天然產(chǎn)物提取分離技術(shù)

精品文檔化學成分提取分離方法1有效成分的提取1.1溶劑提取法相似相溶”的規(guī)律是選擇適當溶劑自中草藥中提取所需要成分的依據(jù)之一。感謝閱讀天然藥物中的化學成分在溶劑中的溶解度直接與溶劑性質(zhì)有關(guān)。溶劑可分為水、感謝閱讀感謝閱讀醚>苯>氯仿>>乙酸乙酯丙酮>乙醇>>水。感謝閱讀感謝閱讀羥基數(shù)目多，能表現(xiàn)強親水性，而甙元則屬于親脂性化合物，而生物堿鹽，能夠謝謝閱讀離子化，加大了極性，就變成了親水性化合物。鞣質(zhì)是多羥基衍生物，列為親水感謝閱讀性化合物。油脂、揮發(fā)油、蠟、脂溶性色素都是強親脂性成分。萜類、甾體等脂精品文檔放心下載環(huán)類及芳香類化合物因為極性較小，易溶于氯仿、乙醚等親脂性溶劑中；糖苷、精品文檔放心下載氨基酸等成分極性較大，易溶于水及含水醇中；酸性、堿性及兩性化合物，因為謝謝閱讀存在狀態(tài)（分子或離子形式）隨溶液而異，故溶解度將隨而改變。精品文檔放心下載1.2水蒸氣蒸餾法感謝閱讀感謝閱讀精品文檔放心下載用水蒸氣蒸餾法。1.3升華法某些固體物質(zhì)如水楊酸、苯甲酸、樟腦等受熱在低于其熔點的溫度下，不精品文檔放心下載感謝閱讀感謝閱讀分一般可升華的很少。2有效成分的分離與精制2.1根據(jù)物質(zhì)溶解度差別進行分離1歡迎下載。精品文檔2.1.1利用溫度不同引起溶解度的改變結(jié)晶法是選用合適的溶劑，將混合物加熱溶解，形成有效成分的飽和溶液，感謝閱讀謝謝閱讀精品文檔放心下載晶即所謂重結(jié)晶的方法，才能得到高純度的晶體。⑴雜質(zhì)的除去結(jié)晶法所用的樣品必須是已經(jīng)用其它方法提得比較純的時候才能采用此法謝謝閱讀精制。結(jié)晶乃同類分子自相排列，如果雜質(zhì)過多，則阻礙分子的排列。如果粗提感謝閱讀取部分的純度很差則很難得到結(jié)晶。①用溶劑溶出雜質(zhì)，或只溶出所需要的成分。②用少量活性炭等進行脫色處理，以除去有色雜質(zhì)。③精品文檔放心下載④制備其晶態(tài)的衍生物（如游離生物堿可制備各種生物堿鹽類，羥基化合物可精品文檔放心下載精品文檔放心下載⑵溶劑的選擇謝謝閱讀的沸點亦不宜太高。一般常用甲醇、丙酮、氯仿、乙醇、乙酸乙酯等。精品文檔放心下載有些化合物在一般溶劑中不易形成結(jié)晶，而在某些溶劑中則易于形成結(jié)晶。感謝閱讀例如葛根素、逆沒食子酸（ellagicacid）在冰醋酸中易形成結(jié)晶，大黃素）在謝謝閱讀DMF感謝閱讀謝謝閱讀形成為加成物結(jié)晶。⑶結(jié)晶溶液的制備制備結(jié)晶的溶液為過飽和的溶液。一般是應(yīng)用適量的溶劑在加溫的情況下，精品文檔放心下載精品文檔放心下載以免伴隨結(jié)晶析出更多的雜質(zhì)。1.5倍量謝謝閱讀2歡迎下載。精品文檔感謝閱讀感謝閱讀析出蝙蝠葛堿的乙醚加成物結(jié)晶。制備結(jié)晶溶液，除用單一溶劑外，也常采用混合溶劑。感謝閱讀直至溶液微呈渾濁，并將此溶液微微加溫，使溶液完全澄清后放置。精品文檔放心下載精品文檔放心下載謝謝閱讀有利于溶出其共存的脂溶性雜質(zhì)，又可降低水的極性，促使虎杖甙的結(jié)晶化。感謝閱讀(4)結(jié)晶純度的判定結(jié)晶的純度可由化合物的晶形、色澤、熔點和熔距、薄層色譜或紙色譜等謝謝閱讀作初步鑒定。一個單體純化合物一般都有一定的熔點和較小的熔距，同時在薄層色譜或感謝閱讀感謝閱讀體化合物。感謝閱讀單體成分。例如鹿含草中主成分為高熊果甙、異高熊果甙極難用一般方法分離，謝謝閱讀謝謝閱讀測其熔點在115～125℃，熔距很長。經(jīng)制備其甲醚后，再經(jīng)紙層層析檢定，可感謝閱讀以出現(xiàn)兩個斑點，異高熊果甙的比移值大于高熊果甙。是近年來可以用作判斷有效成分純度的一種重要手段。此外，GC、精品文檔放心下載光譜等，均有助于檢識結(jié)晶樣品的純度。單晶X謝謝閱讀構(gòu)象等）的最有效方法。2.1.2改變混合溶劑的極性謝謝閱讀置以沉淀除去謝謝閱讀3歡迎下載。精品文檔感謝閱讀脂等類雜質(zhì)則留在母液中。2.1.3加酸堿調(diào)節(jié)溶液的值對酸性、堿性或兩性有機化合物來說，?？赏ㄟ^加入酸、堿以調(diào)節(jié)溶液的精品文檔放心下載感謝閱讀謝謝閱讀精品文檔放心下載這些化合物可以利用與水不相混溶的有機溶劑進行萃取分離?？梢苑譃閺娝嵝浴⒏兄x閱讀謝謝閱讀離。2.1.4沉淀法感謝閱讀的方法。⑴鉛鹽沉淀法鉛鹽沉淀法為分離某些中草藥成分的經(jīng)典方法之一。醋酸鉛及堿式醋酸鉛，精品文檔放心下載精品文檔放心下載雜質(zhì)分離。中性醋酸鉛可與酸性物質(zhì)或某些酚性物質(zhì)結(jié)合成不溶性鉛鹽。因此，精品文檔放心下載常用以沉淀有機酸、氨基酸、蛋白質(zhì)、粘液質(zhì)、鞣質(zhì)、樹脂、酸性皂甙、部分黃精品文檔放心下載酮等。與堿式醋酸鉛產(chǎn)生不溶性鉛鹽或絡(luò)合物的范圍更廣。精品文檔放心下載⑵試劑沉淀法感謝閱讀謝謝閱讀精品文檔放心下載沉淀洋地黃皂甙等。2.1.5鹽析法鹽析法是在中草藥的水提液中、加入無機鹽至一定濃度，或達到飽和狀態(tài)，的無機鹽有氯化鈉、硫酸鈉、硫酸鎂、硫酸銨等。三七的水提取液中加硫酸鎂至謝謝閱讀4歡迎下載。精品文檔謝謝閱讀精品文檔放心下載謝謝閱讀鹽，再用有機溶劑萃取。2.2根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分配比不同進行分離）兩種相互不能任意混溶的溶劑（如氯仿與水）如置分液漏斗感謝閱讀感謝閱讀中的分配比（K）在一定溫度及壓力下為一常數(shù)，可以下式表示：感謝閱讀K=CU/CLK：分配系數(shù)；CU：溶質(zhì)在上相溶劑中的濃度；：溶質(zhì)在下相溶劑中的濃度。精品文檔放心下載、液-液萃取法、高速逆流色譜法（HSCCC）、逆流連續(xù)萃取法、氣液分配色譜（GC或）精品文檔放心下載、逆流分配法（）、液-液分配色譜（或LLC）謝謝閱讀、液滴逆流色譜法（DCCC）2.2.1液-液萃取法利用混合物中各成分在兩種互不相溶的溶劑中分配系數(shù)的不同而達到分離感謝閱讀的方法。精品文檔放心下載精品文檔放心下載取；有效成分是偏于親水性的物質(zhì)，需用弱親脂性的溶劑，例如乙酸乙酯、丁醇感謝閱讀謝謝閱讀用正丁醇、異戊醇和水作兩相萃取。液-液萃取法操作注意事項：⑴先用小試管猛烈振搖約1分鐘，觀察萃取后二液層分層現(xiàn)象。如果容易謝謝閱讀產(chǎn)生乳化，大量提取時要避免猛烈振搖，可延長萃取時間。如碰到乳化現(xiàn)象，可謝謝閱讀將乳化層分出，再用新溶劑萃??；或?qū)⑷榛瘜映闉V，或?qū)⑷榛瘜由陨约訜?；或較感謝閱讀謝謝閱讀逆流連續(xù)萃取裝置。⑵水提取液的濃度最好在比重1.1～1.2精品文檔放心下載5歡迎下載。精品文檔操作。2.2.2高速逆流色譜(High-speedCountercurrentChromatography，HSCCC)謝謝閱讀精品文檔放心下載謝謝閱讀其在分離微量樣品時受到限制?！肺臋n放心下載精品文檔放心下載相分配分離，克服了固相載體帶來的樣品吸附、損失、污染、峰形拖尾等缺點。謝謝閱讀且花費溶劑少，分辨率高，可進行純品制備。利用HSCCC，中草藥粗提物的分離謝謝閱讀純化制備可同步完成，被分離物可定量回收。⑴HSCCC的工作原理兩種互不相溶的溶劑在聚四氟乙烯管內(nèi)作高速行星運轉(zhuǎn)，其中一相溶劑作固精品文檔放心下載謝謝閱讀精品文檔放心下載導致在聚四氟乙烯管中移動的速度也不同，從而使樣品中各組分得到分離。感謝閱讀⑵HSCCC的特點、應(yīng)用范圍廣，適應(yīng)性好HSCCC適用于任何極性范圍謝謝閱讀的品的分離，特別適用于分離極性大的組分以及一些生物大分子。謝謝閱讀、操作簡便，容易掌握HSCCC的制備分離或分析。感謝閱讀、回收率高固定相為液體，無需固體作載體，克服氣、液相色譜使用固相載體帶來的謝謝閱讀樣品吸附、損失、污染、峰形拖尾等缺點。、重現(xiàn)性好分離過程穩(wěn)定、峰的保留相對標準偏差小于％，、分離效率高，分離量較大與一般色譜的分離方式不同，能實現(xiàn)梯度操作和反相操作、亦能進行重復精品文檔放心下載進樣，特別適用于制備性分離，產(chǎn)品純度高，制備量大，溶劑消耗少。精品文檔放心下載6歡迎下載。精品文檔較大的制備型，柱容積可達，一次最多進樣可達粗品；較小的感謝閱讀分析型的HSCCC柱容積為，進樣量為幾十微克，最大轉(zhuǎn)速可達4000r／精品文檔放心下載因此，被廣泛地應(yīng)用于植物化學成分的分離制備研究。⑶HSCCC的應(yīng)用HSCCC適合于中藥成分的分離和分析。目前高速逆流色譜儀感謝閱讀已成功地開發(fā)出分析型和制備型兩大系列。制備或半制備HSCCC的特點是高流精品文檔放心下載精品文檔放心下載感謝閱讀從從粗提物—步純化到純品，來制備中藥化學成分標準品。謝謝閱讀HSCCC感謝閱讀精品文檔放心下載回收率高，制備量大，特別適用于特定部位和特定組分的分離純化與制備。感謝閱讀制備中藥化學對照品：謝謝閱讀求很高。制備型HPLC曾是國外常用的主要手段。但是其設(shè)備和載體填料價格很謝謝閱讀高．對樣品前期處理要求嚴格，存在不可逆吸附，溶劑用量大的缺點。因此致力精品文檔放心下載于HSCCC感謝閱讀義。從銀杏葉中制備異鼠李素、山奈酚、槲皮索、白果內(nèi)酯和橙皮甙；從大黃制謝謝閱讀精品文檔放心下載醇和白藜蘆醇甙等。2.2.3高效液相色譜(HPLC)是在經(jīng)典液相色譜基礎(chǔ)上引入氣相色譜的塔板理論，并采用了高壓輸謝謝閱讀謝謝閱讀動化特點的一種色譜技術(shù)。HPLC特別適合高沸點、大分子和熱穩(wěn)定性差的化合謝謝閱讀物的分離分析。中藥的成分非常復雜，以往常用的薄層色譜等方法因其精密度、感謝閱讀謝謝閱讀感謝閱讀質(zhì)量的控制、天然藥物化學成分的分離及分析測定等。7歡迎下載。精品文檔2.2.3.1高效液相色譜的檢測器感謝閱讀一。其發(fā)展在某種意義上決定著技術(shù)的進步。理想的檢測器應(yīng)具有以下特謝謝閱讀點：⑴靈敏度高；⑵對溫度變化和流量波動不敏感；⑶死體積小，不使峰額外地擴展；⑷對溶劑無響應(yīng)，能用于梯度洗脫操作⑸⑹對所有樣品都有響應(yīng)；⑺對樣品無破壞性。精品文檔放心下載紫外—可見分光檢測器、熒光檢測器、示差折光檢測器、電化學檢測器、二極管謝謝閱讀感謝閱讀感謝閱讀器、放射性檢測器、熱學性質(zhì)檢測器、光電導檢測器、磁旋光檢測器等。謝謝閱讀⑴紫外檢測器（UVD）優(yōu)點：UVD結(jié)構(gòu)簡單，使用方便，售價便宜、高靈敏度和穩(wěn)定性。精品文檔放心下載局限性：UVD檢測的物質(zhì)必須具有吸收紫外光的生色團，而相應(yīng)的流動相謝謝閱讀謝謝閱讀感謝閱讀謝謝閱讀波長限制。⑵示差折光檢測器(RID)RID是一種通用的檢測器，它基于色譜柱流出物光折射率的變化來連續(xù)測定謝謝閱讀樣品濃度。特點：穩(wěn)定、易于操作，樣品不被破壞和具有較好的靈敏度。感謝閱讀缺點：對工作環(huán)境要求很苛刻，要求恒溫、恒流速，且無法采用梯度洗脫．其精品文檔放心下載8歡迎下載。精品文檔檢測靈敏度也不夠高。⑶光電二極管陣列檢測器(DAD)原理：光源經(jīng)光學反射鏡通過流動池，再經(jīng)分光系統(tǒng)、狹縫照射到一組光精品文檔放心下載謝謝閱讀感謝閱讀長，和普通的紫外—可見分光檢測器不同的是進入流動池的光不再是單色光。感謝閱讀ab可得任意時間的光譜圖，相精品文檔放心下載當于與紫外聯(lián)用；c提供組分的定性信息。⑷蒸發(fā)光檢測器（ELSD）ESLD是質(zhì)量型、高靈敏度的通用液相色譜檢測器。它檢測的三個主要過程：感謝閱讀a霧化：色譜柱流出物經(jīng)過針頭式的細導管進入霧化器，與氣體混合噴成均勻謝謝閱讀一致的霧滴；b蒸發(fā)：霧滴經(jīng)過加熱的漂移管，流動相被蒸發(fā)，溶質(zhì)形成極細的顆粒；感謝閱讀c檢測：溶質(zhì)顆粒氣體在檢測池發(fā)生散射作用，經(jīng)光電倍增管成電信號輸出。謝謝閱讀ESLD的優(yōu)點：a適用范圍廣原則上對所有的化合物都能測定，不論化合物是否存在生色團或精品文檔放心下載電活性基團。b適用于梯度洗脫流動相在樣品檢測前揮去；c高靈敏度與示差檢測器(RI)及低波長紫外檢測相比。感謝閱讀由于它的這些優(yōu)點，它有可能像氣相色譜中的氫火焰檢測器(FID)那樣成為精品文檔放心下載液相色譜的高靈敏度通用檢測器。ESLD的應(yīng)用⑴沒有紫外吸收或為紫外末端弱吸收的樣品ELSD的響應(yīng)與被測物的質(zhì)量成正比，而不依賴于被測物的光學特性及官能精品文檔放心下載精品文檔放心下載精品文檔放心下載HPLC-UV檢測則較好地解決精品文檔放心下載了這個問題。從目前國內(nèi)文獻報道來看，ELSD的應(yīng)用亦以分析這類成分及甾類感謝閱讀等最多。9歡迎下載。精品文檔⑵流動相有紫外吸收干擾或梯度洗脫時基線漂移影響測定的情況感謝閱讀用ELSD檢測，流動相在漂移管便氣化蒸發(fā)，不影響樣品檢測。感謝閱讀2.2.3.2高效液相色譜的應(yīng)用a中藥化學成分分析b成分分離制備(1)特別適用于極性較大的成分(如皂苷類)分離；(2)先以分析色譜摸索分離條件；(3)樣品一定要用流動相溶解，再以濾膜過濾。2.3根據(jù)物質(zhì)的吸附性差別進行分離精品文檔放心下載固-液吸附用得最多，分為：1物理吸附(表面吸附，physicaladsorption)：以硅膠、氧化鋁及活性感謝閱讀炭為吸附劑2化學吸附（chemicaladsorption）感謝閱讀3半化學吸附（semichemical精品文檔放心下載2.3.1物理吸附液-固物理吸附色譜是運用較多的一種方法，特別適用于很多中等分子量的精品文檔放心下載樣品（分子量小于，000的低揮發(fā)性樣品）的分離，尤其是脂溶性成分。一般謝謝閱讀不適用于高分子量樣品如蛋白質(zhì)、多糖或離子型親水性化合物等的分離。精品文檔放心下載精品文檔放心下載素。2.3.1.1吸附劑a幾種吸附劑①硅膠層析用硅膠為一多孔性物質(zhì)，分子中具有硅氧烷的交鏈結(jié)構(gòu)，同時在顆粒感謝閱讀感謝閱讀夠通過氫鍵的形成而吸附水分，因此硅膠的吸附力隨吸著的水分增加而降低。感謝閱讀謝謝閱讀10歡迎下載。精品文檔感謝閱讀堿性化合物，則可因離子交換反應(yīng)而吸附堿性化合物。②氧化鋁氧化鋁帶有堿性，對于分離一些堿性中草藥成分，如生物堿類的分離頗為感謝閱讀理想。但是氧化鋁不宜用于醛、酮、酸、內(nèi)酯等類型的化合物分離。因為堿性氧謝謝閱讀化鋁可與上述成分發(fā)生次級反應(yīng)，如異構(gòu)化、氧化、消除反應(yīng)等。精品文檔放心下載用稀硝酸或稀鹽酸處理氧化鋁，不僅可中和氧化鋁中含有的堿性雜質(zhì)，并精品文檔放心下載可使氧化鋁顆粒表面帶有NO3-或精品文檔放心下載合于酸性成分的層析，這種氧化鋁稱為酸性氧化鋁。③活性炭是一種非極性吸附劑?；钚蕴恐饕糜诜蛛x水溶性成分，如氨基酸、糖類謝謝閱讀及某些甙?；钚蕴繛槲阶饔?，在水溶液中最強，在有機溶劑中則較低弱。故水謝謝閱讀的洗脫能力最弱，而有機溶劑則較強。例如以醇-水進行洗脫時，則隨乙醇濃度謝謝閱讀的遞增而洗脫力增加。活性炭對芳香族化合物的吸附力大于脂肪族化合物，對大分子化合物的吸精品文檔放心下載謝謝閱讀族物質(zhì)分開，單糖與多糖分開，氨基酸與多肽分開。b吸附劑的特點硅膠和氧化鋁為極性吸附劑，有以下特點：①對極性物質(zhì)具有較強的親和能力。故同為溶質(zhì)，極性強者將被優(yōu)先吸附。謝謝閱讀②溶劑極性越弱，則吸附劑對溶質(zhì)將表現(xiàn)出越強的吸附能力。溶劑極性增強，精品文檔放心下載則吸附劑對溶質(zhì)的吸附能力即隨之減弱。③溶質(zhì)即使被硅膠、氧化鋁吸附，但一旦加入極性較強的溶劑時，又可被后者謝謝閱讀置換洗脫下來?；钚蕴恳驗槭欠菢O性吸附劑，故與硅膠、氧化鋁相反：對非極性物質(zhì)具有較強的親和能力，在水中對該類物質(zhì)表現(xiàn)出強的吸附能謝謝閱讀洗脫被吸附物質(zhì)時，洗脫溶劑的洗脫能力將隨溶劑極性的減弱而增強。精品文檔放心下載2.3.1.2溶劑11歡迎下載。精品文檔精品文檔放心下載精品文檔放心下載精品文檔放心下載謝謝閱讀洗脫劑的極性亦須相應(yīng)降低。2.3.1.3被分離物質(zhì)的性質(zhì)被分離的物質(zhì)與吸附劑，洗脫劑共同構(gòu)成吸附層析中的三個要素，彼此緊謝謝閱讀謝謝閱讀離物質(zhì)的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)有關(guān)。對極性吸附劑而言，成分的極性大，吸附性強。謝謝閱讀化合物的極性及其強弱判斷：①官能團的極性強弱②化合物的極性則由分子中所含官能團的種類、數(shù)目及排列方式等綜合因素所謝謝閱讀決定。感謝閱讀謝謝閱讀別，就有可能分離，關(guān)鍵在于條件的選擇。精品文檔放心下載感謝閱讀感謝閱讀精品文檔放心下載感謝閱讀度有很大關(guān)系。謝謝閱讀精品文檔放心下載脫，油脂中各單一成分即可按其極性大小的不同依次被洗脫。精品文檔放心下載2.3.2吸附薄層色譜2.3.2.1吸附薄層色譜的分類感謝閱讀12歡迎下載。精品文檔玻璃片上，形成一薄層進行層析時，即稱薄層層析。針對某些性質(zhì)特殊的化合物的分離與檢出，有時需采用一些特殊薄層。精品文檔放心下載①熒光薄層感謝閱讀謝謝閱讀精品文檔放心下載謝謝閱讀鋅。另一種為在紫外光激發(fā)下發(fā)出熒光的，如銀激化的硫化鋅、硫化鎬。感謝閱讀②絡(luò)合薄層常用的有硝酸銀薄層，用來分離碳原子數(shù)相等而其中C一C精品文檔放心下載C-C鍵能與硝酸銀形成謝謝閱讀C-C精品文檔放心下載于飽和程度不同而獲得分離。層析時飽和化合物由于吸附最弱而謝謝閱讀個雙鍵的較含兩個雙鍵的值高，含一個三鍵的較含一個雙鍵的謝謝閱讀謝謝閱讀可用來分離順反異構(gòu)體。③酸堿薄層和緩沖薄層精品文檔放心下載精品文檔放心下載溶液制成堿性硅膠薄層。精品文檔放心下載-精品文檔放心下載值增至0.4左右。說明豬屎豆精品文檔放心下載堿為--堿性生物堿。2.3.2.2薄層層析法應(yīng)用①化學成分的預試用薄層層析法進行中草藥化學成分預試，可依據(jù)各類成分性質(zhì)及熟知的條謝謝閱讀件，有針對性地進行。由于在薄層上展層后，可將一些雜質(zhì)分離，選擇性高，可精品文檔放心下載使預試結(jié)果更為可靠。②化學成分的鑒定13歡迎下載。精品文檔以薄層層析法進中草藥化學成分鑒定，最好要有標準樣品進行共薄層層析。精品文檔放心下載如用數(shù)種溶劑展層后，標準品和鑒定品的值、斑點形狀顏色都完全相同，則感謝閱讀謝謝閱讀方法加以核對。③探索柱層分離的條件精品文檔放心下載謝謝閱讀感謝閱讀對含量。如在薄層上摸索到比較滿意的分離條件，即可將此條件用于干柱層析。精品文檔放心下載首先考慮選用何種吸附劑與洗脫劑。在洗脫過程中各個成分將按何種順序被洗精品文檔放心下載謝謝閱讀感謝閱讀感謝閱讀感謝閱讀離尋找柱層的洗脫條件時,假定在薄層上所測得的值一樣品在柱層中的比移謝謝閱讀謝謝閱讀感謝閱讀分。但若嚴格控制層析操作條件，則可得到接近真實的值。用薄層進行某一精品文檔放心下載組分的分離，其值范圍，一般情形下為．＞＞謝謝閱讀感謝閱讀感謝閱讀的檢查，臨床和生化檢驗以及毒物分析等，都是有效的手段。感謝閱讀2.3.2.3制備薄層色譜（PTLC）感謝閱讀另一些方法是流動相靠外力強制流動，如離心薄層色譜和加壓薄層色譜。精品文檔放心下載a吸附劑：硅膠是最常用的吸附劑。上樣量與吸附劑的厚度有關(guān)。b上樣：謝謝閱讀14歡迎下載。精品文檔上樣是進行感謝閱讀精品文檔放心下載5%-10%左右。點樣帶應(yīng)盡可能狹窄，以獲得更好的謝謝閱讀分離效果。點樣可用手工進行或自動點樣儀。c展開劑的選擇及展開：在進行PTLC之前應(yīng)用分析型TLC預試驗來確定展開劑。感謝閱讀d被分離物質(zhì)的回收2.3.3吸附柱色譜（柱層析）2.3.3.1吸附劑的用量一般為樣品量的～倍。樣品極性較小、難以分離者，吸附劑用量可適感謝閱讀當提高到樣品量的～200倍。據(jù)此可選擇適當規(guī)格的色譜管，實驗室中常用感謝閱讀謝謝閱讀柱色譜用的硅膠及氧化鋁通常以～200目或～目為宜，或甚至直接感謝閱讀采用薄層色譜用規(guī)格，其分離效果可以大大提高。2.3.3.2洗脫劑的選擇以TLC裝柱，濕法裝柱（以起始洗脫劑拌勻裝柱）或干法裝柱2.3.3.3樣品的預處理謝謝閱讀附劑柱上形成狹窄的原始譜帶。精品文檔放心下載劑拌勻，并減壓抽干溶劑或在下加熱揮盡溶劑，置真空干燥器中減壓干燥精品文檔放心下載或直接減壓抽干、研粉后再小心鋪在吸附劑柱上。2.3.3.4洗脫洗脫用溶劑的極性宜逐步增加，跳躍不能太大。感謝閱讀別很大的兩種溶劑組合在一起使用。實驗室中最常應(yīng)用的混合溶劑組合如下：吸附柱色譜常用混合洗脫溶劑謝謝閱讀15歡迎下載。精品文檔2.3.3.5避免發(fā)生化學吸附精品文檔放心下載硅膠、氧化鋁用適當方法處理成中性時，情況會有所緩解。通常在分離酸性（或感謝閱讀謝謝閱讀到防止拖尾、促進分離的效果。2.3.4聚酰胺吸附色譜法感謝閱讀極性物質(zhì)與非極性物質(zhì)均可適用，但特別適合分離酚類、醌類、黃酮類化合物。感謝閱讀2.3.4.1聚酰胺的吸附原理系通過分子中的酰胺羰基與酚類、黃酮類化合物的酚羥基，或酰胺鍵上的感謝閱讀精品文檔放心下載取決于各種化合物與之形成氫鍵的能力。在含水溶劑中大致有以下規(guī)律：①形成氫鍵的基團數(shù)目越多，則吸附能力越強。②成鍵位置對吸附力也有影響。易形成分子內(nèi)氫鍵者，其在聚酰胺上的吸附即精品文檔放心下載相應(yīng)減弱。③分子中芳香化程度高者，則吸附性增強；反之，則減弱。謝謝閱讀謝謝閱讀聚酰胺對溶質(zhì)的氫鍵結(jié)合能力而影響吸附過程。感謝閱讀感謝閱讀精品文檔放心下載謝謝閱讀強從柱上洗脫物質(zhì)的能力。精品文檔放心下載感謝閱讀液中加入堿或酸均可破壞聚酰胺與溶質(zhì)之間的氫鍵締合，也有較強的洗脫能力，氫氧化鈉水溶液等。精品文檔放心下載16歡迎下載。精品文檔各種溶劑在聚酰胺柱上的洗脫能力由弱至強，可大致排列成下列順序：謝謝閱讀水〈甲醇〈丙酮〈氫氧化鈉水溶液〈甲酰胺〈〈尿素精品文檔放心下載水溶液2.3.4.2聚酰胺色譜的應(yīng)用精品文檔放心下載好，加以吸附容量又大，故聚酰胺色譜特別適合于該類化合物的制備分離。感謝閱讀感謝閱讀有廣泛的用途。精品文檔放心下載別適宜。聚酰胺色譜也有薄層色譜和柱色譜兩種方式。2.3.5大孔吸附樹脂精品文檔放心下載感謝閱讀謝謝閱讀一種提取精制的新工藝。⑴大孔吸附樹脂的性質(zhì)—謝謝閱讀和極性兩大類，根據(jù)極性大小還可分為弱極性、中等極性和強極性。精品文檔放心下載常用的為苯乙烯型和丙烯腈型，在樹脂合成時根據(jù)需要引入極性基團則成謝謝閱讀為極性樹脂從而增強吸附能力。大孔吸附樹脂的理化性質(zhì)穩(wěn)定，不溶于酸、堿及有機溶劑。對有機物的選感謝閱讀擇性較好，不受無機鹽類及強離子低分子化合物存在的影響。謝謝閱讀⑵大孔吸附樹脂的分離原理吸附性范德華引力或生成氫鍵的結(jié)果。篩選原理本身多孔性結(jié)構(gòu)所決定。由于吸附和篩選原理，有機化合物根據(jù)吸附力的不同及分子量的大小，在精品文檔放心下載大孔吸附脂上經(jīng)一定的溶劑洗脫而分開。a有機物與無機物的分離17歡迎下載。精品文檔謝謝閱讀謝謝閱讀的提取中，此特征可使提取物中的重金屬和灼燒灰分降至要求的范圍內(nèi)。謝謝閱讀b解離物與非解離物的分離精品文檔放心下載分離。如有機酸在高值成鹽，很難被吸附，因此在堿性條件下可把有機酸分精品文檔放心下載離出來。生物堿在酸性介質(zhì)中可以成鹽，因而能通過調(diào)節(jié)值進行分離。感謝閱讀c一般有機物與強水溶性物質(zhì)的分離謝謝閱讀大的物質(zhì)，這些物質(zhì)容易被樹脂吸附。強水溶性物質(zhì)如低級醇類、低級胺類、糖精品文檔放心下載及多糖、多數(shù)氨基酸、肽類、蛋白質(zhì)等，難被普通吸附樹脂吸附。用普通樹脂可精品文檔放心下載很容易地將此兩類物質(zhì)分離。（）大孔吸附樹脂分離條件的確立、樹脂的選擇精品文檔放心下載脂。精品文檔放心下載和分離條件。、洗脫液的選擇精品文檔放心下載樹脂和極性較大的化合物來說，則用極性較大的洗脫劑為佳。感謝閱讀根據(jù)吸附力強弱選用不同的洗脫劑及濃度。為達到滿意的效果，可通過幾種精品文檔放心下載精品文檔放心下載(4)大孔吸附樹脂在中藥生產(chǎn)中應(yīng)用的優(yōu)點、縮小劑量，提高制劑的內(nèi)在質(zhì)量感謝閱讀減小，有利于制成現(xiàn)代劑型的中藥制劑，并便于質(zhì)量控制。謝謝閱讀、減小產(chǎn)品的吸濕性謝謝閱讀18歡迎下載。精品文檔感謝閱讀定性。、有效去除重金屬謝謝閱讀入國際市場創(chuàng)造了條件。、活性成分的提取分離感謝閱讀（5）大孔吸附樹脂的處理市售大孔吸附樹脂一般含有未聚合的單體、致孔劑（多為長碳鏈的脂肪醇感謝閱讀謝謝閱讀感謝閱讀蒸餾水洗去乙醇。（）大孔吸附樹脂柱色譜樣品一般用水溶液上柱。洗脫時根據(jù)吸附作用強弱不同選用不同濃度的甲謝謝閱讀謝謝閱讀感謝閱讀脂和極性較大的化合物來說，則以用極性較大的溶劑為宜。謝謝閱讀2.4根據(jù)物質(zhì)分子大小差異進行分離、凝膠過濾法、超濾法、透析法、超速離心法生物堿、氨基酸和有機酸、酚類、酮類、皂昔、甾族和萜類化合物以及蛋白質(zhì)、精品文檔放心下載多糖、粘液質(zhì)、鞣質(zhì)、淀粉、纖維素、無機鹽等。相對分子質(zhì)量的分布很寬，從謝謝閱讀幾十到幾百萬道爾頓。故可據(jù)此進行分離。低的成分，藥物有效部位的相對分子質(zhì)量一般較小，僅有幾百到幾千道爾頓。、凝膠過濾法（gelfiltration）精品文檔放心下載19歡迎下載。精品文檔也叫凝膠滲透色譜法（permeationchromatography精品文檔放心下載（molecularsieve(exclusion謝謝閱讀利用分子篩分離物質(zhì)的一種方法。⑴凝膠過濾法分離原理謝謝閱讀感謝閱讀謝謝閱讀到凝膠顆粒內(nèi)部，故通過色譜柱阻阻力增大、流速邊緩，將較晚流出。感謝閱讀感謝閱讀謝謝閱讀出并得到分離。⑵凝膠的種類與性質(zhì)精品文檔放心下載（Bio-GelSepharoseBio-Gel精品文檔放心下載謝謝閱讀①葡聚糖凝膠精品文檔放心下載于交聯(lián)劑的用量及反應(yīng)條件。交聯(lián)劑用量越多，即交聯(lián)度越高，則網(wǎng)孔越緊密，精品文檔放心下載孔徑越小，吸水膨脹越??；交聯(lián)度越低，則網(wǎng)孔越稀疏，孔徑越大，吸水膨脹也謝謝閱讀越大。商品型號即按交聯(lián)度大小分類，并以吸水量多少表示。以SephadexG-25精品文檔放心下載為例，G×10，故G-25示該葡聚糖凝膠吸水量謝謝閱讀為。SephadexG型只適用于在水中應(yīng)用，不同規(guī)格適合不同分子量的物精品文檔放心下載質(zhì)。②羥丙基葡聚糖凝膠為SephadexG精品文檔放心下載丙基以醚鍵形式結(jié)合。與SephadexG比較，SephadexHL-20分子中-OH基總數(shù)雖無改變，但碳原精品文檔放心下載子所占比例卻相對增加。因此與SephadexG僅具親水性不同，不僅可在水中應(yīng)精品文檔放心下載用，也可在極性有機溶劑或它們與水組成的混合溶劑中膨潤使用。精品文檔放心下載20歡迎下載。精品文檔SephadexLH-20除保留有SephadexG-25原有的分子篩特性，可按分子量感謝閱讀精品文檔放心下載譜的效果，適用于不同類型有機化合物的分離。2透析法：透析法是利用小分子物質(zhì)在溶液中可通過半透膜，而大分子物質(zhì)不能通過謝謝閱讀半透膜的性質(zhì)，達到分離的