血液細(xì)胞(血常規(guī))檢驗(yàn)中的幾點(diǎn)注意事項(xiàng)

血液細(xì)胞(血常規(guī))檢驗(yàn)中的幾點(diǎn)注意事項(xiàng)

血液細(xì)胞檢驗(yàn)是指提供關(guān)于血漿中白細(xì)胞（WBC），紅細(xì)胞（RBC），血小板（PLT），血紅蛋白（HGb）的信息的測(cè)定，也稱為血常規(guī)檢驗(yàn)。血常規(guī)檢查不僅是判斷所有血液系統(tǒng)疾病的主要依據(jù)，而且為其他系統(tǒng)疾病的檢查和鑒定提供了大量關(guān)鍵信息，是目前臨床醫(yī)學(xué)檢查中最流行和最關(guān)鍵的基礎(chǔ)項(xiàng)目之一[1]。最原始的血常規(guī)檢測(cè)手段是手動(dòng)顯微技術(shù)檢測(cè)，但由于現(xiàn)代基礎(chǔ)醫(yī)療蓬勃發(fā)展和高科技的廣泛應(yīng)用，人體血細(xì)胞分析儀長(zhǎng)期以來(lái)一直是取代顯微鏡的最主要技術(shù)手段。血常規(guī)分析，特別是分類。無(wú)論是顯微鏡檢測(cè)還是血液分析儀的使用，為獲得穩(wěn)定準(zhǔn)確的血常規(guī)檢查數(shù)據(jù)，為臨床提供正確可靠的檢查依據(jù)，因此實(shí)驗(yàn)室檢查應(yīng)全面分析血常規(guī)檢查中的各種干擾因素[2]。本次研究探討血液細(xì)胞(血常規(guī))檢驗(yàn)中的幾點(diǎn)注意事項(xiàng)，具體報(bào)道如下。一、標(biāo)本的采集1、標(biāo)本的制備優(yōu)質(zhì)的標(biāo)本，是高質(zhì)量檢測(cè)的第一步。保持血漿樣品中所有細(xì)胞的完好形態(tài)，成為血液常規(guī)檢查的高質(zhì)量標(biāo)本最基礎(chǔ)的條件。全血細(xì)胞標(biāo)本的制作主要包括兩個(gè)過(guò)程：采集和抗凝。2、標(biāo)本的采集針對(duì)采血區(qū)域，獲得大量血常規(guī)標(biāo)本，最常見的途徑為血液切開法和末梢毛細(xì)血管內(nèi)采血。各種類型的資料都證明，靜脈血樣是最準(zhǔn)確的標(biāo)本，是指與靜脈血差異最小且在末端毛細(xì)血管血樣中更穩(wěn)定的血樣。手指血仍然不如靜脈血準(zhǔn)確和可重復(fù)；白細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著高(+8%)，而血小板計(jì)數(shù)顯著低(-9%)。所以，絕大多數(shù)專家建議：靜脈血應(yīng)用于血液的常規(guī)檢測(cè)，特別是在應(yīng)用血液分析儀時(shí)。3、標(biāo)本的抗凝進(jìn)行血常規(guī)檢查的血漿樣本都需要使用抗凝劑進(jìn)行抗凝，在目前的抗凝劑中，乙二胺四乙酸（EDTA）鹽主要是抗凝劑，對(duì)白細(xì)胞形態(tài)和血小板的影響相對(duì)較小，最適合血常規(guī)檢查。但除了對(duì)血液采樣原因（生理因素，采血部位等）的作用外，一般情況下血漿樣本的質(zhì)量還取決于血漿中抗凝劑的比例。當(dāng)血漿質(zhì)量不成比例地高時(shí)，由于抗凝劑的相對(duì)減少，血漿中具有微凝塊的可能性增加，并且當(dāng)進(jìn)行血液分析儀時(shí)，也容易阻塞傳感器。此外，一些測(cè)試項(xiàng)目受到干擾。血漿比重過(guò)低，抗凝劑相對(duì)過(guò)量，嚴(yán)重干擾檢查項(xiàng)目。乙二胺四乙酸（EDTA）鹽抗凝血液的使用改變了白細(xì)胞的形態(tài)，并且這種變化是由時(shí)間和乙二胺四乙酸（EDTA）鹽濃度依賴性的。乙二胺四乙酸（EDTA）鹽的最佳濃度（血液比率）為1.5。使用自動(dòng)血細(xì)胞分析儀時(shí)，這一點(diǎn)尤為重要。靜脈血與外周血中都可以使用的抗凝血藥抗凝全血標(biāo)本(標(biāo)本中不存在稀釋液或?qū)?biāo)本造成的稀釋度很小)，明顯很難獲得合適的血液和外周血抗凝標(biāo)本的比例，因此，大多數(shù)專家建議，在制備全血比例時(shí)非常困難。所以，根據(jù)大多數(shù)專家的意見，在研究人類全血比例上相當(dāng)艱難。所以，大多數(shù)專家都認(rèn)為，在提取全血標(biāo)本時(shí)，可采用定量的乙二胺四乙酸（EDTA）鹽的真空采血管收集靜脈血。而不管在顯微鏡檢驗(yàn)上或血液細(xì)胞分析儀中的應(yīng)用怎樣，由于樣本的絕大多數(shù)稀釋液都含有抗凝劑，因此可以將人體微量靜脈血或外周血直接添加到給定體積的稀釋液中（10至40μl）準(zhǔn)備好常述的稀釋標(biāo)本制備。稀釋樣本的制備大部分適用于來(lái)自外周血的血液樣品。4、標(biāo)本的稀釋血漿，是由二階段血細(xì)胞和血漿構(gòu)成的紅色粘性懸浮液。在顯微鏡下或用血液分析儀進(jìn)行全血細(xì)胞測(cè)定計(jì)數(shù)時(shí)，則難以進(jìn)行用血計(jì)量，并且在進(jìn)行血細(xì)胞檢測(cè)計(jì)數(shù)之前需要適當(dāng)和準(zhǔn)確地稀釋血液。根據(jù)全血細(xì)胞分析儀的工程設(shè)計(jì)基礎(chǔ)，在全血細(xì)胞分析儀的設(shè)計(jì)應(yīng)用中，稀釋因子和計(jì)量是最關(guān)鍵的工程設(shè)計(jì)技術(shù)指標(biāo)之中。從20世紀(jì)50年代初開始，血細(xì)胞分析儀，使用傳感器測(cè)量和血細(xì)胞稀釋形態(tài)作為發(fā)射器，應(yīng)均勻流過(guò)傳感器，或同時(shí)對(duì)其產(chǎn)生影響。其具體應(yīng)用是在稀釋溶液中稀釋血漿以形成稀釋樣品（稀釋比為1:N），以流量檢測(cè)方式檢測(cè)一定量?jī)?nèi)（V）的稀釋標(biāo)本血細(xì)胞數(shù)（T），轉(zhuǎn)換為血液中細(xì)菌的濃度（L）；因此，準(zhǔn)確的合理稀釋因子（紅細(xì)胞通常為1:10000-1:30000，儀器中使用PLT；白細(xì)胞，HCB約為1:250）和準(zhǔn)確穩(wěn)定的體積測(cè)定，是另一種血細(xì)胞測(cè)定的基礎(chǔ)。稀釋系數(shù)太低應(yīng)當(dāng)通過(guò)傳感器對(duì)齊時(shí)，細(xì)胞很容易產(chǎn)生缺陷；盡管過(guò)度稀釋因子在相應(yīng)的測(cè)定體積中產(chǎn)生過(guò)量的血細(xì)胞，但這些因素都嚴(yán)重降低了全血細(xì)胞測(cè)定的計(jì)算準(zhǔn)確性。5、標(biāo)本的儲(chǔ)存如前所述，由于時(shí)間和濃度的差異，抗凝血?jiǎng)?huì)對(duì)血細(xì)胞形態(tài)產(chǎn)生影響。在樣本采集后5分鐘、30分鐘內(nèi)以及8小時(shí)內(nèi)（室溫）進(jìn)行測(cè)試時(shí)，用EDTA鹽對(duì)靜脈血樣本進(jìn)行抗凝可獲得最佳測(cè)試結(jié)果。因?yàn)椴灰蟾_的血小板和白細(xì)胞定位信息，標(biāo)本在2℃~8℃條件下可以保存長(zhǎng)達(dá)二十四小時(shí)。事先稀釋的各種標(biāo)本，一般必須在各種標(biāo)本物制成后十分鐘內(nèi)進(jìn)行；若用細(xì)胞穩(wěn)定劑摻入稀釋液中，則事先稀釋的各種標(biāo)本保存時(shí)限不大于四小時(shí)。6、儀器的校準(zhǔn)及試劑的配套使用目前的血細(xì)胞分析儀在實(shí)驗(yàn)室中基本上很受歡迎，因此儀器的正確使用也與測(cè)試結(jié)果的質(zhì)量有關(guān)。首先，儀器設(shè)備必須按照要求放置于正確的位置上，實(shí)驗(yàn)室要密閉整潔干凈，供電平穩(wěn)。儀器所用的試劑應(yīng)當(dāng)達(dá)到國(guó)務(wù)院規(guī)定的，并盡量采用輔助儀器。在抽血后的指定時(shí)間內(nèi)完成測(cè)定。由于分析儀的分析原理再次決定了其局限性，因此只能對(duì)細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行篩選，并且不能識(shí)別細(xì)胞儀器。所以它也需要我們用顯微鏡檢查。7、做好質(zhì)控工作每天質(zhì)控，室內(nèi)指控通常有兩種方式，一種使用全血細(xì)胞質(zhì)對(duì)照，每天用常規(guī)樣品測(cè)定，然后繪制QC圖以查看平均值，標(biāo)準(zhǔn)偏差是否存在差異；另一個(gè)RBC平均指數(shù)，浮動(dòng)平均分析，由患者RBC指數(shù)的變化規(guī)律進(jìn)行質(zhì)量控制。結(jié)語(yǔ)綜上所示，影響血常規(guī)檢查結(jié)果的因素很多，為了獲得準(zhǔn)確的檢測(cè)數(shù)據(jù)，有必要在實(shí)驗(yàn)的每個(gè)步驟中嚴(yán)格遵循操作方案[3]。Reference[1]衛(wèi)克生.全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀與血涂片細(xì)胞形態(tài)學(xué)在血常規(guī)檢驗(yàn)中的應(yīng)用[J].中國(guó)藥物與臨床，2021，21(7):1219-1220[2]史彩