實訓(xùn)穿山龍中薯蕷皂素的提取分離與檢識

中藥化學(xué)技術(shù)皂苷類化合物

實訓(xùn)：穿山龍中薯蕷皂素的提取分離與檢識任務(wù)導(dǎo)入薯蕷科薯蕷屬植物穿龍薯蕷，以根狀莖入藥。主要含薯蕷皂苷（dioscin）等多種甾體皂苷。舒筋活血，止咳化痰，祛風(fēng)止痛。

實訓(xùn)目的1.掌握用酸水解，有機溶劑提取和精制皂苷元的方法。2．熟悉皂苷及皂苷元的性質(zhì)和檢識方法。實訓(xùn)原理1．薯蕷皂苷(dioscin)分子式C45H72O16，分子量869.08，針狀結(jié)晶，mp.275～277℃（分解），可溶于甲醇、乙醇、醋酸，微溶于丙酮、戊醇，難溶于石油醚、苯，不溶于水。

2．薯蕷皂苷元(diosgenin)又稱薯蕷皂素,分子式C27H42O3，分子量414.61。為白色結(jié)晶性粉末（乙醇），mp.206～208℃，可溶于常用的有機溶劑及醋酸中，不溶于水。薯蕷皂苷原理本實驗是根據(jù)藥材中的薯蕷皂苷，經(jīng)酸加熱水解可產(chǎn)生薯蕷皂苷元和糖。因甾體皂苷元不溶于水，可溶于有機溶劑的性質(zhì)，用石油醚連續(xù)回流提取總皂苷元，再用活性炭吸附脫色精制，得到精制薯蕷皂苷元。提取流程穿山龍飲片100g加10％硫酸水400ml，加熱回流6h，濾過水解藥材

酸水液

水漂洗除去硫酸

水解藥材

洗滌液

置乳缽中加碳酸鈉粉研磨，水洗至不顯酸性藥渣抽濾后80℃干燥，粉碎水解藥材粗粉

裝入濾紙筒置于索氏提取器中加石油醚（60～90℃）300ml，回流提取6h，濾過提取液殘渣

回收石油醚至30ml，靜置析晶，濾過結(jié)晶

濾液

少量石油醚洗2～3次，抽干

薯蕷皂苷元粗品

精制流程薯蕷皂苷元粗品

濾液加95％乙醇50ml加熱溶解，加2％活性炭，抽濾活性炭渣

濾液

靜置析晶，濾過

結(jié)晶105℃以下烘干

薯蕷皂苷元精制品薯蕷皂苷與皂苷元的檢識

（1）泡沫試驗：取穿山龍的水浸液2ml，置于小試管中，用力振搖1分鐘，應(yīng)產(chǎn)生多量泡沫，放置10分鐘，泡沫量應(yīng)無顯著變化。（2）醋酐-濃硫酸反應(yīng)：取薯蕷皂苷元結(jié)晶少許，置白瓷板上，加醋酐數(shù)滴溶解后，加濃硫酸1滴，觀察顏色變化。（3）三氯甲烷-濃硫酸試驗：取薯蕷皂苷元結(jié)晶少許，溶于三氯甲烷中，加入濃硫酸后，三氯甲烷層呈紅或藍(lán)色，硫酸層呈現(xiàn)綠色熒光。（4）冰醋酸-乙酰氯試驗：取薯蕷皂苷元結(jié)晶少許，用冰醋酸3ml溶解，加入乙酰氯數(shù)滴及氯化鋅，稍加熱，呈紫紅色。薯蕷皂苷與皂苷元的檢識（5）三氯醋酸反應(yīng)：取薯蕷皂苷元結(jié)晶少許，置于干燥試管中，加等量固體三氯醋酸，于60～70℃恒溫水浴中加熱數(shù)分鐘后，觀察顏色變化。（6）薄層色譜檢識薄層板：硅膠G-CMC-Na板試樣：薯蕷皂苷元精制品乙醇溶液對照品：薯蕷皂苷元對照品乙醇溶液展開劑：氯仿-丙酮（93∶7）顯色：噴5％磷鉬酸乙醇溶液，110℃加熱10分鐘顯色。實訓(xùn)說明及注意事項1．穿山龍經(jīng)酸水解后應(yīng)充分洗滌呈中性，以免烘干時被碳化。2．在干燥水解后的原料時，應(yīng)注意經(jīng)常翻動，以縮短干燥時間。3．石油醚極易揮發(fā)和燃燒，必須用水浴加熱且水浴溫度不宜過高，以能使石油醚微沸即可，并應(yīng)加大冷凝水流速，以便冷凝完全。4．本實驗也可用石蒜科龍舌蘭屬植物劍麻AgauesisalanaPerrine為原料提取甾體皂苷元，將劍麻葉片刮去纖維，殘渣壓榨取汁，將汁液自然發(fā)酵2周（酶水解得其次生苷），布袋濾過收集沉淀，曬干，以干渣為原料，用硫酸水解，再用石油醚提取得甾體皂苷元。實訓(xùn)思考與作業(yè)1．從植物中提取甾體皂苷元