顯微鏡油鏡的使用和細菌形態(tài)的觀察

顯微鏡油鏡的使用和細菌形態(tài)的觀察第1頁，共18頁，2023年，2月20日，星期六一、實驗目的了解顯微鏡的基本構造和使用方法掌握油鏡的原理和使用方法了解細菌的三種基本形態(tài)第2頁，共18頁，2023年，2月20日，星期六二、顯微鏡的基本構造

顯微鏡的構造機械裝置光學系統(tǒng)鏡座載物臺鏡臂標本夾和標本移動尺粗調螺旋和細調螺旋聚光鏡升降螺旋接目鏡接物鏡及鏡頭轉換器聚光鏡虹彩光圈電光源第3頁，共18頁，2023年，2月20日，星期六普通光學顯微鏡基本構造第4頁，共18頁，2023年，2月20日，星期六1、增加照明亮度2、增加顯微鏡的分辨率三、實驗原理δ﹦λ2NA

第5頁，共18頁，2023年，2月20日，星期六油鏡使用的原理

油鏡，即油浸物鏡。當光線由反光鏡通過玻片與鏡頭之間的空氣時，由于空氣與玻片的密度不同，使光線受到曲折，發(fā)生散射，降低了視野的照明度。若中間的介質是一層油（其折射率與玻片的相近），則幾乎不發(fā)生折射，增加了視野的進光量，從而使物象更加清晰。第6頁，共18頁，2023年，2月20日，星期六顯微鏡的放大倍數(shù)、分辨率和數(shù)值孔徑

1.放大倍數(shù)=物鏡放大倍數(shù)×目鏡放大倍數(shù)2.分辨率：是表示顯微鏡辨析物體（兩端）兩點之間距離的能力，可用公式表示為：δ=0.61×λ/N.A

式中：

δ：物鏡分辨出物體兩點間的最短距離。：可見光的波長（平均0.55m)N.A:數(shù)值孔徑3.數(shù)值孔徑(N.A)=n×sinα/2其意為玻片和物鏡之間的折射率（n）乘以光線投射到物鏡上的最大夾角（a）的一半的正弦。第7頁，共18頁，2023年，2月20日，星期六四、實驗器材1、細菌三態(tài)裝片2、顯微鏡3、香柏油4、擦鏡紙等第8頁，共18頁，2023年，2月20日，星期六五、操作步驟1.放置好顯微鏡2.調節(jié)光源3.低倍鏡觀察4.高倍鏡觀察5.油鏡觀察6.清潔和還原顯微鏡第9頁，共18頁，2023年，2月20日，星期六1.放置好顯微鏡

置顯微鏡于平穩(wěn)的實驗臺上，鏡座距實驗臺邊沿約為3~4cm。鏡檢者姿勢要端正。（取、放顯微鏡時應一手握住鏡臂，一手托住底座，使顯微鏡保持直立、平穩(wěn)。切忌用單手拎提；且不論使用單筒顯微鏡或雙筒顯微鏡均應雙眼同時睜開觀察，以減少眼睛疲勞，也便于邊觀察邊繪圖或紀錄。2.調節(jié)好光源接通電源，打開光源。第10頁，共18頁，2023年，2月20日，星期六3.低倍鏡的觀察。將標本片放在載物臺上，用標本夾夾住，調節(jié)標本移動螺旋，使觀察的目的物處于物鏡的正下方。調節(jié)粗調螺旋，使物鏡（10×）與標本靠近，眼睛在測向注視物鏡，防止物鏡和載玻片相碰。張開雙眼向目鏡里觀察，如果見到目的物，但不十分清楚，可用細準焦螺旋調節(jié)，至目的物清晰為止。通過玻片夾推進器慢慢移動玻片，認真觀察標本各部分，找到合適的目的物，仔細觀察并記錄所觀察到的結果。第11頁，共18頁，2023年，2月20日，星期六4.高倍鏡的觀察使用高倍鏡前，必須先用低倍鏡觀察，發(fā)現(xiàn)目的物后將它移至視野正中處。旋動轉換器換高倍鏡。如果高倍鏡觸及載玻片立即停止旋動，這說明原來低倍鏡并沒有調準，目的物并沒有真正找到，必須用低倍鏡重新調節(jié)。如果高倍鏡下觀察目的物有點模糊，調節(jié)細準焦螺旋，直到視野清晰。調節(jié)細準焦螺旋時要注意旋轉方向與載物臺上升或下降的關系，防止鏡頭與載玻片強力接觸，損壞鏡頭或載玻片。第12頁，共18頁，2023年，2月20日，星期六5.油鏡的觀察如果用高倍鏡目的物未能看清，可用油鏡。先用低倍鏡和高倍鏡檢查標本片，將目的物移到視野正中。下降載物臺，在載玻片上滴一滴香柏油，將油鏡移至正中，緩慢調節(jié)粗調螺旋使油鏡頭浸沒在油中，剛好貼近載玻片。然后再用細準焦螺旋微微向上調（切忌用粗準焦螺旋）即可。（應特別注意不要在升降載物臺時用力過猛，或者調焦時誤將粗調節(jié)螺旋向反方向轉動而損壞鏡頭及載玻片）第13頁，共18頁，2023年，2月20日，星期六6.清潔顯微鏡和還原顯微鏡.觀察結束后，調節(jié)光源到最小再關掉電源開關。調節(jié)粗調螺旋，使載物臺下降到最低，取下玻片。.

把油鏡轉離光軸，擦鏡紙擦1～2次，去油，用二甲苯滴濕的擦鏡紙擦2次，再用擦鏡紙擦1～2次，順鏡頭直徑方向擦，不要圓周擦和來回擦。擦干凈鏡體，罩上防塵罩，然后放回原處。.用擦油鏡頭的方法擦玻片。

第14頁，共18頁，2023年，2月20日，星期六六、顯微結構圖的繪制

嚴格按光學顯微鏡的操作方法，依低倍、高倍及油鏡的次序觀察細菌示范片，并繪出其形態(tài)圖。生物繪圖中繪出的圖要清楚，并正確的表示出形態(tài)構造的特點，繪圖注意事項如下：(1)繪圖要用黑色硬鉛筆，不要用軟鉛筆或有色鉛筆，一般用2H鉛筆為宜。(2)圖的大小及在紙上分布的位置要適當。一般畫在靠近中央稍偏左方，并向右方引出注明各部名稱的線條。各引出線條要整齊平列，各部名稱寫在線條右邊第15頁，共18頁，2023年，2月20日，星期六(3)畫圖時先用輕淡小點或輕線條畫出輪廓，再依照輪廓一筆畫出與物象相符的線條。線條要清晰，比例要準確。較長的線條要向順手的方向運筆，或把紙轉動再畫。同一線條粗細相同，中間不要有斷線或開叉痕跡，線條也不要涂抹。(4)繪出的圖要正確，觀察時要把混雜物、破損、重疊等現(xiàn)象區(qū)別清楚，不要把這些現(xiàn)象繪上。(5)圖的明暗及濃淡，應用細點表示，不要采用涂抹方法。點細點時，要點成圓點，不要點成小撇。(6)整個圖要美觀、整潔，還要特別注意準確性。第16頁，共18頁，2023年，2月20日，星期六七、思考題1、使用油鏡時，為什么要先用低倍鏡觀察？2、繪出