體外診斷試劑的標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)

第六章體外診斷試劑的標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)第一頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。目錄§6-1ISO17511-2003，即GB/T21415—2008 §6-2ISO18153:2003§6-3臨床化學(xué)體外診斷試劑(盒)通用技術(shù)要求§6-4體外診斷試劑性能測(cè)試的分析§6-5全自動(dòng)生化分析儀（YY／T0654-2008）的技術(shù)要求第二頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。ISO17511-2003，即GB/T21415—2008 該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了對(duì)以建立或確認(rèn)測(cè)量正確度為目的的校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性進(jìn)行確認(rèn)的方法。校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)由制造商提供，作為體外診斷醫(yī)療器械的一部分或與其一起使用。第三頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。ISO17511-2003，即GB/T21415—2008 由國(guó)際公認(rèn)的參考測(cè)量系統(tǒng)或國(guó)際公認(rèn)的約定參考測(cè)量系統(tǒng)賦值的、已證實(shí)具有互換性的室間質(zhì)量評(píng)價(jià)樣品適用于該標(biāo)準(zhǔn)。第四頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。§6-1ISO17511-2003，即GB/T21415—2008

GB/T21415—2008是關(guān)于《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測(cè)量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性》，由SAC/TC136全國(guó)醫(yī)用臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室和體外診斷系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口。第五頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。為了使檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)量的測(cè)量得到正確的醫(yī)學(xué)應(yīng)用、不論在何時(shí)何地都具有可比性，量必須有明確的定義，報(bào)告給醫(yī)生或其他衛(wèi)生人員及患者的結(jié)果必須準(zhǔn)確（正確和精密）。實(shí)現(xiàn)“正確的醫(yī)學(xué)應(yīng)用”不僅涉及溯源鏈的計(jì)量（分析）內(nèi)容。測(cè)量結(jié)果最終由醫(yī)生為患者服務(wù)，因此醫(yī)生還宜收集許多其他的信息，如關(guān)于分析前和分析后問(wèn)題；診斷靈敏度和診斷特異性，以及有關(guān)參考區(qū)間等內(nèi)容。第六頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。生物樣品中量的測(cè)量要隸參考測(cè)量系統(tǒng)包括與測(cè)量結(jié)果預(yù)期醫(yī)學(xué)應(yīng)用相關(guān)的生物樣品中分析物的定義；人體樣品中選定量的參考測(cè)量程序；適用于選定量的參考物質(zhì)，如一級(jí)校準(zhǔn)品和具有互換性的二級(jí)具基質(zhì)校準(zhǔn)品。第七頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。

為某一校準(zhǔn)品或正確度控制品的一個(gè)指定量所賦的值的測(cè)量正確度取決于該值通過(guò)不同測(cè)量程序和測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)（校準(zhǔn)品）的不間斷比較鏈而具有的計(jì)量學(xué)溯源性。比較鏈逐級(jí)向上測(cè)量不確定度不斷減小。為一個(gè)給定校準(zhǔn)品或正確度控制品所賦的值的不確定度則取決于規(guī)定的計(jì)量學(xué)溯源鏈和與其相關(guān)聯(lián)的合成不確定度。第八頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。計(jì)量學(xué)溯源鏈的理想終點(diǎn)是國(guó)際單位制系統(tǒng)(SI)相關(guān)單位的定義，但是，步驟的選擇和給定值所處的計(jì)量學(xué)溯源鏈的水平，依賴(lài)于可以使用的較高等級(jí)的溯量程序和校準(zhǔn)品。日前在許多情況下，沒(méi)有比制造商選擇的測(cè)量程序或制造商的工作校準(zhǔn)品更高級(jí)的計(jì)量學(xué)溯源性。此時(shí)，在有國(guó)際公認(rèn)的參考測(cè)量程序和／或校準(zhǔn)品可用之前，正確度即指校準(zhǔn)級(jí)別的水平。第九頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。某個(gè)被選定的計(jì)量學(xué)可溯源的校準(zhǔn)的目的是將一個(gè)參考物質(zhì)和／或參考測(cè)量程序的正確度水平傳遞至一個(gè)具有較低計(jì)量學(xué)水平的程序，例如常規(guī)程序。校準(zhǔn)的計(jì)量學(xué)溯源性要求，參考測(cè)量程序和常規(guī)測(cè)量程序測(cè)量的是同一可測(cè)量，量的分析物具有相同的相關(guān)特性。第十頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。這里有必要指出，旨在對(duì)同一量進(jìn)行測(cè)量相同量的不同的程序用于測(cè)量特定某一樣品或參考物質(zhì)時(shí)，實(shí)際上可能會(huì)得出不同的制量結(jié)果。例如當(dāng)用兩個(gè)或更多的免疫學(xué)程序?qū)δ硞€(gè)參考物質(zhì)中的某激素，如促甲狀腺索(甲狀腺刺激激素，TSH)的濃霞進(jìn)行測(cè)量時(shí)就會(huì)出現(xiàn)這種情況，因?yàn)椴煌脑噭┳R(shí)別被測(cè)物質(zhì)中的不同抗原決定簇并與其產(chǎn)生不同程度的反應(yīng)，于是會(huì)產(chǎn)生不同的但相互關(guān)聯(lián)的量。第十一頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。常規(guī)通常檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)可提供400～700類(lèi)量的結(jié)果。其中這些量中的大多數(shù)，因?yàn)閮H由（參考）測(cè)量程序組成一個(gè)計(jì)量上的較高步驟、或因測(cè)量程序和（參考）校準(zhǔn)品組成兩個(gè)較高步驟等，終止了產(chǎn)品校準(zhǔn)品賦值上計(jì)量的可追溯性。原因是許多這樣的量通常和具有臨床上相關(guān)性質(zhì)的分子種類(lèi)混合物有關(guān)，但是，這些比例各異的分子具有不同的結(jié)構(gòu)和相對(duì)分子量，如：糖蛋白。根據(jù)計(jì)量學(xué)溯源至SI的可能性及測(cè)量程序和校準(zhǔn)品的不同計(jì)量水平的可獲得性。第十二頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。測(cè)量結(jié)果可以在計(jì)量上溯源至SI的量；有可用的一級(jí)參考測(cè)量程序和一個(gè)或多個(gè)（經(jīng)認(rèn)定的）一級(jí)參考物質(zhì)（用作校準(zhǔn)品）。達(dá)到這樣水平的有約25～30個(gè)類(lèi)型的量，具有較好確定的組分。如：一些電解質(zhì)、代謝物、甾體激素和一些甲狀腺激素。在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供的常規(guī)結(jié)果中，這些量占較大部分。第十三頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。測(cè)量結(jié)果不能在計(jì)量上溯源至SI的量有可用的國(guó)際約定的參考測(cè)量程序（不能稱(chēng)為一級(jí)參考測(cè)量程序）和一個(gè)或多個(gè)由此程序賦值的國(guó)際約定校準(zhǔn)物。如HbAlc(糖化血紅蛋白)即是符合該情況的量的組分。有可用的國(guó)際約定的參考測(cè)量程序，但沒(méi)有國(guó)際約定校準(zhǔn)物。符合該情況約有30種類(lèi)型組分的量，如：凝血因子。有可用的一個(gè)或多個(gè)國(guó)際約定校準(zhǔn)物（用作校準(zhǔn)品）和賦值方案，但沒(méi)有國(guó)際約定參考測(cè)量程序。符合該情況的量約有300多種如使用世界衛(wèi)生組織(WHO)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的量，如蛋白類(lèi)激素、某些抗體和腫瘤標(biāo)記物。既無(wú)參考測(cè)量程序又無(wú)用作校準(zhǔn)的參考物質(zhì)。制造商自行建立“自用”測(cè)量程序和校準(zhǔn)品，為產(chǎn)品校準(zhǔn)品賦值。符合該情況的約有300種組分的量，如抗體和腫瘤標(biāo)記物等。第十四頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。GB/T21415—2008不適應(yīng)的范圍 沒(méi)有賦值及只用于評(píng)價(jià)一個(gè)測(cè)量程序的精密度，即其重復(fù)性或重現(xiàn)性的控制物質(zhì)（精密度控制物質(zhì)）；用于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制的控制物質(zhì)，此類(lèi)物質(zhì)具有建議的可接受結(jié)果值區(qū)間，此區(qū)間由不同實(shí)驗(yàn)室針對(duì)某具體測(cè)量程序協(xié)議制定，其限值無(wú)計(jì)量學(xué)溯源性；在相同的計(jì)量水平下，測(cè)量相同量的兩個(gè)測(cè)量程序的測(cè)量結(jié)果具相關(guān)性，但是這樣的“水平”相關(guān)不提供計(jì)量學(xué)溯源性；以不同計(jì)量水平的兩個(gè)測(cè)量程序結(jié)果間的相關(guān)作校準(zhǔn)，但是測(cè)量的量的分析物特性不同；常規(guī)結(jié)果可溯源至產(chǎn)品校準(zhǔn)品的計(jì)量溯源性及其與醫(yī)學(xué)判斷限值的關(guān)系；與名義標(biāo)度有關(guān)的特性，即無(wú)量級(jí)的特性（例如血細(xì)胞分類(lèi)）。第十五頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。測(cè)量準(zhǔn)確度注意事項(xiàng)測(cè)量準(zhǔn)確度：根據(jù)IS05725-1，測(cè)量準(zhǔn)確度與測(cè)量的正確度和精密度有關(guān)。（測(cè)定的精密度高，測(cè)定結(jié)果也越接近真實(shí)值。但不能絕對(duì)認(rèn)為精密度高，準(zhǔn)確度也高，因?yàn)橄到y(tǒng)誤差的存在并不影響測(cè)定的精密度，相反，如果沒(méi)有較好的精密度，就很少可能獲得較高的準(zhǔn)確度?？梢哉f(shuō)精密度是保證準(zhǔn)確度的先決條件。就被測(cè)量而言，準(zhǔn)確度不能給出一個(gè)數(shù)字形式的值，只能根據(jù)一個(gè)明確的目的描述為“足夠”或“不足”。從反面衡量準(zhǔn)確度的估計(jì)是“偏差”，定義為“值減去約定真值”。IS03534-1中不使用上述定義中的“真值”的概念，而使用“可接受參考值”，后者可以是理論值（真值）、賦值、公認(rèn)值或由程序確定的值。第十六頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。分析物可測(cè)量名稱(chēng)中示出的組分。例：在“24h尿蛋白量”類(lèi)型的量中，“蛋白質(zhì)”是分析物。在“血漿中葡萄糖物質(zhì)的量”中，“葡萄糖”是分析物。兩個(gè)例子中的整個(gè)短句內(nèi)容為被測(cè)量。分析特異性：測(cè)量程摩只測(cè)量被測(cè)量的能力。第十七頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。測(cè)量值偏倚：測(cè)量結(jié)果期望值與被測(cè)量真值之間的差異。注：一種估計(jì)是，“測(cè)量的統(tǒng)計(jì)抽樣偏倚”，等于“平均值減去參考值”。校準(zhǔn)：在規(guī)定條件下，為確定測(cè)量?jī)x器或測(cè)量系統(tǒng)所指示的量值，或?qū)嵨锪烤呋騾⒖嘉镔|(zhì)所代表的量值，與對(duì)應(yīng)的由標(biāo)準(zhǔn)所復(fù)現(xiàn)的量值之間關(guān)系的一組操作。第十八頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。校準(zhǔn)傳遞方案：使用相同類(lèi)型量的較高級(jí)參考物質(zhì)，對(duì)特定順序的測(cè)量程序進(jìn)行校準(zhǔn)，用于對(duì)參考物質(zhì)進(jìn)行賦值的過(guò)程的詳細(xì)描述。校準(zhǔn)物：具有在校準(zhǔn)函數(shù)中用作獨(dú)立變量值的參考物質(zhì)。有證參考物質(zhì)，CRM：附有證書(shū)的參考物質(zhì)，其一種或多種特性值用建立了溯源性的程序確定，使之可朔源到準(zhǔn)確復(fù)現(xiàn)的表示該特性值的測(cè)量單位，每一種出證的特性值都附有給定置信水平的不確定度。第十九頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。物質(zhì)的互換性：由兩個(gè)測(cè)量程序測(cè)量一給定物質(zhì)的特定量產(chǎn)生的測(cè)量結(jié)果間的數(shù)學(xué)關(guān)系，與測(cè)量常規(guī)樣品的量得到的數(shù)學(xué)關(guān)系的一致程度。影響量：非被測(cè)量但可影響測(cè)量結(jié)果的量。國(guó)際約定校準(zhǔn)物：量值不能溯源至SI，由國(guó)際約定予以賦值的校準(zhǔn)品。注：該量按照預(yù)期臨床用途定義。第二十頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。物質(zhì)系統(tǒng)的基質(zhì)基質(zhì)matrix：一個(gè)物質(zhì)系統(tǒng)中除分析物之外的所有成分。基質(zhì)效應(yīng)：除被測(cè)量以外的樣品特性，對(duì)特定測(cè)量程序測(cè)定被測(cè)量及其測(cè)量值的影響。注1：某個(gè)基質(zhì)效應(yīng)的明確原因即為一個(gè)影響量。注2：“基質(zhì)效應(yīng)”有時(shí)被錯(cuò)誤地用于因分析物的變性或加入非真實(shí)組分（代用品）以模擬分析物等缺少互換性。第二十一頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。可測(cè)量量：現(xiàn)象、物體或物質(zhì)可定性區(qū)別和定量確定的屬性。注1：以一個(gè)名義標(biāo)度表達(dá)的特性不是可測(cè)量。注2：不能將“可測(cè)量”與“分析物”混淆。被測(cè)量：作為測(cè)量對(duì)象的特定量。測(cè)量程序：進(jìn)行特定測(cè)量時(shí)所用的，根據(jù)給定的測(cè)量方法具體敘述的一組操作。第二十二頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。計(jì)量學(xué)溯源性遁過(guò)一條具有規(guī)定不確定度的不間斷的比較鏈，使測(cè)量結(jié)果或測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)的值能夠與規(guī)定的參考標(biāo)準(zhǔn)，通常是與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)聯(lián)系起來(lái)的特性。注1：通過(guò)校準(zhǔn)傳遞方案確定的（參考）測(cè)量程序?qū)崿F(xiàn)每一步比較。注2：溯源性有幾種類(lèi)型。本標(biāo)準(zhǔn)使用術(shù)語(yǔ)“計(jì)量學(xué)溯源性”。第二十三頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。計(jì)量學(xué)關(guān)于測(cè)量的科學(xué)。注：計(jì)量學(xué)涵蓋科學(xué)或技術(shù)的所有領(lǐng)域有關(guān)測(cè)量的理論與實(shí)踐的各個(gè)方面，包括測(cè)量的不確定度。第二十四頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。一級(jí)參考物質(zhì)：具有最高計(jì)量特性的參考物質(zhì)，由一級(jí)參考測(cè)量程序賦值。注1：“一級(jí)校準(zhǔn)品”的概念從屬于“校準(zhǔn)品”和“一級(jí)參考物質(zhì)”一級(jí)參考測(cè)量程序：具有最高級(jí)計(jì)量學(xué)特性的參考測(cè)量程序，其操作能夠被充分描述和理解，可用國(guó)際單位制(SI)單位表示完整的不確定度，不必使用測(cè)量的量的測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)為參考，結(jié)果即可接受。第二十五頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。注：物質(zhì)的量咨詢(xún)委員會(huì)使用術(shù)語(yǔ)“一級(jí)測(cè)量方法”，在本標(biāo)準(zhǔn)中，術(shù)語(yǔ)“一級(jí)參考測(cè)量程序”與VIM一致。VIM中不用“決定方法”，但決定方法有時(shí)指經(jīng)充分研究和評(píng)價(jià)的、具有高準(zhǔn)確度的參考測(cè)量程序。第二十六頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。參考物質(zhì)：具有一種或多種足夠均勻和很好地確定了酌特性，用以校準(zhǔn)測(cè)量裝置、評(píng)價(jià)測(cè)量方法或給材料賦值的一種材料或物質(zhì)。注：詞“均一”指肉眼可見(jiàn)的物質(zhì)的物理均一性，不是分析物分子間的微觀不均一性。第二十七頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。確認(rèn)validation：通過(guò)提供客觀證據(jù)對(duì)特定的預(yù)期角途或應(yīng)用要求已得到滿(mǎn)足的認(rèn)定。驗(yàn)證verification：通過(guò)提供客觀誕疆對(duì)規(guī)定要求已得到滿(mǎn)足的認(rèn)定。第二十八頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。如何認(rèn)識(shí)ISO17511計(jì)量學(xué)溯源的目的，應(yīng)是使經(jīng)校準(zhǔn)的常規(guī)測(cè)量程序所得的結(jié)果，按現(xiàn)有校準(zhǔn)等級(jí)最高水平所得值表示。應(yīng)在開(kāi)始進(jìn)行最終測(cè)量前建立計(jì)量學(xué)溯源鏈，并以相反方向的降序校準(zhǔn)等級(jí)，即從計(jì)量最高參考到終端用戶(hù)結(jié)果進(jìn)行描述。第二十九頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。溯源性(可追溯性）通過(guò)一條具有規(guī)定不確定度的不間斷的比較鏈，使測(cè)量結(jié)果或測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)的值能夠與規(guī)定的參考標(biāo)準(zhǔn)，通常是與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)聯(lián)系起來(lái)的特性。通過(guò)一條連續(xù)（不間斷）的比較鏈〔在一定的誤差條件下〕，使病人樣品檢測(cè)結(jié)果與國(guó)際或國(guó)家的參考系統(tǒng)〔在參考實(shí)驗(yàn)室，使用參考方法、參考品得到的結(jié)果〕聯(lián)系起來(lái)的特性。說(shuō)明結(jié)果準(zhǔn)確的依據(jù)。第三十頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。實(shí)現(xiàn)溯源性的兩個(gè)基本方式整個(gè)比較鏈?zhǔn)冀K以病人的新鮮樣品為比對(duì)的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。始終以方法學(xué)比較為判斷結(jié)果實(shí)現(xiàn)溯源性的實(shí)驗(yàn)手段。第三十一頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。現(xiàn)在為什么要求病人樣品結(jié)果的溯源性？當(dāng)前，醫(yī)學(xué)領(lǐng)域?qū)Σ∪思膊〉脑\斷、治療的監(jiān)視等，都必須有證據(jù)。證據(jù)來(lái)自各種檢查的結(jié)果，包括臨床檢驗(yàn)的結(jié)果。所以，臨床檢驗(yàn)結(jié)果必須在以往準(zhǔn)確度是相對(duì)的水平上，要說(shuō)明準(zhǔn)確可靠的依據(jù)。即：準(zhǔn)確的依據(jù)需要有溯源性（或可追溯性）。為了領(lǐng)會(huì)可追溯性。為此，檢驗(yàn)結(jié)果除了在分析性能（如精密度、正確度、檢測(cè)范圍、分析特異性、分析靈敏度、參考區(qū)間等）有足夠的證據(jù)外；還應(yīng)顯示結(jié)果量值在計(jì)量單位一致的前提下，和參考方法、或以參考品校準(zhǔn)后的方法對(duì)病人樣品檢測(cè)結(jié)果量相同的依據(jù)。這就是追求檢驗(yàn)結(jié)果的可溯源。第三十二頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。值的溯源性步驟一級(jí)校準(zhǔn)品二級(jí)校準(zhǔn)品工作校準(zhǔn)品常規(guī)樣品一級(jí)參考檢測(cè)程序二級(jí)參考檢測(cè)程序廠商選定檢測(cè)程序廠商常設(shè)檢測(cè)程序用戶(hù)常規(guī)檢測(cè)程序商品校準(zhǔn)品結(jié)果SI制度、單位的定義第三十三頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。（一）一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品（原級(jí)參考物）定義：

是已經(jīng)確定的穩(wěn)定而均一的物質(zhì)，其數(shù)值已由決定性方法確定或由高度準(zhǔn)確的若干方法確定，所含雜質(zhì)已經(jīng)定量。應(yīng)用：

用于校正決定性方法，評(píng)價(jià)和校正參考方法以及為“二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品”定值。第三十四頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。（二）二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品（次級(jí)參考物）定義：

這類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)品可以是純?nèi)芤海ㄋ蛴袡C(jī)溶劑的溶液），也可以存在于相似基質(zhì)中。可由實(shí)驗(yàn)室自己配制或?yàn)樯唐?，其中有關(guān)物質(zhì)的量由參考方法定值或用一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品比較而確定。應(yīng)用：

主要用于常規(guī)方法的標(biāo)化和控制物的定值。第三十五頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。（三）控制物（質(zhì)控物）用二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品和常規(guī)方法測(cè)定，用于常規(guī)質(zhì)量控制，以控制病人標(biāo)本的測(cè)定誤差?？刂莆锊荒苡糜跇?biāo)定儀器或方法。

定值血清：在發(fā)生問(wèn)題時(shí)查找原因

未定值血清：一般情況下使用另：用二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品和常規(guī)方法測(cè)定，然后定值經(jīng)過(guò)修正后得到校準(zhǔn)品。第三十六頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。

根據(jù)質(zhì)控品的物理性狀不同分為凍干質(zhì)控品、液體質(zhì)控品和混合血清等．根據(jù)有無(wú)測(cè)定值可分為定值（藍(lán)色標(biāo)簽）質(zhì)控品和非定值（紅色標(biāo)簽）質(zhì)控品。各實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)各自的情況選用以上一種質(zhì)控品作為室內(nèi)質(zhì)控品．質(zhì)控品的種類(lèi)第三十七頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。

①人血清基質(zhì)，分布均勻。②無(wú)傳染性。③添加劑和調(diào)制物的數(shù)量少。④瓶間CV%酶類(lèi)應(yīng)小于2%，其它應(yīng)小于1%。⑤凍干品復(fù)溶后穩(wěn)定，2～8℃時(shí)不少于24小時(shí)，－20℃時(shí)不少于20天；某些不穩(wěn)定成分（如BIL，ALP等）在復(fù)溶后4小時(shí)的變異應(yīng)小于2%⑥在實(shí)驗(yàn)室的有效期應(yīng)在一年以上。⑦合理的成本。質(zhì)控品應(yīng)具有的特征是：第三十八頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。①?lài)?yán)格按質(zhì)控品說(shuō)明書(shū)操作。

②凍干質(zhì)控品的復(fù)溶要確保溶劑的質(zhì)量。

③凍干質(zhì)控品復(fù)溶的加量要準(zhǔn)確一致。

④凍干質(zhì)控品復(fù)溶應(yīng)輕輕搖勻切忌劇烈震搖。

⑤質(zhì)控品應(yīng)按規(guī)定方法保存不用超期品。

⑥質(zhì)控品要與標(biāo)本同樣測(cè)定條件下測(cè)定。質(zhì)控品的正確使用和保存

第三十九頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。實(shí)驗(yàn)方法選擇的原則總原則：

從實(shí)際出發(fā)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的條件和檢測(cè)要求確定適當(dāng)?shù)姆椒?。條件優(yōu)越的實(shí)驗(yàn)室：參考方法一般臨床化學(xué)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)室：常規(guī)方法或使用方便的參考方法第四十頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。

盡量選用國(guó)內(nèi)外通用方法或推薦方法，便于方法的規(guī)范化和質(zhì)量控制，重點(diǎn)考慮實(shí)用性和可靠性。常規(guī)方法選擇時(shí)的原則：第四十一頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。（一）實(shí)用性微量快速、方法簡(jiǎn)便、安全可靠、成本低廉（二）可靠性

所選方法具有較高的精密度、準(zhǔn)確度和較大的檢測(cè)能力，保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性能滿(mǎn)足方法允許誤差限度的要求。標(biāo)本μl、試劑ml第四十二頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。實(shí)驗(yàn)方法選擇的步驟（一）廣泛查閱文獻(xiàn)：（二）選定侯選方法：全面認(rèn)識(shí)該法。（三）侯選方法的初步試驗(yàn)：根據(jù)方法選擇的要求，比較各種方法第四十三頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。初步試驗(yàn)包括：簡(jiǎn)單

標(biāo)準(zhǔn)曲線和重復(fù)性質(zhì)控血清和新鮮標(biāo)本的重復(fù)實(shí)驗(yàn)析濃度不同的標(biāo)本，并與公認(rèn)的參考方法的結(jié)果對(duì)比.初步試驗(yàn)?zāi)康?

使工作者熟悉有關(guān)技術(shù),掌握各分析步驟要點(diǎn),判斷能否適合本室條件要求.根據(jù)所獲得的資料確定是否有必要作進(jìn)一步研究。初步試驗(yàn)第四十四頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。為什么將“SI”放在計(jì)量溯源性的最高級(jí)？通過(guò)對(duì)反應(yīng)條件等的測(cè)量系統(tǒng)的描述，它定義被測(cè)量、尤其是酶組分等，組成的一級(jí)參考測(cè)量程序應(yīng)是給定校準(zhǔn)等級(jí)的下一水平，但也是第一級(jí)操作等級(jí)。國(guó)際單位制（SI）計(jì)量可追溯性鏈的理想終點(diǎn)是國(guó)際單位制（SI）有關(guān)單位的定義，但是，步驟的選擇和給定值處在計(jì)量可追溯性的什么水平上，依賴(lài)于可以使用的較高等級(jí)的測(cè)量程序和校準(zhǔn)品。計(jì)量可追溯性鏈的理想終點(diǎn)。注意，檢測(cè)結(jié)果的溯源性一定是結(jié)果在數(shù)量上的溯源性。這是計(jì)量的溯源性。第四十五頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。所有的檢測(cè)結(jié)果都有計(jì)量單位。若數(shù)量值一樣，但是計(jì)量不一，結(jié)果毫無(wú)可比性。更沒(méi)有任何計(jì)量溯源性的基礎(chǔ)。為了使檢測(cè)結(jié)果具有溯源性，實(shí)現(xiàn)計(jì)量單位在全球的一致，這就是國(guó)際單位制（SI）的目的。我國(guó)于1990年由國(guó)務(wù)院發(fā)布命令，全國(guó)實(shí)施法定計(jì)量單位。國(guó)際上，在許多歐美國(guó)家，仍然在臨床上使用以往的習(xí)慣單位。只是在發(fā)表的文章中，勉強(qiáng)使用SI。因此，實(shí)現(xiàn)全球檢測(cè)結(jié)果的可比性，任重道遠(yuǎn)。第四十六頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。什么是測(cè)量系統(tǒng)或測(cè)量程序？生物樣品中量的測(cè)量要求參考測(cè)量系統(tǒng)，包括：確定生物樣品中分析物，以及測(cè)量結(jié)果的預(yù)期臨床應(yīng)用；確定人樣品中選定量的參考測(cè)量程序；適用于選定量的參考物質(zhì)，如一級(jí)校準(zhǔn)品和可以替代的二級(jí)具基質(zhì)校準(zhǔn)品。第四十七頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。測(cè)量系統(tǒng)＝檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)樣品的檢驗(yàn)，必須使用儀器、試劑、校準(zhǔn)品、和操作程序組合的檢測(cè)系統(tǒng)。沒(méi)有檢測(cè)系統(tǒng)的固定組合，也就不可能實(shí)現(xiàn)樣品檢驗(yàn)結(jié)果的可追溯性。ISO17511的要求是建立在已經(jīng)具有良好性能的檢測(cè)系統(tǒng)上，論述檢測(cè)系統(tǒng)如何實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品檢驗(yàn)結(jié)果的溯源性。因此，單純的試劑盒沒(méi)有說(shuō)明指定在什么儀器上、也沒(méi)有校準(zhǔn)品的，無(wú)法證實(shí)它對(duì)病人樣品檢驗(yàn)結(jié)果的溯源性。單一的儀器，沒(méi)有說(shuō)明使用什么試劑盒，也沒(méi)有指定的校準(zhǔn)品，也無(wú)法證實(shí)任何溯源性。第四十八頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。怎樣理解校準(zhǔn)品的計(jì)量溯源性？校準(zhǔn)品：參考系統(tǒng)與常規(guī)檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)病人新鮮樣品的檢測(cè)結(jié)果，實(shí)現(xiàn)了可比性后，如何使常規(guī)系統(tǒng)能持續(xù)保持溯源性，引入校準(zhǔn)品作為實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期溯源可靠性的“橋梁”。這就是校準(zhǔn)品的功效。第四十九頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。校準(zhǔn)品校準(zhǔn)品是完成樣品檢測(cè)的檢測(cè)系統(tǒng)的一個(gè)組分。在具有良好性能的檢測(cè)系統(tǒng)中，校準(zhǔn)品的校準(zhǔn)值對(duì)檢測(cè)結(jié)果的數(shù)量起著重要作用。檢測(cè)系統(tǒng)的要素：（1）試劑；（2）分析儀；（3）校準(zhǔn)品。它實(shí)現(xiàn)可追溯性中自始至終必需使用新鮮病人樣品。始終采用方法學(xué)比較，為了使病人樣品的結(jié)果和參考系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果一致，調(diào)整校準(zhǔn)品的值。校準(zhǔn)品都屬于制造商提供的檢測(cè)系統(tǒng)專(zhuān)用的。從來(lái)沒(méi)有任何系統(tǒng)、試劑通用的校準(zhǔn)品。ISO17511中談及的一級(jí)或二級(jí)校準(zhǔn)品，只是為說(shuō)清問(wèn)題，將一級(jí)或二級(jí)參考品表示為一級(jí)或二級(jí)校準(zhǔn)品。第五十頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。參考實(shí)驗(yàn)室的要素參考方法；參考品；有資格的人員。通過(guò)提取病人新鮮樣品，結(jié)合具有參考值水平的結(jié)果。要求：結(jié)果水平公認(rèn)；因手工操作、要求高；報(bào)告速度慢。所以無(wú)法適用于常規(guī)。第五十一頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。參考實(shí)驗(yàn)室只有在國(guó)際認(rèn)可的參考實(shí)驗(yàn)室，使用參考物質(zhì)或參考方法（程序），對(duì)病人樣品的檢測(cè)，得到的結(jié)果才有資格被成為參考值結(jié)果。未經(jīng)國(guó)際認(rèn)可的任何實(shí)驗(yàn)室，即使使用了參考物質(zhì)或參考方法，對(duì)樣品的檢測(cè)結(jié)果不是參考值。第五十二頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。廠商在實(shí)現(xiàn)溯源性上的地位重要性實(shí)現(xiàn)溯源性的根本目的是追求病人結(jié)果的可靠。實(shí)驗(yàn)室只有使用具有溯源性的檢測(cè)系統(tǒng)，才能使檢測(cè)結(jié)果實(shí)現(xiàn)溯源性。因此，廠商在制備產(chǎn)品中，實(shí)施質(zhì)量管理；在此基礎(chǔ)上，按照ISO17511的要求，對(duì)校準(zhǔn)品的定值實(shí)現(xiàn)計(jì)量溯源性。對(duì)于血清方面的試劑需要注意的是：必須首先建立日常檢測(cè)系統(tǒng)經(jīng)具有參考值的病人樣品；校準(zhǔn)后，它和參考系統(tǒng)在檢測(cè)病人樣品結(jié)果上實(shí)現(xiàn)了一致性、確認(rèn)日常檢測(cè)系統(tǒng)的檢測(cè)結(jié)果在計(jì)量上可追溯至參考系統(tǒng)后，才由具有可追溯性的日常檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)校準(zhǔn)品定值。第五十三頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。根據(jù)測(cè)量結(jié)果計(jì)量可追溯至SI的可能性，以及測(cè)量程序和參考物質(zhì)的不同計(jì)量水平的可行性，已證實(shí)了哪些計(jì)量可追溯鏈的上端參考系統(tǒng)？第五十四頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。參考系統(tǒng)a)測(cè)量結(jié)果可以在計(jì)量上可追溯至SI的被測(cè)量。有可用的一級(jí)參考測(cè)量程序和一個(gè)或多個(gè)（經(jīng)認(rèn)證的）一級(jí)參考物質(zhì)（作為校準(zhǔn)品）。達(dá)到這樣水平的有約25～30個(gè)類(lèi)型的量，具有良好確定的組分，如：一些電解質(zhì)、代謝物、甾體激素（可的松）、及一些甲狀腺激素等。b)測(cè)量結(jié)果不能在計(jì)量上可追溯至SI的量。有可用的國(guó)際約定的參考測(cè)量程序(不能被稱(chēng)為一級(jí)參考測(cè)量程序)，和一種或多種用此參考檢測(cè)測(cè)量定值的國(guó)際約定校準(zhǔn)物質(zhì)。符合這些條件的量的組分，象HbA1c（糖化血紅蛋白）、IFCC酶參考系統(tǒng)。第五十五頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。有可用的國(guó)際約定參考測(cè)量程序，但是沒(méi)有國(guó)際約定校準(zhǔn)物質(zhì)。符合這些條件的約有30種類(lèi)型組分的量，如：凝血因子。有可用的一個(gè)或多個(gè)國(guó)際約定校準(zhǔn)物質(zhì)（用作校準(zhǔn)品）及定值方案，但是沒(méi)有國(guó)際約定參考程序。符合這些條件的約有300多種量，如：使用世界衛(wèi)生組織（WHO）國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的量，象蛋白激素、某些抗體和腫瘤標(biāo)志物等，特定蛋白CRM470等。既無(wú)參考測(cè)量程序，也無(wú)校準(zhǔn)的參考物質(zhì)可用。廠商自行建立“自用”測(cè)量程序和校準(zhǔn)品，為商品校準(zhǔn)品定值。符合這些條件的約有300種組分的量，如腫瘤標(biāo)志物和抗體等。第五十六頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。如何認(rèn)識(shí)控制品的溯源性？控制品的可追溯性正確度控制物質(zhì)應(yīng)滿(mǎn)足以下要求實(shí)現(xiàn)病人樣品結(jié)果的溯源性中，臨床實(shí)驗(yàn)室的責(zé)任是什么？第五十七頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。控制品的可追溯性需要搞清楚標(biāo)準(zhǔn)指的是什么控制品。標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)調(diào)了檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)病人樣品檢測(cè)結(jié)果的可追溯性。為了證實(shí)實(shí)驗(yàn)室日常使用的檢測(cè)系統(tǒng)是否仍然處于可追溯性的狀態(tài)，需要確認(rèn)。此時(shí)，使用被ISO17511標(biāo)準(zhǔn)定義的“正確度控制品（TurenessControl）”，若檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)該控制品的檢測(cè)值，和控制品的值極其一致，則說(shuō)明：檢測(cè)系統(tǒng)的可追溯性得到正確地確認(rèn)。第五十八頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。正確度控制物質(zhì)（Truenesscontrolmaterial）用于評(píng)估測(cè)量系統(tǒng)測(cè)量偏倚的參考物質(zhì)。

第五十九頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。正確度控制物質(zhì)應(yīng)滿(mǎn)足以下要求

a)基質(zhì)應(yīng)相似于控制下的測(cè)量程序測(cè)量的樣品；注1這和要求具有計(jì)量上為較高水平的校準(zhǔn)品相反，校準(zhǔn)品可以是高純度組分，常處于單一的基質(zhì)中。b）有定值，其測(cè)量不確定度和用途適應(yīng)。注2原則上，須使用正確度控制物質(zhì)驗(yàn)證測(cè)量真實(shí)度；因此，為正確度控制材料定值的傳遞方案應(yīng)相似于校準(zhǔn)品定值的傳遞方案。根據(jù)正確度控制物質(zhì)的用途，應(yīng)使用為相應(yīng)產(chǎn)品校準(zhǔn)品定值時(shí)給定等級(jí)或更高水平的定值方案。第六十頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。對(duì)于正確度控制品，標(biāo)準(zhǔn)中特別指出，本標(biāo)準(zhǔn)不適用于：1)沒(méi)有定值、僅用于評(píng)估檢測(cè)程序的精密度，重復(fù)性或重現(xiàn)性的控制物質(zhì)（精密度控制物質(zhì)）。2)用于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制，附有建議的可接受值區(qū)間的控制物質(zhì)。每個(gè)區(qū)間由各實(shí)驗(yàn)室用某特定測(cè)量程序測(cè)量協(xié)調(diào)一致形成每個(gè)區(qū)間和極值，不具計(jì)量溯源性。第六十一頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。對(duì)于控制品的可追溯性，國(guó)內(nèi)前階段有認(rèn)為，ISO17511講到控制品定值可以具有可追溯性，所以，定值的控制品都可以有可追溯性，這是嚴(yán)重的誤導(dǎo)。要注意：按照ISO要求的定值，要比為校準(zhǔn)品定值還嚴(yán)格。一些實(shí)驗(yàn)室對(duì)控制品的檢測(cè)結(jié)果簡(jiǎn)單的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，無(wú)法屬于“正確度控制品”的定值手段。第六十二頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。識(shí)別控制品是否屬于“正確度控制品”，大致上可以按以下的步驟予以甄別：1）控制品是否是制備檢測(cè)系統(tǒng)制造商出品的？2）控制品說(shuō)明書(shū)上是否指出：該定值按照ISO17511的規(guī)定進(jìn)行定值？而且，定值只有一個(gè)值，以及有不確定度。不是一般控制品定值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差、或定值范圍。3）控制品是否專(zhuān)用于制造商檢測(cè)系統(tǒng)，沒(méi)有其它定值數(shù)據(jù)？第六十三頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。實(shí)現(xiàn)病人樣品結(jié)果的溯源性中，臨床實(shí)驗(yàn)室的責(zé)任是什么？臨床實(shí)驗(yàn)室的責(zé)任實(shí)驗(yàn)室獲得可靠結(jié)果，不僅需要具有可追溯性的檢測(cè)系統(tǒng)；還應(yīng)重視完成檢驗(yàn)的所有過(guò)程。在分析前、分析中、和分析后可能出現(xiàn)的任何變異和誤差，都要認(rèn)真實(shí)現(xiàn)質(zhì)量管理。沒(méi)有這些，再好的檢測(cè)系統(tǒng)，病人樣品無(wú)法獲得具有可追溯性的結(jié)果。建立參考實(shí)驗(yàn)室是一個(gè)長(zhǎng)期的任務(wù)。需要基礎(chǔ)的積累。國(guó)內(nèi)要通過(guò)自己建立參考實(shí)驗(yàn)室，確認(rèn)參考方法與參考物質(zhì)，如果沒(méi)有國(guó)際的認(rèn)可，還是難以實(shí)現(xiàn)國(guó)際量值溯源性。國(guó)際上由各國(guó)有關(guān)學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)、政府的計(jì)量研究院所、制造商的合作，形成了國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)溯源性合作委員會(huì)。第六十四頁(yè)，共一百五十五頁(yè)?！?-2ISO18153:2003ISO18153:2003是關(guān)于《體外診斷醫(yī)療器械——生物源性樣品中量的測(cè)量——校準(zhǔn)品和控制品中酶催化濃度定值的計(jì)量學(xué)溯源性》的標(biāo)準(zhǔn)，是體外診斷試劑的一個(gè)基礎(chǔ)性標(biāo)準(zhǔn)。由SAC/TC136全國(guó)醫(yī)用臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室和體外診斷系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口。第六十五頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。在體外診斷醫(yī)療器械指令98/79/EC中，要求校準(zhǔn)品與控制品的定值具有計(jì)量學(xué)溯源性，能夠溯源到上一級(jí)參考測(cè)量物質(zhì)和參考測(cè)量程序。按照這一概念，關(guān)于“溯源性”的標(biāo)準(zhǔn)ISO17511對(duì)測(cè)量程序和校準(zhǔn)物質(zhì)的溯源等級(jí)進(jìn)行了具體描述。這一標(biāo)準(zhǔn)中的總則同樣適用于催化活性的定量。應(yīng)當(dāng)盡可能使計(jì)量溯源到SI單位，即校準(zhǔn)等級(jí)中的最高級(jí)。第六十六頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。該標(biāo)準(zhǔn)對(duì)酶催化活性濃度（以下稱(chēng)為“催化濃度”）的測(cè)量中校準(zhǔn)品和測(cè)量程序的等級(jí)進(jìn)行了描述。酶學(xué)測(cè)量中，SI單位定義為“摩爾每秒立方米（mol/s?m3）”，國(guó)際計(jì)量大會(huì)將其命名為“卡特每立方米katal/m3”，是溯源等級(jí)的最高級(jí)，然后是一級(jí)參考測(cè)量程序，其它低級(jí)測(cè)量程序、校準(zhǔn)品以及控制品應(yīng)盡可能溯源至該程序。第六十七頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。測(cè)量血液或其他生物體液中酶的催化濃度有助于疾病的診斷。測(cè)量底物轉(zhuǎn)化的催化速率分析原理，具有速度快、檢測(cè)限低、分析特異性高和成本低等優(yōu)點(diǎn)。只有在同一條件下測(cè)量得到的催化濃度值才具有可比性。因此，對(duì)一個(gè)酶被測(cè)量進(jìn)行說(shuō)明時(shí)，不僅應(yīng)有量的類(lèi)（例如催化濃度）、酶和系統(tǒng)的名稱(chēng)，而且還應(yīng)包括特定的測(cè)量程序，特別是測(cè)量反應(yīng)中的指示成份。在溯源等級(jí)的頂點(diǎn)，測(cè)量程序應(yīng)是國(guó)際認(rèn)可的，例如“肌酸激酶（CK）的IFCC參考測(cè)量程序，以NADH轉(zhuǎn)化速率測(cè)量CK”。第六十八頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。因此，一級(jí)參考測(cè)量程序是被測(cè)量的定義不可分割的部分，必須在所有細(xì)節(jié)處嚴(yán)格遵守，應(yīng)包括如下內(nèi)容：底物的種類(lèi)（由酶的特異性決定）及其濃度、催化劑及其濃度、催化反應(yīng)的方向、指示成份、緩沖系統(tǒng)及其pH、溫度、預(yù)溫時(shí)間、反應(yīng)啟動(dòng)物質(zhì)、延遲時(shí)間、反應(yīng)時(shí)間。第六十九頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。酶被測(cè)量定義對(duì)程序的依賴(lài)以及造成測(cè)量結(jié)果的缺陷眾所周知：在室間質(zhì)量評(píng)估（EQA）以及評(píng)估方法的可轉(zhuǎn)移性出現(xiàn)的問(wèn)題；生物參考區(qū)間的多樣性使酶結(jié)果的臨床應(yīng)用產(chǎn)生錯(cuò)誤的危險(xiǎn)。（常規(guī)酶測(cè)量的標(biāo)準(zhǔn)化對(duì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)非常重要，通過(guò)消除現(xiàn)有生物參考區(qū)間的差異，改善結(jié)果的臨床應(yīng)用和可比性。）第七十頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。 可以考慮兩種方式： a)常規(guī)只應(yīng)用每個(gè)酶推薦的或標(biāo)準(zhǔn)化測(cè)量程序。 b)使用經(jīng)選定參考測(cè)量程序定值的可互換的酶校準(zhǔn)品，對(duì)一個(gè)或多個(gè)常規(guī)測(cè)量程序進(jìn)行校準(zhǔn)。第七十一頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。方法（a）“推薦程序”已經(jīng)持續(xù)追求了20多年。在提高酶測(cè)量質(zhì)量水平和可比性以及廢除不好的分析程序方面取得了一定的成就。然而，使用推薦程序進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化的途徑已經(jīng)達(dá)到了極限。其不足之處在于：在眾多推薦程序選擇時(shí)缺乏一致意見(jiàn)，在常規(guī)使用時(shí)對(duì)推薦程序有意或無(wú)意的改動(dòng)，無(wú)意對(duì)推薦程序進(jìn)行分析和技術(shù)上的改進(jìn)，推薦程序?qū)ψ詣?dòng)化要求相當(dāng)不適合。常規(guī)酶測(cè)量程序的改變，不管是否為推薦程序，都不可避免會(huì)導(dǎo)致生物參考范圍的改變，臨床醫(yī)生必然不易接受。第七十二頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。改進(jìn)酶測(cè)量設(shè)計(jì)和分析性能將會(huì)、也應(yīng)該永無(wú)止境。然而，這一程序需要遵循科學(xué)、發(fā)展的道理，應(yīng)具有可操作性。試圖通過(guò)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)化測(cè)量程序的進(jìn)一步發(fā)展和改進(jìn)，使其成為“通用”方法的做法既不切實(shí)際也不符合需要。第七十三頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。方法（b）“參考測(cè)量程序和校準(zhǔn)物質(zhì)”未得到足夠重視，存在的主要問(wèn)題有：缺乏具有相應(yīng)基質(zhì)的穩(wěn)定酶參考物質(zhì)作為校準(zhǔn)品。候選酶校準(zhǔn)品與人樣品中的酶存在差異，包括同工酶的差異。酶校準(zhǔn)品和含有分析物酶的患者樣品，在校準(zhǔn)（參考）程序和被校準(zhǔn)（常規(guī)）程序之間缺乏穩(wěn)定的程序間比值（即缺乏互換性）。第七十四頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。由這些問(wèn)題，對(duì)建議進(jìn)行校準(zhǔn)的較高等級(jí)的酶參考物質(zhì)和測(cè)量程序二者，提出了系列要求。校準(zhǔn)品應(yīng)穩(wěn)定、內(nèi)含的分析物酶在其基質(zhì)中的催化特性應(yīng)和常規(guī)樣品中分析物酶的催化特性接近。測(cè)量程序自身對(duì)目標(biāo)酶的催化活力具有相同的特異性。對(duì)于目標(biāo)酶的催化活性，測(cè)量程序應(yīng)具有相同的特異性。對(duì)于每個(gè)臨床上重要的酶，可通過(guò)選擇參考測(cè)量程序和證實(shí)有關(guān)系列程序，實(shí)現(xiàn)常規(guī)酶測(cè)量結(jié)果的可比性。只要使用該系列的任何程序得到結(jié)果都可以在計(jì)量上溯源至選定的參考測(cè)量程序。第七十五頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用于確立或驗(yàn)證酶催化濃度測(cè)量真實(shí)度的校準(zhǔn)品和控制品定值的計(jì)量學(xué)溯源性的確認(rèn)方法。該標(biāo)準(zhǔn)適用于由制造商提供的作為體外診斷醫(yī)療器械的一部分或者與其組合使用的校準(zhǔn)品和控制品。但并不是所有的標(biāo)準(zhǔn)均適用該標(biāo)準(zhǔn)，以下是一些不適用的標(biāo)準(zhǔn)：第七十六頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。參考測(cè)量程序設(shè)計(jì)或選擇的要求；包含酶的質(zhì)量或酶的免疫活性的量；非定值、僅用于評(píng)價(jià)測(cè)量程序精密度，即重復(fù)性或重現(xiàn)性的控制物質(zhì)（精密度控制物質(zhì)）；用于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制的控制品，此類(lèi)控制品提供了可接受的數(shù)值區(qū)間，每個(gè)區(qū)間都是由不同實(shí)驗(yàn)室根據(jù)一個(gè)規(guī)定測(cè)量程序得出的，而且該數(shù)值區(qū)間不具有計(jì)量學(xué)溯源性；常規(guī)結(jié)果向產(chǎn)品校準(zhǔn)品的計(jì)量學(xué)溯源性，及其與醫(yī)學(xué)判斷限的關(guān)系；與名義和順序標(biāo)度相關(guān)的特性。第七十七頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。定義物質(zhì)的互換性：由一組旨在測(cè)量同一量的測(cè)量程序?qū)δ骋晃镔|(zhì)分別進(jìn)行測(cè)量時(shí)，各測(cè)量結(jié)果間可以產(chǎn)生相同的數(shù)字關(guān)系的能力；以及由同一測(cè)量程序測(cè)量含有該量的其它相關(guān)類(lèi)型的物質(zhì)時(shí)，可以獲得期望的關(guān)系的能力第七十八頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。計(jì)量學(xué)溯源性：通過(guò)一條具有規(guī)定不確定度的不間斷的比較鏈，使測(cè)量結(jié)果或測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)的值能夠與規(guī)定的參考標(biāo)準(zhǔn)，通常是與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)聯(lián)系起來(lái)的特性。注1．每一個(gè)比較都是通過(guò)（參考）測(cè)定程序得到的，這些測(cè)量程序在校準(zhǔn)互換方案中有限定。注2．溯源性有幾種。故在本文中用了“計(jì)量學(xué)溯源性”這一術(shù)語(yǔ)。第七十九頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。計(jì)量學(xué)溯源性鏈與校準(zhǔn)溯源等級(jí)ISO17511對(duì)生物源性樣品中量的測(cè)量結(jié)果的計(jì)量學(xué)溯源性及其校準(zhǔn)的命名和基本原理進(jìn)行了說(shuō)明，它們也可以用于被測(cè)物是酶、被測(cè)量是衍生量的類(lèi)“催化活性”（或者進(jìn)一步的衍生量的類(lèi)如“催化濃度”或“催化內(nèi)容”）的情況。一級(jí)校準(zhǔn)品用一級(jí)參考測(cè)量程序定值，一級(jí)參考物質(zhì)再用于校準(zhǔn)下一級(jí)測(cè)量程序，以此類(lèi)推，直到終用戶(hù)測(cè)定常規(guī)樣品得到的結(jié)果。第八十頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。保證互換方案可用的先決條件在溯源等級(jí)圖中的下一級(jí)測(cè)量程序測(cè)量的是同一個(gè)量。因此，應(yīng)表明，校準(zhǔn)溯源等級(jí)中一級(jí)測(cè)量程序的二級(jí)程序測(cè)量的是相同的被測(cè)量。例如：特定同工酶的催化濃度或者在給定系統(tǒng)中具有同樣相關(guān)程度的異構(gòu)體。第八十一頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。注1：既然量的類(lèi)“催化活性”定義為在特定反應(yīng)體系（特定是指：底物濃度、輔助因子、分析部分的體積分?jǐn)?shù)、溫度）中，特定底物被轉(zhuǎn)化的速率；高級(jí)到低級(jí)的所有測(cè)量程序的測(cè)量條件應(yīng)盡量相似。應(yīng)避免任何使校準(zhǔn)品或控制品定值不確定度增加的反應(yīng)條件變化。注2：有些酶的催化特性較緩和，允許對(duì)底物的性質(zhì)加以改變，但是如果在低一級(jí)的測(cè)量程序中選定的底物與參考測(cè)量程序中的底物不同，則需要另外的實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明在修改程序中測(cè)量的是相同的量。原則上，如果制造商校準(zhǔn)品的定值需要溯源到SI，則需要提供一級(jí)參考測(cè)量程序和制造商校準(zhǔn)品。注1：為降低不確定度，應(yīng)盡可能多的去除校準(zhǔn)溯源中的連續(xù)級(jí)別對(duì)（校準(zhǔn)品和程序）。第八十二頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。一級(jí)參考測(cè)量程序，在給定校準(zhǔn)等級(jí)中應(yīng)優(yōu)于其它水平、處于第一級(jí)操作水平的測(cè)量程序。描述的內(nèi)容有反應(yīng)條件、定義被測(cè)量、特別是酶的組分等。測(cè)量結(jié)果應(yīng)直接用催化濃度表示，如導(dǎo)出SI單位卡特每升或摩爾每秒升，或是其相應(yīng)的倍數(shù)或約數(shù)。測(cè)量的每一步應(yīng)清楚定義，才可能對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度進(jìn)行估計(jì)。第八十三頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。不確定度注1：不確定度估計(jì)要求清楚描述測(cè)量的每一個(gè)步驟，實(shí)驗(yàn)在控制下，不是自動(dòng)化的測(cè)量程序。注2：一級(jí)參考測(cè)量程序應(yīng)由國(guó)際公認(rèn)組織推薦，如國(guó)際臨床化學(xué)和檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)會(huì)（IFCC）。如果沒(méi)有國(guó)際認(rèn)可的一級(jí)參考測(cè)量程序，應(yīng)當(dāng)鼓勵(lì)國(guó)家計(jì)量機(jī)構(gòu)或科學(xué)組織建立這樣的程序，以尋求國(guó)際認(rèn)可。注3：IFCC目前正在更新其參考測(cè)量程序，允許用攝氏溫度370C，代替300C。已經(jīng)發(fā)布了在新的370C下測(cè)量ALT，AST，CK，r-GT和LDH的參考測(cè)量程序。附錄A列出了一級(jí)參考測(cè)量程序清單。第八十四頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。一級(jí)校準(zhǔn)品應(yīng)具有由一級(jí)參考測(cè)量程序所賦的值和測(cè)量不確定度，通過(guò)正式的實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，包括互換性的評(píng)估。注1：一級(jí)校準(zhǔn)物質(zhì)的制備和驗(yàn)證應(yīng)由國(guó)際組織負(fù)責(zé)。注2：舉例來(lái)說(shuō)，BCR有證參考物質(zhì)是一級(jí)校準(zhǔn)物質(zhì)，由歐盟“測(cè)量和測(cè)試機(jī)構(gòu)”建立。或者由歐盟的“參考物質(zhì)和測(cè)量研究院（IRMM）”與IFCC合作建立。第八十五頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。二級(jí)參考測(cè)量程序應(yīng)是由一個(gè)或多個(gè)一級(jí)校準(zhǔn)品校準(zhǔn)的測(cè)量系統(tǒng)。其反應(yīng)條件應(yīng)保證被測(cè)量與一級(jí)參考測(cè)量系統(tǒng)相同。應(yīng)遵循關(guān)于說(shuō)明以及值和不確定度的計(jì)算原則。其反應(yīng)條件應(yīng)使被測(cè)量和一級(jí)參考測(cè)量系統(tǒng)的是相同的。應(yīng)使用給出的敘述原則以及值和不確定度的計(jì)算。注1：為操作方便，二級(jí)參考測(cè)量程序應(yīng)比一級(jí)參考測(cè)量程序更適合機(jī)械操作。注2：二級(jí)參考測(cè)量程序應(yīng)由參考實(shí)驗(yàn)室或制造商進(jìn)行說(shuō)明和實(shí)施。第八十六頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。二級(jí)校準(zhǔn)品應(yīng)由二級(jí)參考測(cè)量程序定值。注1：二級(jí)校準(zhǔn)品可以有證書(shū)。注2：可在參考測(cè)量實(shí)驗(yàn)室或制造商實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行定值。注3：二級(jí)校準(zhǔn)品可以是具有基質(zhì)的材料；這些基質(zhì)相似于最終用戶(hù)常規(guī)測(cè)量程序測(cè)量的人樣品。第八十七頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。制造商選定測(cè)量程序應(yīng)指定一個(gè)測(cè)量系統(tǒng)，如果可能，該系統(tǒng)應(yīng)經(jīng)一個(gè)或多個(gè)一級(jí)或二級(jí)校準(zhǔn)品校準(zhǔn)。注：制造商選定測(cè)量程序可以是二級(jí)參考測(cè)量程序。第八十八頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。制造商工作校準(zhǔn)品應(yīng)由二級(jí)參考測(cè)量程序定值并確定測(cè)量不確定度，也可直接由一級(jí)參考測(cè)量程序定值。在參考測(cè)量程序和被校準(zhǔn)的程序間的校準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)具有足夠的互換性。注：制造商工作校準(zhǔn)品可以是具有基質(zhì)的材料；這些基質(zhì)相似于最終用戶(hù)常規(guī)測(cè)量程序測(cè)量的人樣品。第八十九頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。制造商常設(shè)測(cè)量程序應(yīng)由一個(gè)或多個(gè)制造商工作校準(zhǔn)品校準(zhǔn)，也可以由計(jì)量學(xué)上更高級(jí)別的校準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)。注：制造商常設(shè)測(cè)量程序和常規(guī)測(cè)量程序很接近，但是因輸入量和影響量的較小容許區(qū)間、以及進(jìn)行重復(fù)測(cè)量，可以有較低的測(cè)量不確定度。第九十頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。制造商產(chǎn)品校準(zhǔn)品的值和不確定度應(yīng)由制造商常設(shè)測(cè)量程序來(lái)確定，或者由計(jì)量學(xué)上更高級(jí)的程序來(lái)確定。校準(zhǔn)物質(zhì)對(duì)于定值測(cè)量程序與常規(guī)測(cè)量程序應(yīng)具有足夠的互換性。最終用戶(hù)常規(guī)測(cè)量程序應(yīng)由一個(gè)或多個(gè)制造商產(chǎn)品校準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)。制造商應(yīng)負(fù)責(zé)證明常規(guī)測(cè)量程序?qū)ΤＲ?guī)樣品測(cè)量的量與一級(jí)參考測(cè)量程序測(cè)量的量相同。第九十一頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。計(jì)量學(xué)溯源校準(zhǔn)的確認(rèn)確保真實(shí)度傳遞應(yīng)是所有相關(guān)的測(cè)量程序具有相同的分析特異性，并且校準(zhǔn)品應(yīng)具有足夠的互換性。第九十二頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。注1：在常規(guī)測(cè)量程序中（例如體外診斷醫(yī)療器械）使用計(jì)量學(xué)可溯源的校準(zhǔn)品的目的是：常規(guī)測(cè)量程序測(cè)量樣品得到的被測(cè)量結(jié)果，與使用的校準(zhǔn)品在計(jì)量上可追溯到的參考測(cè)量程序測(cè)量相同樣品的測(cè)量結(jié)果盡可能接近。因此，由校準(zhǔn)的常規(guī)測(cè)量程序給出的值的真實(shí)度，來(lái)自可用的參考測(cè)量程序。注2：依據(jù)酶分析物的性質(zhì)與樣品的基質(zhì)，即使測(cè)量系統(tǒng)和兩個(gè)測(cè)量程序間測(cè)量步驟的細(xì)微差異，也能造成特異性上的差異。第九十三頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。測(cè)量程序的分析特異性按照現(xiàn)有的資料，應(yīng)完整描述候選測(cè)量程序的性質(zhì)，說(shuō)明測(cè)量程序測(cè)量的有可能是相同的量。應(yīng)表明：垂直校準(zhǔn)等級(jí)中的所有測(cè)量程序，本質(zhì)上具有相同的分析特異性。應(yīng)使用典型的最終用戶(hù)的系列人樣品，樣品值的范圍分布于實(shí)際具有的測(cè)量區(qū)間。 為表明兩個(gè)測(cè)量程序在本質(zhì)上具有相同的分析特異性，兩個(gè)程序?qū)γ總€(gè)樣品得到的值的比例，應(yīng)在規(guī)定實(shí)驗(yàn)不確定度的常見(jiàn)的測(cè)量區(qū)間內(nèi)是恒定的。注：具有相同分析特異性的所有測(cè)量程序，組成了指定量的測(cè)量程序組合。第九十四頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。校準(zhǔn)品的互換性制造商工作校準(zhǔn)品的互換性可以通過(guò)同時(shí)用參考測(cè)量程序和常規(guī)測(cè)量程序?qū)χ圃焐坦ぷ餍?zhǔn)品和一系列相關(guān)的人（常規(guī)）樣品進(jìn)行測(cè)量來(lái)評(píng)估。對(duì)于人樣品，如果參考測(cè)量程序得到的結(jié)果x，和常規(guī)程序得到的結(jié)果y的數(shù)學(xué)關(guān)系與用兩個(gè)程序測(cè)量制造商校準(zhǔn)品得到兩個(gè)結(jié)果的數(shù)學(xué)關(guān)系之間在統(tǒng)計(jì)學(xué)上沒(méi)有顯著性差異，則證明這個(gè)校準(zhǔn)品具有互換性。第九十五頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。注1：如果點(diǎn)（x，y）分散在回歸線旁，和（或）其偏移量不能被接受，這種現(xiàn)象產(chǎn)生的原因可能是兩個(gè)測(cè)量程序在分析特異性上存在差異。注2：如果人樣品的數(shù)學(xué)關(guān)系和工作校準(zhǔn)品的數(shù)學(xué)關(guān)系不同，可以通過(guò)調(diào)整用于工作校準(zhǔn)品定值的校正因子或校正函數(shù)予以處理差異。應(yīng)當(dāng)按用戶(hù)的需求提供校正因子或校正函數(shù)。第九十六頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。制造商產(chǎn)品校準(zhǔn)品的有效性，應(yīng)由參考程序和校準(zhǔn)過(guò)的常規(guī)程序，對(duì)本用于常規(guī)測(cè)量程序測(cè)量的一組實(shí)際標(biāo)本進(jìn)行測(cè)量結(jié)果的比較予以證明。這些樣品應(yīng)最好來(lái)自各個(gè)單一供體、未配制混合過(guò)的人樣品，它們的值應(yīng)盡可能分布于被測(cè)量特定測(cè)量區(qū)間的整個(gè)范圍。只有處理過(guò)的樣品與實(shí)際樣品相似，才允許配制或混合等處理。第九十七頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。控制品的互換性如果控制品定值采用的測(cè)量程序和常規(guī)測(cè)量程序不同，應(yīng)采用和校準(zhǔn)物質(zhì)同樣的方法對(duì)其互換性進(jìn)行研究。EU-JRC參考物質(zhì)和測(cè)量研究院（IRMM）可以提供下類(lèi)物質(zhì)：制備的酶制品有助于測(cè)量血清的酶催化濃度結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)化。依據(jù)國(guó)際臨床化學(xué)和檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)會(huì)（IFCC）認(rèn)可的推薦方法確定每個(gè)制品的酶催化濃度。每個(gè)CRM用來(lái)保證IFCC方法的傳遞性，并可能為特定方法和IFCC方法得到的結(jié)果間建立相關(guān)。第九十八頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。第九十九頁(yè)，共一百五十五頁(yè)?！?-3臨床化學(xué)體外診斷試劑(盒)通用技術(shù)要求該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了臨床化學(xué)體外診斷試劑(盒)質(zhì)量檢驗(yàn)的通用技術(shù)要求，適用于醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行臨床化學(xué)項(xiàng)目定量檢驗(yàn)所使用的體外診斷試劑(盒)。該標(biāo)準(zhǔn)不適用于：性能評(píng)價(jià)試劑（如僅供研究用試劑）；臨床化學(xué)體外診斷儀器或設(shè)備；自測(cè)用臨床化學(xué)體外診斷試劑。第一百頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。試劑盒包裝在一起并預(yù)期用于進(jìn)行特定體外診斷檢驗(yàn)程序的體外診斷醫(yī)療器械的一組組件。注：試劑盒組件可包括抗體、酶、緩沖液、稀釋液、校準(zhǔn)品、控制品及其它物品和材料。第一百零一頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。有證參考物質(zhì)附有證書(shū)的參考物質(zhì)，其一種或多種特性值用建立了溯源性的程序確定，使之可溯源到準(zhǔn)確復(fù)現(xiàn)的表示該特性值的測(cè)量單位，每一種出證的特性值都附有給定置信水平的不確定度。注：有些參考物質(zhì)和有證參考物質(zhì)，由于不能和確定的化學(xué)結(jié)構(gòu)相關(guān)聯(lián)或出于其它原因，其特性不能按嚴(yán)格規(guī)定的物理和化學(xué)測(cè)量方法確定。這類(lèi)物質(zhì)包括某些生物物質(zhì)，世界衛(wèi)生組織已規(guī)定了相應(yīng)的國(guó)際單位。第一百零二頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。儀器基本要求分光光度計(jì)或生化分析儀，波長(zhǎng)范圍覆蓋340nm至700nm，生化分析儀應(yīng)帶恒溫裝置（精度0.1C），吸光度測(cè)量精度在0.001以上。凈含量：用通用量具測(cè)量。第一百零三頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。試劑空白測(cè)定用指定空白樣品測(cè)試試劑（盒），在測(cè)試主波長(zhǎng)下，記錄測(cè)試啟動(dòng)時(shí)的吸光度（A1）和約5分鐘(T)后的吸光度（A2），A2測(cè)試結(jié)果即為試劑空白吸光度測(cè)定值；計(jì)算出吸光度變化值()，即為試劑空白吸光度變化率（A/min）。第一百零四頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。線性范圍表征第一百零五頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。測(cè)量精密度測(cè)量第一百零六頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。批內(nèi)瓶間差的計(jì)算第一百零七頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。批間差的計(jì)算第一百零八頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。準(zhǔn)確度的計(jì)算相對(duì)偏差比對(duì)試驗(yàn)回收試驗(yàn)第一百零九頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。相對(duì)偏差用參考物質(zhì)或有證參考物質(zhì)(CRM)和相應(yīng)的參考測(cè)量程序按照符合ISO17511規(guī)定的溯源順序?qū)υ噭ê校┻M(jìn)行測(cè)試，重復(fù)測(cè)定3次，取測(cè)試結(jié)果均值（M），按公式B；用由參考方法定值的高、中、低三個(gè)濃度的人血清對(duì)試劑（盒）進(jìn)行測(cè)試，每個(gè)濃度樣品重復(fù)測(cè)定3次，分別取測(cè)試結(jié)果均值，按公式計(jì)算相對(duì)偏差。B%＝(M－T)／T×100%；M為測(cè)試結(jié)果均值；T為有證參考物質(zhì)標(biāo)示值，或各濃度人血清定值。第一百一十頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。參照EP9-A2的方法，用不少于40個(gè)在測(cè)定濃度范圍內(nèi)不同濃度的人血清樣品，以制造商指定的分析系統(tǒng)作為比對(duì)方法，每份樣品按待測(cè)試劑（盒）操作方法及比對(duì)方法分別測(cè)定。用線性回歸方法計(jì)算兩組結(jié)果的相關(guān)系數(shù)（r）及每個(gè)濃度點(diǎn)的相對(duì)偏差。第一百一十一頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。在人血清樣品中加入一定體積標(biāo)準(zhǔn)溶液（標(biāo)準(zhǔn)溶液體積與血清體積比應(yīng)不大于1:20或其體積比不會(huì)產(chǎn)生基質(zhì)的變化，加入標(biāo)準(zhǔn)溶液后樣品總濃度必須在試劑（盒）測(cè)定線性范圍內(nèi)）或純品，每個(gè)濃度重復(fù)測(cè)定3次，按公式R計(jì)算回收率。第一百一十二頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。第一百一十三頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。穩(wěn)定性 取在規(guī)定的貯存條件下或制造商規(guī)定的加速試驗(yàn)條件下保存至有效期末的試劑(盒)測(cè)試。第一百一十四頁(yè)，共一百五十五頁(yè)?！?-4體外診斷試劑性能測(cè)試的分析第一百一十五頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。線性范圍當(dāng)需要測(cè)定溶液的濃度時(shí)，不論溶液的濃度是試劑本身的濃度，還是試劑和樣本(如血清、質(zhì)控品、標(biāo)準(zhǔn)品、校準(zhǔn)品)反應(yīng)的濃度，通常采用濃度和吸光度之間建立標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法測(cè)定，若證明這種標(biāo)準(zhǔn)曲線是否存在線性關(guān)系，做法是根WS/T124《臨床化學(xué)體外診斷試劑盒質(zhì)量檢驗(yàn)總則》關(guān)于線性范圍的規(guī)定把選取的溶液濃度范圍取6點(diǎn)[包括濃度的下限(或零)、中間值及上限]，每點(diǎn)重復(fù)測(cè)定3次吸光度。根據(jù)式(1)、(2)、(3)來(lái)計(jì)算出直線方程y=a+bx和回歸系數(shù)：第一百一十六頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。第一百一十七頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。批間精密度計(jì)算醫(yī)療器械制造商通常所采取的批內(nèi)精密度測(cè)試方法是：用1份試劑測(cè)定1份樣本，連續(xù)測(cè)定n次，計(jì)算結(jié)果的均值x0（平均值）和標(biāo)準(zhǔn)差s0，其實(shí)這種做法確切的說(shuō)，是證明了分析儀器測(cè)試的穩(wěn)定性、一致性，并不能證明同一批試劑彼此的差異、離散程度，因此應(yīng)該用同批號(hào)n份試劑分別測(cè)定1份樣本，計(jì)算測(cè)定的均值x1（平均值）與標(biāo)準(zhǔn)差s1。其中標(biāo)準(zhǔn)差(s0和s1)的計(jì)算公式如式(4)所示：第一百一十八頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。第一百一十九頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。而真正意義上的標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)是排除分析儀器儀系統(tǒng)所造成標(biāo)準(zhǔn)差影響的結(jié)果，即s批內(nèi)＝，這樣所得變異系數(shù)為第一百二十頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。該結(jié)果更為真實(shí)，而且對(duì)醫(yī)療器械制造商又有利。當(dāng)然如果忽略分析儀器儀系統(tǒng)所造成標(biāo)準(zhǔn)差的影響，也可以用標(biāo)準(zhǔn)差s1來(lái)求變異系數(shù)。測(cè)試精密度時(shí)需注意，從已收集的數(shù)據(jù)計(jì)算出均值和標(biāo)準(zhǔn)差，當(dāng)任何結(jié)果和均值的差值超過(guò)4個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差時(shí)，可認(rèn)為是離群值。在進(jìn)行這種批內(nèi)精密度測(cè)試時(shí)，一次只能有一個(gè)離群值，當(dāng)離群值超過(guò)1個(gè)時(shí)，應(yīng)懷疑是否為方法不穩(wěn)定或操作者不熟悉所致。此時(shí)，可不用此次測(cè)試數(shù)據(jù)。檢查問(wèn)題和解決問(wèn)題后重新開(kāi)始新的測(cè)試。第一百二十一頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。批間精密度第一百二十二頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。也就是說(shuō)，這樣求出的批間精密度標(biāo)準(zhǔn)差表面上看是2個(gè)批次的結(jié)果，實(shí)際上還是2個(gè)批次混合到一批進(jìn)行計(jì)算的結(jié)果，并沒(méi)有明顯體現(xiàn)出2個(gè)批次之間的差異程度。當(dāng)然該方法的優(yōu)點(diǎn)是2個(gè)批次均值一樣時(shí)仍可以體現(xiàn)總體數(shù)據(jù)中各個(gè)數(shù)據(jù)的差異性，不過(guò)缺點(diǎn)是2個(gè)批次之間數(shù)據(jù)差別大時(shí)，由于標(biāo)準(zhǔn)差是各個(gè)數(shù)據(jù)與總體數(shù)據(jù)均值比較而弱化了差異的結(jié)果，并沒(méi)有直接體現(xiàn)2個(gè)批次之間顯著差異。第一百二十三頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。批間精密度計(jì)算還可以按WS/T124《臨床化學(xué)體外診斷試劑盒質(zhì)量檢驗(yàn)總則》批間精密度的規(guī)定進(jìn)行，即取3個(gè)批次的試劑，每個(gè)批次3份。分別測(cè)定1份樣本，分別計(jì)算9份試劑測(cè)定總均值(xT)和每個(gè)批次3份試劑的測(cè)定均值(x1、x2、x3)，并按式(7)求出3個(gè)批次試劑測(cè)定均值的變異系數(shù)：第一百二十四頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。第一百二十五頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。式中：均值xmax為均值x1、x2、x3中的最大值；均值xmin為均值x1、x2、x3中的最小值；xT為總均值。這樣求出的批間精密度只是進(jìn)行了批次之間數(shù)據(jù)均值的極差計(jì)算，并沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)差的計(jì)算，計(jì)算過(guò)程比較簡(jiǎn)單。該方法優(yōu)點(diǎn)是批次之間數(shù)據(jù)差別大時(shí)，可以顯著體現(xiàn)批次之間數(shù)據(jù)結(jié)果的差異性，缺點(diǎn)是批次之間均值一樣時(shí)，則批次之間數(shù)據(jù)均值的極差沒(méi)有了差異，因而掩蓋了批次之間數(shù)據(jù)的個(gè)體差異。第一百二十六頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。準(zhǔn)確度按照WS/T124《臨床化學(xué)體外診斷試劑盒質(zhì)量檢驗(yàn)總則》準(zhǔn)確度的規(guī)定，是用試劑3份平行測(cè)定已知濃度的樣本。計(jì)算測(cè)定結(jié)果均值，以相對(duì)偏差來(lái)表示測(cè)定結(jié)果的不準(zhǔn)確度，如式(8)：第一百二十七頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。式中：δ(%)為相對(duì)偏差，x為樣本測(cè)定結(jié)果的均值T為測(cè)定樣本靶值。準(zhǔn)確度這個(gè)指標(biāo)，是評(píng)價(jià)試劑有效性的重要依據(jù)，在試劑檢測(cè)的樣本濃度范圍內(nèi)都起著準(zhǔn)確定量的作用，所以不僅僅局限于某一個(gè)濃度的檢測(cè)。需注意的是x/T可能≤1，也可能≥1，可見(jiàn)準(zhǔn)確度要求的相對(duì)偏差是一個(gè)百分比的正負(fù)值范圍，故相對(duì)偏差值不只是一個(gè)正的百分?jǐn)?shù)。第一百二十八頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。靈敏度靈敏度測(cè)定常見(jiàn)的方法有：(1)檢測(cè)出區(qū)別于零值的最低濃度；(2)以不含被測(cè)物但其基質(zhì)與待測(cè)定樣本相同的空白樣本，重復(fù)測(cè)定20次(剔除≥3倍標(biāo)準(zhǔn)差的離群值)的均值加2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行計(jì)算。這兩種方法都不能準(zhǔn)確定量靈敏度，第一種方法只說(shuō)明了能檢測(cè)出濃度值，而不能證明檢測(cè)出的濃度值是否準(zhǔn)確，第二種方法的結(jié)果實(shí)際上檢測(cè)的是空白本底值，與被檢測(cè)物無(wú)關(guān)。第一百二十九頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。要達(dá)到靈敏度準(zhǔn)確定量，則試劑所能測(cè)定的最低極限濃度，應(yīng)滿(mǎn)足其準(zhǔn)確度的要求，也就是說(shuō)偶爾測(cè)試出來(lái)的最低極限濃度，并不能說(shuō)明是否準(zhǔn)確，這是沒(méi)有意義的。當(dāng)需要對(duì)測(cè)定最低極限濃度的靈敏度進(jìn)行精密度評(píng)價(jià)時(shí)，可以把最低極限濃度的樣本分成n份，分別和1份試劑反應(yīng)進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算出測(cè)定最低極限濃度的變異系數(shù)，應(yīng)以＜20%為宜。第一百三十頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。檢測(cè)范圍試劑檢測(cè)范圍的最低濃度值和靈敏度的結(jié)果是一致的，都應(yīng)滿(mǎn)足準(zhǔn)確度的要求。同樣，試劑檢測(cè)范圍的最高濃度值，不僅是可檢測(cè)出最高濃度，檢測(cè)出的最高濃度也應(yīng)滿(mǎn)足其準(zhǔn)確度的要求，否則最高濃度是一個(gè)區(qū)間范圍，根本無(wú)法確定。第一百三十一頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。對(duì)于定性試劑主要性能是界定陰性和陽(yáng)性，靈敏度正是界定陰性和陽(yáng)性的重要指標(biāo)，因此試劑對(duì)樣本最低濃度的測(cè)定，就決定了定性試劑的主要性能。在定性試劑中，靈敏度是測(cè)試最低濃度的指標(biāo)，準(zhǔn)確度是測(cè)試陽(yáng)性結(jié)果概率的指標(biāo)，重復(fù)性是測(cè)試同一結(jié)果的概率，因此檢測(cè)定性試劑最低濃度呈現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果的概率，就可以驗(yàn)證了定性試劑的靈敏度、準(zhǔn)確度和重復(fù)性。第一百三十二頁(yè)，共一百五十五頁(yè)?！?-5全自動(dòng)生化分析儀（YY／T0654-2008）的技術(shù)要求全自動(dòng)生化分析儀是根據(jù)光電比色原理來(lái)測(cè)量體液中某種特定化學(xué)成分的儀器；就是將原始手工操作過(guò)程中的取樣、混勻、溫育（37℃）檢測(cè)、結(jié)果計(jì)算、判斷、顯示和打印結(jié)果及清洗等步驟全部或者部分自動(dòng)運(yùn)行。第一百三十三頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。無(wú)論是當(dāng)今運(yùn)行速度最快（3600Test/h）的模塊式全自生化分析儀，還是原始手工操作用于比色的光電比色計(jì)，其原理都是運(yùn)用了光譜技術(shù)中吸收光譜法。是生化儀最基本核心。其單色裝置分為濾光片式、光柵式或其他方式；光路形式有前分光和后分光之分；比色容器類(lèi)型有循環(huán)使用式或一次性使用式。全自動(dòng)生化分析儀分分立式和流動(dòng)式。第一百三十四頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。吸光度線性范圍

Ai-某濃度點(diǎn)實(shí)際測(cè)定的吸光度的平均值；

a-線性擬合的截距；

b-線性擬合的斜率；

ci-相對(duì)濃度；

i-濃度序號(hào)，范圍為5～l1。第一百三十五頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。

Ai——某濃度點(diǎn)實(shí)際測(cè)定的吸光度的平均值；

ci——相對(duì)濃度；

n——選定的濃度個(gè)數(shù)；

i-濃度序號(hào)，范圍為l～4。相對(duì)偏倚小于±5%的吸光度范圍部為吸光度線性范圍第一百三十六頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。 表6-5-2吸光度準(zhǔn)確度要求第一百三十七頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。吸光度重復(fù)性對(duì)分析儀的340nm波長(zhǎng)進(jìn)行吸光度重復(fù)性測(cè)定。340nm的測(cè)定溶液為吸光度為1．O（以蒸餾水為空白，允許偏差為±5%）的重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液。按照下面的設(shè)定條件a）、b），在分析儀上測(cè)定上述溶液的吸光度，重復(fù)測(cè)定20次，按式(4)計(jì)算變異系數(shù)CV，應(yīng)符合要求：a)溶液的加入量為分析儀標(biāo)稱(chēng)的最小反應(yīng)體積；b)反應(yīng)時(shí)間為分析儀標(biāo)稱(chēng)的最長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間或10min；第一百三十八頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。第一百三十九頁(yè)，共一百五十五頁(yè)。溫度準(zhǔn)確度與波動(dòng)度溫度