動(dòng)物繁殖學(xué)生產(chǎn)實(shí)習(xí)綜述

動(dòng)物繁殖學(xué)生產(chǎn)實(shí)習(xí)綜述姓名:xxx學(xué)號：xxxxxx（所在院系：xxxx指導(dǎo)老師：xxxxxxx）摘要：通過對繁殖技術(shù)的觀看、理化因素對精子的影響、豬的采精、冷凍精液的制作、兔子采精、PMSG和FSH生物測定法的實(shí)習(xí)操作，把理論與生產(chǎn)實(shí)踐相聯(lián)系、把學(xué)與習(xí)相結(jié)合，掌握了影響精子活率的理化因素、采精的技術(shù)、對精子的品質(zhì)檢測、精液的冷凍及超數(shù)排卵和同期發(fā)情技術(shù)，獲益匪淺。關(guān)鍵詞：采精；冷凍精液；超數(shù)排卵；繁殖技術(shù)；正文：一、理化因素對精子的影響（一）實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖炀氄莆站浩焚|(zhì)檢查的方法，觀察理化因素對精子運(yùn)動(dòng)及生存性能的影響。（二）實(shí)驗(yàn)材料1、新鮮豬精液2、藥械用品：顯微鏡、載玻片、蓋玻片、溫度計(jì)、滴管、紗布、蒸餾水、3%和1%氯化鈉溶液、2%煤酚溶液、75%酒精等。（三）實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1、溫度的影響將新鮮原精液1滴滴在載玻片上，置于顯微鏡下觀察其精子活率，再放在45-50°C溫度下2min，觀察精子活率有何變化。2、滲透壓的影響將新鮮原精液作出精子活率評級后，分別在2滴原精液內(nèi)分別加入3%氯化鈉和蒸餾水1滴混合均勻后觀察精子活率及精子形態(tài)有何變化。3、化學(xué)消毒藥物的影響取1滴原精液置于載玻片上，評定其精子活率后，再用滴管往精液上滴1滴70%酒精，觀察精子活率及形態(tài)有何變化。（四）實(shí)驗(yàn)結(jié)果1、正常精子的活率評為0.9,在45C處理后，發(fā)現(xiàn)精子的運(yùn)動(dòng)速度明顯減慢，且有很多精子停止運(yùn)動(dòng)，活率評為0.3。這是由于精子的耐高溫很差，在45C時(shí)，很多精子中的失去活性，導(dǎo)致精子死亡。2、新鮮原精液加入3%氯化鈉和蒸餾水后，精子全部死亡。這是由于新鮮原精液的精子處在等滲狀態(tài)，活率最高，加入3%氯化鈉，形成高滲環(huán)境，精子失水死亡。加入蒸餾水形成低滲環(huán)境，精子吸水漲破。3、原精液滴1滴70%酒精后，會(huì)觀察到精子一點(diǎn)點(diǎn)在喪失活力，在一側(cè)滴上酒精后，會(huì)發(fā)現(xiàn)精子在向另一側(cè)沒有酒精的一側(cè)移動(dòng)，到最后精子幾乎全部都死亡。這是因?yàn)橄舅幬锶缇凭蛎悍訉佑卸竞ψ饔?。二、觀看繁殖技術(shù)錄像片（一）實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私庳i、牛、羊等家畜的生殖生理，掌握人工受精的相關(guān)繁殖技術(shù)。（二）實(shí)驗(yàn)材料關(guān)于家畜繁殖的有關(guān)的VCD（三）實(shí)驗(yàn)內(nèi)容主要觀看牛豬的生殖生理與人工受精操作錄像（四）實(shí)驗(yàn)結(jié)果通過觀看有關(guān)家畜主要是牛豬的繁殖的VCD，了解到了很多關(guān)于牛羊豬的生殖生理與人工受精操作的基本知識。對要進(jìn)行的關(guān)于兔子的采精和豬的采精有了初步的了解，為接下來的實(shí)習(xí)奠定了基礎(chǔ)。三、激素對母兔卵巢的作用（一）實(shí)習(xí)目的通過實(shí)驗(yàn)了解促卵泡素，孕馬血清促性腺激素，人絨毛膜促性腺激素的作用。了解卵子的正常和異常形態(tài)結(jié)構(gòu)，認(rèn)識受精卵和未受精卵之區(qū)別，初步掌握沖卵和檢卵技術(shù)，為掌握胚胎移植技術(shù)奠定基礎(chǔ)。（二）材料和器械1、動(dòng)物：挑選健康，成年未孕的母兔2、器具：玻璃注射器，兔用手術(shù)臺，創(chuàng)巾，止血紗布，藥棉，縫合針和線，移卵管，實(shí)體顯微鏡3、藥品：FSH，PMSG，HCG，75%酒精，0.9%NaCl，碘酒，新潔爾滅液，沖卵液，麻醉藥（三）內(nèi)容和步驟1、兔超數(shù)排卵處理（1）FSH處理組先用酒精棉球消毒母兔股內(nèi)側(cè)，每只每次肌肉注射FSH60-80IU，連續(xù)注射6次，每次相隔10~14h，最后一次注射FSH后，從耳靜脈注射（先用酒精棉球消毒耳朵邊緣）HCG65-75IU，隨即放入公兔籠內(nèi)，觀察是否配種。一般來說，超排處理后，母兔陰部表現(xiàn)出發(fā)情癥狀，能成功地配種。（2）PMSG處理組母兔股內(nèi)側(cè)消毒同上。一次注射PMSG100-1200IU。之后72h，同上述方法注射同量的HCG，隨即放入公兔籠內(nèi)。（3）對照組每天注射10ml蒸餾水。（四）手術(shù)沖胚方法耳靜脈注射10ml空氣處死供體母兔。如做活體手術(shù)，則用麻醉藥麻醉后再按外科手術(shù)要求打開腹腔。將把母兔背朝下放固定于兔手術(shù)臺上。在母兔腹部最后兩對乳頭的腹中線部剪毛用沾滿肥皂水的紗布清洗局部，再用須刀刮毛，先后分別用碘酒和酒精棉球由內(nèi)向外進(jìn)行消毒，然后蓋上創(chuàng)巾并固定好。用手術(shù)刀在腹中線處皮膚切開2~3cm長的術(shù)口，再在腹壁肌白線上切一小口，用中指墊著以手術(shù)剪擴(kuò)大術(shù)口?；铙w沖卵時(shí)，要注意止血。打開腹腔后，沿著子宮輕輕引出輸卵管及卵巢。與卵巢下脂肪組織處，以長夾夾注以固定卵巢。仔細(xì)觀察卵巢的變化，記錄排卵點(diǎn)（卵巢排完卵后的小紅點(diǎn)）。先在卵巢附近找到輸卵管的傘，從傘部插入沖卵管并用手指或夾子固定，另一端接表面皿。另一個(gè)人用10ml注射器配制6號針頭吸一管沖卵液（可用生理鹽水代替）。從子宮向輸卵管方向，與子宮角末端和輸卵管交界的無血管處插入針頭，使針頭伸入輸卵管內(nèi)并用手指固定。然后慢慢地推動(dòng)注射器，將沖卵液注入輸卵管，使沖卵液由傘部收集到表面皿內(nèi)。一般每次5ml即可。注意沖卵液不得流失。（五）早期胚胎觀察將接有沖卵液的表面皿置于體視顯微鏡下，檢查胚胎的數(shù)量和發(fā)育形態(tài)。正常兔的受精卵是卵圓形，直徑為140“m，在透明帶外圍有一厚層黏蛋白層（兔胚胎特有結(jié)構(gòu)）。卵黃顆粒很細(xì)，分布很均勻，容易看到核的變化。在卵黃周隙內(nèi)可見2個(gè)極體。而未受精的卵母細(xì)胞中，粗細(xì)不一的卵黃顆粒清楚可見，且分布不均，不能看到細(xì)胞核，在卵黃周隙內(nèi)只有一個(gè)極體。一般在交配后24h，受精卵已發(fā)育成2-細(xì)胞胚胎，48h即發(fā)育成16-細(xì)胞胚胎（早期桑葚胚）。（六）胚胎移植受體的選擇選擇與共同發(fā)情時(shí)間一致（發(fā)情時(shí)間相差不易超過一天）的受體（自然發(fā)情或超排處理誘發(fā)發(fā)情）。保定、麻醉、開腹手術(shù)參照供體處理方法。胚胎分裝先向輸卵管內(nèi)吸進(jìn)少量PBS，接著吸入一點(diǎn)空氣，然后再將胚胎連同少量PBS吸入，接著再吸入一點(diǎn)空氣和PBS，在移卵管尖端保留一段空隙，這樣就可防止胚胎丟失。移植部位將胚胎移入排卵側(cè)的生殖道內(nèi)。凡從供體輸卵管內(nèi)得到的胚胎應(yīng)移植到受體輸卵管內(nèi)。從輸卵管的傘部插入移卵管2~3cm深，輕輕地注入胚胎，最后慢慢地抽出移卵管。一般一側(cè)輸卵管可移植5?10枚胚胎。如從供體子宮收集的胚胎也應(yīng)移植到受體母兔相應(yīng)得部位?？p合按外科手術(shù)要求分別縫合肌層和皮膚，并進(jìn)行消毒。注意手術(shù)后供體和受體的護(hù)理。四、豬的采精（一）實(shí)驗(yàn)?zāi)康模赫莆肇i的采精操作方法和操作要點(diǎn)以及在采精過程中的注意事項(xiàng)。（二）實(shí)驗(yàn)材料：種公豬、棉花、紗布、溫度計(jì)、漏斗、大搪瓷盤、熱水、2%煤酚皂液、凡士林、酒精棉球、鑷子。（三）實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1、種公豬的調(diào)教2、采精前的準(zhǔn)備量筒、三角瓶用洗滌劑洗過、沖凈，空水后放入消毒柜中，用100-125°C溫度消毒1小時(shí)。精液分裝管，用過立即用蒸餾水沖洗，并用75%酒精沖洗，可與輸精器一起放入消毒柜中，在100C溫度下消毒1小時(shí)。大燒杯、集精杯用自來水、洗滌劑洗凈，沖洗后晾干，用前與精液分裝管一起放入消毒柜中，溫度調(diào)至38C，預(yù)熱5分鐘。清洗雙手，用電吹風(fēng)或恒溫箱加熱集精杯，防止集精杯過冷。集精杯的準(zhǔn)備，將集精杯加溫。在集精杯中放入兩層食品袋口翻向保溫杯外，用干凈玻璃棒使食品袋與集精杯內(nèi)壁貼服將一張專用濾網(wǎng)放在保溫杯上用一根橡皮筋將濾網(wǎng)固定，并使網(wǎng)面下陷。3、采精過程清除公豬肋部和腹部的臟物，用右手按摩公豬包皮盡可能多的排放包皮腔中的尿液，并用紙巾拭干，誘導(dǎo)公豬爬跨假母豬，公豬陰莖勃起后，右手呈空拳，拳心向上，使陰莖進(jìn)入空拳中，并立即鎖定陰莖的龜頭，順其向前沖力，將陰莖盡可能的拉出。左手打開集精杯蓋，公豬開始射精后不要立即收集，待公豬射出部分精亮的液體后，開始收集含精多的部分，當(dāng)公豬開始環(huán)顧四周時(shí)，說明公豬射精即將結(jié)束。注意不要過早終止射精，以免影響公豬的健康。第一次射精結(jié)束后可通過適當(dāng)刺激是公豬進(jìn)行第二次射精。4、注意事項(xiàng)（1）最好每3天采一次精。（2）采精時(shí)間要固定，以形成良好的條件反射，最好在每天的9點(diǎn)到10點(diǎn)左右。（3）不要收集最初射出的精液，不要過早終止采精，以防公豬不適。（4）避免精液溫度變化過快，防止陽光照射或紫外線照射。（5）采精的整個(gè)過程，應(yīng)小心仔細(xì)，不要粗暴，以免引起公豬的反感，而影響采精。（四）實(shí)驗(yàn)結(jié)果本次實(shí)習(xí)，主要是觀察老師如何現(xiàn)場操作，由于同學(xué)太多，剛開始公豬有點(diǎn)緊張?，F(xiàn)場觀察，身臨其境，對與豬的采精的手法加深了解，同時(shí)也掌握了在公豬爬跨母臺豬的過程，如何誘導(dǎo)公豬爬跨，最終成功采集精液。五、冷凍精液的制作（一）實(shí)驗(yàn)?zāi)康模壕豪鋬鍪且环N重要的繁殖技術(shù)。通過本次試驗(yàn)，要求能基本掌握冷凍精液的制作技術(shù)。（二）實(shí)驗(yàn)材料1、新鮮豬精液2、葡萄糖、檸檬酸鈉、甘油、雞蛋、青霉素、鏈霉素等。3、100ml量杯、20ml量筒、50-100ml燒杯、滴管、注射器、小試管、保溫瓶、水浴鍋、液氮罐、液氮.（三）實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1、配制稀釋液和解凍液：稀釋液：8%葡萄糖50ml過濾一水浴消毒10分鐘一冷卻一去38.5ml加卵黃10mlf加甘油1.5ml—加雙抗50000單位解凍液：5%葡萄糖50ml過濾一水浴消毒10分鐘一冷卻一去38.5ml—加卵黃10ml一加甘油1.5ml—加雙抗50000單位2、稀釋與平衡：取新鮮豬精液，用等溫的稀釋液以1：1稀釋后，（分別取2ml）用紗布和棉花包裹，放在8°C條件下3.5-6h。3、冷凍：用金屬容器盛滿液氮，用塑料板作為冷凍固定板，在距離液氨面1-2cm處。待降溫恒定后，用滴管將經(jīng)平衡后的精液滴在冷凍板上。每顆精粒體積約為0.1ml，當(dāng)冷凍板上的顆粒由黃色轉(zhuǎn)為發(fā)白有光澤時(shí)，可收集精粒。4、冷凍檢查：取解凍液1ml，放入小試管內(nèi)，浸入40C熱水中經(jīng)2-3min后，投入顆粒凍精，待溶化1/2-2/3時(shí)，取出精液試管，當(dāng)精液全部溶化后，檢查并評定精子活率。（四）實(shí)驗(yàn)結(jié)果冷凍精液解凍后觀察其品質(zhì)，發(fā)現(xiàn)精子幾乎全部死亡。產(chǎn)生這樣的現(xiàn)象原因有可能是：可能是原精液的品質(zhì)低，精子的存活力低；葡萄糖消毒不準(zhǔn)確，導(dǎo)致一些精子被殺死；在平衡的時(shí)候?qū)拥陌粔?；在冷凍的時(shí)候沒有在液氮面1-2cm處等待降溫，直接把冷凍板浸泡在液氮里；在解凍時(shí)沒有把解凍液加熱到指定溫度，就進(jìn)行了解凍。冷凍的操作不準(zhǔn)確，沒有做到位。六、PMSG和FSH生物測定法（一）實(shí)驗(yàn)?zāi)康臏y定PMSG和FSH的活性，掌握該激素的簡易效價(jià)測定方法，為將來進(jìn)行家畜繁殖方面的科研教學(xué)及畜牧生產(chǎn)實(shí)踐打下基礎(chǔ)。（二）實(shí)驗(yàn)材料1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:18-23日齡母兔3只。2、測定樣品:PMSG、FSH、生理鹽水。3、測定器具:10ml注射器、4號針頭、酒精棉球、剪刀、鑷子、搪瓷盤、兔子固定架。（三）實(shí)驗(yàn)內(nèi)容將兔子分3組，每組有1只兔子，將三只兔子作如下處理：1、第一組兔子，第一天上下午分別注射FSH30單位。第二天上下午分別注射FSH30單位，第三天下午注射HCG60單位。2、第二組兔子，第二天上午注射PMSG100單位，第三天下午注射HCG60單位。3、第三組的兔子，不做任何處理。4、在第四天下午通過手術(shù)法，在兔子的最后一對乳頭中間做一個(gè)10cm左右的切口，然后用手將輸精管引出，從輸卵管傘插入一條導(dǎo)管，從宮管處注入沖卵液10-25ml，觀察排卵數(shù)。（四）實(shí)驗(yàn)結(jié)果第一只兔子沖出10個(gè)卵泡，黃體數(shù)為12個(gè)，第二只兔子未沖出卵泡，黃體不明顯，第三只兔子沖出1個(gè)卵泡，黃體數(shù)為1。第一只兔子注射了FSH（垂體促性腺激素），可促進(jìn)卵巢上的卵泡發(fā)育，分泌雌激素，在雌激素的作用下，又可促進(jìn)子宮、卵巢及整個(gè)生殖器官的發(fā)育、增大，增加排卵的個(gè)數(shù)，第二只兔子注射PMCG，它與FSH有相同的作用，本應(yīng)增加排卵的個(gè)數(shù)，可是并沒沖出卵泡，這是由于試驗(yàn)中選的兔子并沒有成熟，還沒開始排卵導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗了，第三只兔子排卵數(shù)為4個(gè)，黃體數(shù)為4,該兔子沒經(jīng)過處理，是在正常狀態(tài)下的排卵，起對照作用?？偨Y(jié)：在這一周的實(shí)習(xí)中，掌握了影響精子活率的理化因素、采精的技術(shù)、對精子的品質(zhì)檢測、精液的冷凍及超數(shù)排卵和同期發(fā)情技術(shù)。雖然有的試驗(yàn)失敗，但是通過親手操作，掌握了相關(guān)技術(shù)，并從失敗中得到經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)，為以后的發(fā)展奠定基礎(chǔ)，下面是我的幾點(diǎn)總結(jié)：1、精子對理化因素要求較高，高溫、高滲透壓、低滲透壓、化學(xué)消毒藥物等，都能使精子的運(yùn)動(dòng)速度減慢，甚至全部殺死精子。因此，我們在保存精液時(shí)要注意理化因素對精子活率的影響，盡量使精子處于合適的理化條件下。2、通過看錄像來學(xué)習(xí)理論知識，形象生動(dòng)，提高同學(xué)們的學(xué)習(xí)積極性，然后通過具體的實(shí)踐練習(xí)來發(fā)現(xiàn)自己知識掌握的不足，從而更全面、準(zhǔn)確的學(xué)習(xí)豬、牛、羊等家畜的生殖生理，及采精、人工受精技術(shù)。3、給動(dòng)物采精時(shí)，要注意氣候條件，如果天氣太熱，盡量安排在早上和傍晚，避免在炎熱的中午，溫度太高將會(huì)影響公畜的發(fā)情和射精，如果用母畜做臺畜，要用發(fā)情的母畜，這樣有利于采精的操作。4、給公畜采精時(shí)，要注意公畜的調(diào)教，同時(shí)要注意采精手法和環(huán)境。正確的采精方法是采精成功與否的關(guān)鍵。5、精液的冷凍，要求