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特種水產(chǎn)經(jīng)濟動物養(yǎng)殖技術(shù)海膽?zhàn)B殖技術(shù)五、采卵目前,獲得海膽成熟卵的方法很多如:解剖法、自然排放法;陰干流水與升溫刺激法;精液刺激法;滲透壓、射線刺激以及浸泡注射等方法。以下介紹幾種常用方法:
1、自然產(chǎn)卵采捕時機適當,性腺發(fā)育良好的親膽,在蓄養(yǎng)期間,可自然排放性產(chǎn)物。成熟的種膽通常在晚上17時30分~22時40分產(chǎn)卵。產(chǎn)卵前親膽一般活動頻繁,沿池壁不斷地爬行,此時可發(fā)現(xiàn)雄性海膽在池壁水表面處排精。排精時,從生殖孑L冒出一縷縷乳白色煙霧狀精液,一般出現(xiàn)排精的當天或1~2天,就可見到雌膽產(chǎn)卵時,也沿池壁水表面向上爬行。產(chǎn)卵時從生殖孔產(chǎn)出的卵子,呈桔黃色絨線狀,在水中逐漸散開呈顆粒狀散落下沉。一旦發(fā)現(xiàn)產(chǎn)卵排精,應立即移出種膽雌雄分別放人準備好的產(chǎn)卵容器中,使其繼續(xù)排放,產(chǎn)卵時間可持續(xù)30分鐘到1小時左右??稍诋a(chǎn)卵完畢或產(chǎn)卵期間實行人工授精,此方法的受精率在90%~100%。蝦夷馬糞海膽的雄膽排精2~3天后會陸續(xù)死亡,雌膽可繼續(xù)促熟暫養(yǎng)再次產(chǎn)卵。
2、陰干流水升溫刺激法性腺成熟的親膽在蓄養(yǎng)期間可以利用陰干流水升溫刺激法使親膽集中排放,這一方法是沿用多數(shù)貝類、海參等刺激產(chǎn)卵的方法。一般做法是:親膽陰干1.5~2小時后,流水刺激1小時,再移到高于原水溫1~2℃的海水中,經(jīng)過2~3小時,出現(xiàn)排精產(chǎn)卵的現(xiàn)象。此法成功率視親膽的性腺發(fā)育程度而異,一般馬糞海膽可達40%左右,受精卵經(jīng)過幾次洗卵,除去多余的精子,即可移人孵化池(槽)孵化。
3、浸泡注射刺激法此法是非常有效的也是經(jīng)常使用的方法。做法是:用濃度為0.5mole/L的KCl溶液1~3ml進行體腔注射,即將需要誘導產(chǎn)卵的親膽,首先要經(jīng)過海水的充分洗滌,然后通過圍口膜,對準生殖腺中部進行體腔注射。注射后按親膽的殼徑大小立即將親膽置于不同口徑的燒杯或瓶口上,且將親膽的反口面向下,使其生殖孔浸泡于燒杯的海水中,或者直接將親膽放人盛有過濾新鮮海水的產(chǎn)卵槽(箱內(nèi))。另外,也可以用KCl溶液浸泡法,即將親膽經(jīng)過充分的海水洗滌后,將其置于盛有濃度為0.5mole/L的KCl溶液的容器內(nèi),使溶液淹沒生殖孔。一般浸泡或注射后1~3分鐘即可出現(xiàn)排精、產(chǎn)卵的現(xiàn)象。當雄、雌親膽出現(xiàn)排放性產(chǎn)物后,立即將它們分開,分別在不同的產(chǎn)卵(精)箱(杯)內(nèi),繼續(xù)排放性產(chǎn)物。排放結(jié)束后,選擇質(zhì)量好的卵子進行人工授精。
4、摘除口器法用剪刀環(huán)狀剪開圍口膜,提出口器后剪掉。用潔凈海水殼內(nèi)黏液,然后將其生殖孔向下懸吊于采卵槽水體上層,一般幾分鐘后排放,收集精卵。日本使用的方法是用剪刀把圍口膜剪掉,取出阿氏提燈,把海膽顛倒放在裝有海水的燒杯中,把海膽體液移出,并注入0.5mole/L的KCl溶液于體腔中。當海膽剛開始產(chǎn)卵時,立即將雌、雄個體分開,分別收集精、卵(海膽產(chǎn)卵前棘和管足有劇烈的抖動)。六、授精1、授精時間一般精子產(chǎn)出后1小時內(nèi),具有正常受精能力,卵子產(chǎn)出后0.5小時內(nèi),受精正常。
2、精子量的控制受精所用的精液以多個雄膽排放的混合精液為好,精子原液必須稀釋至1/250000,平均每個卵子加入1000個精子比例。否則精子過多,會產(chǎn)生異常體,畸形率高;而精子過少,則受精率偏低。另外產(chǎn)卵后應盡量早的進行受精,以提高受精率,受精時一邊加精液一邊輕輕攪動,以使卵子充分而均勻受精。受精3~5分鐘后取樣鏡檢,確定受精情況,若精子不足應盡早補充;顯微鏡觀察:加入精液1~3分鐘后,取少量精液顯微鏡下觀察,若絕大多數(shù)卵的卵黃周圍開始出現(xiàn)圍卵腔,說明受精良好。
3、洗卵目的:洗去多余精子及黏液。若大多數(shù)受精膜舉起,應使其靜止30分鐘后,待受精卵沉淀后,棄去上層清液,加新鮮過濾海水,并用此法反復洗卵3~5次,然后可移到孵化槽(池)內(nèi)進行孵化。方法:傾倒法虹吸法七、孵化孵化密度:蝦夷馬糞海膽成熟卵徑平均90um左右,受精卵徑達110~120um
,而光棘球海膽的成熟卵徑為110~130um,受精卵徑可達150~160um。孵化密度以小于20個/ml為宜,孵化期間不換水,應定時輕輕攪動或進行微量充氣,切不可充氣量過大。幼體孵化出后,發(fā)育至棱柱幼體,即可進行選優(yōu),移人培育池進行幼體培育。幼體上浮時間:幼體孵化上浮時間與種類和孵化水溫有
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