潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證

潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第1頁(yè)2一、潔凈廠房概述藥片是特殊商品，除了必須嚴(yán)格控制藥片成份以外，還必須控制微生物量。伴隨科學(xué)技術(shù)深化，發(fā)覺(jué)細(xì)菌等微生物在空氣中難以存活，它必須依附在塵埃上才能存活?？茖W(xué)家和工程師依據(jù)微生物生存特征，研制不一樣類型過(guò)濾器，經(jīng)過(guò)多道過(guò)濾，最終依據(jù)藥片生存要求，能夠到達(dá)100,000級(jí)，10,000級(jí)和100級(jí)潔凈度要求。同時(shí)，經(jīng)過(guò)冷凍除濕或氯化鈣轉(zhuǎn)輪除濕方法，到達(dá)生產(chǎn)車間舒適或低濕要求，溫度也可經(jīng)過(guò)換熱器控制。潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第2頁(yè)3一、潔凈廠房 藥品生產(chǎn)企業(yè)必須有整齊生產(chǎn)環(huán)境。 廠區(qū)地面、路面及運(yùn)輸?shù)炔粦?yīng)對(duì)藥品生產(chǎn)造成污染。 生產(chǎn)、行政、生活和輔助區(qū)總體布置應(yīng)合理，不得相互防礙。相鄰廠房之間生產(chǎn)操作不得相互防礙。在恪守國(guó)家總體工業(yè)規(guī)劃同時(shí)，選擇大氣含塵、含菌濃度低、無(wú)有害氣體，自然環(huán)境好區(qū)域。平面布置合理，人流、物流分開(kāi)，防止交叉污染。廠區(qū)綠化盡可能各種草坪，少種花粉類植物。

潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第3頁(yè)41-1 潔凈廠房設(shè)計(jì) 藥廠總平面布置和工藝布局總設(shè)計(jì) 整齊生產(chǎn)環(huán)境，人流物流分開(kāi)，相互不受影響，不會(huì)造成交叉污染。 潔凈廠房設(shè)計(jì)方法 －全封閉全空調(diào)，人流物流放開(kāi) －潔凈度經(jīng)過(guò)緩沖逐層提升，到達(dá)無(wú)菌要求。100級(jí)無(wú)菌室設(shè)計(jì)，當(dāng)前國(guó)際上普通采取比較經(jīng)濟(jì)做法：經(jīng)過(guò)緩沖到達(dá)10萬(wàn)級(jí)，再經(jīng)過(guò)緩沖到達(dá)1萬(wàn)級(jí)，最終在1萬(wàn)級(jí)房間局部加層流罩到達(dá)100級(jí)。潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第4頁(yè)51-2 工藝布局 按照生產(chǎn)工藝流程及所要求空氣潔凈等級(jí)進(jìn)行合理布局，同一廠房?jī)?nèi)生產(chǎn)操作不能相互影響，不一樣潔凈度區(qū)域之間人員和物流出入，要設(shè)緩沖區(qū)，預(yù)防交叉污染。 取樣室（可設(shè)在儲(chǔ)備區(qū)）、稱量室、備料間空氣潔凈度與生產(chǎn)要求一致。 足夠大中間儲(chǔ)備室、設(shè)備清洗和儲(chǔ)存、衛(wèi)生設(shè)備清洗和儲(chǔ)存。 生產(chǎn)區(qū)和包裝區(qū)分開(kāi)，更衣室分開(kāi)。 不一樣潔凈度工作服分別清洗、整理。 取樣室、中心稱量室，采取層流設(shè)計(jì)。潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第5頁(yè)61-3 潔凈廠房建筑要求 潔凈室（區(qū)）內(nèi)表面應(yīng)平整光滑、無(wú)裂縫、接口嚴(yán)密、無(wú)顆粒物脫落，并能耐受清洗和消毒。墻壁與地面交界處宜成弧形或采取其它辦法，以降低灰塵積聚和便于清潔。 潔凈室（區(qū)）內(nèi)各種管道、燈具、風(fēng)口以及其它公用設(shè)施，在設(shè)計(jì)和安裝時(shí)，應(yīng)考慮使用中防止出現(xiàn)不易清潔部位。與墻壁或天棚連接部均應(yīng)密封。 潔凈室（區(qū)）應(yīng)依據(jù)生產(chǎn)要求提供足夠照明。主要工作室照度宜為300勒克斯，對(duì)照度有特殊要求生產(chǎn)部位可設(shè)置局部照明。廠房應(yīng)有緊急照明設(shè)施。 潔凈室（區(qū)）安裝水池、地漏不得對(duì)藥品產(chǎn)生污染。100級(jí)潔凈（區(qū)）不得設(shè)置地漏。潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第6頁(yè)71-4 空調(diào)設(shè)計(jì)1-4-1 空氣平衡和流向 空氣從潔凈室流向次潔凈室。 生產(chǎn)區(qū)對(duì)外保持正壓（>10PA） 活性物質(zhì)生產(chǎn)室保持負(fù)壓。易產(chǎn)生粉塵車間為負(fù)壓。 開(kāi)口工段為正壓。（或局部層流） 潔凈設(shè)備間為負(fù)壓。 潔凈房間對(duì)隔層和機(jī)房為正壓。 生產(chǎn)車間內(nèi)辦公室保持正壓。潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第7頁(yè)81-4 空調(diào)設(shè)計(jì)1-4-2 氣體組織 包裝車間、更衣室、走廊和浴室采取上送上回。 生產(chǎn)車間、灌裝車間、儲(chǔ)備室采取上送下回。 潔凈車間不得采取走廊回風(fēng)。潔凈區(qū)無(wú)法采取上送下回時(shí)，可采取側(cè)送側(cè)回，但要注意氣流是否流過(guò)生產(chǎn)操作面。 風(fēng)口設(shè)置時(shí)，注意氣體流能保護(hù)操作面。潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第8頁(yè)91-5 環(huán)境系統(tǒng)驗(yàn)證1-5-1 環(huán)境控制確認(rèn) 確認(rèn)100級(jí)無(wú)菌區(qū)，10,000級(jí)和100,000級(jí)潔凈區(qū)，輔助潔凈區(qū)室塵埃粒子控制。 安裝確認(rèn) －環(huán)境控制區(qū)域?qū)?yīng)被同意設(shè)計(jì)圖及相關(guān)流向圖（空氣流向、壓差、溫度、濕度、人流、物流）。 －系統(tǒng)描述和設(shè)計(jì)特征。 －相關(guān)文件有：DOP測(cè)試、完整性試驗(yàn)、環(huán)境參數(shù)文件 儀表校驗(yàn)文件、操作手冊(cè)和標(biāo)準(zhǔn)操作法。潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第9頁(yè)101-5 環(huán)境系統(tǒng)驗(yàn)證 運(yùn)行確認(rèn) －確認(rèn)整個(gè)環(huán)境調(diào)試、運(yùn)行時(shí)到達(dá)設(shè)計(jì)要求。搜集調(diào)試運(yùn)行時(shí)數(shù)據(jù)（溫度、相對(duì)濕度、風(fēng)速、換氣次數(shù)、風(fēng)壓、風(fēng)量、空氣流向以及機(jī)電設(shè)備運(yùn)行狀態(tài)參數(shù)）。 －測(cè)試總塵埃粒子和菌落數(shù)，證實(shí)系統(tǒng)運(yùn)行到達(dá)設(shè)計(jì)要求。 主要性能測(cè)試：空氣平衡（空氣總風(fēng)量、新風(fēng)量、回風(fēng)量、空氣流向和空氣分配）；溫度、濕度和照度測(cè)試；空氣壓力和控制測(cè)試；懸浮粒子數(shù)測(cè)試；外界誘導(dǎo)空氣測(cè)試；粒子分散和過(guò)渡過(guò)程連續(xù)時(shí)間測(cè)試微生物測(cè)試（懸浮菌和沉降菌）。潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第10頁(yè)111-5 環(huán)境系統(tǒng)驗(yàn)證1-5-2 驗(yàn)證 塵埃粒子測(cè)定 浮游菌和沉降菌測(cè)定 首次測(cè)試不合格處理 驗(yàn)證時(shí)，總塵埃粒子或空氣菌落數(shù)測(cè)試結(jié)果超出范圍需在不合格后緊接在原取樣點(diǎn)重做二次，二次結(jié)果合格都放入表格內(nèi)，可認(rèn)為經(jīng)過(guò)驗(yàn)證。 重做菌落樣前房間需消毒潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第11頁(yè)12說(shuō)明1 塵埃粒子、浮游菌、沉淀菌在驗(yàn)證區(qū)域滿足潔凈等級(jí)要求。2 假如超出標(biāo)準(zhǔn)，每超出標(biāo)準(zhǔn)取樣點(diǎn)必須重新取樣2次測(cè)試。每次重新測(cè)試結(jié)果必須符合驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)。重新測(cè)試樣品必須盡可能在不合格結(jié)果后立刻取樣。3 重新測(cè)試取樣之前，必須清潔有菌落樣區(qū)域。

潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第12頁(yè)134 驗(yàn)證取樣條件4-1 在取樣空氣系統(tǒng)驗(yàn)證區(qū)域必須連續(xù)運(yùn)行6小時(shí)以上，層流必須運(yùn)行30分鐘以上、在取空氣有菌量區(qū)域，必須在取樣消毒。一旦驗(yàn)證開(kāi)始，系統(tǒng)必須天天24小時(shí)，一周7天運(yùn)行。4-2 動(dòng)態(tài)是指灌裝機(jī)運(yùn)行（但無(wú)粉灌入），測(cè)試區(qū)內(nèi)有操作人員存在情況下取樣。4-3

靜態(tài)是指在生產(chǎn)完成后，測(cè)試區(qū)無(wú)人情況下，經(jīng)過(guò)15分鐘-20分鐘凈化后，再對(duì)測(cè)試區(qū)進(jìn)行取樣。4-4 統(tǒng)計(jì)整個(gè)驗(yàn)證時(shí)期溫度、濕度和壓差操作參數(shù)。4-5 高效過(guò)濾器每年必須進(jìn)行完整性測(cè)試和統(tǒng)計(jì)。

潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第13頁(yè)14

E-5 歐洲和美國(guó)GMP對(duì)環(huán)境控制要求

1 概論 歐洲共同體藥品控制局（MAC＝TheMedicinesControlAgency）環(huán)境控制要求，驗(yàn)證環(huán)境控制要到達(dá)A，B，C，D條件。美國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)209E中提出無(wú)菌100級(jí)，清潔10,000級(jí)和輔助100,000級(jí)微粒和微生物控制要求。2 A，B，C，D分級(jí)定義A級(jí) 高風(fēng)險(xiǎn)操作區(qū)，即直接影響操作區(qū)域。像隧道滅菌烘箱、無(wú)菌灌裝、瓶子開(kāi)口處、高壓滅菌冷卻區(qū)等需用100級(jí)層流。直接影響產(chǎn)品質(zhì)量，稱A級(jí)。B級(jí) 間接影響無(wú)菌操作區(qū)，直接圍繞A級(jí)區(qū)域地方，像無(wú)菌灌裝房間、高壓滅菌冷卻房間。 C和D級(jí) 進(jìn)入無(wú)菌生產(chǎn)區(qū)過(guò)分性潔凈區(qū)。準(zhǔn)備間、更衣間和緩沖間。潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第14頁(yè)153 歐洲潔凈等級(jí)要求

潔凈等級(jí) 總平均粒子數(shù) 浮游菌 沉淀菌

歐洲（EU） 209E美國(guó) ≥0.5μM ≥5μM CFU/M3 CFU/4Hours

A級(jí)（靜態(tài)） 100級(jí)

25P/ft3或875P/M3

0 <1 <1 A級(jí)（動(dòng)態(tài)） 100級(jí)

100P/ft3或3500P/M3

0 <1 <1

B級(jí)（靜態(tài)） 100級(jí)

100P/ft3或3500P/M3

0 2 2 B級(jí)（動(dòng)態(tài)） 10,000級(jí)

10,000P/ft3或350,000P/M3

58P/ft3或200P/M3

5 5 5C級(jí)（靜態(tài)） 10,000級(jí)

10,000P/ft3或350,000P/M3

58P/ft3或200P/M3

20 20

C級(jí)（動(dòng)態(tài)） 100,000級(jí)

100,000P/ft3或3,500,000P/M3

580P/ft3或20,00P/M3

50 50

D級(jí)（靜態(tài)） 100,000級(jí)

100,000P/ft3或3,500,000P/M3

580P/ft3或20,00P/M3

100 50

潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第15頁(yè)165 驗(yàn)證取樣標(biāo)準(zhǔn)5-1 空氣有菌量應(yīng)用生物空氣取樣器取樣，使用標(biāo)準(zhǔn)TSA培養(yǎng)基盤。5-2 全部工作水平面空氣有菌量和顆粒取樣應(yīng)在工作活動(dòng)平面層流方 向取樣（灌裝線瓶子開(kāi)口處，及離地 750-1000mm）。5-3

每個(gè)取樣點(diǎn)工作水平取樣1ft3空氣樣，測(cè)試大于等于0.5μm 顆粒總數(shù)。計(jì)算每立方英尺空氣顆粒平均數(shù)。5-4 在A，B，C和D級(jí)每個(gè)房間工作水平應(yīng)取樣5次， 每次1立方 英尺，測(cè)總顆粒數(shù)。潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第16頁(yè)17

E-6 日常生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)控

1 無(wú)菌生產(chǎn)區(qū)環(huán)境監(jiān)控1-1 生產(chǎn)潔凈等級(jí)劃分

潔凈等級(jí) 適應(yīng)室（區(qū)）

EU 209E A級(jí)（靜態(tài)） 100級(jí) 無(wú)菌灌裝機(jī)、滅菌隧道、高壓無(wú)菌斧出料冷卻車 A級(jí)（動(dòng)態(tài)） 100級(jí) 同上 B級(jí)（靜態(tài)） 100級(jí) 無(wú)菌灌裝室（區(qū)）、高壓滅菌斧冷卻室（區(qū)） B級(jí)（動(dòng)態(tài)） 10,000級(jí) 同上 C級(jí)（靜態(tài)） 10,000級(jí) 進(jìn)高壓滅菌斧準(zhǔn)備間、清洗設(shè)備室、消毒、更衣、緩沖、走廊C級(jí)（動(dòng)態(tài)） 100,000級(jí) 同上 D級(jí)（靜態(tài)） 100,000級(jí) 洗瓶、隧道、洗衣房、更衣室、第一緩沖室、進(jìn)洗室前緩沖室

潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第17頁(yè)181-5 環(huán)境系統(tǒng)驗(yàn)證1-5-3 歐美潔凈等級(jí)比較 潔凈等級(jí) 總平均粒子數(shù) 浮游菌 沉淀菌

歐洲（EU） 209E美國(guó) ≥0.5μM ≥5μM CFU/M3 CFU/4Hours

A級(jí)（靜態(tài)） 100級(jí)

25P/ft3或875P/M3

0 <1 <1 A級(jí)（動(dòng)態(tài)） 100級(jí)

100P/ft3或3500P/M3

0 <1 <1

B級(jí)（靜態(tài)） 100級(jí)

100P/ft3或3500P/M3

0 2 2 B級(jí)（動(dòng)態(tài)） 10,000級(jí)

10,000P/ft3或350,000P/M3

58P/ft3或200P/M3

5 5 C級(jí)（靜態(tài)） 10,000級(jí)

10,000P/ft3或350,000P/M3

58P/ft3或200P/M3

20 20

C級(jí)（動(dòng)態(tài)） 100,000級(jí)

100,000P/ft3或3,500,000P/M3

580P/ft3或20,00P/M3

50 50

D級(jí)（靜態(tài)） 100,000級(jí)

100,000P/ft3或3,500,000P/M3

580P/ft3或20,00P/M3

100 50潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第18頁(yè)19滅菌法和無(wú)菌確保滅菌定義：將物體上全部微生物包含細(xì)菌芽孢全部殺死或除去辦法。滅菌法是指殺死或除去全部微生物方法，是滅菌藥劑生產(chǎn)主要過(guò)程，對(duì)于注射劑尤為主要。微生物包含細(xì)菌、真菌、病毒等，凡有生命地方都有微生物存在，微生物繁殖很快。細(xì)菌芽胞含有較強(qiáng)抗熱力，不易殺死，所以滅菌效果，應(yīng)以殺死芽胞為標(biāo)準(zhǔn)。在藥劑中選擇滅菌方法，與微生物學(xué)上要求不盡相同，不但要到達(dá)滅菌目標(biāo)，而且要確保藥品穩(wěn)定性。常見(jiàn)滅菌法有熱壓滅菌、干熱滅菌、紫外線照射滅菌、過(guò)濾除菌和化學(xué)藥劑滅菌。潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第19頁(yè)20F與Fo值在滅菌中意義與作用微生物致死間曲線與D值：大家對(duì)微生物死亡動(dòng)力學(xué)研究表明，其死亡速度屬一級(jí)過(guò)程，在一定溫度下符合下述方程式中N。為原始微生物數(shù)，Nt為殘余微生物t時(shí)殘余微生物。殘余數(shù)對(duì)數(shù)時(shí)間作圖，得一條直線，直線斜率＝K／2.303，K為速度常數(shù)，單位為時(shí)間。潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第20頁(yè)21F與Fo值在滅菌中意義與作用為了方便起見(jiàn)，引用D，并定義D為一定溫度下殺死被滅菌物品中微生物數(shù)90％(降低一個(gè)對(duì)數(shù)值)所需時(shí)間，可描述為：潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第21頁(yè)22F與Fo值在滅菌中意義與作用滅菌方法微生物溫度介質(zhì)或樣品D值（min）

蒸汽滅菌嗜熱脂肪芽孢桿菌1055％葡萄糖水溶液87.8蒸汽滅菌嗜熱脂肪芽孢桿菌1215％葡萄糖水溶液2.4蒸汽滅菌嗜熱脂肪芽孢桿菌121注射用水3.0蒸汽滅菌梭狀芽孢桿菌1055％葡萄糖水溶液1.3干熱滅菌枯草芽胞桿菌135紙16.6紅外線滅菌枯草芽胞桿菌160玻璃板18D值因微生物種類、環(huán)境、滅菌溫度不一樣而各異,下表為不一樣滅菌法不一樣微生物D值：

潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第22頁(yè)23F與Fo值在滅菌中意義與作用Z值：一旦在不一樣溫度下對(duì)特定微生物在特定介質(zhì)或環(huán)境中求得D值后，就可用logD值對(duì)溫度作圖，在一定溫度范圍內(nèi)，logD與T呈直線關(guān)系，直線斜率＝logD2－logD1／T2－T1，因?yàn)榇诵甭蕿樨?fù)值，為防止引入負(fù)數(shù)，而提出Z值概念，Z＝T－T1／logD2－logD1，故定義Z值為降低一個(gè)logD值需溫度數(shù)，也能夠認(rèn)為Z值是降低微生物數(shù)90％所需要溫度數(shù)。潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第23頁(yè)24F與Fo值在滅菌中意義與作用潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第24頁(yè)25F與Fo值在滅菌中意義與作用不一樣溶液以嗜熱脂肪芽孢村菌測(cè)定Z值溶液Z值℃5％葡萄糖水溶液10.3注射用水8.45％葡萄糖乳酸鹽林格氏溶液11.3PH7磷酸緩沖液7.6潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第25頁(yè)26F與Fo值在滅菌中意義與作用F值與Fo值數(shù)學(xué)表示或可表示以下：

△t是測(cè)量被滅菌物溫度時(shí)間間隔，F(xiàn)為在一定溫度（T），給Z值所產(chǎn)生滅菌效力與參比溫度（To）給定Z值所產(chǎn)生滅菌效果相同時(shí)所相當(dāng)時(shí)間（equivalenttime）以分為單位。潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第26頁(yè)27F與Fo值在滅菌中意義與作用Fo值：為一定滅菌溫度（T）Z值為121℃，并假設(shè)尤其耐濕熱微生物指示劑（嗜熱脂肪芽胞桿菌）Z值為10℃，則

顯然，F(xiàn)o值為一定滅菌溫度（T）Z值為10℃所產(chǎn)生滅菌效果力相同時(shí)所相當(dāng)時(shí)間（分）。也就是說(shuō)Fo是將各種滅菌溫度使微生物致死力轉(zhuǎn)換為滅菌物品完全暴露于121℃使微生物致死效力。潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第27頁(yè)28滅菌法和無(wú)菌確保Fo值計(jì)算對(duì)于驗(yàn)證滅菌效果極為有用，故用Fo來(lái)監(jiān)測(cè)滅菌效果肯有主要意義。因?yàn)镕o是將不一樣滅菌溫度折算到相當(dāng)于121℃濕熱滅菌時(shí)效力，故Fo值可作為滅菌過(guò)程比較參數(shù)。當(dāng)產(chǎn)品以121℃濕熱滅菌時(shí)，滅菌器內(nèi)溫度雖能快速升到121℃，而被菌物品內(nèi)部則不然，經(jīng)過(guò)因?yàn)榘b材料性能及其它原因影響而使。升溫度各異，而Fo將伴隨產(chǎn)品溫度（T）改變而呈指數(shù)改變。故溫度即使很小差異（如0.1-1）,將對(duì)Fo值產(chǎn)生顯著影響。所以要求測(cè)定滅菌物品內(nèi)實(shí)際溫度。潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第28頁(yè)29滅菌法和無(wú)菌確保為了使Fo測(cè)定準(zhǔn)確，先應(yīng)選擇靈敏度高，重現(xiàn)性好，精密度為0.1熱電偶，并對(duì)熱電偶進(jìn)行校驗(yàn)。滅菌時(shí)應(yīng)將熱電偶探針置于被測(cè)物內(nèi)部，經(jīng)滅菌器通向柜外濕度統(tǒng)計(jì)儀，有些滅菌統(tǒng)計(jì)儀（digistriprecolder）附有Fo計(jì)算器，在滅菌過(guò)程中和滅菌后，自動(dòng)顯示Fo值。另外，還應(yīng)考慮一些其它原因?qū)o值影響，有些人對(duì)溶液粘度，容器充填量及容器在滅菌器內(nèi)數(shù)量與排布進(jìn)行了研究。結(jié)果發(fā)覺(jué)對(duì)Fo都有影響，而以后者影響最大。故要注意滅菌器內(nèi)各層、四角、中間位置熱分布是否均勻，并進(jìn)行實(shí)際測(cè)定，作出合理排布，方便測(cè)得Fo值更可靠。潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第29頁(yè)30滅菌方法無(wú)菌確保值（SterilityAssuranceLevel即SAL）：我國(guó)及歐美藥典都把無(wú)菌確保值（SAL）不得大于百萬(wàn)分之一作為最終滅菌產(chǎn)品無(wú)菌確保要求，即SAL≤10－6在Fo計(jì)算時(shí)則使用以下定義：

無(wú)菌確保值（SAL）＝－lg（微生物存活概率）≥6（F0－D污×lgN污）/D污≥6F0＝D污（lgN污+6）其中D污為污染菌D121值，N污為滅菌前污染菌數(shù)量。在生產(chǎn)實(shí)踐中，耐熱性差產(chǎn)品，在F0小于8時(shí)，只要強(qiáng)化工藝控制伎倆，仍能到達(dá)無(wú)菌標(biāo)準(zhǔn)，相反當(dāng)工藝失控時(shí)，即使F0大于8，也不一定能到達(dá)無(wú)菌要求。潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第30頁(yè)31滅菌法和無(wú)菌確保因產(chǎn)品熱穩(wěn)定性較差，所選滅菌程序?yàn)椋?09℃×60min，所以在生產(chǎn)過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格對(duì)微生物進(jìn)行控制。首先在灌裝開(kāi)始和結(jié)束各取樣10瓶，置于100℃下曝?zé)?0min，進(jìn)行需氧和厭氧條件培養(yǎng)，應(yīng)不長(zhǎng)菌，證實(shí)產(chǎn)品中不存在耐熱孢子，可設(shè)定產(chǎn)品中污染菌耐熱性（D121）不超出0.5。故使用D121為0.7枯草芽孢桿菌做為生物指示劑，進(jìn)行生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)。以確認(rèn)產(chǎn)品無(wú)菌確保值SAL到達(dá)6。

潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第31頁(yè)32滅菌方法依據(jù)公式F0＝D污（lgN污+6）=DBi（lgNBi+1）其中D污為污染菌D121值，N污為滅菌前污染菌數(shù)量，DBi為生物指示劑D121值，NBi為生物指示劑用量。F0值計(jì)算：查得L為0.063，故F0＝0.063×60＝3.78加上升溫及降溫階段，實(shí)際F0可達(dá)5以上。

∴為保險(xiǎn)起見(jiàn)，取F0＝4.9進(jìn)行計(jì)算污染菌數(shù)控制計(jì)算：F0＝D污（lgN污+6）將F0＝4.9和D污＝0.3代入，得

lgN污＝（4.9-0.5×6）/0.5＝3.75∴N污＝5.6×103生物指示劑用量計(jì)算：F0＝DBi（lgNBi+1）將F0＝4.9和DBi＝0.6代入，得lgNBi＝（4.9-0.7）/0.7＝6∴N污＝1.0×106潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第32頁(yè)33滅菌方法常見(jiàn)滅菌方法有濕熱滅菌法、干熱滅菌法、氣體滅菌法、輻射滅菌法和過(guò)濾除菌法?？梢罁?jù)被滅菌物品特征采取一個(gè)或各種方法組合滅菌。只要產(chǎn)品允許，應(yīng)盡可能選取最終滅菌法（即產(chǎn)品分裝至包裝容器后再滅菌）滅菌。若產(chǎn)品不適合采取最終滅菌法，可選取過(guò)濾除菌法或無(wú)菌生產(chǎn)工藝到達(dá)無(wú)菌確保要求，只要可能，應(yīng)對(duì)非最終滅菌產(chǎn)品作補(bǔ)充性滅菌處理（如流通蒸汽滅菌）。潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第33頁(yè)34滅菌方法一、濕熱滅菌法本法系指將物品置于滅菌柜內(nèi)利用高壓飽和蒸汽、過(guò)熱水噴淋等伎倆使微生物菌體中蛋白質(zhì)、核酸發(fā)生變性而殺滅微生物方法。該法滅菌能力強(qiáng)，為熱力滅菌中最有效、應(yīng)用最廣泛滅菌方法。藥品、容器、培養(yǎng)基、無(wú)菌衣、膠塞以及其它遇高溫和潮濕不發(fā)生改變或損壞物品，均可用本法滅菌。流通蒸汽不能完全殺滅細(xì)菌孢子，普通可作為不耐熱無(wú)菌產(chǎn)品輔助滅菌伎倆。潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第34頁(yè)35滅菌方法濕熱滅菌條件采取程序各種，但必須確保物品滅菌后SAL≤10-6。對(duì)熱穩(wěn)定物品，可采取過(guò)分殺滅法，其SAL應(yīng)≤10-12。熱敏感產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間F0可低于8min，但應(yīng)在生產(chǎn)全過(guò)程中，對(duì)產(chǎn)品中污染微生物嚴(yán)加監(jiān)控，并采取各種辦法預(yù)防耐熱菌污染及降低微生物污染水平，確保被滅菌產(chǎn)品到達(dá)無(wú)菌確保要求。潔凈廠房空調(diào)系統(tǒng)滅菌法和無(wú)菌保證第35頁(yè)36滅菌方法濕熱滅菌工藝驗(yàn)證時(shí)，應(yīng)進(jìn)行熱分布試驗(yàn)、熱穿透試驗(yàn)和生物指示劑驗(yàn)證試驗(yàn)。以確定滅菌柜空載及不一樣裝載時(shí)腔室中熱分布情況及可能存在冷點(diǎn)；在空載條件