稀有血型庫的建立及稀有血型血液的臨床供應(yīng)與保障

稀有血型庫的建立及稀有血型血液的臨床供應(yīng)與保障第1頁/共47頁人類紅細(xì)胞血型抗原

(ISBT紅細(xì)胞表面抗原命名委員會2008年發(fā)布)血型系統(tǒng)：30個抗原：270血型集合：6個抗原：12700系列：

低頻率抗原抗原：18901系列：

高頻率抗原抗原：9第2頁/共47頁血型系統(tǒng)、編碼基因及其染色體定位

(ISBT，2008)第3頁/共47頁

建立稀有血型庫的意義稀有血型的臨床供應(yīng)是一個國際性難題。當(dāng)存在血型抗體的稀有血型患者急需輸血而又找不到相應(yīng)的稀有血型血源時，就會有生命危險且難以解決。向臨床提供及時、足量的稀有血型血液成為輸血工作的重點(diǎn)之一。

2006年7月，山東東營一嚴(yán)重貧血患者急需稀有血型血源，經(jīng)過山東省血液中心十余天的艱苦努力，最終從日本引進(jìn)3200毫升稀有血型血液，成功地挽救了病人的生命建立我省自己的稀有血型人群信息資料庫，為稀有血型患者解決輸血難題，具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。第4頁/共47頁

稀有血型的定義人群中<1‰

紅細(xì)胞上缺乏高頻抗原多種抗原陰性，血液中存在多種抗體稀有血型血液:產(chǎn)生了在臨床上有重要意義的同種抗體,難以為患者尋找到配合型的血液稀有血型與其他血型一樣不會對健康人造成任何問題，除非需要輸血第5頁/共47頁

各國對稀有血型的定義美國1/1000英國1/200荷蘭1/100日本1/100-1/1000巴西1/1000德國1/1000法國4/1000以色列1/200中國香港1/600中國1/1000第6頁/共47頁

最具臨床價值的稀有血型高頻率組抗原具有特定表型組合的血型抗原：

-血型系統(tǒng)的無標(biāo)志細(xì)胞Rhnull,Oh

-同時缺失幾個免疫原性很強(qiáng)的血型抗原E-M-JKa--缺失某一血型系中一組或大部分血型抗原D--,D..高頻率抗原組（901系）11個Vel,Lan,Ata,JraEmm,AnWj,MER2,Sda,Duclos,PEL,ABTI,MAM低頻率抗原組（700系）33個By,Chra,Swa……REIT第7頁/共47頁

不同人種中的稀有血型

黑人U-,Fy(a-b-),s-

印地安人RzRz(CCDEE)白種人Kp(b-),Vel-

猶太人Dr(a-)亞洲與太平洋群島Jk(a-b-)

亞洲、西班牙Di(b-)第8頁/共47頁

ISBT最難獲得的稀有血型第9頁/共47頁

中國人稀有血型的資源優(yōu)勢中國人群的遺傳與相關(guān)生物資料只有中國有血型是一種較易入手的研究與發(fā)展的領(lǐng)域稀有血型研究中國有優(yōu)勢：從理論上講：美國日本每發(fā)現(xiàn)1例，中國就有6-7例第10頁/共47頁

建議可在中國人群中首先開展的篩選抗原

篩選項(xiàng)目血型系統(tǒng)稀有抗原(1)血型糖蛋白A缺乏（GPA缺乏）MNSsU系統(tǒng)En(a-)、MKMK(2)血型糖蛋白C缺乏（GPC缺乏）GerbichGe-2,-3,-4(3)H抗原缺失HhOh(4)成人iiIi成人ii(5)KELKellK0

(6)Rh變異型RhRhnull、Rhmod、D－－D··、CCDEE、CCdEE(7)DiegoDiegoDi(a+b-)、Di(a-b-)(8)Jk(a-b-)KiddJk(a-b-)(9)KpbKellKpb－(10)FyDuffyFy(a-b-)、Fy(a-b+)(11)TjaPPP1Pk、pp、Pk(12)LULuLu(a-b-)、Lu(a+b-)第11頁/共47頁

稀有血型者的篩選獻(xiàn)血者篩選計劃有抗體產(chǎn)生的患者及家族96孔U型/V型微量板改良IAT試驗(yàn)120孔梯度板血凝試驗(yàn)分子生物學(xué)篩選試驗(yàn)第12頁/共47頁稀有血型篩選——自動血型儀奧林巴斯PK7300第13頁/共47頁P(yáng)K7300檢測項(xiàng)目檢測項(xiàng)目通道試劑Rh（D）血液型1抗D紅細(xì)胞陰性對照2PBSABO血型正定型3抗A4稀釋抗A5抗B6稀釋抗B反定型7A型血球8B型血球不規(guī)則抗體鹽水法9鹽水法用O型試劑紅細(xì)胞酶法10酶法用O型試劑紅細(xì)胞第14頁/共47頁P(yáng)K7300判定圖像DABO

抗體

稀有血型12345678910A D?

抗體?A D＋

抗體?A D＋

抗體?O D＋

抗體?O D＋

抗體?O D＋

抗體?B D＋

抗體?B D＋

抗體?AB D＋

抗體?AB D＋

抗體?判定第15頁/共47頁改良的間接抗人球蛋白試驗(yàn)第16頁/共47頁

篩選用稀有血型抗血清單克隆抗體?Anti-Rh17?Anti-GPA?Anti-GPC?Anti-Wrb?Anti-Kell?Anti-I?Anti-Lu?Anti-Tn?Anti-Kpb?Anti-H單克隆和多克隆抗體?Anti-Mur?Anti-Dia?Anti-Dib?Anti-Lan?Anti-PP1Pk(Tja)?Anti-Coa第17頁/共47頁

利用稀有血型的某些特性進(jìn)行篩選

SCD(HbS)紅細(xì)胞在低滲時不溶血Jk(a-b-)紅細(xì)胞在2M尿素中不溶血第18頁/共47頁國外稀有血型庫現(xiàn)狀1959年，美國AABB（TheAmericanAssociationofBloodBanks)發(fā)展了稀有獻(xiàn)血者檔案,1998年與美國紅十字會稀有血型登記處合并成為美國稀有血型庫(AmericanRareDonorProgram，ARDP)1965年，法國建立稀有獻(xiàn)血者檢索。同年，英國Bristol國際血型參比實(shí)驗(yàn)室開始建立國際捐血者庫，初期由來自10個國家，300個獻(xiàn)血員組成，目前已擁有26個國家60個血液中心的4000名獻(xiàn)血員1984年，ISBT稀有血型工作組被任命，致力于稀有血型供者血液儲存的國際間合作世界上目前有４個較大的稀有血型庫，分別在英國、美國、荷蘭和日本，其中最大的位于英國Bristol的國際稀有血型庫保存著４０００多名來自世界各國稀有血型獻(xiàn)血員的信息第19頁/共47頁國外稀有血型工作的歷史195019601970198019901959AABBFranceISBTdevelopsWHOIDPISBTWorkingParty1987Japan1970

WHO日本RareBloodTypescenter第20頁/共47頁美國稀有血型庫(ARDP)

介紹-ARC和AABB共同設(shè)立

-1998年11月開始

-81個成員

-數(shù)據(jù)>65000獻(xiàn)血者第21頁/共47頁ARDP成員-AABB或ARC認(rèn)證的IRL

-每年至少提交10個稀有血型獻(xiàn)血者數(shù)據(jù)每年至少提供15個單位稀有血型血液大量篩選高頻抗原陰性的獻(xiàn)血者對稀有血型者進(jìn)行家族研究共享抗血清第22頁/共47頁高頻抗原陰性的稀有血型獻(xiàn)血者1/1000，所有ABO血型都可以

對常見抗原進(jìn)行定型(不包括M,N,P1,Lea,Leb),最好用兩種抗血清如有要求，國家血型參比實(shí)驗(yàn)室(NRLBGS)可對高頻抗原做確證試驗(yàn)第23頁/共47頁多種常見抗原陰性的獻(xiàn)血者只有O和A型可接受

必須用兩種抗血清鑒定抗原獻(xiàn)血者須是：

R1,R2,R0或rr且K:-1且Fy(a-)或

Fy(b-)且Jk(a-)或Jk(b-)且S-或s-

或

R1,R2或rr且K:-1且Fy(a-b-)第24頁/共47頁如果你是成員-填寫病人申請單并傳真至ARDP位于Penn-Jersey工作人員-Penn-Jersey工作人員傳真至:數(shù)據(jù)庫中存在相應(yīng)稀有血型血液的各成員

-ARDP人員接到回應(yīng)后，將給你打電話或發(fā)傳真-如果無法確定，將傳真發(fā)至所有成員啟動招募

MMA試驗(yàn)自身獻(xiàn)血同胞檢測國際檢索如何進(jìn)入ARDP第25頁/共47頁如何進(jìn)入ARDP如果你不是成員：

-通過一個ARDP機(jī)構(gòu)(入口)進(jìn)入系統(tǒng)

-該ARDP機(jī)構(gòu)將要求你的抗體鑒定文件

-該ARDP機(jī)構(gòu)進(jìn)入傳真程序第26頁/共47頁ARDP

IgA缺乏獻(xiàn)血者：屬稀有血型對于缺乏IgA并有抗IgA抗體的病人，需提供：-紅細(xì)胞：洗滌-血漿：無IgA血漿-血小板：無IgA血小板

第27頁/共47頁2007年ARDP需求最多的高頻抗原陰性

(n=537)

D+U-86(16.0%)Lu(b-)39(7.3%)Js(b-)59(10.9%)Vel-31(5.8%)Yt(a-)57(10.6%)E-hrB-25(4.6%)K:-245(8.4%)D-U-24(4.5%)稀有Rh39(7.3%)Kp(b-)16(3.0%)第28頁/共47頁

2007年未滿足的高頻抗原陰性

100%1/1Sc:-1,1/1K:-2andVel-,1/1At(a-)50%2/4Cr(a-),1/2K0,3/6Lan-44.4%4/9Do(b-)37.5%3/8Hy-33.3%1/3Jr(a-),1/3Jo(a-)30%3/10Ge:-214.2%1/7Do(a-),1/7Di(b-),1/7Ge:-2,-310-11%1/9E-hrs-,6/57Yt(a-),4/39rareRh8%2/24U-D-,2/25E-hrB-,1/12Jk(a-b-)3-6%1/31Vel-,1/16Kp(b-)2-3%1/39Lu(b-),2/86U-D+第29頁/共47頁美國稀有血型庫（ARDP）需求數(shù)據(jù)

（2003-2008）

需求數(shù)量完全滿足%部分滿足%未滿足%200367086%4%10%200466884%4%12%200569385%8%7%200680686%9%6%200779588%5%7%200895188%5%7%

ARDP6年需求平均值：763例/年

第30頁/共47頁2007年ARDP需求最多的稀有血型抗原

(n=537)

D+U-86(16.0%)Lu(b-)39(7.3%)Js(b-)59(10.9%)Vel-31(5.8%)Yt(a-)57(10.6%)E-hrB-25(4.6%)K:-245(8.4%)D-U-24(4.5%)稀有Rh39(7.3%)Kp(b-)16(3.0%)第31頁/共47頁ARDP稀有血型需求的滿足率第32頁/共47頁33ARDP運(yùn)行流程第33頁/共47頁日本稀有血型登記獻(xiàn)血者（I群）稀有血型RhD+RhD-Bombay50En(a–)20MiV/MiV30Nsat/Nsat10S–s–U–11Pk40Rhnull－6Rhmod－7Kp(a–b–)10k–30K:–1420McLeod150Fy(a–b–)40截至2009.3.31稀有血型RhD+RhD-I–190Ge–130Lan–110Gy(a–)50Ok(a–)160JMH–110para-

Bombay830p281–D–99－Lu(a–b–)903Ko992Jk(a–b–)533第34頁/共47頁日本稀有血型登記獻(xiàn)血者（Ⅱ群）稀有血液型RhD+RhD-Fy(a-)2,704486Di(b-)2,18798Jr(a-)1,64939s-2861082005.3I群截止2009.3.31第35頁/共47頁日本Ⅰ群稀有血型血液供給量

(1999-2008)單位平均第36頁/共47頁日本Ⅱ群稀有血型血液供給量

(1999-2008)平均第37頁/共47頁中國稀有血型工作概況

（2008年ISBT會議）在中國目前已發(fā)現(xiàn)的稀有血型OHCDE/CDECdE/CdEcwD-/cwD--D-/-D-RhnullRh:-51Rh:33pPkTja-KoiiJk(a-b-)Lu(a-b-)Fy(a-b+)Vel-Lan-Di(a+b-)Mur+第38頁/共47頁國內(nèi)稀有血型庫現(xiàn)狀-上海血液中心2005-2008年共篩選取126萬獻(xiàn)血者建立了單克隆抗體制備系統(tǒng)5個轉(zhuǎn)基因細(xì)胞模型、2個能夠分泌抗GPA和抗I的細(xì)胞模型1個冰凍儲存庫獲得1300名各類稀有血型獻(xiàn)血者稀有血型包括：Rhnull,Rh:-33,K0,Lan-,Vel-,Tja-,Lub-,Coa-,Jk(a-b-),Di(a+b-)andPara-Bombay.第39頁/共47頁國內(nèi)稀有血型庫現(xiàn)狀-廣州番禺地區(qū)稀有表型篩選人數(shù)陰性數(shù)陽性數(shù)頻率（%）抗-MurMur+293272217.17抗HH-153401533730.019抗LubLub-4204420220.048抗-TjaTja-3151315100抗-MNM-N-111361113600抗-GPAEna-141521415200抗-GPCGe-141521415200抗-RhnullRhnull111361113600抗-KellK0121891218900抗-WrbWrb-121891218900抗-iI42040420402mol/L尿素Jk(a-b-)5003450024100.02第40頁/共47頁山東省稀有血型庫的建設(shè)構(gòu)想組織結(jié)構(gòu)網(wǎng)絡(luò)山東省稀有血型庫：工作委員會山東省稀有血型庫：專家委員會山東省稀有血型庫：信息資料庫山東省稀有血型庫：實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)第41頁/共47頁主要研究內(nèi)容——稀有血型庫工作流程職責(zé)分工：血型參比研究室：負(fù)責(zé)初篩為稀有血型的確認(rèn)、稀有血型人群信息錄入、信息資料庫管理檢驗(yàn)科：獻(xiàn)血者稀有血型抗原初篩體采科：稀有血型獻(xiàn)血者檔案登記，稀有血型獻(xiàn)血者應(yīng)急獻(xiàn)血招募成分科：稀有血型血液的冰凍保存及解凍使用供血科：稀有血型血液的預(yù)約需求及已冰凍稀有血型血液的監(jiān)控管理信息中心：開發(fā)稀有血型信息資料庫計算機(jī)管理軟件，用于稀有血型獻(xiàn)血者的采供及臨床使用信息管理獻(xiàn)血辦：統(tǒng)計全省稀有血型獻(xiàn)血者信息，建立全省統(tǒng)一的稀有血型供血者信息