不同生化檢測(cè)系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)結(jié)果可比性的方法

新鄉(xiāng)市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科齊振普不同生化檢測(cè)系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)結(jié)果可比性的方法現(xiàn)在是1頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三問(wèn)題的提出現(xiàn)在是2頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三問(wèn)題1目前，很多實(shí)驗(yàn)室都有兩臺(tái)或多臺(tái)生化分析儀，經(jīng)常有不同儀器檢測(cè)同一項(xiàng)目結(jié)果不一致的情況。怎樣才能使兩臺(tái)儀器之間的結(jié)果具有可比性呢？現(xiàn)在是3頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三問(wèn)題2即使只有一臺(tái)生化分析儀，但參加EQA結(jié)果不成功，地區(qū)間不同實(shí)驗(yàn)室結(jié)果可比性差。如何改進(jìn)EQA成績(jī)，提高地區(qū)間不同實(shí)驗(yàn)室之間結(jié)果的可比性呢？現(xiàn)在是4頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三問(wèn)題3病人抱怨在不同醫(yī)院檢驗(yàn)結(jié)果不一致，不知道該相信誰(shuí)。醫(yī)師不知道該如何依據(jù)檢驗(yàn)結(jié)果對(duì)患者診斷和治療。衛(wèi)生部要求不同實(shí)驗(yàn)室之間結(jié)果“互認(rèn)”，降低醫(yī)療成本。現(xiàn)在是5頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三怎樣解決這些問(wèn)題呢？現(xiàn)在是6頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三實(shí)現(xiàn)同一檢測(cè)項(xiàng)目在不同檢測(cè)系統(tǒng)中的檢測(cè)結(jié)果具有可比性，是臨床診斷疾病的基本要求，也是衛(wèi)生部提倡“結(jié)果互認(rèn)”的基礎(chǔ)，更是實(shí)驗(yàn)室管理的重要目標(biāo)。解決“可比性”的關(guān)鍵在于檢測(cè)系統(tǒng)的量值溯源。鑰匙現(xiàn)在是7頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三檢測(cè)系統(tǒng)：是指完成一個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目所需要的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、檢驗(yàn)程序等的組合?，F(xiàn)在是8頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三儀器試劑校準(zhǔn)品實(shí)驗(yàn)程序現(xiàn)在是9頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三固定檢測(cè)系統(tǒng)（封閉檢測(cè)系統(tǒng)）：由公司選定的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、檢驗(yàn)程序等組成固定的組合，用戶實(shí)驗(yàn)室不能更改。這樣的檢測(cè)系統(tǒng)經(jīng)過(guò)公司與參考系統(tǒng)校準(zhǔn)比對(duì)，可以保證結(jié)果的可比性和量值溯源性?，F(xiàn)在是10頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三自建檢測(cè)系統(tǒng)（開(kāi)放檢測(cè)系統(tǒng)）：實(shí)驗(yàn)室自行選擇的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、檢驗(yàn)程序的組合，其中的每一要件都可以更改。如果自建的檢測(cè)系統(tǒng)經(jīng)過(guò)比對(duì)、校準(zhǔn)驗(yàn)證和偏倚評(píng)估，證明其有效性。則成為有效的檢測(cè)系統(tǒng)，其檢測(cè)結(jié)果具有可比性和量值溯源性。現(xiàn)在是11頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三如果自建的檢測(cè)系統(tǒng)未經(jīng)過(guò)比對(duì)、校準(zhǔn)驗(yàn)證和偏倚評(píng)估，其檢測(cè)結(jié)果的可比性和量值溯源性未知，則稱為“自攢檢測(cè)系統(tǒng)”?，F(xiàn)在是12頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三選擇檢測(cè)系統(tǒng)的原則：①選擇性能優(yōu)良的儀器和質(zhì)量好的試劑；②以性能和質(zhì)量為主要標(biāo)準(zhǔn)，價(jià)格為次要標(biāo)準(zhǔn)；③儀器制造商和試劑生產(chǎn)商的美譽(yù)度；④培訓(xùn)和售后服務(wù)；⑤考慮發(fā)展因素；⑥檢測(cè)系統(tǒng)經(jīng)過(guò)評(píng)價(jià)確定后，不可隨意更換任一要素，特別是試劑和程序。除非有特殊原因，如原使用的試劑停產(chǎn)等。特別不能因?yàn)榻?jīng)濟(jì)利益的原因，隨意更換試劑。⑦如果確實(shí)需要更換試劑，必須重新評(píng)價(jià)新檢測(cè)系統(tǒng)的性能指標(biāo)，證明是有效的檢測(cè)系統(tǒng)，方可在實(shí)際工作中應(yīng)用。現(xiàn)在是13頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三實(shí)驗(yàn)方法的分級(jí)現(xiàn)在是14頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三檢驗(yàn)方法學(xué)包括：(1)經(jīng)詳盡研究尚未發(fā)現(xiàn)不準(zhǔn)確度或不確定性原因的決定性方法；(2)經(jīng)詳盡研究證實(shí)不準(zhǔn)確度與不精密度可以忽略的參考方法；(3)可滿足臨床或其他目的需要的日常使用的常規(guī)方法?，F(xiàn)在是15頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三決定性方法（definitivemethod）是指準(zhǔn)確度最高，系統(tǒng)誤差最小，經(jīng)過(guò)詳細(xì)的研究，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生誤差的原因或在某些方面不夠明確的方法。用于發(fā)展及評(píng)價(jià)參考方法和一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品。

現(xiàn)在是16頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三參考方法（referencemethod）是指準(zhǔn)確度與精密度已經(jīng)充分證實(shí)的分析方法，干擾因素少，系統(tǒng)誤差與重復(fù)測(cè)定的隨機(jī)誤差相比可以忽略不計(jì)，有適當(dāng)?shù)撵`敏度、特異性及較寬的分析范圍。這類方法在條件許可的實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)經(jīng)常使用。用于評(píng)價(jià)常規(guī)方法和試劑盒，鑒定二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品。

現(xiàn)在是17頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三常規(guī)方法（routinemethod）指性能指標(biāo)符合臨床或其他目的的需要，有足夠的精密度、準(zhǔn)確度、特異性和適當(dāng)?shù)姆治龇秶?，而且?jīng)濟(jì)實(shí)用。這類方法經(jīng)有關(guān)學(xué)術(shù)組織認(rèn)可后可稱為推薦方法（recommendedmethod），推薦方法應(yīng)具有足夠的實(shí)驗(yàn)證據(jù)。

現(xiàn)在是18頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三項(xiàng)目決定性方法參考方法 常規(guī)方法鈣ID-MS 原子吸收分光光度法 鄰甲酚肽絡(luò)合法氯電量滴定法、 電流滴定法 電量分析法中子活化法 硝酸汞滴定法鎂 ID-MS 原子吸收分光光度法 甲基麝香草酚蘭比色法磷 ID-MS—— ——鉀 ID-MS、 火焰光度法 火焰光度法中子活化法鈉 重量分析法、 火焰光度法 火焰光度法 中子活化法白蛋白—— 免疫化學(xué)法 溴甲酚綠法總蛋白—— 雙縮脲法 雙縮脲法肌酐 ID-MS、 離子交換層析法 苦味酸法 離子交換層析法尿素 ID-MS 尿素酶法 尿素酶法尿酸 ID-MS 尿酸酶法（紫外法） 尿酸酶法膽紅素 —— 重氮反應(yīng)法 重氮反應(yīng)法葡萄糖 ID-MS 己糖激酶法 葡萄糖氧化酶法膽固醇 ID-MS Abell-Kendall法， 膽固醇氧化酶法 膽固醇氧化酶法甘油三酯ID-MS 酶法 酶法AST —— 酶偶聯(lián)法 酶偶聯(lián)法ALT —— 酶偶聯(lián)法 酶偶聯(lián)法GGT —— 連續(xù)監(jiān)測(cè)產(chǎn)物生成法 連續(xù)監(jiān)測(cè)產(chǎn)物生成法CK —— 酶偶聯(lián)法 酶偶聯(lián)法現(xiàn)在是19頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三生化參考方法（衛(wèi)生部臨檢中心2011.12.23）分析項(xiàng)目分析原理參考方法名稱葡萄糖（Glu）ID-LC/MS/MS血清葡萄糖同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法尿素（Urea）ID-GC/MS血清尿素同位素稀釋氣相色譜質(zhì)譜法尿酸（UA）ID-LC/MS/MS血清尿酸同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法肌酐（Crea）ID-LC/MS/MS血清肌酐同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）IFCC-Spectrophotometry丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性濃度（37℃）參考測(cè)定方法天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）IFCC-Spectrophotometry天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性濃度（37℃）參考測(cè)定方法轉(zhuǎn)肽酶（GGT）IFCC-Spectrophotometryr-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶活性濃度（37℃）參考測(cè)定方法乳酸脫氫酶（LDH）IFCC-Spectrophotometry乳酸脫氫酶活性濃度（37℃）參考測(cè)定方法肌酸激酶（CK）IFCC-Spectrophotometry肌酸激酶活性濃度（37℃）參考測(cè)定方法淀粉酶（AMY）IFCC-Spectrophotometry淀粉酶活性濃度（37℃）參考測(cè)定方法鈉（Na）ICP/MS血清鈉電感耦合等離子體質(zhì)譜法鎂（Mg）ICP/MS血清鎂電感耦合等離子體質(zhì)譜法糖化血紅蛋白A1cIFCC-LC/MS/MS糖化血紅蛋白液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜IFCC法高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）Ultracentrifugation-HPLC高密度脂蛋白及其亞類膽固醇超速離心-高效液相色譜法低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）Ultracentrifugation-HPLC低密度脂蛋白及其亞類膽固醇超速離心-高效液相色譜法膽固醇（TC）ID-LC/MS/MS血清總膽固醇同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法膽固醇（TC）ID-GC/MS血清總膽固醇同位素稀釋氣相色譜質(zhì)譜法甘油三酯（TG）ID-LC/MS/MS血清甘油三酯同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法甘油三酯（TG）ID-GC/MS血清甘油三酯同位素稀釋氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法皮質(zhì)醇（Co）ID-LC/MS/MS血清皮質(zhì)醇同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法睪酮（T）ID-LC/MS/MS血清睪酮同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法孕酮（P）ID-GC/MS血清孕酮同位素稀釋氣相色譜質(zhì)譜法現(xiàn)在是20頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三血液參考方法（）

檢測(cè)項(xiàng)目檢測(cè)原理參考方法名稱白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）單通道電阻抗法白細(xì)胞計(jì)數(shù)參考方法紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）單通道電阻抗法紅細(xì)胞計(jì)數(shù)參考方法血紅蛋白測(cè)定（HGB）HiCN分光光度法血紅蛋白測(cè)定參考方法紅細(xì)胞比容測(cè)定（Hct）微量毛細(xì)管離心法紅細(xì)胞比容測(cè)定參考方法血小板計(jì)數(shù)（PLT）流式細(xì)胞術(shù)法血小板計(jì)數(shù)參考方法現(xiàn)在是21頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三標(biāo)準(zhǔn)品的分級(jí)（3級(jí)）現(xiàn)在是22頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品（原級(jí)參考物質(zhì)）是一種穩(wěn)定而均一的物質(zhì)，它的數(shù)值已由決定性方法確定，或由高度準(zhǔn)確的方法確定，所含雜質(zhì)也已經(jīng)定量，且有證書(shū)；用于校正決定性方法，評(píng)價(jià)及校正參考方法以及為二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品定值?，F(xiàn)在是23頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品（次級(jí)參考物質(zhì)）這類標(biāo)準(zhǔn)品可由實(shí)驗(yàn)室自已配制或?yàn)樯唐罚氖局当仨氂靡患?jí)標(biāo)準(zhǔn)品和參考方法確定；主要用于常規(guī)方法的評(píng)價(jià)或?yàn)榭刂莆锒ㄖ岛统Ｒ?guī)測(cè)定的結(jié)果計(jì)算?，F(xiàn)在是24頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三日常校準(zhǔn)品用二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品和常規(guī)方法測(cè)定得到校準(zhǔn)品，用于常規(guī)測(cè)定中的標(biāo)準(zhǔn)?，F(xiàn)在是25頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三生化標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)）1.GBW09174冰凍人血清中葡萄糖、肌酐、尿酸、尿素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)2.GBW09175冰凍人血清中葡萄糖、肌酐、尿酸、尿素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

3.GBW09176冰凍人血清中葡萄糖、肌酐、尿酸、尿素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)4.GBW09177冰凍人血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、γ-谷氨?；被D(zhuǎn)移酶、乳酸脫氫酶、肌酸激酶、α-淀粉酶活性濃度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)5.GBW09178血清總膽固醇、總甘油、高密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)6.GBW09179血清總膽固醇、總甘油、高密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)7.GBW09180血清總膽固醇、總甘油、高密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)8.GBW09181人血紅蛋白溶液中糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)9.GBW09182人血紅蛋白溶液中糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)10.GBW09183人血紅蛋白溶液中糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)現(xiàn)在是26頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三血液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)）檢測(cè)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)名稱證書(shū)編號(hào)HGB氰化高鐵血紅蛋白國(guó)家一級(jí)標(biāo)物質(zhì)GBW09153WBC、RBC、HBG、PLT血細(xì)胞分析國(guó)家一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW09172HCT紅細(xì)胞比容國(guó)家一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW09173現(xiàn)在是27頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三免疫和核酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)名稱標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)編號(hào)濃度乙型肝炎表面抗原（HBsAg）血清（凍干）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW0916428.0±3.2IU/ml乙型肝炎表面抗原（HBsAg）血清（液體）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW(E)0900380.23±0.08IU/ml乙型肝炎表面抗原（HBsAg）血清（液體）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW(E)0900390.74±0.23IU/ml乙型肝炎表面抗原（HBsAg）血清（液體）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW(E)0900401.31±0.42IU/ml乙型肝炎表面抗原（HBsAg）血清（液體）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW(E)0900412.55±0.80IU/ml乙型肝炎表面抗原（HBsAg）血清（液體）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW(E)0900424.6±1.3IU/ml丙型肝炎病毒（HCV）抗體血清（凍干）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW091608.00±0.20NCU/ml丙型肝炎病毒（HCV）抗體血清（液體）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW(E)0900440.86±0.09NCU/ml丙型肝炎病毒（HCV）抗體血清（液體）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW(E)0900452.10±0.29NCU/ml丙型肝炎病毒（HCV）抗體血清（液體）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW(E)0900464.35±0.72NCU/ml丙型肝炎病毒（HCV）抗體血清（液體）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW(E)0900478.4±1.1NCU/ml現(xiàn)在是28頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三臨床實(shí)驗(yàn)室使用常規(guī)方法和日常校準(zhǔn)品，涉及到分析儀器、試劑、分析參數(shù)和校準(zhǔn)品。如果常規(guī)方法的檢測(cè)結(jié)果經(jīng)一系列合理實(shí)驗(yàn)的驗(yàn)證，其量值能夠溯源到高級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，說(shuō)明檢驗(yàn)結(jié)果有溯源性。最高級(jí)標(biāo)準(zhǔn)為國(guó)際或國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，如無(wú)國(guó)際或國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，常規(guī)測(cè)量結(jié)果通常應(yīng)該溯源到廠家標(biāo)準(zhǔn)。

現(xiàn)在是29頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可的兩個(gè)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)ISO/IEC17025（檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則）和ISO/15189（醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室—質(zhì)量和能力的專用要求）都對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的溯源性和可比性提出了明確要求，強(qiáng)調(diào)方法學(xué)比對(duì)試驗(yàn)是實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確度溯源和患者標(biāo)本檢驗(yàn)結(jié)果可比性的重要途徑現(xiàn)在是30頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)（CLSI）EP9-A2文件提供了不同檢測(cè)系統(tǒng)比對(duì)試驗(yàn)的方法。在進(jìn)行比對(duì)試驗(yàn)之前，首先應(yīng)對(duì)自建系統(tǒng)作精密度評(píng)價(jià)。EP5-A2文件提供了精密度評(píng)價(jià)方法?，F(xiàn)在是31頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三精密度和準(zhǔn)確度現(xiàn)在是32頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三1.精密度試驗(yàn)現(xiàn)在是33頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三精密度實(shí)驗(yàn)一般選擇2個(gè)標(biāo)本，1個(gè)為正?；蛟卺t(yī)學(xué)決定水平附近，另1個(gè)為異常值。以本實(shí)驗(yàn)室研制的改良血清蛋白方法（中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2005，11：1197-1200）的精密度評(píng)價(jià)為例，實(shí)驗(yàn)用1份正常值混合血清和1份高值混合血清?，F(xiàn)在是34頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三⑴精密度初步試驗(yàn)正常值和高值混合血清各重復(fù)測(cè)定20次，計(jì)算均值，標(biāo)準(zhǔn)差（s），變異系數(shù)（CV%）。結(jié)果如下。正常值混合血清：x=71.0g/L，s=1.30g/L，CV=1.81%。高值混合血清：x=96.5g/L，s=1.36g/L，CV=1.42%?，F(xiàn)在是35頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三⑵精密度正式試驗(yàn)①測(cè)定：取上述2個(gè)混合血清，每日測(cè)定2次（2次間隔>2h），每次測(cè)定均作雙份，連續(xù)20天。每次測(cè)定均同時(shí)做質(zhì)控。②離群點(diǎn)檢查：如每次雙份測(cè)定的差值超過(guò)初步精密度測(cè)定時(shí)±標(biāo)準(zhǔn)差的5.5倍（是99.99%的上限值），這對(duì)數(shù)據(jù)為“離群點(diǎn)”，棄去并重新補(bǔ)做?，F(xiàn)在是36頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三③統(tǒng)計(jì)分析：所得數(shù)據(jù)按文獻(xiàn)[1]計(jì)算均值，標(biāo)準(zhǔn)差（s），變異系數(shù)（CV%）。包括批內(nèi)CV，批間CV，日間CV和總CV（表1，2）。④結(jié)果判斷：按照國(guó)內(nèi)或國(guó)際上權(quán)威機(jī)構(gòu)公布的精密度指標(biāo)判斷精密度試驗(yàn)結(jié)果的可接受性。如果自建系統(tǒng)的精密度不可接受，則要查找原因，必要時(shí)更換檢測(cè)系統(tǒng)?，F(xiàn)在是37頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三表1精密度試驗(yàn)計(jì)算表（正常值混合血清）現(xiàn)在是38頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三正常值混合血清：日平均均值=70.1 S日間(B)=2.32，CV日間=B/日平均均值×100%=3.32% S批間(A)=(E/2n)1/2=1.65，CV批間=A/日平均均值×100%=2.35% S批內(nèi)(F)=((C+D)/4n)1/2=1.39 CV批內(nèi)=F/日平均均值×100%=1.99% S總(G)=(B2+A2+F2)1/2=3.17 CV總=G/日平均均值×100%=4.52% 總CV4.52%，低于IFCC規(guī)定的CV≤5%的標(biāo)準(zhǔn)?，F(xiàn)在是39頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三表2精密度試驗(yàn)計(jì)算表（高值混合血清）現(xiàn)在是40頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三高值混合血清：

日平均均值=91.1S日間(B)=1.57，CV日間=B/日平均均值×100%=1.72%S批間(A)=(E/2n)1/2=0.87，CV批間=A/日平均均值×100%=0.96%S批內(nèi)(F)=((C+D)/4n)1/2=1.12，CV批內(nèi)=F/日平均均值×100%=1.23%S總(G）=（B2+A2+F2）1/2=2.12 CV總=G/日平均均值×100%=2.33%總CV2.33%，低于IFCC規(guī)定的CV≤5%的標(biāo)準(zhǔn)。

現(xiàn)在是41頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三精密度好，準(zhǔn)確度如何？是B還是C？現(xiàn)在是42頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三2.與參考方法或目標(biāo)系統(tǒng)比對(duì)，實(shí)現(xiàn)自建檢測(cè)系統(tǒng)的量值溯源現(xiàn)在是43頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三溯源性ISO15189：醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室-質(zhì)量和能力的專用要求

“通過(guò)一條具有規(guī)定不確定度的不間斷的比較鏈，使測(cè)量結(jié)果或測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)的值能夠與規(guī)定的參考標(biāo)準(zhǔn)，通常是與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)聯(lián)系起來(lái)的特性”?，F(xiàn)在是44頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三自建系統(tǒng)與目標(biāo)系統(tǒng)比對(duì)與量值溯源鏈現(xiàn)在是45頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三比較方法。應(yīng)是參考方法或推薦方法，如果該項(xiàng)目沒(méi)有參考方法或推薦方法，也可用公認(rèn)的常規(guī)方法。但須具備：①比試驗(yàn)方法有更好的精密度。②干擾影響已知。③與試驗(yàn)方法使用相同的計(jì)量單位。目標(biāo)系統(tǒng)。性能良好的固定檢測(cè)系統(tǒng)或室內(nèi)質(zhì)控（IQC）和長(zhǎng)期室間質(zhì)評(píng)（EQA）成績(jī)合格的檢測(cè)系統(tǒng)，可作為比對(duì)的目標(biāo)系統(tǒng)。

⑴比較方法和目標(biāo)系統(tǒng)現(xiàn)在是46頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三⑵實(shí)驗(yàn)標(biāo)本每天收集不同濃度的新鮮血清8份，連續(xù)收集5天以上，濃度范圍盡可能覆蓋該項(xiàng)目的測(cè)量范圍，且參考值范圍以外的標(biāo)本盡可能在50%以上。各濃度標(biāo)本數(shù)量的按排可參閱表3?，F(xiàn)在是47頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三表3方法比較中分析物濃度水平現(xiàn)在是48頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三⑶實(shí)驗(yàn)方法每天用兩種方法分別測(cè)定8個(gè)標(biāo)本，每個(gè)標(biāo)本測(cè)定2次。第1次按1→8，第2次按8→1的順序，共測(cè)定5天，各獲得80個(gè)數(shù)據(jù)?，F(xiàn)在是49頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三舉例：NCCLS(EP9-A2)文件2.3方法比較步驟(以淀粉酶測(cè)定為例)2.3.1樣品大小至少為40個(gè)標(biāo)本,每個(gè)標(biāo)本用2種方法分別作雙份測(cè)定,因此樣本應(yīng)有足夠的量,如臨床標(biāo)本的量太少可將2份含量相近的標(biāo)本混合。2.3.2每天測(cè)定8個(gè)標(biāo)本,雙份測(cè)定時(shí)第一次按順序1,2..7,8,第二次8,7..2,1,共測(cè)5天,將數(shù)據(jù)整理成表4?，F(xiàn)在是50頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三表4

淀粉酶測(cè)定試驗(yàn)方法(Y)與BM試劑(X)比較(U/L)

試驗(yàn)方法 比較方法試驗(yàn)方法比較方法樣品 結(jié)果1 結(jié)果2結(jié)果1結(jié)果2 結(jié)果1-2結(jié)果1-2

1 1792 179516721676 3 42 1755 175115611562 4 13 1598 1595148014833 3..38 353639401 139727579 78 3 140 545258 55 2 3現(xiàn)在是51頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三⑷離群值檢查方法內(nèi)離群值的檢查：計(jì)算每個(gè)標(biāo)本重復(fù)測(cè)定值間的絕對(duì)差值、每個(gè)標(biāo)本測(cè)定值的均值，以平均絕對(duì)差值的4倍為限，超出限值即為離群點(diǎn)。（表5）方法間離群值的檢查：計(jì)算兩方法間成對(duì)結(jié)果的絕對(duì)差值及其平均值，以平均絕對(duì)差值的4倍為限，超出限值即為離群點(diǎn)。（表6）現(xiàn)在是52頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三表5方法內(nèi)復(fù)測(cè)結(jié)果離群值檢查Xi1=1672Xi2=1676 Yi1=1792Yi2=1795DXi=︱xi1-xi2︱=︱1672-1676︱=4,X1=(Xi1+Xi2)/2=1674DYi=︱Yi1-Yi2︱=︱1792-1795︱=3,Y1=(Yi1+Yi2)/2=1793.5DXi’=DXi/Xi=4/1674=0.00239DYi’=DYi/Yi=3/1793.5=0.00167同樣:I Xi1Xi2Yi1Yi2DXiDYiDXi’DYi’1 167216761792 1795430.00239 0.001672 15611562 1755 1751140.00511 0.002283 14801483 1598 1595330.00202 0.00202..38 394035 36 110.0253 0.028239 7978 72 75 130.0127 0.038240 5655 54 52 120.0180 0.0377現(xiàn)在是53頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三DX=2.75,控制限值=4×DX=4×2.75=11進(jìn)位制=11DY=2.875,控制限值=4×DY=4×2.875=11.5進(jìn)位制=12DX’=0.00698控制限值=4×DX’=0.0288DY’=0.0105

控制限值=4×DY’=0.0420

本例方法內(nèi)未發(fā)現(xiàn)離群點(diǎn)?，F(xiàn)在是54頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三表6方法間離群點(diǎn)檢查Xi1=1672 Xi2=1676 Yi1=1792 Yi2=1795Ei1=︱Yi1-Xi1︱=︱1792-1672︱=120Ei2=︱Yi2-Xi2︱=︱1795-1676︱=119Ei1’=Ei1/Xi1=120/1672=0.0718Ei2’=Ei2/Xi2=119/1676=0.0710同樣：I Ei1Ei2 Ei1’ Ei2’1 120119 0.0718 0.07102 185*189* 0.1180 0.12103 118112 0.0797 0.0755.3844 0.1030 0.10003973 0.0886 0.03854023 0.0357 0.0545現(xiàn)在是55頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三

402E=1/80∑∑Eij=1/80×3359=41.99

I=1j=1E的控制限值=4×E=4×41.99=167.96進(jìn)位=168

402E’=1/80∑∑E’ij=1/80×4.831=0.0604

I=1j=1E’的控制限值=4×E’=0.2416本例方法間出現(xiàn)2個(gè)離群點(diǎn)現(xiàn)在是56頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三⑸實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可接受性判斷兩種方法的相關(guān)性分析：①計(jì)算回歸方程

y（自建）=a+bx（比對(duì)）②計(jì)算相關(guān)系數(shù)（r）和決定系數(shù)（r2）。

現(xiàn)在是57頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三③相關(guān)系數(shù)r≥0.975或決定系數(shù)r2≥0.95，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)范圍合適，直線回歸統(tǒng)計(jì)的斜率和截距可靠。④相關(guān)系數(shù)r<0.975或決定系數(shù)r2<0.95，說(shuō)明自建系統(tǒng)方法精密度差或?qū)嶒?yàn)數(shù)據(jù)范圍不合適，直線回歸統(tǒng)計(jì)的斜率和截距不可靠，需改進(jìn)方法的精密度或擴(kuò)大濃度范圍。現(xiàn)在是58頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三⑹臨床可接受性判斷①計(jì)算方法間的系統(tǒng)誤差：將各個(gè)項(xiàng)目的醫(yī)學(xué)決定水平濃度（Xc）代入回歸方程，計(jì)算Y與X之間的系統(tǒng)誤差（SE）。SE=∣Y－X∣②計(jì)算相對(duì)偏差（SE%）=（SE/Xc）×100%現(xiàn)在是59頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三③以方法學(xué)比較評(píng)估的SE%≤1/2美國(guó)臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)部門修正法案（CLIA’88）能力比對(duì)檢驗(yàn)的分析質(zhì)量要求允許總誤差（TEa）為臨床可接受水平，判斷自建系統(tǒng)與目標(biāo)系統(tǒng)檢驗(yàn)結(jié)果的可比性。淀粉酶測(cè)定的最大允許誤差（TEa）=靶值±30%（附錄）。SE%≤15%即為臨床可接受?，F(xiàn)在是60頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三④自建系統(tǒng)與比對(duì)方法或目標(biāo)系統(tǒng)的檢驗(yàn)結(jié)果有可比性，即認(rèn)為自建檢測(cè)系統(tǒng)為有效的檢測(cè)系統(tǒng)。其檢測(cè)結(jié)果具有量值溯源性?，F(xiàn)在是61頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三⑤如果自建系統(tǒng)與目標(biāo)系統(tǒng)檢驗(yàn)結(jié)果不具可比性，則應(yīng)依據(jù)NCCLSEP15-A文件[7]對(duì)自建系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)驗(yàn)證和溯源性確認(rèn)?，F(xiàn)在是62頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三3.自建系統(tǒng)的校準(zhǔn)驗(yàn)證和溯源性確認(rèn)現(xiàn)在是63頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三采用新鮮血清賦值傳遞的方法，是實(shí)現(xiàn)自建系統(tǒng)與目標(biāo)系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果一致性的有效途徑。用目標(biāo)系統(tǒng)先給新鮮血清定值，再賦值給商品校準(zhǔn)物（日常校準(zhǔn)品），解決了自建系統(tǒng)的校準(zhǔn)溯源性問(wèn)題。由于商品血清校準(zhǔn)物存在“基質(zhì)效應(yīng)”，新鮮血清不存在基質(zhì)效應(yīng)但不易儲(chǔ)存，二者結(jié)合應(yīng)用可克服缺陷，優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)。現(xiàn)在是64頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三⑴自建檢測(cè)系統(tǒng)的校準(zhǔn)現(xiàn)在是65頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三⑵校準(zhǔn)驗(yàn)證和溯源性確認(rèn)①選取由低到高系列濃度患者新鮮血清5～6份，濃度覆蓋整個(gè)測(cè)量范圍；②分別在自建系統(tǒng)和目標(biāo)系統(tǒng)上重復(fù)測(cè)定2次，求平均值；③進(jìn)行相關(guān)與回歸分析，若回歸線性相關(guān)系數(shù)（r）≥0.975，斜率（b）與1差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，截距（a）與0差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明相關(guān)性良好。④將醫(yī)學(xué)決定水平值代入回歸方程，計(jì)算各點(diǎn)校準(zhǔn)驗(yàn)證值。若校準(zhǔn)驗(yàn)證的相對(duì)偏差（SE%）≤1/4CLIA’88允許總誤差（TEa），說(shuō)明校準(zhǔn)成功，結(jié)果具有溯源性。否則重新校準(zhǔn)。現(xiàn)在是66頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三4.用室內(nèi)質(zhì)控（IQC）和室間質(zhì)評(píng)（EQA）相結(jié)合的方法驗(yàn)證自建系統(tǒng)的量值溯源性現(xiàn)在是67頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三⑴

室內(nèi)質(zhì)控（IQC）主要控制測(cè)定的隨機(jī)誤差（精密度）是A還是B或C?現(xiàn)在是68頁(yè)\一共有75頁(yè)\編輯于星期三室內(nèi)質(zhì)控（IQC）①質(zhì)控物：選取與人血清基質(zhì)相同的質(zhì)控品，要求性能穩(wěn)定、有效期1年以上且瓶間變異小。②確定靶值與標(biāo)準(zhǔn)差：當(dāng)實(shí)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)差（s）≤1/4CLIA’88TEa（附錄1，2）時(shí)，以實(shí)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)差為質(zhì)控圖的標(biāo)準(zhǔn)差。當(dāng)實(shí)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)差