抗體制備和凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)

抗體制備和凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)抗體制備和凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)第1頁試驗二抗體制備和凝集反應(yīng)(2)&沉淀反應(yīng)抗體制備和凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)第2頁1.原理:試管凝集抗原抗體反應(yīng)直接凝集反應(yīng)玻片凝集定性半定量抗體制備和凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)第3頁1)玻片凝集反應(yīng):已知抗原+未知抗體凝集團塊混濁?2)試管凝集反應(yīng)：定量抗原+系列稀釋抗體不一樣程度凝集反應(yīng)YESNO確定抗體滴度抗體制備和凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)第4頁抗體滴度：

能產(chǎn)生顯著凝集反應(yīng)、抗體最高稀釋度倒數(shù)?？贵w制備和凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)第5頁

試驗材料：

滅活傷寒菌液(7×108/ml),待測血清2.方法：0.50.50.50.50.50.50.50.50.51:201:401:801:1601:3200.5棄掉123450.160.9生理鹽水(ml)待測血清對照管0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml①②③④滅活傷寒菌液0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml抗體稀釋度徹底混勻56℃,1h抗體制備和凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)第6頁3.注意事項標(biāo)識試管正確使用滴管徹底混勻溫度:56℃統(tǒng)計時間輕拿試管，觀察結(jié)果，首先觀察對照管抗體制備和凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)第7頁4.預(yù)期結(jié)果+很小凝集顆?；鞚?無凝集現(xiàn)象與對攝影同++小、個別凝集塊中等混濁+++大多凝集管底輕度混濁++++大凝集塊清亮凝集程度沉淀上清抗體制備和凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)第8頁管底沉淀凝集程度最高稀釋百分比待測血清滴度抗體制備和凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)第9頁Test2沉淀反應(yīng)

——瓊脂擴散試驗抗體制備和凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)第10頁經(jīng)典抗原抗體反應(yīng)一個。

分類:瓊脂擴散環(huán)狀沉淀反應(yīng)絮狀沉淀反應(yīng)免疫電泳沉淀反應(yīng):沉淀線或沉淀環(huán)可溶性抗原對應(yīng)抗體+抗體制備和凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)第11頁瓊脂擴散試驗:可溶性抗原和抗體在瓊脂中擴散，相遇，在適當(dāng)百分比下形成沉淀線或沉淀環(huán)。分類:單向瓊脂擴散試驗:僅抗原或抗體擴散

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定量試驗雙向瓊脂擴散試驗:抗原和抗體同時擴散

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定性試驗抗體制備和凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)第12頁Ⅰ單向瓊脂擴散試驗:抗原濃度沉淀環(huán)直徑平方AgAgAgAg瓊脂中含抗體1:101:201:401:80Ag未知抗體制備和凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)第13頁Ⅱ雙向瓊脂擴散試驗:抗體制備和凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)第14頁方法：1.微波爐中徹底融化1%瓊脂2.取5ml瓊脂均勻鋪在載玻片上凝固3.在瓊脂板上打5個孔4.在孔中加入對應(yīng)樣品AbAg1Ag1Ag2Ag25.37℃,孵育24h抗體制備和凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)第15頁注意：瓊脂板一定平整、光滑(無氣泡).瓊脂不可過厚孔中液體不可過滿抗體制備和凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)第16頁Test3再次免疫抗體制備和凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)第17頁2.方法:脫纖維綿羊紅細胞（SRBC）加入3ml生理鹽水，混勻rpm,離心，5min棄上清制備綿羊紅細胞溶液20%、25%