精漿生化檢測與男性不育

精漿生化檢測與男性不育第1頁，共23頁，2023年，2月20日，星期二一、男性不育概述不孕不育已成為全球性難題，男性約占50%，其中約75%病因不甚明確。事關男女雙方，受孕過程復雜，需要：合格的精子、輸精管道、附屬性腺合格的卵子、子宮和輸卵管現(xiàn)狀精子質量越來越差，患者人群越來越大卵子質量越來越差，患者年齡越來越輕相對性不育多，絕對性不育少WHO至今沒有可供推薦的有效方案第2頁，共23頁，2023年，2月20日，星期二二、男性不育的病因男性不育睪丸前因素睪丸因素睪丸后因素下丘腦疾病垂體疾病內源性或外源性激素異常先天性異常外源性損害全身疾病輸精管道梗阻免疫因素性功能障礙KallmannLH或FSH缺乏垂體功能不足高催乳素血癥雌、雄激素過多糖皮質激素過多甲狀腺功能異常染色體異常隱睪雄激素抵抗環(huán)境、藥物感染創(chuàng)傷和手術肝腎功能不全腫瘤先天性梗阻獲得性梗阻功能性梗阻抗精子抗體性欲減退ED射精功能障礙尿道下裂第3頁，共23頁，2023年，2月20日，星期二7000余例男性不育患者病因統(tǒng)計性功能障礙1.7％泌尿生殖道感染6.6％先天性畸形2.1％獲得性疾病2.6％精索靜脈曲張12.3％

內分泌紊亂0.6％免疫性因素3.1％其他異常3.0％特發(fā)性精液異常

或不明原因75.1％

第4頁，共23頁，2023年，2月20日，星期二三、男性不育的診斷（一）、病史要全面了解家族史、婚育史、性生活史和其它對生育可能造成影響的因素，還要簡要了解女方病史。（二）、體格檢查體型及第二性征生殖器官的檢查其它檢查：直腸指診、神經(jīng)反射非常重要！許多不育患者可通過病史和體檢大體判斷其生育能力第5頁，共23頁，2023年，2月20日，星期二（三）、精液檢查精液檢查是診斷男性不育最基礎和最重要的檢查項目

正常精液標準（WHO第五版）

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體積≥2.0ml

PH≥7.2

精子密度≥15×106/ml

精子總數(shù)≥40

×106/一次射精

活力前向運動精子≥32%

精子形態(tài)嚴格標準下正常形態(tài)的精子≥4%

精子活率≥50%的精子存活

白細胞<1×106/ml

免疫珠實驗（IBT）

活動精子結合免疫珠<20%

混合抗球蛋白反應（MAR）<50%精子有凝集

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﹡根據(jù)Kruger和menkfeld標準。第6頁，共23頁，2023年，2月20日，星期二（四）精液生化檢查項目參數(shù)枸櫞酸每份精液≥52μmol果糖≥13μmol/每份精液或者定性試驗陽性鋅每份精液≥2.4μmol肉毒堿(DTNB法)≥0.319mmol/L中性α-葡糖苷酶≥20U/每份精液酸性磷酸酶≥200U/每份精液白細胞數(shù)＜1×106/ml第7頁，共23頁，2023年，2月20日，星期二（五）抗精子抗體大量研究資料表明10%-30%的不育不孕患者血清或精漿中可檢到AsAb。為排除免疫性因素，AsAb檢測已是男性不育癥的重要檢查項目之一目前WHO推薦的AsAb檢測方法為免疫珠法(IBT)和混合抗球蛋白反應試驗(MAR)。MAR操作簡單、快速，可以和精液的常規(guī)化驗同時進行，國內比較常用。第8頁，共23頁，2023年，2月20日，星期二（六）其它檢查內分泌檢查:LH、FSH、T、PRL、E2抑制素B(InhibinB)影像學檢查：超聲、造影、CT、MRI染色體及Y染色體微缺失檢查睪丸活檢術：TESA、TESE、PESA、MESA、micro-TESE第9頁，共23頁，2023年，2月20日，星期二如何合理診斷及治療雖然診斷手段眾多，但仍然有75%的患者無法明確診斷。合理利用目前的手段診斷男性不育是一個難題。重點：精漿生化分析第10頁，共23頁，2023年，2月20日，星期二性功能及射精功能異常正?？贵w包裹的精子陽性免疫因素不育陰性精子的各參數(shù)精漿檢查不明原因不育單純精漿異常不育異常正常正常性功能和射精功能障礙導致不育的因素異常是激素檢查（T低+FSH不升高或PRL升高）內分泌因素不育是感染指標檢查附屬性腺感染不育是精索靜脈曲張精索靜脈曲張不育是獲得性睪丸因素繼發(fā)性睪丸損傷不育是先天性因素先天性因素不育是全身性疾病或環(huán)境因素全身性疾病因素不育是醫(yī)源性因素醫(yī)源性因素不育是無致病因素精子有精子密度特發(fā)性少精癥/隱匿精子癥異常精子活力特發(fā)性弱精子癥異常正常精子形態(tài)特發(fā)性畸形精子癥異常正常未發(fā)現(xiàn)睪丸體積及FSH特發(fā)性無精子癥異常睪丸活檢/生精發(fā)生不全梗阻性無精子癥完全第11頁，共23頁，2023年，2月20日，星期二四、精漿生化分析方法及臨床意義精液分析：精子的數(shù)量、活力和形態(tài)（少精、弱精、畸形精子、無精子、液化不良）局限性：受許多內外因素干擾、波動大、不能反映病因（疾病在精子上的反映）精漿生化：精液分析的補充，可反映男性附屬性腺功能。第12頁，共23頁，2023年，2月20日，星期二精漿生化指標與附屬性腺的關系附睪：中性α-葡糖苷酶、左旋肉毒堿精囊：果糖前列腺：酸性磷酸酶、檸檬酸、鋅感染、外傷或手術：抗精子抗體第13頁，共23頁，2023年，2月20日，星期二人類精漿的組成幾乎都來自于附屬性腺，其中約30%來自前列腺，60%來自精囊腺，5%～10%來自附睪及尿道球腺等。精漿生化標志可反映附屬性腺功能。這些特異性標志總排出量的高低可用以評價男性附屬性腺的功能狀態(tài)，也可用于綜合評價不育的發(fā)病原因和機制。第14頁，共23頁，2023年，2月20日，星期二（一）精漿α-葡糖苷酶測定精漿中存在兩種α-葡糖苷酶的異構體，其中中性α-葡糖苷酶占80%，僅來源于附睪；酸性α-葡糖苷酶占20%，主要來源于前列腺。WHO手冊推薦了中性α-葡糖苷酶的檢測方法?！緳z驗原理】

酸性條件下，通過對精漿酸性α-葡糖苷酶的抑制，保留中性α-葡糖苷酶活性，后者分解底物生成終產(chǎn)物對硝基酚，對硝基酚在405nm波長有最大吸收波長，顏色深淺與單位時間內精漿中性α-葡糖苷酶活力成正比。第15頁，共23頁，2023年，2月20日，星期二【臨床意義】中性α-葡糖苷酶是附睪分泌功能的指標。結合激素和睪丸其他指標，對遠端輸精管阻塞有較好的診斷價值。果糖結合中性α-葡糖苷酶檢測，可大大提高其診斷阻塞性無精子癥的價值。正常參考值：≥20U/每份精液第16頁，共23頁，2023年，2月20日，星期二【精漿α-葡糖苷酶檢測中應注意兩點】①離心速度不同，精漿α-葡糖苷酶活性有所差異。離心速度越高，精漿總α-葡糖苷酶水平越低。因此，在精漿α-葡糖苷酶的檢測中，精液離心時的速度不得低于3000g離心15min。②精漿α-葡糖苷酶活性與禁欲時間的長短密切相關。禁欲時間越長，α-葡糖苷酶水平越高。禁欲7天以上的精漿α-葡糖苷酶水平明顯升高。因此，精漿α-葡糖苷酶水平檢測的最佳禁欲時間最好為4~7天。第17頁，共23頁，2023年，2月20日，星期二（二）精漿果糖測定

精漿果糖的測定幾乎被在世界上所有男科學實驗室進行，WHO也推薦以精漿果糖濃度的測定作為評價精囊腺功能的指標。目前，用于檢測精漿果糖的方法有間苯二酚顯色法、氣相層析法、吲哚顯色法等多種方法。第18頁，共23頁，2023年，2月20日，星期二【臨床意義】精囊分泌的果糖是精子能量的主要來源。睪酮的水平影響精囊果糖的分泌，雄激素不足可造成果糖含量降低，因此果糖含量間接反映睪丸間質細胞分泌睪酮的功能。果糖可為精子的運動提供能量。精囊腺功能紊亂時，精液總量減少，精漿果糖含量降低，進而引起精子活力不足，導致不育。第19頁，共23頁，2023年，2月20日，星期二先天性精囊缺如患者果糖測定為陰性；精囊炎時，果糖含量降低。不完全射精或射精過頻，果糖含量亦降低。精漿果糖與α-葡糖苷酶結合可用于鑒別單純性輸精管阻塞所致的無精癥（果糖含量正常）和輸精管、精囊發(fā)育不良引起的無精癥。精漿果糖正常參考值：0.87~3.95g/L。第20頁，共23頁，2023年，2月20日，星期二【精漿果糖檢測中應注意三點】①果糖標準液配制后應放置2周后使用，使用2周后出現(xiàn)吸光度降低時應立即更換新的果糖標準液。②離心速度不同精漿果糖濃度稍有差異。離心速度增加時精漿果糖濃度有升高趨勢。因此，離心速度不得低于3000g離心15min。③精液液化后應立即離心將精子和精漿分離，否則會影響精漿果糖