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細(xì)胞物資運(yùn)輸3第一頁,共21頁。蛋白質(zhì)的加工與分泌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中蛋白質(zhì)的加工包括糖基化(N-連接)、形成二硫鍵、監(jiān)控折疊裝配正確進(jìn)行等。第二頁,共21頁。糖基化glycosylation:?jiǎn)翁腔蚬烟桥c蛋白質(zhì)之間通過共價(jià)鍵結(jié)合形成糖蛋白的過程。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成的蛋白質(zhì)大多都會(huì)進(jìn)行N-連接糖基化或O-連接糖基化。N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc),甘露糖(Man),葡萄糖(Glc),半乳糖(Gal),N-乙酰半乳糖胺(GalNAc),巖藻糖(Fuc),唾液酸(SA)第三頁,共21頁。糖分子首先連接到RER膜上的多萜醇分子上裝配成寡糖鏈,再由糖基轉(zhuǎn)移酶催化轉(zhuǎn)到暴露于RER腔面的新生肽鏈的特定序列中的天冬酰胺殘基上(N-連接)。第四頁,共21頁。N-linkedglycosylationintheERAsn-X-SerAsn-X-ThrN-連接糖基化發(fā)生于多肽鏈的特定序列,在去除3分子葡萄糖和1分子甘露糖后被膜泡運(yùn)輸至GC進(jìn)一步加工。第五頁,共21頁。ER還會(huì)對(duì)糖基化后蛋白的折疊裝配過程進(jìn)行監(jiān)控,只有形成正確構(gòu)象的蛋白才能運(yùn)送到GC。第六頁,共21頁。未折疊蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的積聚可反饋性調(diào)節(jié)基因的轉(zhuǎn)錄第七頁,共21頁。GC中蛋白質(zhì)的加工包括糖鏈修飾、糖基化(O-連接)

、多余肽鏈的水解。

N-連接糖蛋白(Asn):起始于內(nèi)質(zhì)網(wǎng),在高爾基體中加工修飾完畢O-連接糖蛋白(Ser/Thr):在高爾基體中起始并完成修飾第八頁,共21頁。N-連接蛋白在高爾基體中的糖基修飾第九頁,共21頁。糖基化的作用是:使蛋白質(zhì)能夠抵抗消化酶的作用;賦予蛋白質(zhì)傳導(dǎo)信號(hào)的功能;糖基化后蛋白可用于形成細(xì)胞外被。第十頁,共21頁。蛋白質(zhì)在高爾基體的水解:ER中合成前胰島素原→ER中切除信號(hào)肽成為胰島素原→GC中水解多余肽段并折疊成為胰島素第十一頁,共21頁。蛋白質(zhì)的分揀與分泌第十二頁,共21頁。溶酶體酶的運(yùn)輸組成溶酶體的各種成分在ER中合成、GC中修飾后經(jīng)轉(zhuǎn)運(yùn)小泡參與組建溶酶體。其中蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)由分揀信號(hào)和GC膜上相應(yīng)的受體介導(dǎo)。溶酶體水解酶的分揀信號(hào)為6-磷酸甘露糖M6P第十三頁,共21頁。M6P是一種分選信號(hào),當(dāng)帶有M6P標(biāo)記的前體蛋白到達(dá)反面高爾基網(wǎng)時(shí),便與反面高爾基網(wǎng)膜內(nèi)側(cè)的M6P受體結(jié)合,隨即觸發(fā)網(wǎng)格蛋白被在反面高爾基網(wǎng)膜的胞質(zhì)面組裝。第十四頁,共21頁。組裝完成后,反面高爾基網(wǎng)在局部出芽形成有被小泡,有被小泡脫離反面高爾基網(wǎng)時(shí),小泡表面的網(wǎng)格蛋白被即脫落而成為光滑的運(yùn)輸小泡。裝有前體蛋白的運(yùn)輸小泡與細(xì)胞內(nèi)的晚期內(nèi)吞體融合,形成內(nèi)溶酶體。第十五頁,共21頁。H+泵使內(nèi)溶酶體pH值下降,在酸性環(huán)境下,前體蛋白與M6P受體分離并去磷酸化,成為成熟溶酶體蛋白。M6P受體隨運(yùn)輸小泡回到高爾基體反面網(wǎng)膜。第十六頁,共21頁。從高爾基復(fù)合體芽生出的轉(zhuǎn)運(yùn)小泡,運(yùn)送到細(xì)胞表面與細(xì)胞膜融合,一方面把小泡的內(nèi)容物分泌到細(xì)胞外,同時(shí)為細(xì)胞膜提供新的膜蛋白和膜脂。蛋白質(zhì)的分泌第十七頁,共21頁。放射性同位素可示蹤蛋白在細(xì)胞內(nèi)的位置變化第十八頁,共21頁。膜流membraneflow膜流現(xiàn)象:由于細(xì)胞的胞吞、胞吐作用和ER、GC的物質(zhì)合成、加工、運(yùn)輸,使細(xì)胞膜發(fā)生移位、融合、重組,細(xì)胞內(nèi)各膜性結(jié)構(gòu)實(shí)現(xiàn)了相互聯(lián)系和轉(zhuǎn)移,使細(xì)胞構(gòu)成一個(gè)統(tǒng)一的整體,維持了活體細(xì)胞的動(dòng)態(tài)平衡。第十九頁,共21頁。本章要點(diǎn)離子和小分子、生物大分子和顆粒

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