常用抗生素配法

目的：配制500ml的50mg/ml氨芐青霉素貯存液。實(shí)驗(yàn)用品的準(zhǔn)備：足夠量的2ml的EP管，濾頭（內(nèi)裝有兩層濾膜）、兩個(gè)50ml的離心管、注射器，以上用品除注射器外都要進(jìn)行高壓滅菌；注意：（1） 濾頭滅菌前，安裝濾膜時(shí)，不要旋得太緊，待滅菌后使用前于超凈臺(tái)上用力旋緊，以防漏液。（2） EP管，濾頭、兩個(gè)50ml的離心管滅菌后要進(jìn)行烘干?？股厝芤旱呐渲疲海?） 稱取25g的氨芐青霉素粉末，倒入盛有200—300ml去離子水的燒杯中，最好在燒杯上面蓋個(gè)東西（封口膜或者干凈的濾紙），以防止粉末飄出，輕搖燒杯，可見氨芐青霉素粉末迅速溶解。（2） 待氨芐青霉素粉末溶解完，加去離子水至500ml，稍等幾分鐘讓粉末完全溶解，以免過濾時(shí)堵塞濾膜。氨芐青霉素溶液的過濾除菌及分裝：（1） 取出舊報(bào)紙包裹的濾頭，用力旋緊，備用。（2） 用注射器吸取配制好的溶液，然后把濾頭安在注射器上，緩緩?fù)苿?dòng)注射器活塞，把溶液經(jīng)濾膜推至50ml的離心管中，直至把兩個(gè)離心管都注滿。注意：動(dòng)作用緩和，一只手拿著活塞，一只手拿著濾頭，使濾出液出口正對(duì)著離心管，還要防止染菌。（3） 把50ml離心管中已除菌的氨芐青霉素溶液分裝到2ml的EP管中。（4） 重復(fù)（2）、（3）直至把500ml溶液分裝完畢。（5） 在EP管上做好標(biāo)記，包括名稱、日期等。（6） 把做好標(biāo)記的盛有氨芐青霉素的EP管于-20°C保存。氨革青霉素*組分濃度100mg/ml氨芐青霉素*配制量50ml*配制方法1.稱取5gAmpicilli置于50ml塑料離心管中。2.加入40ml滅菌水，充分混合溶解之后定容至50ml。3.0.22μm濾膜過濾除菌，小份分裝（1ml一管）后，置于一20C保存。卡那霉素*組分濃度50mg/ml卡那霉素*配制量50ml*配制方法1.稱取2.5g卡那霉素置于50ml塑料離心管中。2.加入40ml滅菌水，充分混合溶解之后定容至50ml。3.0.22μm濾膜過濾除菌，小份分裝（1ml一管）后，置于一20°C保存。RNaseA*組分濃度10mg/mlRNaseA*配制量50ml*配制方法1.取0.5gRNaseA置于50ml塑料離心管中。2.加入40ml滅菌水，充分混合溶解之后定容至50ml。3.100C煮沸15min,緩慢冷卻至室溫，小份分裝（1ml一管）后，置于一20C保存。IPTG*組分濃度24mg/mlIPTG*配制量50ml*配制方法1.稱取1.2gIPTG置于50ml塑料離心管中。.加入40ml滅菌水，充分混合溶解之后定容至50ml。3.用0.22μm濾膜過濾除菌，小份分裝（1ml一管）后，置于一20C保存。X-Gal*組分濃度20mg/mlX-Gal*配制量50ml*配制方法1.稱取1gX-Gal置于50ml塑料離心管中。2.加入40mlDMF（二甲基甲酰胺），充分混合溶解之后定容至50ml。.小份分裝（1ml一管）后，置于一20C保存DTT*組分濃度1MDTT*配制量10ml*配制方法1.稱取1.54gDTT置于15ml塑料離心管中。2.加入8ml的10mMNaAc (pH5.2)，充分混合溶解之后定容至10ml。3.用0.22μm濾膜過濾除菌，小份分裝(1ml一管)后，置于一20°C保存。EDTA~溶液*組分濃度0.5MEDTA*配制量1L*配制方法1.稱取186.1gNa2EDTA?2H2O置于1L燒杯中。加入800ml的去離子水，置于磁力攪拌器上充分?jǐn)嚢?。用NaOH