新編藥物的鑒別試驗

定義：依據(jù)藥品分子結構、理化性質(zhì)，采取物理、化學或生物學方法來判斷其真?zhèn)巍Ｄ繕耍河糜谧C實貯藏在有標簽容器中藥品是否為所標示藥品，而非對未知物判定。判別試驗方法應有一定專屬性，普通選取2～4種不一樣類型方法?！?-1藥品判別試驗定義與目標新編藥物的鑒別試驗第1頁§2-2判別試驗項目判別項下要求試驗

原料藥判別制劑判別普通判別試驗專屬判別試驗性狀判別新編藥物的鑒別試驗第2頁一、性狀性狀判別反應了藥品特有物理性質(zhì)，普通包含外觀、溶解度和物理常數(shù)等。外觀：指藥品聚集狀態(tài)、晶型、色澤以及臭、味等性質(zhì)。示例：ChP中鹽酸氯丙嗪性狀描述：本品為白色或乳白色結晶性粉末；有微臭，味極苦；有引濕性；遇光漸變色；水溶液顯酸性反應。新編藥物的鑒別試驗第3頁溶解度：藥品一個物理性質(zhì)，在一定程度上反應了藥品純度、晶型或粒度。溶解度采取“極易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、極微溶解、幾乎不溶或不溶”來描述。物理常數(shù)：用于藥品判別，反應藥品純雜程度。ChP收載物理常數(shù)包含：相對密度、餾程、熔點、凝點、比旋度、折光率、黏度、吸收系數(shù)、碘值、皂化值、酸值等。新編藥物的鑒別試驗第4頁熔點固體熔化成液體溫度熔融同時分解溫度自初熔至全熔一段溫度示例：雌二醇熔點：本品熔點為175～180℃多數(shù)固體有機藥品主要物理常數(shù)，可用于藥品判別和純度檢驗。1.熔點新編藥物的鑒別試驗第5頁2.比旋度

在一定波長與溫度下，偏振光透過長1dm且每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g溶液時測得旋光度。用表示。是反應手性藥品特征及其純度主要指標?？捎糜趨^(qū)分藥品、檢驗純度或測定制劑含量。D：鈉光譜D線(589.3nm)t：測定時溫度a：旋光度l：測定管長度，dmd：液體相對密度c：100ml溶液中含有被測物質(zhì)重量，g液體供試品：固體供試品：新編藥物的鑒別試驗第6頁

在給定波長、溶劑和溫度等條件下，吸光物質(zhì)在單位濃度、單位液層厚度時吸光度。3.吸收系數(shù)百分吸收系數(shù)（ChP收載）

（c:%(g/ml),即g/100ml）

吸收系數(shù)摩爾吸收系數(shù)ε=A/cl（c:mol/L）百分吸收系數(shù)：在一定波長下，溶液濃度為1%(g/ml)，厚度為1cm時吸光度。是吸光物質(zhì)主要物理常數(shù)，可用于考查原料藥質(zhì)量及測定制劑含量。新編藥物的鑒別試驗第7頁二、普通判別試驗依據(jù)某一類藥品化學結構或物化性質(zhì)特征，通過化學反應來判別藥品真?zhèn)巍?/p>

ChP附錄收載普通判別試驗有：

丙二酰脲類、托烷生物堿類、芳香第一胺類、有機氟化物、無機金屬鹽類、有機酸鹽、無機酸鹽。有機藥品----經(jīng)典官能團反應無機藥品----陰離子、陽離子特殊反應新編藥物的鑒別試驗第8頁（一）有機氟化物堿液吸收氧瓶燃燒有機氟化物無機氟化物pH4.3

茜素氟藍硝酸亞鈰藍紫色OOOOCH2NCeCH2COOHCH2COOHFOOOHOHCH2NCH2COOHCH2COOH++Ce3pH4.3F-+茜素氟藍藍紫色絡合物新編藥物的鑒別試驗第9頁②水楊酸鹽+稀HCl→白色沉淀(水楊酸)→溶于醋酸銨。FeCl3反應:①中性條件呈紅色弱酸性條件呈紫色1.水楊酸鹽（二）有機酸鹽新編藥物的鑒別試驗第10頁2.酒石酸鹽利用酒石酸還原性，在中性溶液中與氨制硝酸銀發(fā)生銀鏡反應。供試品溶液（中性）+氨制硝酸銀銀鏡水浴中CCHOHOCOOHCOOHHH+2Ag(NH3)2OH2Ag+CCCOONH4COONH4HOHO+2NH32H2O+新編藥物的鑒別試驗第11頁（三）芳香第一胺類利用芳伯氨基重氮化－偶合顯色反應。供試品+

稀鹽酸亞硝酸鈉堿性-萘酚試液橙黃到猩紅色沉淀++__新編藥物的鑒別試驗第12頁（四）托烷生物堿類

含有莨菪酸結構，可發(fā)生Vitali反應，顯紫色。醌型產(chǎn)物新編藥物的鑒別試驗第13頁（五）無機金屬鹽

1.鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鋇鹽焰色反應Na+顯鮮黃色；K+顯紫色；Ca2+顯磚紅色；Ba2+顯黃綠色，自綠色玻璃中透視顯藍色。2.銨鹽供試品+NaOH氨氣使?jié)駶櫦t色石蕊試紙變藍使硝酸亞汞試液濕潤濾紙顯黑色氨臭新編藥物的鑒別試驗第14頁（六）無機酸根氯化物：供試液＋MnO2＋H2SO4Cl2使?jié)駶櫟饣浀矸墼嚰堬@藍色供試液＋HNO3（?。獳gNO3氨試液HNO3白色沉淀白色沉淀溶解硫酸鹽：供試液＋BaCl2白色

鹽酸或硝酸不溶供試液＋HCl無白色沉淀（與硫代硫酸鹽區(qū)分）供試液＋Pb(AC)2白色醋酸銨或NaOH溶解新編藥物的鑒別試驗第15頁硝酸鹽：供試液+硫酸+硫酸亞鐵使成兩液層，接界面顯棕色供試液+硫酸+銅絲紅棕色蒸氣供試液+高錳酸鉀紫色不應褪去（與亞硝酸鹽區(qū)分）△新編藥物的鑒別試驗第16頁依據(jù)某一個藥品化學結構及其物理化學性質(zhì)特征，選取一些特有定性反應來判別藥品真?zhèn)巍Ｊ沟馔噬cPb2+生成黑色PbS三、專屬判別試驗同屬巴比妥類新編藥物的鑒別試驗第17頁§2-3判別方法呈色反應判別法

沉淀生成反應判別法

氣體生成反應判別法

使試劑褪色判別法熒光反應判別法

測定生成物熔點鑒別方法化學判別法光譜判別法生物學法

色譜判別法

顯微判別法

指紋圖譜法新編藥物的鑒別試驗第18頁

在供試品溶液中加入適當試劑，在一定條件下反應，生成易于觀察有色產(chǎn)物。（1）酚羥基三氯化鐵呈色反應（2）托烷生物堿類Vitali反應（3）芳香第一胺重氮化-偶合反應（4）氨基醇結構雙縮脲反應（5）含羰基結構苯肼反應

（一）呈色反應判別法新編藥物的鑒別試驗第19頁（二）沉淀生成反應判別法（1）氯化物銀鹽沉淀反應（2）與重金屬離子沉淀反應（3）含氮雜環(huán)類生物堿沉淀劑（碘化鉍鉀、硅鎢酸等）反應（4）磺胺類藥品銅鹽反應在供試品溶液中加入適當試劑，在一定條件下反應，生成不一樣顏色沉淀。新編藥物的鑒別試驗第20頁（三）熒光判別法（1）在適當溶液中藥品本身在可見光下發(fā)射熒光如：硫酸奎寧稀硫酸溶液顯藍色熒光（2）藥品與適當試劑反應后發(fā)射熒光

如：維生素B1硫色素反應VB1硫色素（藍色熒光）堿性K3Fe(CN)6新編藥物的鑒別試驗第21頁（四）氣體生成反應判別法（1）大多數(shù)胺（銨）類藥品、酰脲類藥品以及一些酰胺類藥品，經(jīng)強堿處理后加熱，產(chǎn)生氨（胺）氣；（2）化學結構中含硫藥品，經(jīng)強酸處理后加熱，產(chǎn)生硫化氫氣體；（3）含碘有機藥品，經(jīng)直火加熱，生成紫色碘蒸氣；（4）含乙酸酯和乙酰胺類藥品，經(jīng)硫酸水解后加乙醇，產(chǎn)生乙酸乙酯香味。新編藥物的鑒別試驗第22頁（五）使試劑褪色判別法（六）測定生成物熔點如：維生素C二氯靛酚反應司可巴比妥鈉碘試液反應操作煩瑣、費時，應用較少。制備衍生物測定熔點法藥品＋試劑新化合物有一定mp新編藥物的鑒別試驗第23頁紫外光譜法

（UV）紅外光譜法

（IR）原子吸收法（AAS）核磁共振法（NMR）近紅外光譜法（NIR）質(zhì)譜法（MS）X射線粉末衍射法（XRD）鑒別方法化學判別法光譜判別法生物學法

色譜判別法

顯微判別法

指紋圖譜法新編藥物的鑒別試驗第24頁（一）紫外光譜判別法特點：操作簡便、快速，可用于多數(shù)有機藥品判別。不足：用作判別專屬性遠不如紅外光譜法。①測定最大吸收波長，或同時測定最小吸收波長；

②要求一定濃度供試液在最大吸收波優(yōu)點吸光度；

③要求吸收波長和吸收系數(shù)法；

④要求吸收波長和吸光度比值法；

⑤經(jīng)化學處理后，測定反應產(chǎn)物吸收光譜特征。慣用方法：以上方法可單用，也可幾個結合使用，以提升專屬性。新編藥物的鑒別試驗第25頁ChP版示例示例一鹽酸布比卡因判別試驗約0.40mg/mlλmax:263nm、271nmA:0.53~0.58；0.43~0.48要求一定濃度供試液在最大吸收波優(yōu)點吸光度示例二地蒽酚判別試驗λmax:257nm、289nm、356nmA257/A289=1.06~1.10A356/A289=0.90~0.94要求最大吸收波長和吸光度比值法新編藥物的鑒別試驗第26頁（二）紅外光譜判別法特點：專屬性強，應用較廣（固體、液體、氣體）；主要用于組分單一、結構明確原料藥，以及結構相近同類藥品。標準圖譜法：按指定條件繪制供試品紅外圖譜，與《藥品紅外光譜集》中對應標準圖譜對比，假如峰位、峰形、相對強度都一致時，即為同一個藥品。對照品法：將供試品與對照品在相同條件下繪制紅外圖譜，彼此對比是否一致方法。可消除不一樣儀器和操作條件造成誤差。方法：新編藥物的鑒別試驗第27頁（三）近紅外光譜法

經(jīng)過測定被測物在近紅外區(qū)750~2500nm（12800~4000cm-1）特征光譜，并利用適宜化學計量學方法提取相關信息后，進行定性、定量分析一個分析技術。含有快速、準確、對樣品無破壞特點。（四）原子吸收法利用原子蒸氣能夠吸收由該元素作為陰極空心陰極燈發(fā)出特征譜線特征，依據(jù)供試溶液在特征譜線處最大吸收和特征譜線強度減弱程度進行定性、定量分析。新編藥物的鑒別試驗第28頁（五）核磁共振法

用于化學結構研究。藥品中慣用是1H-NMR，其光譜化學位移、峰面積、偶合常數(shù)、弛豫時間是判定化合物結構主要參數(shù)。（六）質(zhì)譜法

將被測物質(zhì)離子化后，在高真空狀態(tài)下按離子質(zhì)荷比（m/z）大小分離，而實現(xiàn)物質(zhì)成份和結構分析方法。用于藥品定性判別和定量測定。新編藥物的鑒別試驗第29頁（七）X射線粉末衍射法

利用晶體對X射線衍射效應來進行定性、定量分析方法。用于結晶物質(zhì)判別，將供試品與參考品X射線粉末衍射圖進行比較。新編藥物的鑒別試驗第30頁原理：利用不一樣物質(zhì)在不一樣色譜條件下，產(chǎn)生各自特征色譜行為（Rf值或tR值）進行判別試驗。特點：適合用于復雜環(huán)境下藥品有效成份及雜質(zhì)判別，含有分離、分析同時進行特點。方法：常采取對比法，即將供試品與對照品（或經(jīng)確證已知藥品）在相同條件下進行色譜分離，并比較二者保留行為是否一致。三、色譜判別法新編藥物的鑒別試驗第31頁（一）薄層色譜判別法特點：專屬性強、操作簡便、試驗成本低。在判別試驗中，薄層色譜法是色譜法中應用最廣一個方法。基線到斑點中心距離基線到展開劑前沿距離Rf=經(jīng)過比移值（Rf）、斑點顏色進行定性。新編藥物的鑒別試驗第32頁判別方法：供試品，對照品（等濃度）斑點顏色、位置（Rf值）應一致，大小相同供試品+對照品（等體積）應顯示單一、緊密斑點供試品，結構相同藥品對照品Rf值應不一樣供試品+結構相同藥品對照品（等體積）應顯示兩個清楚分離斑點新編藥物的鑒別試驗第33頁（二）高效液相色譜和氣相色譜判別法tR供＝tR對定性參數(shù)：保留時間（tR）供試品和對照品色譜峰保留時間應一致。在含量測定同時進行判別。新編藥物的鑒別試驗第34頁四、顯微判別法主要用于中藥及其制劑判別，通常采取顯微鏡對藥材組織、細胞或內(nèi)含物等特征進行判別。五、生物學法利用藥效學和分子生物學等相關技術來判定藥品品質(zhì)一個方法。主要用于抗生素、生化藥品以及中藥判別，分為生物效應判別法和基因判別法。六、指紋圖譜與特征圖譜判別法主要用于中藥及其制劑判別與質(zhì)量控制。新編藥物的鑒別試驗第35頁§2-4判別試驗條件及方法驗證一、影響判別試驗條件1.溶液濃度2.溶液溫度3.溶液酸堿度4.試驗時間5.干擾物質(zhì)新編藥物的鑒別試驗第36頁專屬性：在其它成份（其它藥品成份、雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等）存在情況下，采取判別方法能否正確地判別出被測物質(zhì)特征。每種判別方法都存在一定不足，普通最少采取兩種以上不一樣類型方法，如化學法和光譜法。耐用性：指測定條件發(fā)生小變動時，測定結果受到影響程度。在建立某種藥品判別方法時，需要對方法專屬性和耐用性進行驗證。二、判別方法驗證新編藥物的鑒別試驗第37頁（一）最正確選擇題1.在藥品質(zhì)量標準中，藥品外觀、臭、味等內(nèi)容歸屬項目是（）A.性狀B.普通判別C.專屬判別D.檢驗E.含量測定2.取供試品少許，置試管中，加等量二氧化錳，混勻，加硫酸濕潤，緩緩加熱，即產(chǎn)生氯氣，能使用水濕潤碘化鉀淀粉試紙顯藍色。以下物質(zhì)可用上述試驗判別是（）A.托烷生物堿類B.酒石酸鹽C.氯化物D.硫酸鹽E.有機氟化物新編藥物的鑒別試驗第38頁3.表示（）A.一定波長時，溶液濃度為1%(g/ml)，厚度為1cm吸光度B.一定波長時，溶液濃度為1g/ml，厚度為1cm吸光度

C.一定波長時，溶液濃度為1g/100ml，厚度為1dm吸光度

D.一定波長時，溶液濃度為1mol/L，厚度為1cm吸光度

E.一定波長時，溶液濃度為1%(mg/ml)，厚度為1dm吸光度

新編藥物的鑒別試驗第39頁（二）配伍選擇題[3-4]A.取供試品稀溶液，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫色。B.取供試品約10mg，加發(fā)煙硝酸5滴，置水浴上蒸