三萜及其苷類詳解

三萜及其苷類詳解演示文稿目前一頁\總數(shù)一百頁\編于二十點優(yōu)選三萜及其苷類目前二頁\總數(shù)一百頁\編于二十點一、三萜的定義

定義:由30個碳原子組成的萜類化合物，分子中有6個異戊二烯單位，通式(C5H8)6

。三萜類(triterpenes)在自然界分布廣泛，有的游離存在于植物體，稱為三萜皂苷元(Triterpenoidsapogenins)；有的以與糖結(jié)合成苷的形式存在，稱為三萜皂苷(Triterpenoidsaponins)。目前三頁\總數(shù)一百頁\編于二十點

與甾體皂苷相同，三萜皂苷也具有溶血、毒魚及毒貝類的作用。因三萜皂苷多溶于水，振搖后可生成膠體溶液，并有持久性似肥皂溶液的泡沫，故有此名。三萜皂苷多具有羧基，故又稱其為酸性皂苷。皂角目前四頁\總數(shù)一百頁\編于二十點二、三萜的分布

三萜類(triterpenes)在自然界分布廣泛，菌類、蕨類、單子葉、雙子葉植物、動物及海洋生物中均有分布，尤以雙子葉植物中分布最多。主要分布于石竹科、五加科、豆科、七葉樹科、遠(yuǎn)志科、桔?？萍靶⒖啤：腥祁惓煞值闹饕兴幦缛藚ⅰ⒏什?、柴胡、黃芪、桔梗、川楝皮、澤瀉、靈芝等。目前五頁\總數(shù)一百頁\編于二十點

少數(shù)三萜類成分也存在于動物體，如從羊毛脂中分離出羊毛脂醇，從鯊魚肝臟中分離出鯊烯；從海洋生物如海參、軟珊瑚中也分離出各種類型的三萜類化合物。目前六頁\總數(shù)一百頁\編于二十點常見的糖：葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、鼠李糖，糖醛酸，特殊糖（如芹糖、乙酰氨基糖等）糖鏈：單糖鏈、雙糖鏈、三糖鏈成苷位置：3、28（酯皂苷）或其它位-OH次皂苷：原生苷被部分降解的產(chǎn)物三、存在形式多以游離或成苷成酯的形式存在苷元：四環(huán)三萜、五環(huán)三萜

328目前七頁\總數(shù)一百頁\編于二十點三萜是由鯊烯(squalene)經(jīng)過不同的途徑環(huán)合而成。而鯊烯是由倍半萜金合歡醇(farnesol)的焦磷酸酯尾尾縮合而成。

這樣就溝通了三萜和其它萜類之間的生源關(guān)系。第2節(jié)三萜類化合物的生物合成目前八頁\總數(shù)一百頁\編于二十點目前九頁\總數(shù)一百頁\編于二十點三萜類化合物的結(jié)構(gòu)類型很多，多數(shù)三萜為四環(huán)三萜和五環(huán)三萜，少數(shù)為鏈狀、單環(huán)、雙環(huán)和三環(huán)三萜。近幾十年還發(fā)現(xiàn)了許多由于氧化、環(huán)裂解、甲基轉(zhuǎn)位、重排及降解等而產(chǎn)生的結(jié)構(gòu)復(fù)雜的高度氧化的新骨架類型的三萜類化合物。第3節(jié)三萜的結(jié)構(gòu)分類目前十頁\總數(shù)一百頁\編于二十點四環(huán)三萜(tetracyclictriterpenoids)在生源上可視為由鯊烯變?yōu)殓摅w的中間體，大多數(shù)結(jié)構(gòu)和甾醇很相似，亦具有環(huán)戊烷駢多氫菲的四環(huán)甾核。在4α、4β、14α位上比甾醇多三個甲基，也有認(rèn)為是植物甾醇的三甲基衍生物。存在于自然界較多的四環(huán)三萜或其皂苷苷元主要有羊毛脂烷、達(dá)瑪烷、甘遂烷、環(huán)阿屯烷（環(huán)阿爾廷烷）、葫蘆烷、楝苦素型和原萜烷型三萜類。一、四環(huán)三萜類目前十一頁\總數(shù)一百頁\編于二十點1.

達(dá)瑪烷型從環(huán)氧鯊烯由全椅式構(gòu)象形成，其結(jié)構(gòu)特點是A/B、B/C、C/D環(huán)均為反式,C13位-CH3移到C8位,C13有-H,C17有側(cè)鏈,C20構(gòu)型為R或S。目前十二頁\總數(shù)一百頁\編于二十點舉例：人參中含有人參皂苷(ginsenosides)目前十三頁\總數(shù)一百頁\編于二十點目前十四頁\總數(shù)一百頁\編于二十點人參中的人參皂苷(ginsenosides):目前十五頁\總數(shù)一百頁\編于二十點由20(S)-原人參二醇衍生的皂苷:木糖目前十六頁\總數(shù)一百頁\編于二十點由人參三醇衍生的皂苷:目前十七頁\總數(shù)一百頁\編于二十點

在HCl溶液中,20(S)原人參二醇或20(S)原人參三醇20位羥基發(fā)生異構(gòu),轉(zhuǎn)變成20(R)原人參二醇或20(R)原人參三醇,再環(huán)合生成人參二醇或人參三醇。目前十八頁\總數(shù)一百頁\編于二十點由達(dá)瑪烷衍生的人參皂苷，在生物活性上有顯著的差異。

例如：由20(S)-原人參三醇衍生的皂苷有溶血性質(zhì)，而由20(S)-原人參二醇衍生的皂苷則具對抗溶血的作用，因此人參總皂苷不能表現(xiàn)出溶血的現(xiàn)象。

人參皂苷Rg1有輕度中樞神經(jīng)興奮作用及抗疲勞作用。人參皂苷Rh則有中樞神經(jīng)抑制作用和安定作用。

人參皂苷Rb1還有增強(qiáng)核糖核酸聚合酶的活性，而人參皂苷Rc則有抑制核糖核酸聚合酶的活性。目前十九頁\總數(shù)一百頁\編于二十點1983年，日本學(xué)者北川勛首選確定了人參皂苷Rh2的結(jié)構(gòu)，在紅參中的收取率也只有十萬分之一，含量是相當(dāng)?shù)南∩?，人參皂苷Rh2是一種稀有皂苷，在其后證明了對卵巢癌、黑色素瘤等癌癥細(xì)胞有很好的抑制效果，現(xiàn)在研究證明人參皂苷Rh2有廣譜抗癌的效果，針對很多癌癥都有相關(guān)的報道。人參皂苷Rh2真正為市場熟知，是2009年央視走進(jìn)科學(xué)節(jié)目報道。證實其對腫瘤的作用。目前二十頁\總數(shù)一百頁\編于二十點目前二十一頁\總數(shù)一百頁\編于二十點人參皂苷產(chǎn)品種類很多，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)的種類有40余種，人參皂苷各種成分都有不同的作用，有幾種有抗癌的作用，但有的還有相反的作用，所以癌癥病人不能直接服用人參也不能直接服用人參皂苷。在具有抗癌作用的人參皂苷中，二醇型皂苷為最強(qiáng)，其中最廣為人知的主要有Rg3和人參皂苷Rh2，但因為人參皂苷Rg3在體內(nèi)發(fā)揮抗腫瘤的效果主要還是轉(zhuǎn)變成人參皂苷Rh2后發(fā)揮效果的，所以人參皂苷Rh2的在抗癌方面的效果是優(yōu)于人參皂苷Rg3的。人參皂苷Rh2的含量是非常少，在人參中僅為十萬分之一，所以如何提高收取率和在人體的吸收率也是現(xiàn)在研究非常關(guān)鍵的問題。目前二十二頁\總數(shù)一百頁\編于二十點1.抑制和殺滅癌細(xì)胞

從而使腫瘤縮小消失。與其他化放療藥物合用，有很好的協(xié)同作用，并可大大減輕其他化放療藥物的毒副反應(yīng)。2.誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡

實驗驗證Rh2能通過不同途徑誘發(fā)腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤、肝癌等多種癌細(xì)胞凋亡，從而有效地治療癌癥。3.誘導(dǎo)癌細(xì)胞分化

使低分化的癌細(xì)胞向正常分化逆轉(zhuǎn)或恢復(fù)分化效應(yīng)。實驗證明人參皂苷Rh2能使肝癌、細(xì)胞癌、黑色素瘤、畸胎瘤、白血病等癌細(xì)胞向正常細(xì)胞逆轉(zhuǎn)的誘導(dǎo)分化作用，與西藥分化劑聯(lián)合應(yīng)用，將在癌癥病人治療中發(fā)揮十分積極的作用。人參皂苷Rh2抗癌作用機(jī)理目前二十三頁\總數(shù)一百頁\編于二十點4.增強(qiáng)機(jī)體免疫功能

人體免疫功能低下是引發(fā)癌癥的主要原因之一，而化放療可進(jìn)一步摧毀機(jī)體免疫功能，因此，即使在手術(shù)后化放療期間癌癥也易復(fù)發(fā)、侵襲和廣泛性轉(zhuǎn)移，甚至?xí)l(fā)生第二癌癥?，F(xiàn)在證明人參皂苷Rh2可有效的保護(hù)免疫器官增強(qiáng)免疫功能，有利于免疫監(jiān)視與清除異常細(xì)胞功能的正常發(fā)揮，從而可以預(yù)防癌癥和癌癥細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。5.人參大補(bǔ)元氣人參皂苷Rh2也可通過恢復(fù)癌細(xì)胞對化療藥物的敏感性，保護(hù)骨髓功能調(diào)整人體狀態(tài)，改善病人生活質(zhì)量，克服或減輕放化療藥物的毒副反應(yīng)等多種途徑間接達(dá)到治療癌癥的效果。目前二十四頁\總數(shù)一百頁\編于二十點2.羊毛脂烷型從環(huán)氧鯊烯由全椅-船-椅式構(gòu)象形成，其A/B,B/C,C/D環(huán)均為反式。10、13、14位分別連有,,-CH3，C20為R構(gòu)型，C17側(cè)鏈為β構(gòu)型,C3位常有-OH存在。目前二十五頁\總數(shù)一百頁\編于二十點

從靈芝中分離出一個三萜化合物，具有扶正固本之功。它的結(jié)構(gòu)與羊毛甾烷相比，多了3=O，11=O，15=O，23=O，27-CH3→27-COOH，是羊毛甾烷的高度氧化化合物。目前二十六頁\總數(shù)一百頁\編于二十點3.甘遂烷型從環(huán)氧鯊烯由全椅-船-椅式構(gòu)象形成，其A/B,B/C,C/D環(huán)均為反式，10、13、14位分別連有,,-CH3，C20為S構(gòu)型。目前二十七頁\總數(shù)一百頁\編于二十點4.環(huán)阿屯型基本骨架與羊毛脂烷相似，差別僅在于環(huán)阿屯型19位甲基與9位脫氫形成三元環(huán)。目前二十八頁\總數(shù)一百頁\編于二十點

膜莢黃芪Astragalusmembranaceus，具有補(bǔ)氣，強(qiáng)壯之功效。從其中分離鑒定的皂苷有近20個，多數(shù)皂苷的苷元為環(huán)黃芪醇cycloastragenol。目前二十九頁\總數(shù)一百頁\編于二十點5.葫蘆烷型基本骨架與羊毛脂烷相似，但它有5-H,10-H,9-CH3。目前三十頁\總數(shù)一百頁\編于二十點

云南果血膽為清熱解毒藥，從其中分離出抗菌消炎成分血膽甲素(cucurbitacinIIa)，血膽乙素(cucurbitacinIib)。目前三十一頁\總數(shù)一百頁\編于二十點6.楝烷型

楝科楝屬植物苦楝果實及樹皮中含多種三萜成分，具苦味，總稱為楝苦素類成分，其由26個碳構(gòu)成，屬于楝烷型。其A/B,B/C,C/D均為反式；具有C8-βCH3，C10-βCH3，C13-αCH3。目前三十二頁\總數(shù)一百頁\編于二十點多數(shù)三萜皂苷苷元以五環(huán)三萜形式存在。其C3-OH與糖結(jié)合成苷，苷元中常含有羧基，故又稱酸性皂苷，在植物體中常與鈣、鎂等離子結(jié)合成鹽。五環(huán)三萜主要有下面幾種類型：二、五環(huán)三萜類目前三十三頁\總數(shù)一百頁\編于二十點1.齊墩果烷型(oleanane)又稱b-香樹脂烷型(β-amyrane)，在植物界分布極為廣泛。其基本碳架是多氫蒎的五環(huán)母核，環(huán)的構(gòu)型為A/B反，B/C反，C/D反，D/E順，C28常有-COOH，有時也在C4位，C3常有羥基，C12、C13位往往有不飽和雙鍵的存在。目前三十四頁\總數(shù)一百頁\編于二十點目前三十五頁\總數(shù)一百頁\編于二十點

齊墩果酸首先由油橄欖的葉子中分得，廣泛分布于植物界，如在青葉膽全草、女貞果實等植物中游離存在，但大多數(shù)與糖結(jié)合成苷存在。齊墩果酸具有抗炎、鎮(zhèn)靜、防腫瘤等作用，是治療急性黃膽性肝炎和慢性遷延性肝炎的有效藥物。含齊墩果酸的植物很多，但含量超過10%的很少，從刺五加(Acanthopanaxsenticosus)、龍牙蔥木(Araliamandshurica)中提取齊墩果酸，得率都超過10%，純度在95%以上，是很好的植物資源。目前三十六頁\總數(shù)一百頁\編于二十點

甘草(Glycyrrhizaurlensis)中含有甘草次酸(glycyrrhetinicacid)和甘草酸(glycyrrhizicacid)[又稱甘草皂苷(glycyrrhizin)或甘草甜素]。

甘草次酸有促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)樣作用，臨床上用于抗炎和治療胃潰瘍。但只有18-βH的甘草次酸才有此活性，18αH者無此活性。18目前三十七頁\總數(shù)一百頁\編于二十點目前三十八頁\總數(shù)一百頁\編于二十點植物來源：豆科植物甘草(GlycyrrhizauralensisFisch)的干燥根及根莖

英文名稱：Liquorice

分子式及分子量：C42H62O16;822.92

藥理作用：甘草酸具有腎上腺皮質(zhì)激素樣作用，能抑制毛細(xì)血管通透性，減輕過敏休克的癥狀?？梢越档透哐獕翰∪说难迥戠薮?。甘草酸（Glycyrrhizicacid）目前三十九頁\總數(shù)一百頁\編于二十點【用法用量】靜脈注射1日1次，150mg/次，用10％葡萄糖注射液250ml稀釋后緩慢滴注?！咀⒁馐马棥勘酒肺唇?jīng)稀釋不得進(jìn)行注射；治療中應(yīng)檢測血清鈉、鉀和血壓；治療中出現(xiàn)高血壓、血鈉滯留、低血鉀等應(yīng)停藥或適當(dāng)減量。甘草酸二銨（注射劑）DiammoniumGlycyrrhizinate【主要成分】同甘草酸二銨膠囊。

【藥理作用】同甘草酸二銨膠囊?！具m應(yīng)證】同甘草酸二銨膠囊?！静涣挤磻?yīng)】同甘草酸二銨膠囊。目前四十頁\總數(shù)一百頁\編于二十點甘草次酸（Glycyrrhetinicacid）植物來源：豆科植物甘草(GlycyrrhizauralensisFisch)的根、根莖

英文名稱：Liquorice

分子式及分子量：C30H46O4;470.64

藥理作用：甘草次酸具有抗菌、抗腫瘤及腎上腺皮質(zhì)激素樣作用，可制成抗炎抗過敏制劑，用于治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、氣喘、過敏性及職業(yè)性皮炎、眼耳鼻喉科炎癥及潰瘍等。目前四十一頁\總數(shù)一百頁\編于二十點柴胡為傘形科柴胡屬植物的干燥根，具和解退熱，疏肝解郁，升舉陽氣的功能。迄今為止，柴胡屬植物中已經(jīng)分離出100多種三萜皂苷，絕大多數(shù)為齊墩果烷型骨架。目前四十二頁\總數(shù)一百頁\編于二十點2.烏蘇烷型

又稱-香樹脂烷型(α-amyrane)或熊果烷型，其分子結(jié)構(gòu)與齊墩果烷型不同之處是E環(huán)上兩個甲基位置不同，即C20位的甲基移到C19位上。此類三萜大多是烏蘇酸的衍生物。目前四十三頁\總數(shù)一百頁\編于二十點熊果酸（Ursolicacid）植物來源：木犀科植物女貞(LigustrumlucidumAit.)葉

英文名稱：GlossyPrivet

分子式及分子量：C30H48O3：456.68

3β-Hydroxyurs-12-en-28-oicacid(I)藥理作用：熊果酸又名烏索酸，烏蘇酸，屬三萜類化合物。具有鎮(zhèn)靜、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗?jié)?、降低血糖等多種生物學(xué)效應(yīng)。目前四十四頁\總數(shù)一百頁\編于二十點研發(fā)進(jìn)展：近年來發(fā)現(xiàn)它具有抗致癌、抗促癌、誘導(dǎo)F9畸胎瘤細(xì)胞分化和抗血管生成作用。研究發(fā)現(xiàn)：熊果酸能明顯抑制HL－60細(xì)胞增殖，可誘導(dǎo)其凋亡；能使小鼠的巨噬細(xì)胞吞噬功能顯著提高。體內(nèi)試驗證明，熊果酸可以明顯增強(qiáng)機(jī)體免疫功能。說明它的抗腫瘤作用廣泛，極有可能成為低毒有效的新型抗癌藥物。目前四十五頁\總數(shù)一百頁\編于二十點

白花刺參（Morinanepalensisvar.alba）是國家衛(wèi)生部藏藥藥品標(biāo)準(zhǔn)中收載的三種刺參藏藥材中的第一種，具有催吐，健胃等功能。從白花刺參中分離獲得了兩種新的三萜皂苷類化合物——刺參皂苷Ａ和Ｂ,其苷元均以烏蘇酸為骨架。目前四十六頁\總數(shù)一百頁\編于二十點3.羽扇豆烷型

羽扇豆烷三萜類E環(huán)為五元碳環(huán)，且在E環(huán)19位有異丙基以α構(gòu)型取代，A/B、B/C、C/D及D/E均為反式。目前四十七頁\總數(shù)一百頁\編于二十點

白樺脂醇(betulin)存在于中草藥酸棗仁、樺樹皮、棍欄樹皮、槐花等中。

白樺脂酸(betulinicacid)存在于酸棗仁、樺樹皮、柿蒂、天門冬、石榴樹皮及葉、睡菜葉等中。

羽扇豆醇(lupeol)存在于羽扇豆種皮中。目前四十八頁\總數(shù)一百頁\編于二十點4.木栓烷型由齊墩果烯經(jīng)甲基移位轉(zhuǎn)變而來。目前四十九頁\總數(shù)一百頁\編于二十點雷公藤酮是失去25甲基的木栓烷型衍生物?；瘜W(xué)名3-hydroxy-25-nor-friedel-3,1(10)-dien-2-one-30-oicacid.目前五十頁\總數(shù)一百頁\編于二十點1.性狀：苷元有較好晶型，皂苷多為無定形粉末。2.氣味：皂苷多數(shù)具有苦而辛辣味，其粉末對人體黏膜具有強(qiáng)烈刺激性，但甘草皂苷有顯著而強(qiáng)的甜味，對黏膜刺激性弱。皂苷還具吸濕性。3.表面活性：親水性基團(tuán)為糖，親脂性基團(tuán)為苷元，當(dāng)二種基團(tuán)比例適當(dāng)時具有表面活性。皂苷水溶液經(jīng)強(qiáng)烈振搖能產(chǎn)生持久性的泡沫，且不因加熱而消失。第4節(jié)三萜皂苷的理化性質(zhì)目前五十一頁\總數(shù)一百頁\編于二十點4.溶解度皂苷：可溶于水，易溶于熱水，溶于含水醇（甲醇、乙醇、丁醇、戊醇等），溶于熱甲醇、乙醇；幾不溶于乙醚、苯、丙酮等有機(jī)溶劑。皂苷在提取的過程中會產(chǎn)生次級苷，水溶性下降，溶于中等極性有機(jī)溶劑（醇，醋酸乙酯）。皂苷元：不溶于水，易溶于石油醚、苯、CHCl3、Et2O。目前五十二頁\總數(shù)一百頁\編于二十點5.溶血作用皂苷水溶液能與紅細(xì)胞壁上的膽甾醇結(jié)合，生成不溶于水的分子復(fù)合物，破壞了紅細(xì)胞的正常滲透，使細(xì)胞內(nèi)滲透壓增加而發(fā)生崩解，從而導(dǎo)致溶血現(xiàn)象，故皂苷又稱為皂毒素(saptoxins)。因此，皂苷水溶液不能用于靜脈注射或肌肉注射。但并不是所有的皂苷都具有溶血作用，如以人參二醇為苷元的皂苷則無溶血作用。溶血指數(shù)：指在一定條件下能使血液中紅細(xì)胞完全溶解的最低皂苷濃度。如甘草皂苷，溶血指數(shù)1：4000，溶血性能較強(qiáng)。目前五十三頁\總數(shù)一百頁\編于二十點6.沉淀反應(yīng)皂苷的水溶液可以和一些金屬鹽類如鉛鹽、鋇鹽、銅鹽等產(chǎn)生沉淀。此性質(zhì)可用于皂苷的分離：先用金屬鹽使皂苷沉淀下來，分離出來之后在對其分解脫鹽。如：三萜皂苷+PbAc2→沉淀→分解脫鉛→皂苷缺點：鉛鹽吸附力強(qiáng)，容易帶入雜質(zhì)，并且在脫鉛時鉛鹽也會帶走一些皂苷，脫鉛也不一定能脫干凈。三萜皂苷為酸性皂苷，可用中性PbAc2沉淀，而甾體皂苷則為中性皂苷，須用堿性PbAc2沉淀。目前五十四頁\總數(shù)一百頁\編于二十點7.顯色反應(yīng)1）濃H2SO4-醋酐（Liebermann-burchard）反應(yīng)樣品溶于冰醋酸，加濃硫酸-醋酐(1:20)，產(chǎn)生紅→紫→藍(lán)→綠→污綠等顏色變化，最后褪色。甾體皂苷也有此反應(yīng)，但顏色變化快，在顏色變化的最后呈現(xiàn)污綠色；而三萜皂苷顏色變化稍慢，且不出現(xiàn)污綠色。目前五十五頁\總數(shù)一百頁\編于二十點2）五氯化銻（kahlenberg）反應(yīng)三氯化銻或五氯化銻反應(yīng)將樣品醇溶液點于濾紙上，噴以20%三氯化銻（或五氯化銻）氯仿溶液（不應(yīng)含乙醇和水）干燥后，60-70℃加熱，顯黃色、灰藍(lán)色、灰紫色斑點，在紫外燈下顯藍(lán)紫色熒光（甾體皂苷則顯黃色熒光）。

注意：五氯化銻腐蝕性很強(qiáng)，宜少量配置，用后倒掉。3）三氯醋酸（Rosen-Heimer）反應(yīng)樣品溶液點于濾紙上，噴25%三氯醋酸乙醇溶液，加熱至100℃，顯紅色→紫色斑點。目前五十六頁\總數(shù)一百頁\編于二十點4）氯仿-濃硫酸（salkawski）反應(yīng)將樣品溶于氯仿，加入濃硫酸后，在氯仿層呈現(xiàn)紅色或蘭色，硫酸層有綠色熒光出現(xiàn)。5）冰醋酸-乙酰氯（Tschugaeff）反應(yīng)

樣品溶于冰醋酸，加乙酰氯數(shù)滴及氯化鋅結(jié)晶數(shù)粒，稍加熱，則呈現(xiàn)淡紅色或紫紅色。

目前五十七頁\總數(shù)一百頁\編于二十點一、苷元的提取與分離（一）提取1.醇提，提取物直接進(jìn)行分離2.醇提，有機(jī)溶劑萃取3.制備成衍生物再進(jìn)行分離4.將皂苷進(jìn)行水解，有機(jī)溶劑提（二）分離硅膠柱層析第5節(jié)三萜皂苷的提取分離目前五十八頁\總數(shù)一百頁\編于二十點目前五十九頁\總數(shù)一百頁\編于二十點二、三萜皂苷的提取與分離特性：難以結(jié)晶，多為無定形粉末由于糖分子的引入，極性基團(tuán)明顯增多，致使極性增強(qiáng)，故具有較大的極性而易溶于醇類溶劑、含水醇及水難溶于弱極性的有機(jī)溶劑目前六十頁\總數(shù)一百頁\編于二十點◆常用的提取方法甲醇或乙醇提取脫脂正丁醇萃取稀醇洗脫總皂苷大孔吸附樹脂柱目前六十一頁\總數(shù)一百頁\編于二十點目前六十二頁\總數(shù)一百頁\編于二十點（二）分離1.分配柱層析法以硅膠為支持劑CHCl3-MeOH-H2O，CH2Cl2-MeOH-H2O，EtOAc-EtOH-H2O或水飽和的正丁醇等溶劑2.反相層析法以反相鍵合相RP-18、RP-8或RP-2為填充劑，常用CH3OH-H2O或乙腈-水為洗脫劑。系統(tǒng)洗脫目前六十三頁\總數(shù)一百頁\編于二十點3.逆流色譜作為一種無需吸附劑的液液分配色譜，具有諸多優(yōu)越性，如利于樣品的回收、緩解拖尾現(xiàn)象、減少溶劑的用量等，尤其是對于極性強(qiáng)的皂苷類化合物不會造成不可逆吸附。目前六十四頁\總數(shù)一百頁\編于二十點第6節(jié)三萜及其皂苷的結(jié)構(gòu)解析皂苷的結(jié)構(gòu)解析主要包括以下幾個方面：①苷元結(jié)構(gòu)類型②糖鏈中糖的種類、數(shù)量、連接位置以及連接順序，還有糖的端基構(gòu)型及其與苷元的連接位置③其他取代基團(tuán)的結(jié)構(gòu)和連接位置目前六十五頁\總數(shù)一百頁\編于二十點一、苷鍵的水解目前，為了節(jié)約時間并不損失樣品，多采用核磁共振直接測定皂苷結(jié)構(gòu)。但是，苷鍵裂解對研究新皂苷結(jié)構(gòu)中糖的絕對構(gòu)型仍是一種不可或缺的手段。常用的苷鍵裂解方法如下：1.酸水解由于苷鍵是縮醛結(jié)構(gòu)的一部分，容易被酸所水解，因此該方法是很常用的一種苷鍵裂解方法。將皂苷溶于HCl或H2SO4水或醇的溶液中加熱，而后減壓除去有機(jī)溶劑，再用弱極性有機(jī)溶劑對水溶液進(jìn)行萃取以獲得苷元，或直接將水溶液中的苷元沉淀過濾出來。母液通過堿或陰離子交換樹脂中和后再通過薄層色譜或氣相色譜鑒定水解所生成的單糖。目前六十六頁\總數(shù)一百頁\編于二十點2.二相酸水解酸水解反應(yīng)劇烈時會造成苷元結(jié)構(gòu)的變化，因此在進(jìn)行酸水解的同時向反應(yīng)液中加入有機(jī)相，如苯或甲苯等，可以將反應(yīng)生成的苷元在第一時間萃取至有機(jī)溶劑中，從而避免了苷元副產(chǎn)物的產(chǎn)生。3.Smith降解皂苷分子中的含有鄰二羥基的糖可以在過碘酸鈉的氧化下生成二醛中間體，中間體用硼氫化鈉還原，而后在室溫下酸處理即可得到失去含鄰二羥基糖片段的苷元或次級苷，該方法被稱為Smith降解，其反應(yīng)條件非常溫和，適合于酸水解條件下不穩(wěn)定的皂苷。目前六十七頁\總數(shù)一百頁\編于二十點4.堿水解針對含有酯苷鍵的皂苷，可以使用堿水解的方法對酯鍵進(jìn)行裂解而不影響醚苷鍵。但該方法反應(yīng)條件較劇烈時會破壞苷元結(jié)構(gòu)并導(dǎo)致水解掉的糖分解，需要特別注意。5.酶水解糖苷酶(glycosidase)在適合的條件下可以選擇性的裂解某一類苷鍵，具有較高的專屬性，并且反應(yīng)條件溫和，不會破壞苷元和糖的結(jié)構(gòu)。6.微生物水解一些土壤微生物可以在一定條件下水解苷目前六十八頁\總數(shù)一百頁\編于二十點二、三萜的波譜特征1、紫外光譜(UV)結(jié)構(gòu)中有一個孤立雙鍵:205-250nm處有微弱吸收;α、β不飽和羰基λmax:242-250nm；異環(huán)共軛雙烯λmax:240、250、260nm；同環(huán)共軛雙烯λmax:285nm。

多數(shù)三萜類化合物不產(chǎn)生紫外吸收，但以濃硫酸為試劑測定五環(huán)三萜類化合物時，可在310nm處觀察到最大吸收，且不受母核上的取代基影響。！目前六十九頁\總數(shù)一百頁\編于二十點2、紅外光譜(IR)根據(jù)紅外光譜A區(qū)（1355-1392cm-1）和B區(qū)(1245-1330cm-1）的碳?xì)湮諄韰^(qū)別齊墩果烷、烏蘇烷和四環(huán)三萜的基本骨架。齊墩果烷型的A區(qū)有兩個峰（1392-1379cm-1，1370-1355cm-1）；B區(qū)有三個峰（1330-1315cm-1，1306-1299cm-1，1269-1250cm-1）。烏蘇烷型的A區(qū)有三個峰（1392-1386cm-1，1383-1370cm-1，1364-1359cm-1）；B區(qū)也有三個峰（1312-1308cm-1,1276-1270cm-1,1250-1245cm-1）。四環(huán)三萜的A區(qū)和B區(qū)都只有一個峰。目前七十頁\總數(shù)一百頁\編于二十點目前七十一頁\總數(shù)一百頁\編于二十點還可根據(jù)紅外光譜初步判斷三萜母核上羥基的類型。通常伯羥基的吸收在3640-3641cm-1;

仲羥基在3623-3630cm-1（a鍵仲羥基在3625-3628cm-1，e鍵仲羥基在3623-3630cm-1）。目前七十二頁\總數(shù)一百頁\編于二十點3、質(zhì)譜三萜類化合物質(zhì)譜裂解有較強(qiáng)的規(guī)律：1）當(dāng)有環(huán)內(nèi)雙鍵時，一般都有較特征的逆Diels-Alder(RDA)裂解；2）如無環(huán)內(nèi)雙鍵時，常從C環(huán)斷裂成兩個碎片；3）在有些情況下，可同時產(chǎn)生RDA裂解和C環(huán)斷裂。

四環(huán)三萜類化合物裂解的共同規(guī)律是失去側(cè)鏈。目前七十三頁\總數(shù)一百頁\編于二十點目前七十四頁\總數(shù)一百頁\編于二十點目前七十五頁\總數(shù)一百頁\編于二十點目前七十六頁\總數(shù)一百頁\編于二十點4、1H-NMR1）環(huán)內(nèi)雙鍵質(zhì)子的δ值一般大于5，如齊墩果酸類和烏蘇酸類C12烯氫在δ4.93～5.50處出現(xiàn)分辨不好的多重峰。環(huán)外烯鍵的δ值一般小于5，如羽扇豆烯和何伯烯型的C29位兩個同碳?xì)湫盘柖喑霈F(xiàn)在δ4.30～5.00。目前七十七頁\總數(shù)一百頁\編于二十點2）乙?；|(zhì)子的δ值在1.82-2.07。對于絕大多數(shù)齊墩果烷型和烏蘇烷型三萜，當(dāng)-COOCH3位于C28位時，其甲酯的δ值小于3.795，否則就大于3.795。這一規(guī)律常用于推定齊墩果烷和烏蘇烷母核中C28位的羧基。目前七十八頁\總數(shù)一百頁\編于二十點大多數(shù)三萜化合物C3上有羥基或其它含氧基團(tuán)，此時，C3質(zhì)子的信號多為dd峰。以3-乙酰氧基取代的三萜衍生物為例，C3-H為豎鍵(α-H,β-OAc)時，其δ值在4.00-4.75之間，最大偶合常數(shù)為12Hz左右；C3-H若為橫鍵（β-H,α-OAc），δ值在5.00-5.48之間，最大偶合常數(shù)約為8Hz，二者均為寬低峰。

δ3-H：4.00-4.75,J=12Hzδ3-H：5.00-5.48,J=8Hz

目前七十九頁\總數(shù)一百頁\編于二十點3）三萜中甲基的信號一般出現(xiàn)在δ0.50-1.20之間，以吡啶為溶劑時，可以得到分辨較好的單峰。對于齊墩果烷型和烏蘇烷型的三萜，其最高場甲基的δ值與C28的取代基有關(guān)。當(dāng)C28為COOCH3時最高場甲基的δ值小于0.775，反之則大于0.775。羽扇豆烯型的C30甲基因與雙鍵相連，且有烯丙偶合，δ值在較低場1.63-1.80之間，且呈寬單峰。目前八十頁\總數(shù)一百頁\編于二十點5、13C-NMR角甲基一般出現(xiàn)在δ8.9～33.7，其中23-CH3和29-CH3為e鍵甲基出現(xiàn)在低場，δ值依次為28和33左右。苷元和糖上與氧相連的碳的δ值為60～90;烯碳在δ109—160;羰基碳為δ170-220。目前八十一頁\總數(shù)一百頁\編于二十點(1)雙鍵位置及結(jié)構(gòu)母核的確定根據(jù)碳譜中苷元的烯碳的個數(shù)和化學(xué)位移值不同，可推測一些三萜的雙鍵位置。多數(shù)齊墩果烷、烏蘇烷、羽扇豆烷類三萜主要烯碳化學(xué)位移如下表：目前八十二頁\總數(shù)一百頁\編于二十點三萜及雙鍵位置烯碳δ值其他特征碳Δ12-齊墩果烯C12:122～124，C13:143～14411-oxo,Δ12-齊墩果烯C12:128～129，C13:155～16711-C=O,199～200Δ1l-13,28-epoxy-齊墩果烯C11:132～133，C12:131～132Δ1l,13（18）齊墩果烯C11:126～127，C12:126～13-C:84～85.5（異環(huán)雙烯）C13:136～137，C18:133～Δ9,（11）,12齊墩果烯C9:154～155，C11:116～117同環(huán)雙烯C12:121～122，C13:143～147Δ12-烏蘇烯C12:124～125，C13:139—140Δ20（29）羽扇豆烯C29:109～，C20:150～目前八十三頁\總數(shù)一百頁\編于二十點(2)苷化位置的確定三萜3-OH苷化，一般C-3向低場位移8-10，而且會影響C-4的δ值。糖之間連接位置的苷化位移約為+3～8。但糖與28-COOH成酯苷，苷化位移是向高場位移，羰基碳苷化位移約為-2，糖的端基碳一般位移至δ95～96。目前八十四頁\總數(shù)一百頁\編于二十點3.羥基取代位置及取向的確定

羥基取代可引起:

α-碳向低場移34～50β-碳向低場移2～10而γ-碳則高場移0～9目前八十五頁\總數(shù)一百頁\編于二十點4．糖上乙?；拇_定糖上乙?；赡馨l(fā)生在任一羥基上，有的還出現(xiàn)雙羥基乙酰化，一般乙酰化后，連接乙?；恢玫奶贾迪虻蛨鑫灰?+0.2～1.6)，其鄰位碳向高場位移(2.2-3.5)，但鄰位雙乙酰化時，乙?；捌溧徫惶家话憔蚋邎鑫灰啤Ｄ壳鞍耸揬總數(shù)一百頁\編于二十點(三)其他核磁共振技術(shù)H-Hcosy主要通過分析相鄰質(zhì)子的偶合關(guān)系，用于苷元及糖上質(zhì)子的歸屬;DEPT用于確定碳的類型(CH3、CH2、CH、C);C,H-cosy和為提高靈敏度已發(fā)展的通過氫檢測的異核多量子相關(guān)譜HMQC進(jìn)行碳連接質(zhì)子的歸屬，測試HMQC譜所用化合物樣品量較少。目前八十七頁\總數(shù)一百頁\編于二十點苷中糖的連接位置可由苷化位移確定，或采用NOE實驗，照射糖的端基質(zhì)子可觀察到與糖連接位置的碳上質(zhì)子增益?；虿捎糜蓺錂z測異核多鍵相關(guān)實驗HMBC，在HMBC譜中糖的端基氫與連接位置的碳有明顯的相關(guān)點。全相關(guān)譜TOCSY(HOHAHA)對于糖環(huán)的連續(xù)相互偶合氫的歸屬特別有用，特別是在糖上氫信號互相重疊時，往往可以通過任何一個分離較好的信號(如端基氫)，得到所有該信號偶合體系中的其他質(zhì)子信號，進(jìn)行歸屬。目前八十八頁\總數(shù)一百頁\編于二十