通常是要求用于臨床試驗(yàn)的樣品雜質(zhì)不得超過用于臨床前安全性研究的樣品；

對(duì)于仿制藥物，可根據(jù)已有的標(biāo)準(zhǔn)制訂相應(yīng)的雜質(zhì)限度；

對(duì)于其他新藥，可參照創(chuàng)新藥物或仿制藥物的要求進(jìn)行。第36頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一（四）雜質(zhì)檢查方法的選擇與驗(yàn)證檢測(cè)方法包括：化學(xué)法光譜法色譜法等因藥物結(jié)構(gòu)及雜質(zhì)的不同采用不同的檢測(cè)方法。有機(jī)雜質(zhì)的檢測(cè)方法多采用色譜法，特別是HPLC法、TLC法。對(duì)檢測(cè)方法的要求：專屬、靈敏。二、雜質(zhì)的常用檢查方法

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第37頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一（一）化學(xué)方法

當(dāng)藥物中雜質(zhì)與藥物的化學(xué)性質(zhì)相差較大時(shí)，可選擇合適的試劑，使之與雜質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生顏色、氣體、沉淀，從而檢查雜質(zhì)的限量。采用化學(xué)方法檢查法可以對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行：1、半定量檢查2、可采用滴定法或重量法進(jìn)行定量測(cè)定第38頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一具體方法：P1041、顯色反應(yīng)檢查法2、沉淀反應(yīng)檢查法3、生成氣體檢查法4、滴定法第39頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一（二）色譜法

藥物中的有機(jī)雜質(zhì)，可能是已知的或未知的、揮發(fā)性或不揮發(fā)性的，其結(jié)構(gòu)和性質(zhì)往往和藥物相近。如果藥物和雜質(zhì)與某些試劑的反應(yīng)相同或相似，或者它們的光譜特征相似，就難以用化學(xué)法或光譜法對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行檢查。色譜法可以利用藥物與雜質(zhì)的色譜性質(zhì)的差異，能有效地將雜質(zhì)與藥物進(jìn)行分離和檢測(cè)，因而色譜法廣泛應(yīng)用于藥物雜質(zhì)的檢查。一般是首選方法。第40頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一1、TLC法優(yōu)點(diǎn)：設(shè)備簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便、分離速度快靈敏度和分辨率較高應(yīng)用：藥物中雜質(zhì)的檢查方法：（1）雜質(zhì)對(duì)照品法（2）供試品溶液自身稀釋對(duì)照法（3）雜質(zhì)對(duì)照品與供試品溶液自身稀釋對(duì)照并用法（4）對(duì)照藥物法注意：質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中應(yīng)規(guī)定雜質(zhì)的個(gè)數(shù)和限量第41頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一（1）雜質(zhì)對(duì)照品法適用范圍：已知雜質(zhì)并能制備雜質(zhì)對(duì)照品方法：①根據(jù)雜質(zhì)限量要求，取供試品溶液和一定濃度的雜質(zhì)對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)樣于同一薄層板，展開、斑點(diǎn)定位。②供試品溶液除主斑點(diǎn)（有效成分）外的其他斑點(diǎn)（雜質(zhì)斑點(diǎn)）與相應(yīng)的雜質(zhì)對(duì)照品溶液的相應(yīng)主斑點(diǎn)進(jìn)行比較。判斷：根據(jù)《中國(guó)藥典》要求，判斷雜質(zhì)限量例：P106第42頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一（2）供試品溶液自身稀釋對(duì)照法適用范圍：①雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)不明確；

②雖然雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)明確，但沒有雜質(zhì)對(duì)照品。要求：該方法僅限于雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色與主成分

斑點(diǎn)顏色相同或相近的情況下使用。方法：①配制一定濃度的供試品溶液，取一定量，將其按限量要求稀釋至一定濃度作為對(duì)照溶液；②將供試品溶液和對(duì)照溶液分別點(diǎn)于同一薄層板上，展開、斑點(diǎn)定位。判斷：供試品溶液所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)與自身稀釋對(duì)照溶液的相應(yīng)主斑點(diǎn)比較，不得更深。（該斑點(diǎn)是何物？）例：P106

第43頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一（3）雜質(zhì)對(duì)照品與供試品溶液自身稀釋對(duì)照并用法

當(dāng)藥物中存在多個(gè)雜質(zhì)時(shí)，如果有已知雜質(zhì)的對(duì)照品，則采用雜質(zhì)對(duì)照品法檢查；共存的未知雜質(zhì)或沒有對(duì)照品的雜質(zhì)，則同時(shí)采用供試品溶液自身稀釋對(duì)照法檢查P107

第44頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一（4）對(duì)照藥物法

無合適的雜質(zhì)對(duì)照品，或者是供試品顯示的雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色與主成分斑點(diǎn)顏色有差異，難以判斷限量時(shí)，可采用與供試品相同的藥物作為對(duì)照。對(duì)照藥物中所含待檢雜質(zhì)需符合限量要求，且穩(wěn)定性好。（間接法）

第45頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一2、HPLC法優(yōu)點(diǎn)：分離效能高、專屬性強(qiáng)、檢測(cè)靈敏性好，可以準(zhǔn)確測(cè)定各組分的峰面積（定量）方法：（1）外標(biāo)法（2）加校正因子的主成分自身對(duì)照測(cè)定法（3）不加校正因子的主成分自身對(duì)照法（4）面積歸一化法例：P108第46頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一3、GC法適用：測(cè)定藥物中揮發(fā)性特殊雜質(zhì)，特別是藥物中殘留溶劑的檢查第47頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一（三）光譜方法依據(jù)：藥物與藥物中雜質(zhì)對(duì)光選擇吸收性質(zhì)差異進(jìn)行。1、UV-VIS法2、IR法3、AAS法第48頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一（四）其他方法1、熱分析法P113（1）熱重分析（2）差熱分析（3）差示掃描熱分析2、酸堿度檢查法P1163、物理性狀檢查法P117第49頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一第三節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法

在原料藥及其制劑的生產(chǎn)過程中，常用到酸、堿、反應(yīng)試劑、催化劑等，引入無機(jī)雜質(zhì)。這些雜質(zhì)的產(chǎn)生重要與生產(chǎn)工藝過程有關(guān)，可反映生產(chǎn)工藝情況，并直接影響藥品的穩(wěn)定性。

檢查無機(jī)雜質(zhì)對(duì)評(píng)價(jià)藥品生產(chǎn)工藝的狀況有重要意義。第50頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一一般雜質(zhì)檢查規(guī)則規(guī)定：（1）遵循平行操作原則1)儀器的配對(duì)性如納氏比色管應(yīng)配對(duì)，刻度線高低相差不超過2mm；砷鹽檢查時(shí)導(dǎo)氣管長(zhǎng)度及孔的大小要一致。

2）對(duì)照品與供試品要同步操作第51頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一（2）依照《中國(guó)藥典》，正確取樣、供試品的稱量范圍（3）依照《中國(guó)藥典》，正確比色、比濁（4）檢查結(jié)果不符合規(guī)定或在限度邊緣時(shí)應(yīng)對(duì)供試管和對(duì)照管各復(fù)查兩份第52頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一一、氯化物的檢查

1．原理：是利用氯化物在硝酸性溶液中與硝酸銀試液作用，生成氯化銀的白色渾濁液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液在相同條件下生成的氯化銀混濁液比較，以判斷供試品中氯化物是否超過限量。

Cl-+Ag+→AgCl↓（白）第53頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

2．條件：

[Cl-]0.05mg～0.08mg/50ml,即相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液5ml～8ml。

酸度稀硝酸10ml/50ml。

溫度30～40℃

第54頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

3．干擾的排除

（1）供試品液混濁：可用含硝酸的蒸餾水洗凈氯紙中氯化物后過濾來消除混濁對(duì)氯化物檢查的干擾。

第55頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

（2）供試品有色：可采用內(nèi)消色法，按中國(guó)藥典附錄規(guī)定的方法處理。供試品+AgNO3放置10min澄清溶液+標(biāo)準(zhǔn)NaCl+水對(duì)照溶液供試品+AgNO3+水供試品溶液暗處放置5min后比較第56頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一二、硫酸鹽檢查法

1．原理是利用SO42-在鹽酸酸性溶液中與氯化鋇試液作用，生成硫酸鋇的白色渾濁液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液在相同條件下生成的硫酸鋇渾濁液比較，以判斷供試品中硫酸鹽是否超過限量。

第57頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

2．條件：[SO42-]0.1mg～0.5mg/50ml,即相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液1～5ml。

酸度稀鹽酸2ml/50ml。3．干擾的排除供試品有色：可采用內(nèi)消色法。第58頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

三、鐵鹽檢查法（一）硫氰酸鹽法1．原理Fe3++6SCN-{Fe(SCN)6-]3-

紅色2．條件：[Fe3+]0.01mg～0.05mg/50ml,即相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液1～5ml。酸度稀鹽酸4ml/50ml。

HCl第59頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

3．干擾的排除（1）當(dāng)有Fe2+存在時(shí)，加氧化劑過硫酸銨氧化Fe2+成Fe3+。（2）當(dāng)供試液管與對(duì)照溶液管色調(diào)不一致，或所呈硫氰酸鐵的顏色較淺不便比較時(shí)，可分別移入分液漏斗中，加正丁醇或異戊醇提取，分別取提取液比色。因硫氰酸鐵離子在正丁醇等溶劑中溶解度大，故能增加顏色深度，且能排除某些干擾物質(zhì)的影響。第60頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

(二）巰基醋酸法1.原理巰基醋酸還原Fe3+為Fe2+，在氨堿性試液中與Fe2

+

作用生成紅色配位離子。2Fe3++2HSCH2COOH2Fe2++SCH2COOH+2H+

SCH2COOHFe2++2HSCH2COOHFe(SCH2COOH)2+H+Fe(SCH2COOH)2[Fe(SCH2COOH)2]2-+2H2O

2OH-第61頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

2.說明

在加巰基醋酸溶液前，先加枸櫞酸溶液，使其與鐵離形成配位離子，以免在氨堿性溶液中產(chǎn)生氫氧化鐵沉淀。（此法靈敏度比較高，但試劑較貴）第62頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一四、重金屬檢查法

重金屬影響藥物穩(wěn)定性和安全性

重金屬是指在實(shí)驗(yàn)室條件下與硫代乙酰胺或S2-作用顯色的金屬雜質(zhì).

如銀、鉛、汞、銅、鎘、錫、銻、鉍等，由于藥品生產(chǎn)過程中遇到鉛的機(jī)會(huì)比較多，鉛在體內(nèi)容易積蓄中毒，故檢查時(shí)以鉛作為代表,以鉛的限量表示重金屬限度.（實(shí)驗(yàn)條件主要指溶液的PH，因?yàn)槿芤旱腜H直接影響重金屬與顯色劑反應(yīng)是否完全，從而影響測(cè)定的準(zhǔn)確度）

第63頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一中國(guó)藥典（2010年版）重金屬的檢查法規(guī)定了三種方法

第一法為硫代乙酰胺法；第二法是將供試品在500~600℃熾灼破壞后，再按第一法檢查；第三法是檢查能溶入堿溶液，而不溶于酸溶液的藥物，在堿性條件下用硫化鈉作顯色劑；第64頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

第一法硫代乙酰胺法1、原理

CH3CSNH2+H2OCH3CONH2+H2S合格＜H2S+Pb2+PbS↓+2H+

2．條件：[Pb2+]10μg～20μg/27ml,相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液1～2ml。

酸度pH3.0～3.5.合格＜

第65頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一3．干擾的排除

(1)供試品有色：可采用外消色法消除干擾。(2)供試品有微量Fe3+:在弱酸性溶液中氧化硫化氫析出硫，產(chǎn)生混濁影響比色，可加Vc或鹽酸羥胺使Fe3+氧化成Fe2+離子再檢查。

其他兩種方法見P122

第66頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一五、砷鹽檢查法

《中國(guó)藥典》采用古蔡法和二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DDC）檢查藥物中的微量的砷鹽。（一）古蔡法Gutzeit)(BP也采用此法）

1.原理As3++3Zn+3H+3Zn2++AsH3

AsO33-+3Zn+9H+3Zn2++3H2O+AsH3

AsO43-+4Zn+11H+4Zn2++4H2O+AsH3AsH3+3HgBr23HBr+As(HgBr)3(棕色)2As(HgBr)3+AsH33AsH(HgBr)2(黃色)

As(HgBr)3+AsH33HBr+As2Hg3(棕黑色)第67頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

2.裝置與試劑作用

(1)驗(yàn)砷儀砷化氫發(fā)生瓶;中空磨口塞;導(dǎo)氣管(2)試劑的作用合格＜①KI-SnCl2的作用：交替還原作用；首先將AsO43-還原成AsO33-，生成的碘再被還原成碘離子。即:將五價(jià)砷還原成三價(jià)砷(五價(jià)砷與氫反應(yīng)較慢)第68頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

AsO43-+2I-+2H+

AsO33-+I2+H2O

AsO43-+Sn2++2H+AsO33-+Sn4++H2OI2+Sn2+

—2I-+Sn4+

4I-+Zn2+

—[ZnI4]2-

由于碘離子的存在,與鋅離子形成配合物,有利于

AsH3

氣體生成.

第69頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

②Zn粒與氯化亞錫作用，在其面上形成Zn-Sn齊，起極化作用,從而使氫氣均勻而連續(xù)地發(fā)生.

極化:當(dāng)電流通過電解池或電池時(shí),使電極電位改變并產(chǎn)生一反電動(dòng)勢(shì)的現(xiàn)象.

第70頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一1、Pb(AC)2棉太緊影響砷化氫氣體通過；太松，硫化氫也通過起不到作用。2、硫化氫來源：鋅及供試品中可能含有少量硫化物，在酸性溶液中產(chǎn)生硫化氫氣體③Pb(AC)2棉的作用：是消除供試品可能含有的少量的硫化物。S2-

+2H+H2SH2S+HgBr22HBr+HgS（汞斑）H2S+Pb(AC)2PbS+2HAC第71頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

3.干擾的排除（1）供試品為S2-,SO32-,S2O32-等:因在酸中生成H2S,SO2,與HgBr作用生成HgS或Hg，干擾砷斑檢查。用硝酸氧化成硫酸鹽可消除。（2）供試品為Fe3+能消耗KI，SnCl2

應(yīng)測(cè)定條件，先可加足量KI。第72頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

（3）含銻藥物

銻鹽被還原為SbH3與HgBr2試紙作用，產(chǎn)生灰色銻斑，干擾砷斑的檢查，可改用Betterdorff法。白田道夫法原理：As3＋＋SnCl2＋HCl→As↓＋SnCl4＋H＋

棕褐色的膠態(tài)砷＋第73頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一（二）Ag-DDC法(二乙基二硫代氨基甲酸銀，USP采用此法)

1.原理：是利用砷化氫與Ag-DDC吡啶溶液作用，使Ag-DDC中的銀還原為紅色膠態(tài)銀，以Ag-DDC溶液為空白，于510nm的波長(zhǎng)處，測(cè)定吸收度，供試品溶液的吸收度不得大于標(biāo)準(zhǔn)砷溶液的吸收度。2.試劑的作用：同古蔡法。第74頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一六、溶液顏色檢查法

溶液顏色檢查法是控制藥物中有色雜質(zhì)量的方法。中國(guó)藥典（2010年版）收載有三種方法：K2Cr2O7黃、綠1.標(biāo)準(zhǔn)比色液進(jìn)行比較的方法標(biāo)準(zhǔn)比色液CoCl2橙黃,橙紅2.分光光度法CuSO4藍(lán)色3.色差計(jì)法通過測(cè)定供試品與標(biāo)準(zhǔn)比色液或水之間的色差值第75頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一用分光光度法注意事項(xiàng)1、藥品溶液有色時(shí)，雜質(zhì)檢查測(cè)定波長(zhǎng)的選擇2、溶劑的選擇第76頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一七、易炭化物檢查法

是檢查藥物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有機(jī)雜質(zhì)。這類雜質(zhì)多數(shù)結(jié)構(gòu)未知，用硫酸呈色的方法簡(jiǎn)單控制其含量.常采用與標(biāo)準(zhǔn)比色液比色的方法進(jìn)行檢查。標(biāo)準(zhǔn)比色液為CoCl2,K2Cr2O7,CuSO4第77頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一注意事項(xiàng)：1、供試品為固體，應(yīng)先研成細(xì)粉。如需加熱才能溶解時(shí)，可將供試品與硫酸混合均勻，加熱溶解后，放冷至室溫，再轉(zhuǎn)移置比色管中。2、操作時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格控制硫酸濃度、反應(yīng)溫度及時(shí)間。因易炭化合物與硫酸呈現(xiàn)的顏色與上述因素有關(guān)。第78頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

是檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì)。常采用與濁度標(biāo)準(zhǔn)液比濁的方法進(jìn)行檢查。濁度標(biāo)準(zhǔn)液制備原理：(CH2)6N4+6H2O6HCHO+4NH3HCHO+H2N-NH2H2C=N-NH2+H2O

甲醛腙白色混濁

不同級(jí)號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液級(jí)號(hào)0.51234濁度標(biāo)準(zhǔn)原液（ml）2.55.010.030.050.0水（ml）97.595.090.070.050.0八、溶液澄清度檢查法第79頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一1、標(biāo)準(zhǔn)濁度溶液的影響因素⑴溫度：在低溫（1℃）反應(yīng)不能進(jìn)行，不產(chǎn)生沉淀；高溫形成的濁度稍低。因此，藥典規(guī)定反應(yīng)溫度為25±1℃⑵放置時(shí)間：硫酸肼溶液配制后，應(yīng)放置4---6小時(shí)，然后再與烏洛托品反應(yīng)。溶液不放置，制得的標(biāo)準(zhǔn)濁度溶液渾濁不穩(wěn)定。⑶濕度：各地的相對(duì)濕度不同，而試劑的含水量可直接影響溶液的濃度。因此，試劑應(yīng)先經(jīng)硅膠干燥劑干燥24h后使用為佳。⑷儲(chǔ)存期：應(yīng)置涼處避光儲(chǔ)存。按規(guī)定儲(chǔ)存期使用，濁度無明顯變化。2、對(duì)于帶乳濁色供試液的澄清度檢查，不能用本法。應(yīng)該用氯化鈉與硝酸銀產(chǎn)生的渾濁度比較。注意事項(xiàng)第80頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一渾濁程度分五級(jí):澄清、輕微渾濁、微濁、渾濁、重度渾濁澄清系指供試品溶液的澄清度相同于所用的溶劑或未超過0.5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)濁度溶液。判斷標(biāo)準(zhǔn)第81頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一補(bǔ)充：1、《中國(guó)藥典》還規(guī)定“注射液中不溶性微粒檢查法”。它與“澄清度”檢查的概念是不同的應(yīng)予注意。2、微粒系指注射液可移動(dòng)的不溶性外來物質(zhì)。這些微粒進(jìn)入血管能引起血管肉芽腫，靜脈炎，血栓及血小板減少，對(duì)心肌、肝、腎等亦有損害。第82頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一九、熾灼殘?jiān)鼨z查法(residueonignition)

BP稱硫酸灰分（sulphatedash)是檢查有機(jī)藥物中混入的各種無機(jī)雜質(zhì)。常采用重量方法進(jìn)行檢查。

殘?jiān)佰釄逯亍釄逯?/p>

殘?jiān)?=×100%

供試品重第83頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一注意事項(xiàng)1、動(dòng)植物生藥經(jīng)灼燒后的灰燼稱為灰分，它是生藥藥品的正常成分。2、不含金屬元素組成的有機(jī)藥品經(jīng)灼燒后，所留的殘?jiān)Q熾灼殘?jiān)恿蛩岵⒆茻?00--800℃后，所得的硫酸鹽又稱硫酸沿灰分。3、氫氟酸對(duì)瓷坩堝有腐蝕性，故含氟的藥品應(yīng)置于白金坩堝中灼燒。4、加熱時(shí)，必須小心，先用小火加熱，以免供試品濺出；切不可直接大火加熱坩堝底部，否則易引起暴沸或燃燒。第84頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一5、自高溫爐取出坩堝時(shí)，應(yīng)先將坩堝預(yù)熱（打開爐門），再與坩堝接觸，避免熱坩堝聚遇冷而破裂。6、有機(jī)藥品的灼燒可以一定量的已恒重的純沙或混以乙醇、甘油，以分散藥品增大與氧接觸的面，使灰化完全。7、坩堝置高溫爐內(nèi)灼燒前，務(wù)必蒸發(fā)除盡硫酸，以免硫酸蒸汽腐蝕爐膛，造成漏電事故。8、可采用藍(lán)墨水與三氯化鐵溶液混合液涂寫烘烤，供瓷坩堝編號(hào)。注意事項(xiàng)第85頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一十、干燥失重檢查法

主要檢查藥物中的水分及其他揮發(fā)性的物質(zhì)。？常采用重量方法進(jìn)行檢查。常用的方法有三種：（一）常壓恒溫干燥法

（二）干燥劑干燥法（注意常用干燥劑P127）

（三）

減壓干燥法第86頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一（一）常壓恒溫干燥法

適用于受熱較穩(wěn)定的藥物。干燥溫度一般為105℃注意：⑴供試品應(yīng)鋪平，厚度∠5㎜，疏松物10㎜；

⑵結(jié)晶藥物應(yīng)該研細(xì)；⑶瓶蓋半開或者放置旁邊；⑷取時(shí)，先蓋瓶蓋。

第87頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一（二）干燥劑干燥法（注意常用干燥劑P127）

1）硅膠：吸水率居中。變色硅膠加有氧化鈷，無水氧化鈷藍(lán)色，吸水后含二分子結(jié)晶水呈淡紅色。

105℃干燥后可恢復(fù)使用。優(yōu)點(diǎn)：廉價(jià)、方便、無腐蝕性、可重復(fù)2）濃硫酸：吸水率低，有腐蝕性；3）五氧化二磷：吸水性好，不能重復(fù)使用第88頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一（三）

減壓干燥法適用于熔點(diǎn)低，受熱不穩(wěn)定或水分難以除去的藥物。除另行規(guī)定外，壓力在2.67KPa以下。第89頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

熱重分析法

熱分析法（thermoanalysis)

差示熱分析差示掃描量熱法1.熱重分析法（thermogravimetricanalysis,TGA)

在程序升溫下，測(cè)量物質(zhì)的質(zhì)量與溫度的關(guān)系，研究物質(zhì)在加熱同時(shí)失重的情況下，所發(fā)生的質(zhì)的變化，常用于藥物穩(wěn)定性的研究；貴重和易氧化藥物的干燥失重測(cè)定。第90頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

2.差示熱分析（differentialthermlanalysis,DTA)

是在程序升溫下，測(cè)量被測(cè)物質(zhì)和參比物之間的溫差與溫度關(guān)系的一種技術(shù)。參比物是一種惰性物質(zhì)，在加熱過程中不發(fā)生相變和化學(xué)變化。因此溫差(△T)只與被測(cè)物質(zhì)的量質(zhì)變化有關(guān)?！鱐=0被測(cè)物未發(fā)生吸熱或放熱反應(yīng);△T=-為吸熱峰;△T=+為放熱峰.第91頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

測(cè)藥的溶點(diǎn)

DTA在藥物分析中應(yīng)用尖峰為物理變化藥物定性分析寬峰為化學(xué)變化估測(cè)藥物的純度第92頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

3.差示掃描量熱法(differentialscanningcalorimetry,DSC)是在程序升溫下，測(cè)量維持樣品和參比物的溫度相同，系統(tǒng)所需供給樣品隨溫差變化的能量的一種技術(shù)。DSC與DTA的不同之處是記錄方式不同，是記錄系統(tǒng)供給的能量，吸熱供給能量；放熱減少供給的能量。在藥物分析中應(yīng)用與DTA相同。DSC-TG常聯(lián)合用。

第93頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一十一、水分測(cè)定《中國(guó)藥典》收載方法

卡爾.費(fèi)休法、甲苯法測(cè)定物：藥物中的結(jié)晶水、吸附水、游離水原理：碘將二氧化硫氧化成三氧化硫時(shí)，需要一定量的水參與反應(yīng)，根據(jù)消耗碘的量測(cè)定水分（P127）費(fèi)休試液組成：水：碘：二氧化硫：甲醇：吡啶提問：1、甲醇、吡啶的作用？

2、為什么上述兩試劑需是無水的？第94頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一例：注射用青霉素鈉水分測(cè)定精密稱取本品0.7540g，置干燥具塞玻璃瓶中，加無水甲醇5ml，充分振搖后，用費(fèi)休試液滴至溶液由淺黃色變成紅棕色，消耗用費(fèi)休試液2.15ml；另取無水甲醇5ml，同法測(cè)定，消耗用費(fèi)休試液0.15ml，求青霉素鈉的含水量（已知每1ml費(fèi)休試液相當(dāng)于3.52mg水）。解：供試品中含水量%=（A-B)F/W×100%%=（2.15-0.15）×3.15/0.7540×1000×100%=0.93%第95頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一注意：（1）費(fèi)休法不適用于測(cè)定氧化劑、還原劑、以及能與試液生成水的化合物的測(cè)定，如：鉻酸鹽、過氧化物、硫代硫酸鹽、硫化物、堿性氧化物以及含氧弱酸鹽等的測(cè)定；一些羰基化合物如活潑的醛、酮可于試劑中的甲醇作用，生成縮醛和水，干擾測(cè)定。（2）費(fèi)休試液的F值應(yīng)在4.0mg/ml上下為宜，F(xiàn)值降至3.0mg/ml以下時(shí)，測(cè)定終點(diǎn)不敏銳，不宜再用。（3）整個(gè)操作應(yīng)迅速，且不宜再陰雨或空氣濕度太大時(shí)進(jìn)行。第96頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一十二、有機(jī)溶劑殘留量測(cè)定法[ChP(2010)]

主要檢查藥物在生產(chǎn)過程中引入的有害的有機(jī)溶劑(如苯、氯仿、二氯甲烷、吡啶、甲苯、環(huán)氧乙烷、二氧六環(huán)等）。常采用氣相色譜法方法進(jìn)行檢查。常用的方法有二種：①直接進(jìn)樣法和②頂空進(jìn)樣法（試用于揮發(fā)性大的樣品測(cè)定）。色譜系統(tǒng)性試驗(yàn)的要求：(1)N＞1000;(2)用內(nèi)標(biāo)法測(cè)定時(shí)，要求R＞1.5;(3)外標(biāo)法測(cè)定時(shí)，待測(cè)物的峰面積的RSD＜10%。第97頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一殘留有機(jī)溶劑測(cè)定的方法和限量

2010版藥典對(duì)殘留溶劑的控制種類和限度進(jìn)行了較大的修訂,溶劑殘留量的種類與限度與人用藥品注冊(cè)技術(shù)范圍的國(guó)際協(xié)調(diào)會(huì)一致.按有機(jī)溶劑毒性的程度分為三類:一類有機(jī)溶媒毒性較大,具有致癌作用并對(duì)環(huán)境有害,應(yīng)盡量避免使用;二類有機(jī)溶媒對(duì)人有一定毒性,盡量少用;三類有機(jī)溶媒對(duì)人的健康危險(xiǎn)性較小,推薦使用.P129第98頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一補(bǔ)充：元素狀態(tài)的硒對(duì)人體無毒性，但硒化合物（二氧化硒）對(duì)人體劇毒。因此，對(duì)于有可能引入硒的一些藥物須對(duì)殘留硒進(jìn)行限量檢查。第99頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一第四節(jié)特殊雜質(zhì)的檢查方法

一、特殊雜質(zhì)的研究規(guī)范藥物中特殊雜質(zhì)的研究是藥物質(zhì)量控制的重要部分，該研究可以為藥物的工藝研究、質(zhì)量研究·、穩(wěn)定性研究、藥理毒理及臨床研究提供重要信息，對(duì)特殊雜質(zhì)研究直接體現(xiàn)創(chuàng)新藥物的研究水平。通過對(duì)有關(guān)物質(zhì)的定性研究，可以獲得有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息，分析其形成過程，合成時(shí)可設(shè)法避免該雜質(zhì)的形成，或經(jīng)純化使之降至可接受的水平，或儲(chǔ)藏過程中控制好條件。第100頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一二、利用藥物和雜質(zhì)在物理性質(zhì)上的差（一）臭味及揮發(fā)性質(zhì)的差異利用藥物中存在的雜質(zhì)具有特殊臭味，可以從臭味判斷

例：黃凡士林中異性有機(jī)物檢查：本品2.0g,直火加熱無辛味。（二）顏色差異

例：磺胺嘧啶中有色偶氮苯化合物的檢查：取本品2.0g，加NaOH試液10ml，加水25ml，與黃色3號(hào)比色液比，不得更深。第101頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

（三）溶解行為的差異利用藥物可溶于水或有機(jī)溶劑、酸、堿中，而雜質(zhì)不溶；反之雜質(zhì)可溶而藥物不溶。例：吡哌酸中堿中不溶物吡哌酸甲酯（I）和（II）檢查（四）旋光性質(zhì)的差異例：硫酸阿托品中莨菪堿的檢查：本品溶液(50mg/ml)α＜-0.4

第102頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

（五）對(duì)光吸收性質(zhì)的差異1.紫外分光光度法：例:地蒽酚中二羥基蒽醌的檢查

再如：苯丙醇中苯丙酮的檢查：可利用供試液的吸收度比來控制雜質(zhì);純品苯丙醇A247nm/A258nm=0.59;99.5%時(shí)A247nm/A258nm=0.79;

因此規(guī)定供試品A247nm/A258nm＜0.79;即所含苯丙酮＜0.5%.第103頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

2.原子吸收分光光度法：是通過測(cè)定藥物中所含待測(cè)元素原子,吸收發(fā)自光源的該元素特定波長(zhǎng)的程度，以求出藥物中待測(cè)元素的含量。限量檢查時(shí)：對(duì)照品液=供試品+限量-----a

供試品液=------------------b

符合規(guī)定時(shí)b＜(a-b);b＞(a-b)不合格。第104頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

3。紅外分光光度法：

主要用于藥物中無效或低效晶型檢查，如甲苯咪唑中A晶型檢查第105頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

A晶型C晶型在640cm-1有強(qiáng)吸收吸收很弱在662cm-1吸收很弱有強(qiáng)吸收662cm-1640cm-1662cm-1640cm-1供試品+10%A晶型D2D1

供試品D2D1＜10%

R=D1/D2＞R’=D’1/D’2第106頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

4.熒光分析法

3,4-二去氫利血平利血平中氧化產(chǎn)物檢查：利血平(無熒光)(I)(黃綠色熒光)3,4,5,6-四去氫利血平(II)(藍(lán)色熒光)第107頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一(六)吸附或分配性的差異

1.薄層色譜法(TLC)有關(guān)物質(zhì)

(1)雜質(zhì)對(duì)照品法例如:鹽酸左旋咪唑中檢查硅膠G2,3-二氫-6-苯基咪唑[2,1-b]噻唑鹽苯:甲醇:冰HAC樣品

對(duì)照品。·····第108頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一注意：①此法必須首先確認(rèn)供試品中存在的待檢雜質(zhì)是什么？并具備該雜質(zhì)對(duì)照品。如具備上述條件，用該法檢查十分可靠。因?yàn)閷?duì)照品與雜質(zhì)系同一物質(zhì)，且檢查條件完全一致。②如不能確認(rèn)供試品中存在的待檢雜質(zhì)是什么？選用可能存在的某種物質(zhì)作為雜質(zhì)對(duì)照品第109頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

當(dāng)藥物存在的雜質(zhì)未完全確認(rèn)或待檢雜質(zhì)不止一種時(shí)，可根據(jù)藥物合成路線，化學(xué)性質(zhì)等推斷可能存在的雜質(zhì)，并且能獲得該物質(zhì)的對(duì)照品，即可采用此法。應(yīng)用此法需注意雜質(zhì)斑點(diǎn)與對(duì)照品應(yīng)具有可比性。第110頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一(2)供試品溶液自身稀釋法檢查物為:結(jié)構(gòu)不確定;或無雜質(zhì)對(duì)照品的情況注意:該法限于雜質(zhì)斑點(diǎn)的顏色與主成分斑點(diǎn)的顏色相同或相近的情況下使用.第111頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

(3)高低濃度對(duì)比品法(對(duì)照藥物法)

例如:鹽酸異丙嗪中有關(guān)物質(zhì)的檢查硅膠G有多個(gè)雜質(zhì)而且結(jié)構(gòu)不清樣品10mg/ml;對(duì)照品(1)0.15mg/ml己烷:丙酮:乙胺(2)0.05mg/ml

樣品液對(duì)(1)(2)

供試液雜質(zhì)斑點(diǎn)不多于3個(gè);雜質(zhì)斑點(diǎn)與對(duì)照(1)的主斑點(diǎn)比較,不得更深;如有一點(diǎn)超過,應(yīng)不深于對(duì)照液(2)的主斑點(diǎn).......

....

...第112頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

2.紙層析法(PC)

常用于極性大的藥物的分離、分析，如地高辛中的有關(guān)雜質(zhì)的檢查。第113頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

3.高效液相色譜法(HPLC)（1）峰面積歸一化法：L%=∑Ai/(∑Ai+A主）×100%例如：利巴韋林中有關(guān)雜質(zhì)的檢查：對(duì)照品液(5μg/ml)進(jìn)樣10μl,調(diào)靈敏度，使主峰達(dá)滿量程的20%～25%樣品液(0.4mg/ml)進(jìn)樣10μl,雜質(zhì)∑Ai＜(∑Ai+A主）的1.0%第114頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

（2）不加校正因子主成分對(duì)照法對(duì)照品液為供試品的稀釋液進(jìn)樣測(cè)得A主

供試品液進(jìn)樣測(cè)得∑Ai

其∑Ai＜A主即為合格.例如:甲硝唑中2-甲基-5-硝基咪唑:對(duì)照品液(0.01mg/ml)進(jìn)樣20μl,調(diào)靈敏度，使主峰達(dá)10%～30%樣品液(0.14mg/ml)進(jìn)樣20μl,雜質(zhì)∑Ai＜A主的1.0%.第115頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

（3）內(nèi)標(biāo)法加校正因子測(cè)定供試品中雜質(zhì)的含量

對(duì)照品+內(nèi)標(biāo)進(jìn)樣求校正因子（f)=(As/Cs)/(AR/CR)

供試品+內(nèi)標(biāo)進(jìn)樣求AX.AS,則雜質(zhì)濃度CX=f×AX/(AS/CS)第116頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一

4.氣相色譜法(GC)

主要用于藥物中揮發(fā)性的雜質(zhì)檢查，其檢查方法與HPLC法相同。第117頁，共130頁，2023年，2月20日，星期一三、利用藥物和雜質(zhì)在化學(xué)性上的差異（一）酸堿性的差異

1.規(guī)定消耗滴定液體積例如己酸羥孕酮中正己酐、對(duì)甲苯磺酸檢查：(NaOH0.02mol/L)取本品0.20g+中性乙醇+溴麝香草酚藍(lán)微藍(lán)色＜0.50ml2.pH法例如乙琥胺中2-甲基-2-乙基丁二酸檢查：0.01g/mlpH3.0～4.5.3.指示劑法例如苯巴比妥中苯基丙二酰脲檢查：其水溶液不得使甲基橙顯紅