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幾種光學(xué)顯微鏡的使用第1頁,共10頁,2023年,2月20日,星期日目錄實驗?zāi)康?實驗原理2實驗用品3實驗方法4第2頁,共10頁,2023年,2月20日,星期日實驗?zāi)康?、了解幾種光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)、工作原理、主要用途和使用方法;2、掌握使用普通顯微鏡提高分辨力的方法。
第3頁,共10頁,2023年,2月20日,星期日實驗原理一般實驗室經(jīng)常使用的光學(xué)顯微鏡都是由物鏡、目鏡、聚光器和光闌組成,普通顯微鏡它們的放大原理及光路圖如下:
AB物體.A1Bl第一次成像,A2B2第二次成像,Ol目鏡.O2物鏡,F(xiàn)1為Ol的前焦點,F(xiàn)2為O2的前焦點O2O1B1A1ABA2F1F2B2第4頁,共10頁,2023年,2月20日,星期日暗視野顯微鏡:結(jié)構(gòu)特點主要是使用中央遮光板或暗視野聚光器,使光源的中央光束被阻擋.不能由下而上地通過標(biāo)本進入物鏡。從而使光線改變途徑,傾斜地照射在觀察的標(biāo)本上,標(biāo)本遇光發(fā)生反射或散射,散射的光線投入物鏡內(nèi),因而整個視野是黑暗的。觀察到被檢物體的衍射光圖像.非物體的本身,所以只能看到物體的存在和運動,不能辨清物體的細(xì)微結(jié)構(gòu)。第5頁,共10頁,2023年,2月20日,星期日相差顯微鏡:相差顯微鏡能夠改變直射光或衍射光的相位,并且利用光的衍射和干涉現(xiàn)象,把相差變成振幅差(明暗差),同時它還吸收部分直射光線,以增大其明暗的反差。因此可用以觀察活細(xì)胞或未染色標(biāo)本。第6頁,共10頁,2023年,2月20日,星期日熒光顯微鏡:熒光顯微鏡是利用一個高發(fā)光效率的點光源,經(jīng)過濾色系統(tǒng)發(fā)出一定波長的光作為激發(fā)光、激發(fā)標(biāo)本內(nèi)的熒光物質(zhì)發(fā)射出各種不同顏色的熒光后,再通過物鏡和目鏡的放大進行觀察。這樣在強烈的對襯背景下,即使熒光很微弱也易辨認(rèn),敏感性高,主要用于細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能以及化學(xué)成分等的研究。第7頁,共10頁,2023年,2月20日,星期日實驗用品實驗材料:草履蟲,洋蔥內(nèi)表皮,紫鴨趾草等花粉,菠菜葉。實驗用品:普通光學(xué)顯微鏡,暗視野顯微鏡。相差顯微鏡,熒光顯微鏡,載玻片,蓋玻片,吸管,鑷子,剪刀等。第8頁,共10頁,2023年,2月20日,星期日實驗方法1.觀察草履蟲取少許棉花纖維或擦鏡紙纖維,放于載玻片上,用吸管吸少許草履蟲培養(yǎng)液,滴于棉花纖維上,用蓋玻片蓋住,輕輕擠壓,然后觀察2、觀察洋蔥表皮細(xì)胞和菠菜葉的細(xì)胞核、葉綠體
在載玻片上滴一滴水,用鑷子輕輕從洋蔥內(nèi)表皮或菠菜表皮撕下一小塊(越薄越透明越好)放于其中,使其展開,然后加蓋玻片觀察3、紫鴨趾草花粉的外形表面突起的觀察在載玻片上滴一滴水,取紫鴨趾草雄蕊在其中沾幾下,然后蓋片觀察第9頁,共1
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