毒物檢驗在急性中毒診治中的作用

毒物(dúwù)檢驗簡介診斷性的目的：通過對進入體內(nèi)的毒物的分離鑒定，查清毒物及中毒原因。即是否中毒，是什么毒物引起的中毒。為中毒的診斷、急救和預(yù)防提供科學(xué)的依據(jù)。通過毒檢查清毒物對中毒病進行診斷，就如同通過查明蟲體和微生物對寄生蟲病和傳染病進行診斷一樣，如果查不清毒物，單憑病史、癥狀、病理變化等是很難對中毒病進行確診的。

預(yù)防性的目的：主要(zhǔyào)通過食物、飲用水、所在的環(huán)境及機體的某些生理指標進行監(jiān)測及早預(yù)防中毒病的發(fā)生。毒物(dúwù)檢驗的目的

※※

第二頁，共三十三頁。毒物檢驗(jiǎnyàn)簡介毒物檢驗中的幾個主要環(huán)節(jié)

由于中毒往往在短時間內(nèi)造成嚴重后果，所以要求毒物檢驗既要迅速又要結(jié)果正確無誤。毒物的種類很多，中毒的原因也很復(fù)雜，在進行毒檢之前，要考慮以下幾個問題：

（1）、有無中毒的可能，即是否(shìfǒu)為中毒？（2）、如果是中毒可能是何種毒物中毒？（3）、該取什么檢材？

（4）、用什么方法進行檢驗。

只有這幾個問題明確了，毒檢工作才不致于白費力，或少走彎路。第三頁，共三十三頁。目錄1、實驗室檢測的重要性2、毒物理化實驗室開展項目(xiàngmù)3、實驗室檢測的質(zhì)量保證4、理化實驗室展望第四頁，共三十三頁。31、實驗室檢測(jiǎncè)的重要性?急性中毒分析的應(yīng)對(yìngduì)流程：現(xiàn)場調(diào)查→現(xiàn)場采樣→現(xiàn)場檢測→實驗室檢測→中毒原因?實驗室檢測結(jié)果對事件(shìjiàn)病因確定，中毒患者病因的診斷和治療方案的確定均有重要的作用。?患者的生物材料測定結(jié)果可直接指示中毒原因和中毒程度，是事件應(yīng)對中必采的樣品。第五頁，共三十三頁。41-1、常用(chánɡyònɡ)臨床生物樣品

常用生物樣品的種類、特點與采集

血漿（plasma

）?

血樣

——

血清（serum

）全血（wholeblood

）?尿液（urine

）——

用于未知樣品的劑量回收、腎清除率及生物利用度的研究?！蛞何粗獦悠窛舛茸兓?，應(yīng)測定(cèdìng)一定時間內(nèi)尿中該物質(zhì)總量?！蛞号c血液中未知樣品的相關(guān)性?！蛑形粗獦悠返某尸F(xiàn)狀態(tài)。第六頁，共三十三頁。5尿樣：>50ml，若不能及時測定，需4℃保存。血樣：采集血清，血漿和全血時防止溶血；臨時存放(cúnfàng)于4℃保存，否則須冷凍保存。蓋子顏色添加抗凝劑用途紅色無化學(xué)、血清學(xué)、血庫紫色EDTA適用于血液常規(guī)檢查、糖化血紅蛋白綠色肝素鈉、肝素鋰、肝素胺化學(xué)黃色多茴香腦磺酸鈉血培養(yǎng)棕色肝素鈉鉛測定橘紅色促凝劑快速生化常用彩色(cǎisè)真空采血容器常用生物(shēngwù)樣品的采集與保存第七頁，共三十三頁。6

體內(nèi)物質(zhì)分析是借助于現(xiàn)代化的儀器與技術(shù)來分析其在體內(nèi)數(shù)量與質(zhì)量的變化，主要考慮生物樣品的種類，被測定生物樣品的性質(zhì)和測定方法等方面的問題。 目前，用于生物樣品分析的技術(shù)有很多，而利用待測組分或其化學(xué)反應(yīng)(huàxuéfǎnyìng)生成物所表現(xiàn)出來的物理或物理化學(xué)特性，如光學(xué)特性、電化學(xué)特性等，應(yīng)用分析儀器進行測量來計算待測組分含量的方法，即物理化學(xué)分析法為理化實驗室常用方法。

1-2、生物樣品(yàngpǐn)的常用分析技術(shù)第八頁，共三十三頁。72、毒物理化(lǐhuà)實驗室開展項目第九頁，共三十三頁。82-1、重金屬毒物(dúwù)

重金屬中毒是指重金屬元素或其化合物引起的中毒，如汞中毒、鉛中毒等。重金屬能夠使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)發(fā)生(fāshēng)不可逆的改變，從而影響組織細胞功能，進而影響人體健康。

典型重金屬中毒的癥狀：錳早期錳中毒以神經(jīng)衰弱癥候群和植物神經(jīng)功能障礙為主，晚期有錐體外系受損的癥狀，有致癌致畸致突變效應(yīng)。第十頁，共三十三頁。92-1、重金屬毒物(dúwù)

原子吸收(xīshōu)分光光度計鋅（Zn）、鎘（Cd）、砷（As）等汞(Hg)血鉛檢測(jiǎncè)尿鉛檢測血汞檢測尿汞檢測鉛(Pb)錳(Mn)尿錳檢測發(fā)錳檢測銅(Cu)血銅檢測????測汞儀：汞蒸氣通過進入測汞儀的吸收池測定吸光度，根據(jù)光線減弱的程度可以測出氣體中的汞含量。

第十一頁，共三十三頁。10

?盡管錳、銅、鋅等重金屬是生命活動所需要的微量元素，但是大部分重金屬如汞、鉛、鎘等并非生命活動所必須，而且所有重金屬超過一定濃度都對人體有毒害作用。?

檢測方法(fāngfǎ)：石墨爐原子吸收分光光度法

火焰原子吸收分光光度法?

原理：試樣經(jīng)灰化或酸消解后，注入原子吸收分光光度計石墨爐/火焰管中，電熱原子化/火焰原子化后吸收相應(yīng)的共振線，在一定濃度范圍內(nèi)，其吸收值與重金屬含量成正比，用標準系列定量。原子(yuánzǐ)吸收分光光度計

第十二頁，共三十三頁。112-2、氣體(qìtǐ)與揮發(fā)性毒物

?一氧化碳（CO）中毒是含碳物質(zhì)燃燒不完全時的產(chǎn)物經(jīng)呼吸道吸入引起中毒。?CO易與血紅蛋白結(jié)合，形成碳氧血紅蛋白，使血紅蛋白喪失攜氧能力，造成組織窒息。其對全身的組織細胞均有毒性作用，尤其(yóuqí)對大腦皮質(zhì)的影響最為嚴重。?檢測方法：血中碳氧血紅蛋白分光光度計的定量檢測。?臨床意義：用于CO中毒的臨床診斷，其中正常參考范圍小于3%。輕度中毒血液HbCO濃度為10%～30%，中度中毒血液HbCO濃度為30%～40%，重度中毒血液HbCO濃度可高達50%。①碳氧血紅蛋白(xuèhóngdànbái)（HbCO）第十三頁，共三十三頁。12碳氧血紅蛋白定量(dìngliàng)檢測檢測原理：

分光光度法是通過雙波長吸光度比值法檢測血中HbCO，以碳氧血紅蛋白飽和度表示血液中HbCO。利用(lìyòng)血液中的碳氧血紅蛋白吸光光譜特性在化學(xué)處理后的改變，進行定量測定。紫外-可見(kějiàn)分光光度計第十四頁，共三十三頁。132-2、氣體(qìtǐ)與揮發(fā)性毒物

②血液中乙醇檢測(jiǎncè)：氣相色譜法測定混合物中乙醇的含量

氣相色譜法進行(jìnxíng)血液中酒精含量的定性及定量檢測分析。氣相色譜中的氣-液色譜法屬于分配色譜，利用混合物中各組分在固定相與流動相之間分配情況不同，從而達到分離的目的。③氰化物檢測：硫氰酸鹽的定性檢測普魯士蘭快速檢驗法：酸化的檢樣受熱后，氰化物變成氫氰酸逸出，在堿性條件下與硫酸亞鐵作用，生成亞鐵氰絡(luò)鹽，用酸酸化后，與高鐵離子反應(yīng)，生成普魯士藍。氣相色譜儀第十五頁，共三十三頁。142-3、除草劑

百草枯又名殺草快、一掃光，速效觸滅型除草劑，噴灑后能很快發(fā)揮作用。正常情況下對環(huán)境無危害，但對人畜具有較強毒性。其主要特點致死量低、死亡率高、預(yù)后差。中毒(zhòngdú)多為自服或誤服，也可經(jīng)皮膚和呼吸道吸收損害上皮組織，于肺部聚集，導(dǎo)致肺纖維化和呼吸衰竭。實驗室檢測：血、尿中百草枯進行毒物分析。臨床表現(xiàn)：輕型-攝入量<20mg/kg，預(yù)計能夠完全恢復(fù)；中到重型-攝入量>20mg/kg，多數(shù)患者死于肺功能衰竭；暴發(fā)型-攝入量>40mg/kg，1-4天內(nèi)死于多臟器衰竭。????第十六頁，共三十三頁。15定性檢測：化學(xué)法快速檢測通過顏色判斷體內(nèi)含量。定量檢測：液相色譜法檢測血液中百草枯及其衍生物的含量。百草(bǎicǎo)枯檢測方法(fāngfǎ)液相色譜儀濃度從左至右依次遞增，顏色相應(yīng)加深。第十七頁，共三十三頁。162-4、殺鼠劑毒鼠強

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俗名“三步倒”、“聞到死”。一種化學(xué)劇毒藥，其毒性甚至比氰化物還要大100倍。

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不易降解，可造成二次、三次中毒，故而世界上從未正式將其作為商品滅鼠藥。

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毒性極大，動物食入后，毒物未入胃便發(fā)作，每1000克體重使用0.2毫克，幾分鐘即可死亡。

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對人的致死量為5~12mg，人口服(kǒufú)中毒后數(shù)分鐘至半小時內(nèi)發(fā)病，若不及時搶救，多于2小時內(nèi)死亡，但也有中毒較輕者，2~3天后才發(fā)病。第十八頁，共三十三頁。172-4、殺鼠劑化學(xué)名：四次甲基二砜四胺方法確證體外檢材預(yù)試動物實驗體內(nèi)檢材鑒別GCGC/MS快速定性試驗：硫酸-鹽酸苯肼顯色測定微量毒鼠強。毒鼠強的檢測(jiǎncè)第十九頁，共三十三頁。182-5、染色體和微核微核（micronucleus,簡稱MCN），是真核類生物細胞(xìbāo)中的一種異常結(jié)構(gòu)，是染色體畸變在間期細胞(xìbāo)中的一種表現(xiàn)形式。目前國內(nèi)外不少部門已把微核測試用于輻射損傷、輻射防護、化學(xué)誘變劑、新藥試驗、食品添加劑的安全評價，以及染色體遺傳疾病和癌癥前期診斷等各個方面。

染色體（Chromosome）檢查，是用外周血在細胞生長刺激因子作用下，培養(yǎng)、獲得大量分裂細胞，固定(gùdìng)于載玻片上，在顯微鏡下觀察染色體的結(jié)構(gòu)和數(shù)量。適用于放射性損傷、白血病及其它腫瘤患者、接觸過有害物質(zhì)者、生殖功能障礙者等。第二十頁，共三十三頁。192-6、高鐵血紅蛋白(xuèhóngdànbái)

亞硝酸鹽的檢驗(jiǎnyàn)亞硝酸鹽是一種血液毒物，進入血液循環(huán)后作為強氧化劑，迅速將血紅蛋白氧化成為高鐵（Fe3+）血紅蛋白，使該部分血紅蛋白失去攜氧釋氧功能，導(dǎo)致組織缺氧的一種急性、亞急性中毒。常態(tài)(chángtài)下，亞硝酸鹽通常呈白色或淺黃色顆粒結(jié)晶，形似食鹽，因此常因誤食而中毒。臨床上以黏膜發(fā)紺、血液褐變、呼吸困難、胃腸道炎癥。檢驗方法：氰化高鐵血紅蛋白定量測定法。????第二十一頁，共三十三頁。原理：高鐵血紅蛋白（methemoglobin，MetHb）為血紅蛋白的氧化物，其在波長632nm處有吸收帶。目前(mùqián)標準化的試驗方法是氰化高鐵血紅蛋白測定法，該類方法基于弱酸性MetHb加入氰化物后形成氰化MetHb（MetHb-CN），在630nm處的特征吸收峰會消失。根據(jù)加入氰化物前后密度的變化量來計算MetHb的含量。

氰化高鐵血紅蛋白(xuèhóngdànbái)測定法該法是國際血液標準化委員會推薦的參考方法，具有操作簡單、顯色快、結(jié)果穩(wěn)定可靠等優(yōu)點，其致命(zhìmìng)的弱點是氰化鉀試劑劇毒，應(yīng)合理使用并保管。紫外-可見分光光度計第二十二頁，共三十三頁。212-7、尿δ-氨基(ānjī)乙酰丙酸原理(yuánlǐ)：ALA+乙酰乙酸乙酯

顯色液，形成紅色化合物比色定量萃取液+吡咯(bǐluò)化合物100℃PH=4.6乙酸乙酯萃取554nm

尿δ-氨基乙酰丙酸（δ-aminolevulinicacid，簡稱δ-ALA）檢測是診斷鉛中毒的指標。δ-ALA活性上升是對鉛的特異性反映，作為驅(qū)鉛療效觀察指標，應(yīng)用于鉛接觸人員健康監(jiān)護指標。乙酸乙酯萃取:對二氨基苯甲醛比色法第二十三頁，共三十三頁。222-8、氟氟是人體內(nèi)必須的微量元素。在人體內(nèi)的分布主要集中(jízhōng)在骨骼、牙齒、指甲和毛發(fā)中，尤以牙釉質(zhì)中含量最多。骨骼中以長骨的含氟量最高。

飲水占人體氟來源的65%，長期生活在高氟環(huán)境的居民主要通過飲水等攝入過量氟而引起的以氟斑牙和氟骨癥為特征的全身慢性蓄積性疾病。檢查方法：血氟、尿氟、水氟離子選擇電極定量測定法。????第二十四頁，共三十三頁。23氟離子選擇電極(diànjí)定量測定法原理：氟化鑭單晶膜對氟離子有選擇性，在氟化鑭電極膜兩側(cè)的不同濃度(nóngdù)氟溶液之間存在電位差，這種電位差通常稱為膜電位。膜電位的大小與氟化物溶液的離子濃度(nóngdù)有關(guān)。氟電極與飽和甘汞電極組成一對原電池。利用電動勢與離子活度負對數(shù)值的線性關(guān)系求出檢測樣中氟離子濃度(nóngdù)。氟離子選擇(xuǎnzé)電極儀第二十五頁，共三十三頁。243、實驗室檢測(jiǎncè)的質(zhì)量保證

第二十六頁，共三十三頁。253-1、實驗室的檢驗(jiǎnyàn)質(zhì)量＊正確的檢驗(jiǎnyàn)結(jié)果＊在正確的時間＊基于正確的樣本＊取自正確的患者＊正確的數(shù)據(jù)解釋＊基于正確的參考范圍＊基于合適的成本第二十七頁，共三十三頁。26

3-2、職業(yè)衛(wèi)生(wèishēng)檢測方法的基本要求實驗室檢查(jiǎnchá):﹡檢查所用的試驗器具、材料、樣品等是否正確、符合要求；﹡檢驗方法是否正確；﹡檢驗儀器、設(shè)備運行是否正常；﹡檢查實驗(shíyàn)操作有無差錯。第二十八頁，共三十三頁。273-3、實驗室常用(chánɡyònɡ)檢測方法光譜法分子光譜原子光譜色譜法氣相色譜液相色譜離子色譜電化學(xué)法電位溶出電位分析法電導(dǎo)法第二十九頁，共三十三頁。283-4、檢測(jiǎncè)方