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文檔簡介
關(guān)于溶血性貧血的實驗室檢查第1頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月溶血性貧血定義各種原因?qū)е录t細(xì)胞生存時間縮短、破壞增多或加速,骨髓代償造血功能不足時所發(fā)生的一類貧血叫溶血性貧血。指骨髓代償能力足以補償紅細(xì)胞的損耗而不出現(xiàn)貧血時稱溶血性疾患。第2頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月溶血性貧血的分類按發(fā)病機制分類1.RBC內(nèi)在因素(遺傳性/獲得性)RBC膜缺陷:遺傳球、PNHRBC酶缺陷:G-6PD缺乏癥珠蛋白異常(肽鏈不平衡):海洋性貧血、異常血紅蛋白病2.RBC外在因素(獲得性)免疫性溶貧:AIHA、新生兒溶血癥、藥物誘發(fā)紅細(xì)胞相關(guān)抗體機械損傷性:DIC、TTP、人造瓣膜感染:瘧疾物理因素:灼傷毒素:蛇毒脾亢:單核巨噬細(xì)胞功能亢進第3頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月溶血性貧血的分類按溶血發(fā)生部位分類(RBC破壞場所)血管內(nèi)溶血:RBC在血管內(nèi)破壞見于DIC、機械性微血管病變、燒傷、輸血、PNH血管外溶血:RBC在單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)吞噬或破壞AIHA,遺傳性球形細(xì)胞增多癥第4頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月溶血性貧血第一步確定是否有溶血(篩查檢測)1.紅細(xì)胞破壞增加2.紅細(xì)胞代償性增生第二步哪一類溶貧(病因檢測)第5頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月一、溶血性貧血的篩查檢測第6頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月(一)、紅細(xì)胞破壞增加RBC壽命測定51Cr同位素標(biāo)記參考值:25~32天半衰期<15天,說明有溶血存在第7頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月2.血漿游離血紅蛋白測定
(plasmafreehemoglobin)【參考值】:<50mg/L
【意義】:血管內(nèi)溶血時明顯增高
血管外溶血時正常或輕度升高第8頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月3.血清結(jié)合珠蛋白(haptoglobin,Hp)
【參考值】:0.7~1.5g/L【臨床意義】:
Hp減少,提示溶血存在,血管內(nèi)溶血時顯著減低
Hp增加,提示急慢性感染、惡性腫瘤、創(chuàng)傷、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、SLE等鑒別肝內(nèi)外阻塞性黃疸肝內(nèi)阻塞性黃疸顯著減少或缺乏肝外阻塞性黃疸正?;蛟龈叩?頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月4.尿含鐵血黃素試驗
(Roustest)腎小管上皮細(xì)胞吸收血紅蛋白,代謝成含鐵血黃素。當(dāng)細(xì)胞脫落至尿中,鐵離子在酸化的低鐵氰化鉀溶液中生成藍(lán)色的鐵氰化鐵,顯微鏡下尿沉渣可有深藍(lán)色物質(zhì)出現(xiàn),即為陽性?!窘Y(jié)果判定】陰性【臨床意義】見于慢性血管內(nèi)溶血,如PNH第10頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月5.血紅蛋白尿測定(hemoglobinuria)血管內(nèi)有大量紅細(xì)胞破壞,血漿中的游離血紅蛋白量超過1000mg/L時出現(xiàn)醬油色尿【結(jié)果判定】陰性【臨床意義】溶血時陽性第11頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月6.血漿高鐵血紅素白蛋白試驗
(methemalbumintest)血漿中游離血紅蛋白氧化成高鐵血紅蛋白,接著分解為高鐵血紅素,后者與白蛋白結(jié)合形成高鐵血紅素白蛋白【結(jié)果判定】陰性【臨床意義】見于各種原因所致的嚴(yán)重血管內(nèi)溶血第12頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月7.外周血紅細(xì)胞形態(tài)改變第13頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月裂細(xì)胞schistocyte(紅細(xì)胞異形癥poikilocytosis)系指紅細(xì)胞發(fā)生各種明顯的形態(tài)學(xué)異常改變而言。紅細(xì)胞可呈梨形、淚滴性、新月形、長圓形、啞鈴型、逗點性、三角形、盔形,以及球形、靶形等。
見于紅細(xì)胞因機械或物理因素所致的破壞,如微血管病性溶血性貧血如彌散性血管內(nèi)凝血、血栓性血小板減少性紫癜、溶血尿毒癥綜合征等。也可見于嚴(yán)重?zé)齻∪恕5?4頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月8.血清膽紅素(TBIL)增高,已非結(jié)合膽紅素(間接膽紅素,IBIL)增高為主【參考值】TBIL0~1.2mg/dl(0~20.5ummol/L)IBIL0~0.8mg/dl(0~13.7ummol/L)【臨床意義】提示溶血第15頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月8.血清乳酸脫氫酶
【參考值】80~220U/L【臨床意義】提示溶血第16頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月(二)、
紅細(xì)胞代償增生紅細(xì)胞大小不均
網(wǎng)織紅細(xì)胞增多
外周血見有核RBC
骨髓紅細(xì)胞系統(tǒng)增生明顯活躍,形態(tài)異常細(xì)胞嗜多色性出現(xiàn)嗜堿點彩紅細(xì)胞出現(xiàn)豪-喬小體出現(xiàn)卡波環(huán)第17頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月紅細(xì)胞大小不均anisocytosis
紅細(xì)胞大小懸殊,直徑可相差一倍以上。
反映骨髓中紅細(xì)胞增生明顯旺盛。見于增生性貧血,而在巨幼細(xì)胞貧血中尤為明顯。MDS中也可見。第18頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月嗜多色性
紅細(xì)胞呈淡灰藍(lán)或紫灰色,是未完全成熟的紅細(xì)胞,體積較正常紅細(xì)胞稍大,胞質(zhì)呈嗜堿性著色的物質(zhì)為少量殘留的核糖體、線粒體等成分。其增多反映骨髓造血功能活躍,紅細(xì)胞系增生旺盛。見于增生性貧血,尤以急性溶血性貧血時為最多見。第19頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月嗜堿性點彩細(xì)胞內(nèi)見到散在的大小和數(shù)量不一深藍(lán)色顆粒。點彩紅細(xì)胞屬于未完全成熟的紅細(xì)胞,有時與嗜多性并存。多見于鉛中毒及骨髓增生旺盛的貧血如溶貧,巨幼貧。第20頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月染色質(zhì)小體又稱豪-喬小體,為紫紅色圓形小體,是核染色質(zhì)的殘留部分。常見于骨髓增生旺盛的貧血如溶貧,巨幼貧等第21頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月卡波環(huán)(Cabot)一種紫紅色成圓形或8字形細(xì)線狀環(huán)??赡苁羌忓N體的殘余物或是胞質(zhì)中脂蛋白變性所致。常與染色質(zhì)小體同時出現(xiàn),見于溶血性貧血、巨幼細(xì)胞貧血、鉛中毒及白血病等。第22頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月有核紅細(xì)胞
有核紅細(xì)胞即幼稚紅細(xì)胞,均存在于骨髓中,正常人外周血中不能見到,在出生一周之內(nèi)的新生兒外周血中可見到少量。見于:①各種溶血性貧血②紅白血?、鬯柰庠煅芄撬柁D(zhuǎn)移腫瘤第23頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月二、哪一類溶血性貧血?第24頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月(一)紅細(xì)胞膜缺陷的檢驗
紅細(xì)胞滲透脆性試驗紅細(xì)胞孵育滲透脆性試驗酸溶血試驗蔗糖溶血試驗蛇毒溶血試驗CD55,CD59檢測第25頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月
1.紅細(xì)胞滲透脆性試驗【原理】是測定紅細(xì)胞對不同濃度低滲氯化鈉溶血的抵抗能力。主要取決于紅細(xì)胞表面積與體積之比。表面積大而體積小,對低滲鹽水抵抗力大(即脆性較?。?。反之,抵抗力較?。创嘈暂^大)。
【參考值】開始溶血:0.42%~0.46%(4.2~4.6g/L)NaCL完全溶血:0.28%~0.34%(2.8~3.4g/L)NaCL【臨床意義】
(1)脆性增高遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥(開始溶血5.2g/L,甚至在6.8g/L即開始溶血)(2)脆性減低小細(xì)胞低色素性貧血:海洋性貧血、缺鐵性貧血第26頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月2.紅細(xì)胞孵育滲透脆性試驗【原理】37℃孵育24小時,細(xì)胞內(nèi)葡萄糖消耗增加,ATP減少,鈉離子泵出減少,細(xì)胞膨脹脆性增高【參考值】未孵育50%溶血4.0~4.45g/L 孵育50%溶血4.65~5.9g/L【意義】
脆性增高遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥脆性減低缺鐵性貧血珠蛋白生成障礙性貧血第27頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(PNH)一種后天獲得性血細(xì)胞膜缺陷的克隆性疾病,臨床上可表現(xiàn)血管內(nèi)溶血、栓塞、全血細(xì)胞減少等,有時可出現(xiàn)骨髓衰竭。大多數(shù)PNH患者異??寺∨c正常造血并存,使本病的診斷和發(fā)病機制的研究受到限制。PNH患者紅細(xì)胞膜表面缺乏加速衰變因子(DAF,CD55)反應(yīng)性溶血的膜抑制物(MIRL,CD59)等,使紅細(xì)胞對補體敏感而溶血。上述3種蛋白都經(jīng)糖基化磷脂酰肌醇(GPI)連接在細(xì)胞膜上,稱為GPI錨連蛋白。GPI錨連蛋白缺失是由于體細(xì)胞發(fā)生X連鎖的PIG-A基因突變造成的。第28頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月3.酸溶血試驗(Ham試驗)
【原理】膜蛋白缺陷的紅細(xì)胞對補體敏感增加,在弱酸血清(pH6.6~6.8)中,經(jīng)37℃孵育后紅細(xì)胞發(fā)生溶血?!九R床意義】正常人陰性,陽性見于陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿(PNH)。該法敏感性較高。特異性高。第29頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月4.蔗糖水溶血試驗【原理】
蔗糖離子濃度低,增強補體與紅細(xì)胞結(jié)合,使紅細(xì)胞膜上形成小孔,蔗糖進入紅細(xì)胞而致溶血?!九R床意義】正常陰性。PNH本試驗常為陽性??勺鳛镻NH篩選試驗,陰性可排除,陽性應(yīng)作Ham試驗。第30頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月(二)紅細(xì)胞內(nèi)酶缺陷的檢驗1.自身溶血試驗及糾正試驗【原理】細(xì)胞內(nèi)酶缺陷(葡萄糖-6-磷酸脫氫酶G-6PD、丙酮酸激酶),葡萄糖酵解障礙,不能提供足量ATP,紅細(xì)胞在自身血漿中溫育48小時,不能繼續(xù)從血漿攝取葡萄糖作能量來源,ATP減少,不能維持紅細(xì)胞內(nèi)鈉泵作用,導(dǎo)致溶血增加。在溫育過程中分別加入葡萄糖和ATP作糾正物,看溶血能否糾正。第31頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月【參考值】正常人輕微溶血,溶血度<3.5%;加葡萄糖、ATP溶血明顯糾正,溶血度<1%?!九R床意義】
1)葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6PD)缺乏癥、蠶豆病溶血增加,加葡萄糖、ATP溶血部分糾正。2)丙酮酸激酶缺乏癥加葡萄糖不能糾正,加入ATP能糾正。第32頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月(三)異常血紅蛋白的檢測
血紅蛋白電泳檢測【參考值】正常成人電泳圖譜顯示4條區(qū)帶,最多的是HbA,少量HbA2,再后為兩條兩更少的紅細(xì)胞內(nèi)的非血紅蛋白成分(NH1、NH2)?!九R床意義】有異常血紅蛋白區(qū)帶見于海洋性貧血、異常血紅蛋白病第33頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月(四)自身免疫性溶血的檢驗1.抗人球蛋白試驗(Coombs’test)
【原理】紅細(xì)胞的膜電位使兩個紅細(xì)胞間保持一定距離。不完全抗體IgG分子較小,無法連接兩個鄰近的紅細(xì)胞而只能和一個紅細(xì)胞抗原相結(jié)合。用正常人血清免疫家兔,獲得抗人球蛋白血清??谷饲虻鞍资峭耆贵w,可與多個紅細(xì)胞表面不完全抗體結(jié)合,使紅細(xì)胞相互連接起來出現(xiàn)凝集現(xiàn)象,稱為抗人球蛋白試驗陽性。
直接抗人球蛋白試驗:檢測紅細(xì)胞表面結(jié)合有不完全抗體。
間接抗人球蛋白試驗:檢查血清中有無游離的不完全抗體。第34頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月抗人球蛋白IgG不完全抗體RBC第35頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月第36頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月將病人血清和正常RBC混合,再加入抗IgG試劑病人血清RBC抗IgG第37頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月【參考值】正常人直接、間接均抗人球蛋白試驗均陰性【臨床意義】1)陽性見于AIHA,新生兒溶血病,SLE等2)AIHA大多為IgG(溫抗體型37℃條件下作用最強),少數(shù)為IgM(冷抗體型4℃條件下進行試驗)3)間接試驗主要見于Rh或ABO妊娠免疫性新生兒溶血病母體血清中不完全抗體檢測。第38頁,課件共42頁,創(chuàng)作于2023年2月(五)冷凝集試驗【原理】機體存在抗自身紅細(xì)胞抗體,在低溫時與相應(yīng)抗原結(jié)合,使紅細(xì)胞凝集,特別是在4℃時最強烈,但溫度
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