肌酐實驗室檢測講座

肌酐實驗室檢測講座石家莊腎病醫(yī)院檢驗輯課件肌酐的測定血清非蛋白含氮化合物的一種，肌肉組織中肌酸或磷酸肌酸代謝的最終產物。肌酐的排出量相當恒定，不受食物蛋白質含量及尿量的影響而與肌肉發(fā)達程度、性別及年齡有關。肌酐的測定是臨床診斷的重要指標。編輯課件

肌酐檢測分類：（一）化學法：堿性苦味酸法1.漂白土堿性苦味酸法2.陽離子交換樹脂法3.速率法4.雙PH法（二次讀數(shù)法）（二）酶法：1.肌酐酰胺水解酶法2.肌酐亞氨水解酶法（三）高效液相色譜法編輯課件

堿性苦味酸法：堿性溶液肌酐+苦味酸肌酐-苦味酸加成物（紅色）510nm比色pH4：肌酐-苦味酸加成物肌酐-苦味酸加成物（紅色）（黃色）編輯課件

堿性苦味酸法測定肌酐存在非特異的色素原干擾：干擾物質：抗壞血酸、a-酮酸、丙酮、乙酰乙酸、葡萄糖、蛋白質、胍以及其它化合物。這些不是肌酐而能與堿性苦味酸反應生成紅色的物質稱為假肌酐。*相當大量的假肌酐存在與紅細胞中，測定時不宜采用全血。編輯課件

排除干擾方法：1.漂白土吸附法：一種硅酸鋁土,酸性條件下吸附無蛋白血濾液中的肌酐，然后加入堿性苦味酸試劑洗脫肌酐并顯色。2.陽離子交換樹脂法：陽離子交換樹脂（Ag50WX2，100~200目）吸附血清或尿中肌酐，肌酐洗脫后與堿性苦味酸反應。編輯課件

3.速率法（動力學法）：根據(jù)肌酐和堿性苦味酸形成復合物的速度與非肌酐干擾物的不同，且肌酐的反應速度與濃度成正比的原理。干擾物質：a.快反應物質最初30s內反應

b.慢反應物質120s以后反應肌酐反應：31~60s

該法有助于解決反應的特異性，可消除某些非化學反應的干擾且簡單、快速編輯課件

4.雙pH法（二次讀數(shù)法）：利用肌酐苦味酸復合物和假肌酐質與苦味酸復合物的色澤穩(wěn)定性差別原理。肌酐假肌酐+堿性苦味酸紅色復合物紅色復合物酸化至pH4酸化至pH4

褪色不褪色編輯課件

（二）酶法：1.肌酐酰胺水解酶法：肌酐水合酶肌酐+H2O肌酸肌酸激酶肌酸+ATP磷酸肌酸+ADP丙酮酸激酶ADP+磷酸烯醇式丙酮酸丙酮酸+ATP乳酸脫氫酶丙酮酸+NADH+H+

乳酸+NAD+340nm比色編輯課件

2.肌酐亞氨水解酶法：肌酐酶水解肌酐N-甲基內酰+NH3

溴酚藍電極或離子電極測NH3酶法優(yōu)點：特異性高、準確性好缺點：酶試劑昂貴、來源困難、不易保存（三）高效液相色譜法：準確性、特異性好，一般作為參考方法編輯課件實驗82去蛋白堿性苦味酸法測定血清肌酐[原理]血清經除蛋白處理后，肌酐與堿性苦味酸反應，生成紅橙色的苦味酸肌酐復合物，在510nm測定吸光度，與肌酐含量成正比。[試劑]1.35mmol/L鎢酸溶液沉淀蛋白質，去除蛋白質對反應的干擾。編輯課件2.0.04mol/L苦味酸溶液與肌酐反應，生成肌酐-苦味酸復合物3.0.75mol/L氫氧化鈉溶液提供堿性環(huán)境編輯課件[肌酐檢測注意事項]1.制備去蛋白血濾液時，鎢酸溶液