(36)-2.4.113C-NMR譜在中藥化學(xué)成分鑒定中應(yīng)用

13C-NMR譜在中藥化學(xué)成分鑒定中應(yīng)用13C峰度僅1.11％，比1H信號(hào)弱得多，約1/6400化學(xué)位移范圍：0～220ppm提供各種類型碳（伯、仲、叔、季碳）的信息。不能用積分曲線獲取碳的數(shù)目信息13C-NMR的特點(diǎn)鄰近有吸電子基團(tuán)，信號(hào)移向低場(chǎng)（左移）碳周圍電子密度增加，信號(hào)移向高場(chǎng)（右移）常規(guī)13CNMR譜為全去偶譜，因而所有的碳信號(hào)均為單峰。13C-NMR的特點(diǎn)①質(zhì)子寬帶去偶也稱質(zhì)子噪音去偶或全氫去偶。此時(shí)H的偶合影響全部被消除，從而簡(jiǎn)化了圖譜。在分子中沒(méi)有對(duì)稱因素和不含F(xiàn)、P等元素時(shí)，每個(gè)碳原子都會(huì)給出一個(gè)單峰，互不重疊。雖無(wú)法區(qū)別碳上連接H的數(shù)，但對(duì)判斷13C信號(hào)的化學(xué)位移十分方便。因照射H后產(chǎn)生NOE現(xiàn)象，連有H的C信號(hào)強(qiáng)度增加。季碳信號(hào)因不連有H，表現(xiàn)為較弱的峰。②偏共振去偶在偏共振去偶譜中，每個(gè)連接質(zhì)子的碳有殘余裂分，故在所得圖譜中次甲基(-CH)碳核呈雙峰，亞甲基(-CH2)呈三重峰，甲基(-CH3)呈四重峰，季碳為單峰強(qiáng)度最低。由此可獲得碳所連接的質(zhì)子數(shù)、偶合情況等信息。但此法常因各信號(hào)的裂分峰相互重疊，對(duì)結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的中藥有效成分，有些信號(hào)難于全部識(shí)別或解析。β-紫羅蘭酮偏共振去偶譜③INEPT（低靈敏核極化轉(zhuǎn)移增強(qiáng)法，insensitivenucleienhancedbypolarizationtransfer）用調(diào)節(jié)弛豫時(shí)間(Δ)來(lái)調(diào)節(jié)CH、CH2、CH3信號(hào)的強(qiáng)度，從而有效地識(shí)別CH、CH2、CH3。季碳因?yàn)闆](méi)有極化轉(zhuǎn)移條件，所以在INEPT譜中無(wú)信號(hào)。當(dāng)Δ＝1/4（JCH）時(shí),CH、CH2、CH3皆為正峰；當(dāng)Δ＝2/4（JCH）時(shí),只有正的CH峰；當(dāng)Δ＝3/4（JCH)時(shí),CH、CH3為正峰,CH2為負(fù)峰。由此可以區(qū)分CH、CH2和CH3信號(hào)。再與質(zhì)子寬帶去偶譜對(duì)照，還可以確定季碳信號(hào)。INEPT譜④DEPT（無(wú)畸變極化轉(zhuǎn)移增強(qiáng)法，distortionlessenhancementbypolarizationtransfer）是INEPT的一種改進(jìn)方法。在DEPT法中，通過(guò)改變照射1H的脈沖寬度(θ)，使為45o、90o、和135o變化并測(cè)定13C-NMR譜。即當(dāng)θ=45o時(shí)，所有的CH、CH2、CH3均顯正信號(hào)；當(dāng)θ=90o時(shí)，僅顯示CH正信號(hào)；當(dāng)θ=135o時(shí)，CH和CH3為正信號(hào)，而CH2為負(fù)信號(hào)。季碳同樣無(wú)信號(hào)出現(xiàn)。由此可以區(qū)分CH、CH2和CH3信號(hào)。還可以確定季碳信號(hào)。④DEPT（無(wú)畸變極化轉(zhuǎn)移增強(qiáng)法，distortionlessenhancementbypolarizationtransfer）一種特殊技術(shù)，可識(shí)別碳的類型（CH3,CH2,CH,andC)可確定與碳相連的質(zhì)子的數(shù)目以及各類碳的數(shù)目。

DEPT13CNMRcitronellal13C-NMR的化學(xué)位移區(qū)分譜圖中的溶劑峰和雜質(zhì)峰。同氫譜中一樣，測(cè)定液體核磁共振碳譜也須采用氘代溶劑。碳譜中雜質(zhì)峰的判斷可參照氫譜解析時(shí)雜質(zhì)峰的判別。一般雜質(zhì)峰均為較弱的峰。分析化合物結(jié)構(gòu)的對(duì)稱性。當(dāng)譜線數(shù)目與分子式中碳原子數(shù)目相等時(shí)，說(shuō)明分子沒(méi)有對(duì)稱性，而當(dāng)譜線數(shù)目小于分子式中碳原子數(shù)目時(shí)，則說(shuō)明分子中有某種對(duì)稱性，在推測(cè)和鑒定化合物分子結(jié)構(gòu)時(shí)應(yīng)加以注意。當(dāng)化合物較為復(fù)雜，碳原子數(shù)目較多時(shí)，則應(yīng)考慮不同類型碳原子的化學(xué)位移值的偶然重合。碳譜的解析步驟按化學(xué)位移值分區(qū)確定碳原子類型。碳譜按化學(xué)位移值一般可分為下列三個(gè)區(qū)，根據(jù)這三個(gè)區(qū)域可大致歸屬譜圖中各譜線的碳原子類型。飽和碳原子區(qū)（<100）飽和碳原子若不直接和雜原子（O、S、N、F等）相連，其化學(xué)位移值一般小于55。不飽和碳原子區(qū)（

90-160）烯碳原子和芳碳原子在這個(gè)區(qū)域出峰。羰基或疊烯區(qū)（

>150）該區(qū)域的基團(tuán)中碳原子的值一般>160。其中酸、酯和酸酐的羰基碳原子在160-180出峰，酮和醛在200以上出峰。碳原子級(jí)數(shù)的確定。碳譜的解析步驟對(duì)碳譜各譜線進(jìn)行歸屬。推測(cè)出化合物的結(jié)構(gòu)或按分子結(jié)構(gòu)歸屬各條譜線。若分子中含有較為接近的基團(tuán)或骨架時(shí)，則按上述步驟也很難將所有譜線一一歸屬，這時(shí)可參照氫譜或采用碳譜近似計(jì)算的方法。利用二維13C-1H相關(guān)譜可清楚地解析絕大部分有機(jī)化合物碳譜中的每一條譜線。碳譜的解析步驟何為質(zhì)子寬帶去耦，有何作用？質(zhì)子寬帶去偶也稱噪聲去偶（protonnoisedecoupling）。使所有氫對(duì)碳核的偶合