微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制

微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制

溫州醫(yī)學(xué)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院

溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院周鐵麗第一頁(yè)，共三十頁(yè)。微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制質(zhì)量控制（Qualitycontrol）

是臨床微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室為了保證檢驗(yàn)結(jié)果實(shí)事求是地反映客觀存在而建立的操作程序體系。室內(nèi)質(zhì)量控制

室內(nèi)質(zhì)量控制是由實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部制定并實(shí)施的，是質(zhì)量保證的核心和基礎(chǔ)。室間質(zhì)量控制評(píng)價(jià)

室間質(zhì)量控制評(píng)價(jià)是由實(shí)驗(yàn)室外部的組織或機(jī)構(gòu)對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行的質(zhì)量評(píng)價(jià)。

第二頁(yè)，共三十頁(yè)。檢驗(yàn)前的質(zhì)量保證

檢驗(yàn)前程序：又叫分析前期。

指從臨床醫(yī)生開(kāi)醫(yī)囑開(kāi)始，到分析檢驗(yàn)程序啟動(dòng)時(shí)終止的步驟。包括

檢驗(yàn)申請(qǐng)標(biāo)本的采集、運(yùn)送與接收第三頁(yè)，共三十頁(yè)。微生物檢驗(yàn)中的質(zhì)量保證人員的組織與管理規(guī)范的操作規(guī)程試劑培養(yǎng)基設(shè)備檢驗(yàn)過(guò)程第四頁(yè)，共三十頁(yè)。試劑、培養(yǎng)基的質(zhì)量控制

有效期外觀性能測(cè)試保存第五頁(yè)，共三十頁(yè)。各種試劑的監(jiān)控菌種試劑“x+v”因子試劑條流感嗜血桿菌副流感嗜血桿菌嗜沫嗜血桿菌

硝酸鹽還原試劑大腸埃希菌醋酸鈣不動(dòng)桿菌每批，以后每次靛基質(zhì)試劑大腸埃希菌產(chǎn)氣腸桿菌每批，以后每天甲基紅試劑大腸埃希菌產(chǎn)氣腸桿菌每批，以后每周V-P試劑產(chǎn)氣腸桿菌大腸埃希菌每批，以后每周第六頁(yè)，共三十頁(yè)。常用試驗(yàn)、染液的推薦菌株

試驗(yàn)名稱陽(yáng)性對(duì)照菌陰性對(duì)照菌血漿凝固酶試驗(yàn)金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌觸酶試驗(yàn)金黃色葡萄球菌肺炎鏈球菌氧化酶試驗(yàn)銅綠假單胞菌大腸埃希菌桿菌肽試驗(yàn)A群鏈球菌B群鏈球菌奧普托欣試驗(yàn)肺炎鏈球菌草綠色鏈球菌革蘭染液金黃色葡萄球菌大腸埃希菌抗酸染液結(jié)核分枝桿菌混合非抗酸菌第七頁(yè)，共三十頁(yè)。測(cè)定各種培養(yǎng)基性能的菌種

培養(yǎng)基質(zhì)控菌株判定標(biāo)準(zhǔn)羊血瓊脂平板

金黃色葡萄球菌ATCC25923生長(zhǎng)

生長(zhǎng)試驗(yàn)

大腸埃希菌ATCC25922生長(zhǎng)溶血反應(yīng)

肺炎鏈球菌ATCC19615生長(zhǎng)，α溶血化膿性鏈球菌ATCC6305生長(zhǎng)，β溶血

桿菌肽敏感（紙片法）化膿性鏈球菌ATCC6305>10mm，敏感B群鏈球菌<10mm，耐藥Optochin敏感（紙片法）

肺炎鏈球菌15∽18mm，敏感涎鏈球菌<15mm，耐藥第八頁(yè)，共三十頁(yè)。測(cè)定各種培養(yǎng)基性能的菌種巧克平板生長(zhǎng)試驗(yàn)淋病奈瑟菌腦膜炎奈瑟菌流感嗜血桿菌肺炎鏈球菌生長(zhǎng)SS平板鼠傷寒沙門(mén)菌傷寒沙門(mén)菌福志賀菌大腸埃希菌

腸球菌生長(zhǎng)，黑色菌落中心生長(zhǎng)，無(wú)色透明菌落生長(zhǎng)，無(wú)色透明菌落部分抑制生長(zhǎng)，紅色混濁菌落部分抑制生長(zhǎng)第九頁(yè)，共三十頁(yè)。測(cè)定各種培養(yǎng)基性能的菌種麥康凱平板大腸埃希菌生長(zhǎng)，紅色混濁菌落傷寒沙門(mén)菌生長(zhǎng)，無(wú)色透明菌落中國(guó)藍(lán)瓊脂大腸埃希菌生長(zhǎng)，藍(lán)色菌落傷寒沙門(mén)菌生長(zhǎng)，無(wú)色菌落營(yíng)養(yǎng)瓊脂金黃色葡萄球菌大量生長(zhǎng)福志賀菌大量生長(zhǎng)厭氧血平板脆弱擬桿菌生長(zhǎng)產(chǎn)氣莢膜梭菌生長(zhǎng)，β溶血堿性蛋白胨水霍亂弧菌大量生長(zhǎng)大腸埃希菌抑制生長(zhǎng)第十頁(yè)，共三十頁(yè)。測(cè)定各種培養(yǎng)基性能的菌種彎曲菌瓊脂空腸彎曲菌生長(zhǎng)大腸埃希菌

部分抑制TCBS平板霍亂弧菌生長(zhǎng)，黃色菌落副溶血性弧菌

生長(zhǎng)，藍(lán)綠色菌落沙保弱瓊脂白色念珠菌生長(zhǎng)大腸埃希菌

部分或完全抑制需氧血液增菌液肺炎鏈球菌生長(zhǎng)化膿性鏈球菌銅綠假單胞菌白色念珠菌厭氧血液增菌液脆弱擬桿菌

生長(zhǎng)第十一頁(yè)，共三十頁(yè)。各種鑒別培養(yǎng)基的測(cè)試菌種培養(yǎng)基陽(yáng)性對(duì)照菌陰性對(duì)照菌賴氨酸脫羧酶遲緩愛(ài)德華菌

費(fèi)枸櫞酸桿菌鳥(niǎo)氨酸脫羧酶產(chǎn)氣腸桿菌

費(fèi)枸櫞酸桿菌精氨酸雙水解酶陰溝腸桿菌

普通變形桿菌蛋白胨水（靛基質(zhì)）大腸埃希菌

陰溝腸桿菌第十二頁(yè)，共三十頁(yè)。各種鑒別培養(yǎng)基的測(cè)試菌種

培養(yǎng)基陽(yáng)性對(duì)照菌陰性對(duì)照菌

MR

大腸埃希菌

陰溝腸桿菌

V-P

陰溝腸桿菌

大腸埃希菌枸櫞酸鹽（西蒙氏）產(chǎn)氣腸桿菌

遲緩愛(ài)德華菌苯丙氨酸脫氨酶

雷極變形桿菌

費(fèi)枸櫞酸桿菌O-F試驗(yàn)管

銅綠假單胞菌（氧化型）洛菲不動(dòng)桿菌（不利用）

大腸埃希菌（發(fā)酵型）硝酸鹽還原

大腸埃希菌

洛菲不動(dòng)桿菌第十三頁(yè)，共三十頁(yè)。各種鑒別培養(yǎng)基的測(cè)試菌種培養(yǎng)基陽(yáng)性對(duì)照菌陰性對(duì)照菌膽汁-七葉苷糞腸球菌

化膿性鏈球菌脫氧核糖核酸瓊脂粘質(zhì)沙雷菌

表皮葡萄球菌氰化鉀肉湯產(chǎn)氣腸桿菌

遲緩愛(ài)德華菌丙二酸鹽產(chǎn)氣腸桿菌

遲緩愛(ài)德華菌尿素瓊脂雷極變形桿菌（快）大腸埃希菌

肺炎克雷白菌（慢）半固體瓊脂動(dòng)力試驗(yàn)大腸埃希菌

肺炎克雷白菌第十四頁(yè)，共三十頁(yè)。儀器設(shè)備的質(zhì)量控制設(shè)備控制范圍備注高壓滅菌器121℃

定期用嗜熱芽胞桿菌測(cè)試（每月）孵育箱35±1℃

定期加水水浴箱37±0.5℃

定期加水、清潔內(nèi)壁冰箱4±2℃

定期清潔內(nèi)部CO2箱5-10%

淋病奈瑟氏菌檢測(cè)效果厭氧箱美蘭或銅綠假單胞菌測(cè)試厭氧條件生物安全柜更換濾網(wǎng)，紫外線消毒性能檢測(cè)（每三個(gè)月）血液培養(yǎng)儀培養(yǎng)瓶進(jìn)行少量生長(zhǎng)試驗(yàn)；瓶位定期校正微生物鑒定儀探測(cè)部位定期清潔；鑒定卡、條、板測(cè)試

第十五頁(yè)，共三十頁(yè)。標(biāo)本檢驗(yàn)過(guò)程的質(zhì)量控制選擇合理的檢驗(yàn)項(xiàng)目選擇適當(dāng)?shù)臉?biāo)本正確書(shū)寫(xiě)檢驗(yàn)申清單第十六頁(yè)，共三十頁(yè)。直接診斷

直接發(fā)現(xiàn)病原體

---膿、腦脊液、胸腹水等無(wú)菌部位標(biāo)本確定標(biāo)本是否合格，并推測(cè)病原體

---痰液標(biāo)本發(fā)現(xiàn)病原體并進(jìn)行初步計(jì)數(shù)

---尿液標(biāo)本為培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法的選擇提供信息第十七頁(yè)，共三十頁(yè)。病原菌的分離培養(yǎng)

呼吸道標(biāo)本

接種血瓊脂平板、巧克力平板、麥康復(fù)凱平板和沙保弱瓊脂，并將巧克力血平板置5%-10%CO235℃環(huán)境中培養(yǎng)。糞便標(biāo)本

接種SS平板、麥康凱平板或中國(guó)藍(lán)平板血液培養(yǎng)

在血液增菌培養(yǎng)期間，應(yīng)至少在24h∽48h盲目翻種一次，以后有可疑細(xì)菌生長(zhǎng)即刻翻種，盡早發(fā)現(xiàn)病原菌。第十八頁(yè)，共三十頁(yè)。病原菌的鑒定

菌落形態(tài)觀察--涂片染色鏡檢--生化鑒定--血清學(xué)試驗(yàn)

---氧化酶試驗(yàn)不應(yīng)在糖類發(fā)酵選擇性平板上進(jìn)行，以免假陰性結(jié)果出現(xiàn)。---在腸道選擇性平板上應(yīng)挑取菌落進(jìn)行生化反應(yīng)，生化反應(yīng)符合，血清學(xué)凝集陽(yáng)性者可確認(rèn)報(bào)告。

不能從選擇性平板上挑取菌落進(jìn)行血清學(xué)凝集，會(huì)因?yàn)榻徊婵乖拇嬖诨蚩乖膩G失而導(dǎo)致假陽(yáng)性或假陰性。每次血清凝集試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)用生理鹽水作對(duì)照。防止粗糙型菌落造成的假凝集第十九頁(yè)，共三十頁(yè)。藥敏試驗(yàn)的質(zhì)量控制要點(diǎn)培養(yǎng)基紙片菌量操作孵育：時(shí)間、溫度、平板放置結(jié)果判斷質(zhì)控菌株第二十頁(yè)，共三十頁(yè)。紙片擴(kuò)散法的質(zhì)控菌株金黃色葡萄球菌ATCC25923大腸埃希菌ATCC25922大腸埃希菌ATCC35218（用于β內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合制劑）銅綠假單胞菌ATCC27853糞腸球菌ATCC29212流感嗜血桿菌（用于HTM培養(yǎng)基）ATCC49247、49766淋病奈瑟菌（用于GC瓊脂）ATCC49226肺炎鏈球菌（用于5%羊血MH瓊脂）ATCC49619第二十一頁(yè)，共三十頁(yè)。失控的常見(jiàn)的原因---質(zhì)控結(jié)果記錄錯(cuò)誤---量取抑菌環(huán)直徑時(shí)讀數(shù)錯(cuò)誤---標(biāo)準(zhǔn)菌株被污染或其它改變---接種的菌懸液太濃或過(guò)淡---0.5管麥?zhǔn)蠞岫葮?biāo)準(zhǔn)管未搖勻或已過(guò)期失效---孵育溫度或氣體環(huán)境不正確---MH培養(yǎng)基質(zhì)量有無(wú)問(wèn)題---含藥紙片失效第二十二頁(yè)，共三十頁(yè)。檢驗(yàn)后的質(zhì)量保證檢驗(yàn)后程序：也稱分析后期。

指檢驗(yàn)后全部過(guò)程。包括檢驗(yàn)結(jié)果的評(píng)審與報(bào)告

---報(bào)告時(shí)間、分級(jí)報(bào)告、危急值報(bào)告及記錄

標(biāo)本的處置

---感染性廢棄物

第二十三頁(yè)，共三十頁(yè)。菌種保存方法培養(yǎng)基保存法快速冷凍法冷凍干燥法

第二十四頁(yè)，共三十頁(yè)。菌種保管定期轉(zhuǎn)種制備記錄卡專人負(fù)責(zé)第二十五頁(yè)，共三十頁(yè)。室內(nèi)全面質(zhì)量控制全面實(shí)施各項(xiàng)質(zhì)量控制內(nèi)容對(duì)人員要及時(shí)進(jìn)行培訓(xùn)和考核嚴(yán)格審核標(biāo)本和結(jié)果報(bào)告在日常標(biāo)本中摻入模擬標(biāo)本，進(jìn)行盲點(diǎn)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)誤差，應(yīng)及時(shí)找出原因，進(jìn)行改進(jìn)

第二十六頁(yè)，共三十頁(yè)。室間質(zhì)量控制的實(shí)施組織單位：各級(jí)臨床檢驗(yàn)中心和參考實(shí)驗(yàn)室工作任務(wù)：定期或不定期地進(jìn)行熟練程度考核和盲點(diǎn)試驗(yàn)檢查。定期或不定期地舉辦各種學(xué)習(xí)班，提高各級(jí)技術(shù)人員的技術(shù)水平，學(xué)習(xí)新的知識(shí)。提供或督促有關(guān)部門(mén)提供合格的標(biāo)準(zhǔn)化的試劑、抗血清、培養(yǎng)基等實(shí)驗(yàn)必需品。

第二十七頁(yè)，共三十頁(yè)。盲點(diǎn)質(zhì)量控制

---qualitycontrolblindunknown方法

質(zhì)控管理機(jī)構(gòu)將模擬標(biāo)本混入臨床普通標(biāo)本，送入實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行常規(guī)測(cè)定。

評(píng)價(jià)

質(zhì)控管理機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)收回和評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，根據(jù)參加的規(guī)模和鑒定的正確數(shù)，計(jì)算鑒定正確率及所有參加實(shí)驗(yàn)室的平均分，以及每個(gè)實(shí)驗(yàn)室的得分。

第二十八頁(yè)，共三十頁(yè)。謝謝第二十九頁(yè)，共三十頁(yè)。內(nèi)容總結(jié)微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制。包括。各種試劑的監(jiān)控菌種試劑。桿菌肽敏感（紙片法）化膿性