微生物純培養(yǎng)的分離方法

關于微生物純培養(yǎng)的分離方法第1頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月微生物純種分離將多種混雜微生物，經(jīng)某種技術或方法分離成純種的過程純培養(yǎng)（pureculture）將在實驗室條件下從一個細胞或一種細胞群繁殖得到的后代稱為純培養(yǎng)。第2頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月微生物樣品多種混雜某種方法分散成單個微生物平板培養(yǎng)單菌落每個菌落為純種（純培養(yǎng)）單菌落轉(zhuǎn)接培養(yǎng)純種（純培養(yǎng)）微生物純種分離的原理和方法第3頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月單個微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞群體，稱為菌落。菌落第4頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月一個菌落是一個純種，也是一個純培養(yǎng)；單個微生物只在固體培養(yǎng)基上形成菌落；在液體培養(yǎng)基中不會形成菌落第5頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月同一細菌在不同的培養(yǎng)平板上形成不同的特征菌落第6頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月分區(qū)劃線法（蛇形線法）操作圖第一區(qū)劃線第二區(qū)劃線第三區(qū)劃線一、劃線法第7頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月分區(qū)劃線法適用范圍：

適用于濃度較大的樣品第8頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月連續(xù)劃線法操作圖連續(xù)劃線法適用范圍：適用于濃度較小的樣品第9頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月二、稀釋平板法從土壤中分離純微生物104/ml103/ml102/ml101/ml第10頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月1、稀釋傾注分離法第11頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月涂布平板法稀釋倒平板法2、稀釋涂布分離法第12頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月采用顯微分離法從混雜群體中直接分離單個細胞或單個個體進行培養(yǎng)以得到純培養(yǎng)，稱為單細胞（單孢子）分離法。第13頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月個體較小的微生物需采用顯微操作儀分離難度與細胞或個體的大小成反比營養(yǎng)瓊脂平板上不能形成菌落較大的微生物可使用毛細管提取三、單細胞挑取法五、小滴分離法第14頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月Eachcolonywasexaminedmicroscopically第15頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月四、選擇培養(yǎng)基分離法創(chuàng)造適于目的微生物生長條件原理促使目的微生物快速生長呈優(yōu)勢菌抑制非目的微生物生長從混雜微生物中分離目的微生物第16頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月1、利用選擇培養(yǎng)基進行直接分離選擇培養(yǎng)基只允許特定微生物生長，而同時抑制或阻止其他微生物生長的培養(yǎng)基第17頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月土壤目的菌優(yōu)勢非目的菌選擇培養(yǎng)基直接分離單細胞選擇培養(yǎng)基平板（含牛奶或酪蛋白唯一C、N源）37℃培養(yǎng)目的菌落菌落周圍有透明蛋白水解圈1、利用選擇培養(yǎng)基進行直接分離例一：分離篩選蛋白酶產(chǎn)生細菌第18頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月含牛奶選擇培養(yǎng)基目的菌生長平板營養(yǎng)選擇因子：牛奶或酪蛋白只允許分解利用蛋白質(zhì)的目的菌生長，淘汰非目的菌長出的目的菌并不一定是同種細菌，但皆產(chǎn)蛋白酶例一：分離篩選蛋白酶產(chǎn)生細菌第19頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月例二：分離篩選產(chǎn)高溫淀粉酶（65℃）細菌單細胞選擇培養(yǎng)基平板（淀粉為唯一C源）65℃培養(yǎng)淀粉水解透明圈目的菌菌落選擇因子：營養(yǎng)選擇因子淀粉環(huán)境選擇因子65℃高溫第20頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月人為創(chuàng)造一些條件只讓所需的微生物生長，在這些條件下，所需要的微生物能有效地與其他微生物進行競爭，在生長能力方面遠遠超過其他微生物。2、富集培養(yǎng)法富集培養(yǎng)是分離微生物菌種最強有力的技術之一營養(yǎng)選擇因子和生理條件選擇因子可無窮盡組合，可從自然界選擇分離各類特異微生物第21頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月例：從土壤中分離能產(chǎn)生?－半乳糖苷酶的微生物富集培養(yǎng)選擇培養(yǎng)基分離目的菌驗證第22頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月1.接種針2.接種環(huán)3.接種鉤4.接種鋤5.接種鏟6.接種匙7.接種刀8.接種刀9.剪刀10.鋼鉤11.鑷子12.彈簧接種槍13.接種、槍（日本式）涂布棒彈簧接種槍第23頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月接種環(huán)的滅菌接種環(huán)燒紅接種環(huán)稍冷卻接種工具第24頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月