發(fā)育毒理學詳解

發(fā)育毒理學詳解演示文稿目前一頁\總數一百四十五頁\編于二十點優(yōu)選發(fā)育毒理學目前二頁\總數一百四十五頁\編于二十點3

第一節(jié)概述

目前三頁\總數一百四十五頁\編于二十點4Dyingtoseparate拉丹和拉蕾是伊朗一對連體姐妹，出生時頭顱后部相連，面部、五官和軀干肢體都互不相連。她們共同生活了29年，都希望能相互分開獨立生活。為追求自己的夢想，她們曾向德國醫(yī)生求助，但醫(yī)生認為風險過高，拒絕為她們操刀。目前四頁\總數一百四十五頁\編于二十點5

2002年姐妹倆慕名前來新加坡，希望成功為頭部相連的尼泊爾連體嬰分體的神經外科醫(yī)生吳有晶，能幫助她們實現分體。醫(yī)生多次勸阻，但姐妹倆堅持要分體。她們認為連體的生活“比死亡還要糟糕”。對于分離手術帶來的死亡威脅，兩姐妹表示，在苦苦等待29后，已經不在乎“這點威脅”了。醫(yī)院先確認可以對她們進行分體手術，爾后又研究解決了醫(yī)學道德、法律和手術后護理等許多問題。2003年6月，醫(yī)院宣布將對她們進行分顱手術。伊朗總統(tǒng)哈塔米宣布，伊朗政府將承擔此次高達約30萬美元的醫(yī)療費用。目前五頁\總數一百四十五頁\編于二十點6這對連頭姐妹頭部在X光拍片

目前六頁\總數一百四十五頁\編于二十點7這例顱腦分離手術是歷史上第一例成年頭部聯體分離手術。引起醫(yī)學界高度關注，來自新加坡、美國、法國、日本、瑞士和尼泊爾共24名專家以及100多位助手參加了手術。最復雜之處在于，姐妹倆雖各有一個大腦，但共用一條向腦部供血的主動脈。2003年7月8日開始手術。50多個小時的馬拉松式的手術終于使姐妹們實現生前最大的愿望——分開來，擁有獨自個體，不過這個愿望只實現了九十分鐘就先后死亡。致命原因是未能阻止腦部大量出血。7月12日，連體姐妹被分別裝在兩個棺材中埋葬。超過兩萬人參加了葬禮。全國“為她們兩人的勇氣、承擔與眾不同命運的毅力，以及她們追求更快樂未來的意志致敬”。目前七頁\總數一百四十五頁\編于二十點8生殖發(fā)育是哺乳動物繁衍種族的正常生理過程，其中包括生殖細胞(精子/卵細胞)發(fā)生、卵細胞受精、著床(imbed，或植入implantation)、胚胎形成、胚胎發(fā)育、器官發(fā)生(organogenesis)、分娩和哺乳過程。也可稱為繁殖過程(reproduction)。人類社會之所以存在最基本的生理過程！目前八頁\總數一百四十五頁\編于二十點9外源化學物或其它環(huán)境因素與機體接觸后，可干擾生殖發(fā)育任何環(huán)節(jié)，并造成損害作用?；瘜W因素物理因素生物因素

環(huán)境目前九頁\總數一百四十五頁\編于二十點10近年來隨著毒理學和生命科學的深入發(fā)展，外源化學物對生殖發(fā)育損害作用的研究又進一步分為兩方面：①對生殖過程的影響，即生殖毒性(reproductivetoxicity)②對發(fā)育過程的影響，即發(fā)育毒性(developmentaltoxicity)兩方面都逐漸發(fā)展成為毒理學的分支科學；前者稱為生殖毒理學(reproductivetoxicology)，后者稱為發(fā)育毒理學(developmentaltoxicology）。生殖毒理學主要涉及外源化學物對性成熟后哺乳動物生殖功能的影響，評定方法即為生殖毒性試驗。目前十頁\總數一百四十五頁\編于二十點11發(fā)育毒理學*（developmentaltoxicology）研究發(fā)育生物體在受精卵、妊娠期、出生后、直至性成熟的發(fā)育過程中，由于出生前接觸導致異常發(fā)育的理化因素或環(huán)境條件后的發(fā)病機制和結果是毒理學的重要分支學科目前十一頁\總數一百四十五頁\編于二十點12發(fā)育毒理學是在畸胎學基礎上發(fā)展起來的毒理學分支學科畸胎學(古代)現代實驗畸胎學(19世紀)發(fā)育毒理學目前十二頁\總數一百四十五頁\編于二十點13畸胎學神話人物如獨眼巨人、海妖等的原型可能來自嚴重畸形的嬰兒獨眼巨人目前十三頁\總數一百四十五頁\編于二十點14Hybridtheory(雜交理論)認為畸形是人和動物雜交的結果并且這種雜交動物廣泛存在于神話傳說中，如人頭馬身怪物、人身牛頭等目前十四頁\總數一百四十五頁\編于二十點15目前十五頁\總數一百四十五頁\編于二十點16“teratology（畸形學）”來自于希臘語“monster（怪胎）”，即“teras（畸胎）”1651年，WilliamHarvey提出發(fā)育障礙學說：畸形起因于器官或結構的不完全發(fā)育目前十六頁\總數一百四十五頁\編于二十點17現代實驗畸胎學雞蛋畸形小雞19世紀神經管缺陷、無腦畸形、脊柱裂、獨眼畸形、心臟缺陷、位置顛倒、聯體雙胞胎等物理(震動、倒置，針刺)化學因素目前十七頁\總數一百四十五頁\編于二十點18對人類具有致畸作用的因素動物實驗表明，具有致畸作用的化學物有2500多種(1995年Shepard)肯定的人類致畸因素僅數十種，其中化學物或藥物40多種目前十八頁\總數一百四十五頁\編于二十點19電離輻射(放射治療、放射性碘等)化學物和藥物：鎮(zhèn)靜安眠藥，抗驚厥藥，抗抑郁藥，致幻藥和毒品，抗癌藥，維生素A類似物等吸煙病毒感染等母體代謝失調(克汀病、糖尿病、高燒、苯丙酮尿癥、酒精中毒等)目前十九頁\總數一百四十五頁\編于二十點20目前二十頁\總數一百四十五頁\編于二十點21Heavyalcoholconsumptioncandecreasebrainsize.Thistoppictureisaviewoftwohumanbrains.Oneisanormalinfantbrainat6weeks.Theoneontherightisaviewofaninfantwithfetalalcoholsyndrome.Youcanseethatthefetalalcoholbrainissmallerandlooksirregular.Thefoldsinthebraintissuearedifferentthanthenormalbrain.目前二十一頁\總數一百四十五頁\編于二十點22反應停(thalidomide)事件*孕婦的理想選擇？1953年，聯邦德國一家名為Chemie

Gruenenthal的制藥公司研究發(fā)現，反應停具有一定的鎮(zhèn)靜安眠作用，而且對孕婦懷孕早期的妊娠嘔吐療效極佳

1957年10月1日該公司將反應停正式推向市場目前二十二頁\總數一百四十五頁\編于二十點23反應停便成了“孕婦的理想選擇”（當時的廣告用語），在歐洲、亞洲、非洲、澳洲和南美洲被醫(yī)生大量處方給孕婦以治療妊娠嘔吐科學家們在研制反應停時，并沒有料到這種藥物會產生如此可怕的副作用目前二十三頁\總數一百四十五頁\編于二十點24到了1961年，歐洲的醫(yī)生們開始發(fā)現，本地區(qū)畸形嬰兒的出生率明顯上升。這些嬰兒有的是四肢畸形(主要是雙上肢的短肢畸形)，有的是腭裂，有的是盲兒或聾兒，還有的是內臟畸形令人恐怖的副作用目前二十四頁\總數一百四十五頁\編于二十點25目前二十五頁\總數一百四十五頁\編于二十點26調查顯示，孕婦懷孕時末次月經后第34～

50天是反應停作用的敏感期，口服200mg便可引起嚴重的短肢畸形；還可能引起流產、早產和死胎。在此時間段以外服用反應停，一般不會導致胎兒的出生缺陷動物模型復制成功目前二十六頁\總數一百四十五頁\編于二十點27支付巨額賠償金1970年4月10日，案件的控辯雙方于法庭外達成了和解，Chemie

Gruenenthal公司同意向控方支付總額1.1億德國馬克的賠償金反應停事件是人類歷史上的一個悲劇，也是一個轉折。它促進了化學致畸的研究以及管理法規(guī)的建立。目前二十七頁\總數一百四十五頁\編于二十點28人類不良生殖結局生殖發(fā)育是哺乳動物繁衍的生理過程，其中包括生殖細胞（配子，即精子和卵細胞）發(fā)生、卵細胞受精、著床、胚胎形成、胚胎發(fā)育、器官發(fā)生、胎仔發(fā)育、分娩和哺乳過程。正常生育率?<50％著床后的丟失（流產和死胎）31％嚴重畸形2-3％較小的出生缺陷14％神經功能異常16-17％低出生體重7％目前二十八頁\總數一百四十五頁\編于二十點29WhatareBirthDefects!BirthDefects(BD)arephysiologicalorstructuralabnormalitiesthatdevelopsatorbeforebirthandispresentatthetimeofbirth,especiallyasaresultoffaultydevelopment,infection,heredity,orinjury.Alsocalledcongenitalanomaly.目前二十九頁\總數一百四十五頁\編于二十點30目前三十頁\總數一百四十五頁\編于二十點31BDsinChinaInChina,therateforBDsisalso5%800,000-1,200,000peryear/1.9perminuteInsomeregion(Shanxi),thisratecanover10%Forcongenitalheartdisease,thecostoftreatment>12,000M/year目前三十一頁\總數一百四十五頁\編于二十點32國家“十一五”中長期發(fā)展綱要國務院重點領域及其優(yōu)先主題（人口與健康）第一條：

安全避孕節(jié)育與出生缺陷防治國務院重大科學研究計劃：

蛋白質/量子調控/納米/發(fā)育與生殖/干細胞

國家基礎研究重大項目等國家確定山西省平遙、和順、中陽、平定4縣為全國人口出生缺陷干預工程試點縣國家確定9月12日為“中國預防出生缺陷日”。Relatedtoourlives!Dangerous!目前三十二頁\總數一百四十五頁\編于二十點33畸形與發(fā)育毒性

外來化學物可干擾胚胎以及胎兒的發(fā)育過程，影響正常發(fā)育。具體表現可分為*：

1．生長遲緩(growthretardation)

。

2．致畸作用(teratogenicity)

。

3．功能不全或異常。

4．胚胎或胎仔致死作用(embryolethality)

。致畸作用是外來化學物發(fā)育毒性的一種具體表現，對存活后代機體影響較為嚴重，往往是一種不可逆過程。有些文獻中將致畸作用稱為發(fā)育毒性，可以理解為發(fā)育毒性的狹義概念。目前三十三頁\總數一百四十五頁\編于二十點34第二節(jié)發(fā)育毒性與致畸性目前三十四頁\總數一百四十五頁\編于二十點35一、基本概念畸形*(malformation)

：指出生前因素引起發(fā)育生物體的嚴重的解剖學上形態(tài)結構的缺陷(異常)對發(fā)育、生長、生理功能、生育力和（或）壽命可產生有害影響可以存活也可能不能存活目前三十五頁\總數一百四十五頁\編于二十點36致畸性（teratogenicity）和致畸作用(teratogeniceffect)：均指在妊娠期（出生前）接觸外源性理化因素引起后代結構畸形的特性或作用致畸作用所表現的形態(tài)結構異常，在出生后立即可被發(fā)現?目前三十六頁\總數一百四十五頁\編于二十點37致畸物*(teratogen)：凡在一定劑量下，能通過母體對胚胎或胎兒正常發(fā)育過程造成干擾，使子代出生后具有畸形的化學物稱為致畸物或致畸原畸胎：具有畸形的胚胎或胎仔目前三十七頁\總數一百四十五頁\編于二十點38受精卵中含有構建個體的全部信息，發(fā)育涉及儲存在DNA內遺傳信息的逐步表達，由此產生各種細胞、組織的分化，各具不同的代謝、形態(tài)結構和功能。這一過程由許多不同的調節(jié)機制控制，同時也受環(huán)境因素以及鄰近組織誘導作用的影響。這一過程都是很嚴格地進行的，若其中一個環(huán)節(jié)受到干擾，均可導致畸形?；伟l(fā)生的原因Epigenetics?目前三十八頁\總數一百四十五頁\編于二十點39不發(fā)育(agenesis)某個器官或軀體部分發(fā)生或完全缺如。發(fā)育不全(hypoplasia)這種畸形常在名詞前冠以“小”字，如小頭、小眼等。此外，亦有軟骨發(fā)育不全等。發(fā)育受阻某器官或結構發(fā)育至半途時受阻而停止，可分為四類：①不合并(non-fusion）；②不分裂(non-division），如動脈干永存；③抑制遷移(sup-pressedmigration）；④暫時性結構的保存(persistenceoftransitorystructure），如肛門閉鎖、憩室等。相鄰原基粘連如馬蹄腎，或原基分裂，如分裂輸尿管。生長過度（overgrowth）如多指、巨指或先天性角化過度等。錯位（misplacement）如內臟錯位等。錯誤遷移（incorrectmigration）如卵巢遷移到外生殖器，并耳等。不典型分化(atypicaldifferentiation）包括先天性腫瘤的形成、異位和分化。返祖（atavism）常見的有多毛、復乳等。目前三十九頁\總數一百四十五頁\編于二十點40一頭二身四腿連體嬰兒頭部連體雙頭畸形美人魚綜合癥三腿目前四十頁\總數一百四十五頁\編于二十點41目前四十一頁\總數一百四十五頁\編于二十點42目前四十二頁\總數一百四十五頁\編于二十點43致畸作用的影響因素孕婦對致畸因子的感受性，在個體之間存在著差異。胎兒發(fā)育的不同階段，對致畸因子的感受性不同，大多數致畸因子有其特定的作用階段。致畸因子的作用機制有所不同。許多藥物和病毒對某種組織、器官有特別親和性，故特別易侵及某種組織和器官影響其發(fā)育。致畸因子的損傷與劑量有關，通常劑量越大，毒性越大。致畸因子的作用后果，包括胎兒死亡、生長發(fā)育延遲、畸形或功能缺陷。究竟出現何種后果，則取決于致畸因子，母體及胎兒胎盤的相互作用如何。目前四十三頁\總數一百四十五頁\編于二十點44變異(variation)：指同一種屬的子代與親代之間或者子代的個體之間，有時出現不完全相同的現象，是小的或次要的結構改變變異是生命的一種特征，在生物學上具有適應與進化的意義，變異并非畸形，但有時與畸形難于嚴格區(qū)分。例如肋骨或椎骨數目多于或少于正常，甚至某些內臟易位也屬於變異目前四十四頁\總數一百四十五頁\編于二十點45一般認為變異不影響正常生理功能，更不危及生命但是在動物致畸試驗中，如果某種變異出現較多，并呈現一定劑量-效應關系，應該引起注意目前四十五頁\總數一百四十五頁\編于二十點46胚胎-胎兒毒性胚胎毒性*(embryotoxicity)：通常是指外源性理化因素造成的孕體著床前后直到器官形成期結束的所有的毒性。表現為：胚胎期染毒而出現畸胎、生長遲緩、著床數減少和吸收胎，也偶有晚死胎目前四十六頁\總數一百四十五頁\編于二十點47胎兒毒性(fetotoxicity)：指器官形成期結束后的因素引發(fā)的任何毒性表現。包括死亡、體重降低、骨化遲緩、功能缺陷以及結構異常，甚至腫瘤在實驗動物發(fā)育毒性試驗中，通常不去區(qū)分胎兒與胚胎，所以使用胚胎-胎兒毒性更恰當目前四十七頁\總數一百四十五頁\編于二十點48發(fā)育毒性(developmentaltoxicity)*：指出生前經父體和/或母體接觸外源性理化因素引起的在子代到達成體之前內出現的有害作用。包括①結構畸形②生長遲緩③功能障礙④死亡目前四十八頁\總數一百四十五頁\編于二十點49發(fā)育毒物（developmentaltoxicant）:能造成發(fā)育毒性的物質發(fā)育毒物應是在未誘發(fā)母體毒性的劑量下產生發(fā)育毒性的物質目前四十九頁\總數一百四十五頁\編于二十點50出生缺陷（birthdefect）：是指嬰兒出生前即已形成的發(fā)育障礙。包括：形態(tài)結構異常：畸形功能缺陷：如智力低下，代謝和行為的異常目前五十頁\總數一百四十五頁\編于二十點51受精卵器官形成出生成年胚胎毒性胎兒毒性畸形變異出生缺陷發(fā)育毒性發(fā)育毒性：結構畸形、生長遲緩、功能障礙及死亡出生缺陷：畸形和功能缺陷畸形：形態(tài)結構胚胎毒性：器官形成期胎兒毒性：器官形成后目前五十一頁\總數一百四十五頁\編于二十點52行為畸胎學（behavioralteratology）功能發(fā)育毒理學(functionaldevelopmentaltoxicity)精神畸胎學(psychoterotology)發(fā)育神經毒理學(developmentalneurotoxicology)功能畸胎學(functiontertology)其他與發(fā)育毒理學有關的術語目前五十二頁\總數一百四十五頁\編于二十點53二、發(fā)育各階段發(fā)育毒性作用的特點（一）著床前期（二）器官形成期（三）胎兒期（四）圍生期和出生后的發(fā)育期卵子受精后一直至出生為止，都稱為孕體(conceptus)目前五十三頁\總數一百四十五頁\編于二十點54（一）著床前期發(fā)育毒性從受精算起，到完成著床之前（人類為11-12天，嚙齒類動物為前6天）通常是未分化細胞受化學毒物損傷而致胚泡死亡，即著床前丟失也有著床前接觸毒物導致畸形的例子，如環(huán)氧己烷、甲基亞硝脲等目前五十四頁\總數一百四十五頁\編于二十點55（二）器官形成期（胚胎發(fā)育期）在致畸作用中，對致畸物最敏感的階段是器官形成期*，一般稱為危險期(criticalperiod)或關鍵期自受精日計算：人是3-8周；大鼠約為9～17天；小鼠約為7.5～16天；家兔為11～20天目前五十五頁\總數一百四十五頁\編于二十點56Inthe28dayssincethespermhasjoinedwiththeegg,incrediblechangeshavetakenplace.Thespineisgrowing,thebrainandotherorgansaredevelopingandtheheartisbeating.目前五十六頁\總數一百四十五頁\編于二十點57Thisfirstfewweeksofpregnancyareaperiodoftimewhenseveredamagecanbedoneifapregnantwomandrinksalcohol,smokes,takesdrugs,orlacksvitaminsfrompoornutrition.Thisistheperiodwhenmanyimportantorgansaredevelopingtheirinternalstructureanddamageduringtheperiodcanhavelonglastingeffects.目前五十七頁\總數一百四十五頁\編于二十點58在器官發(fā)生期中，致畸物與胚胎接觸可能造成形態(tài)結構異常；也有可能發(fā)生胚胎死亡、生長遲緩目前五十八頁\總數一百四十五頁\編于二十點59發(fā)育中的胚胎對致畸作用的敏感期雖然主要在器官發(fā)生期，但在此期間，各種不同器官還各有特別敏感的時間，即“靶窗”(targetwindow)大鼠器官發(fā)生期為受精后9～17天，但眼的最敏感期為受孕后9天，心臟和主動脈弓約為9～10天目前五十九頁\總數一百四十五頁\編于二十點60■

致畸敏感度高，■致畸敏感度低人胚胎主要器官的致畸敏感期外生殖器腭牙唇下肢耳眼心臟中樞神經系統(tǒng)胚胎發(fā)育時期（周，受精齡）87653820121094321上肢目前六十頁\總數一百四十五頁\編于二十點61同一劑量的一種致畸物在敏感期中與胚胎接觸，可因胚胎所處發(fā)育階段不同而出現不同的畸形如將大量維生素A在受精后第8天給予大鼠，主要出現骨骼畸形；如在第12天給予，則誘發(fā)腭裂

作用時間、劑量、方式！目前六十一頁\總數一百四十五頁\編于二十點62目前六十二頁\總數一百四十五頁\編于二十點63（三）胎兒期器官形成結束后（以硬顎閉合為標志）即進入胎兒期(人類從56-58天起)，直到分娩特點：以組織分化、生長和生理學的成熟為主目前六十三頁\總數一百四十五頁\編于二十點64最容易表現的發(fā)育毒性是生長遲緩、特異的功能障礙（如神經、內分泌以及免疫系統(tǒng)機能的改變）、經胎盤致癌和偶見死胎胎仔或胎兒對胚胎致死作用的易感性雖較胚胎為低，但仍有一定數目的死胎發(fā)生目前六十四頁\總數一百四十五頁\編于二十點65（四）圍生期和出生后的發(fā)育期發(fā)育免疫毒性妊娠期或圍生期接觸某些外源性化學物，會嚴重影響出生后T細胞、B細胞和吞噬細胞的發(fā)育、遷移、歸巢和功能

主要表現：發(fā)育免疫毒性、神經行為發(fā)育異常和兒童期腫瘤目前六十五頁\總數一百四十五頁\編于二十點66發(fā)育神經毒性表現為對感覺、運動、自主和認知的影響妊娠期飲酒造成乙醇綜合癥胎兒妊娠期安定暴露對F1代大鼠有一定的發(fā)育及神經行為毒性，表現為早期生理發(fā)育和神經行為發(fā)育滯后等表現目前六十六頁\總數一百四十五頁\編于二十點67兒童期腫瘤圍生期是一生中對致癌物最敏感的時期，許多兒童期高發(fā)腫瘤（急性淋巴細胞性白血病、神經母細胞瘤、骶骨前畸胎瘤、胚性腺瘤等）都可能與出生前因素有關這一時期細胞增殖快，藥物代謝酶的個體發(fā)生不全，免疫監(jiān)視功能低目前六十七頁\總數一百四十五頁\編于二十點68三、母體毒性與發(fā)育毒性目前六十八頁\總數一百四十五頁\編于二十點69（一）母體因素對發(fā)育毒性的影響母體毒性(maternaltoxicity)是指外源化學物在一定劑量下，對受孕母體產生的損害作用具體表現：體重減輕、出現某些臨床癥狀、死亡目前六十九頁\總數一百四十五頁\編于二十點70母體毒性作用可分為輕度母體中毒的表現應限于母體體重下降，正常增長受到抑制。抑制程度不超過不接觸受試物對照組動物的10%嚴重母體中毒可出現體重增長大幅度抑制、持久性嘔吐、過度安靜或活動過度、呼吸困難、生育機能明顯受損及其它中毒癥狀，甚至死亡目前七十頁\總數一百四十五頁\編于二十點71母體因素對發(fā)育毒性的影響1.遺傳學如唇腭裂的發(fā)病率依賴于母體的而非胚胎的基因型，白人中的發(fā)病率比黑人更高2.疾病母體未控制的糖尿病，某些感染，經過間接的疾病相關的母體變化或直接經胎盤的感染對孕體有不利影響目前七十一頁\總數一百四十五頁\編于二十點723.營養(yǎng)蛋白質、熱量、維生素、微量元素及輔酶因子的缺乏對妊娠產生不利的影響4.應激如大鼠、小鼠妊娠期噪聲暴露可產生發(fā)育毒性。5.對胎盤的毒性目前七十二頁\總數一百四十五頁\編于二十點73服用過量維生素引起的畸形維生素A每日服用5萬單位（相當于濃縮A丸劑2丸、或濃縮魚肝油滴劑30滴），連續(xù)3個月，會使胎兒骨骼畸形、并趾、腭裂、眼與腦畸形、腎及中樞神經損害目前七十三頁\總數一百四十五頁\編于二十點74

葉酸缺乏引起的神通管畸形（NeuralTubeDefects，NTDs）目前七十四頁\總數一百四十五頁\編于二十點75目前七十五頁\總數一百四十五頁\編于二十點76母體毒性與胚胎毒性的關系

1.具有致畸作用，但無母體毒性出現，稱為非共效應致畸物(non-coeffectiveteratogen)此種外源化學物的致畸作用具有特定的作用機理，與母體毒性無關，如反應停此種受試物致畸作用往往較強，應特別注意目前七十六頁\總數一百四十五頁\編于二十點772.出現致畸作用的同時也表現母體毒性，稱為共效應致畸物(coeffectiveteratogen)

此種受試物可能既對胚胎有特定的致畸機理，同時也對母體具有損害作用，但二者并無直接聯系3.僅具有母體毒性，但不具有致畸作用

目前七十七頁\總數一百四十五頁\編于二十點784.在一定劑量下，既無母體毒性，也不表現胚胎毒性應在動物可能耐受條件下，最大限度地增加劑量，使其遠遠高于人類實際可能接觸的水平，如仍未出現致畸作用，才可做出結論

母體毒性與致畸作用的劑量關系之間，并無固定比值；一般情況下，致畸作用劑量較母體毒性作用劑量低目前七十八頁\總數一百四十五頁\編于二十點79四、發(fā)育毒性的劑量-反應模式和

閾值的概念目前七十九頁\總數一百四十五頁\編于二十點80（一）發(fā)育毒性的劑量-反應模式A胚胎死亡生長遲緩結構畸形B結構畸形生長遲緩胚胎死亡C胚胎死亡生長遲緩同窩胎仔反應率%胚胎毒性劑量010001000100較常見高度致畸作用，較少見在開始生長遲緩到致死劑量之間，多設實驗組，以確證無致畸作用。目前八十頁\總數一百四十五頁\編于二十點81（二）發(fā)育毒性的閾值的概念發(fā)育毒性通常認為是一種閾值現象。假定的閾值低于它就不會發(fā)生有害效應的母體的劑量。發(fā)育毒性是否有閾值尚存在爭論(1)很難用實驗找出一個發(fā)生率很低的劑量-反應關系，因為那需要極大的樣本數量，每劑量組幾百到幾千窩的動物(2)多數發(fā)育毒性機制還不了解，有的已知機制支持閾值的存在，而有些機制則不支持相對閾值！目前八十一頁\總數一百四十五頁\編于二十點82第三節(jié)致畸（發(fā)育毒性）作用機制（MechanismsofTeratogenicAction）目前八十二頁\總數一百四十五頁\編于二十點831.干擾基因/蛋白表達2.基因突變與染色體畸變3.損傷細胞和分子水平的翻譯4.細胞凋亡致畸機制是多方面的*5.干擾細胞-細胞交互作用6.通過胎盤毒性引起發(fā)育毒性7.干擾母體穩(wěn)態(tài)8.內分泌干擾作用目前八十三頁\總數一百四十五頁\編于二十點84（一）干擾基因表達某些基因的表達受到抑制或異常表達可能引起畸形如在培養(yǎng)的小鼠胚胎中用反義寡核苷酸探針抑制或剔除原癌基因Wnt-1或Wnt-3a，都可產生中腦和后腦，或中腦、后腦和脊髓的畸形目前八十四頁\總數一百四十五頁\編于二十點85有些外來化學物作用于生殖細胞或體細胞，可誘發(fā)基因突變和染色體畸變，以致DNA的結構和功能受損，造成胚胎正常發(fā)育障礙，出現畸形,并具有遺傳性。特別是在常規(guī)的致畸試驗中，胚胎與受試物接觸，已進入器官發(fā)生期。僅只能作用于體細胞，與生殖細胞無關。（二）基因突變與染色體畸變目前八十五頁\總數一百四十五頁\編于二十點86CP（cyclophosphamide，環(huán)磷酰胺）PM（phosphoramidemustard）AC（Acrolein，丙烯醛）代謝＋DNA損傷，DNA-DNA,DNA-蛋白交聯與蛋白質結合腦積水、露眼、腭裂、小頜畸形、臍疝、尾部和肢部缺陷（3H標記CP試驗）目前八十六頁\總數一百四十五頁\編于二十點87（三）損傷細胞和分子水平的翻譯細胞增殖細胞周期目前八十七頁\總數一百四十五頁\編于二十點88（四）細胞凋亡目前八十八頁\總數一百四十五頁\編于二十點89（五）干擾細胞-細胞交互作用1.2.目前八十九頁\總數一百四十五頁\編于二十點90反應停的代謝活化產物引起胚胎細胞的粘聯受體下調，阻礙發(fā)育過程中細胞與細胞、細胞與基質之間的相互作用，干擾了細胞之間的通訊從而導致肢芽結構異常目前九十頁\總數一百四十五頁\編于二十點91（六）通過胎盤毒性引起發(fā)育毒性對卵黃囊或絨毛膜尿囊胎盤有毒性的毒物有46種，包括鎘、砷或汞、香煙、乙醇、可卡因、內毒素、水楊酸鈉等目前九十一頁\總數一百四十五頁\編于二十點92（七）干擾母體穩(wěn)態(tài)二氟苯水楊酸苯妥英羥基脲孕婦缺乏代謝前體或基質（如維生素、碘的缺乏）母體貧血、紅細胞ATP水平損耗兔的中軸骨骼缺陷母體葉酸代謝致畸子宮血流減少胚胎顱面和心包出血目前九十二頁\總數一百四十五頁\編于二十點93（八）內分泌干擾作用內分泌干擾化學物（EndocrineDisruptingChemicals，簡稱EDCs），又稱EnvironmentalEstrogens（環(huán)境雌激素）EndocrineModulators（內分泌調節(jié)劑）Xenoestrogens（外源性雌激素）EnvironmentalEndocrineDisruptingChemicals（簡稱EDCs，環(huán)境內分泌干擾化學物質或環(huán)境內分泌干擾化學劑）等干擾激素的制造、釋放、傳送、代謝、結合、作用或排除的外源性因子目前九十三頁\總數一百四十五頁\編于二十點94按照EDCs的干擾功能分類EDCs①雌激素干擾物③雄激素干擾物②甲狀腺干擾物⑤胰島素干擾物④糖皮質激素干擾物⑥腎上腺皮質激素干擾物

……目前九十四頁\總數一百四十五頁\編于二十點95天然激素化合物：如植物激素大豆異黃酮藥物如類固醇類、己烯雌酚、避孕藥等。工農業(yè)用原料、產品及排放的廢棄物工業(yè)原料：如某些溶劑（如壬基酚）、增塑劑農用物資：如某些殺蟲劑、除草劑、塑料薄膜生活用品：如塑料、油漆、室內殺蟲劑醫(yī)用塑料器具：如塑料輸液器汽車尾氣、垃圾焚燒環(huán)境中EDCs的來源目前九十五頁\總數一百四十五頁\編于二十點96已注冊化學物>5500萬種，每年新增化學物>400萬種已進入環(huán)境的常見化學物>10萬種目前九十六頁\總數一百四十五頁\編于二十點97環(huán)境內分泌干擾化學物（EDCs）危害嚴重！分布面廣量大難以降解和消除（如POPs）長期低劑量接觸累積效應目前九十七頁\總數一百四十五頁\編于二十點98環(huán)境雌激素對生殖系統(tǒng)的發(fā)育具有明顯的影響在發(fā)育的關鍵期，環(huán)境激素對雌激素和雄激素功能的破壞，可對發(fā)育中的生殖器官和其它具有這些激素受體的器官造成永久性的改變目前九十八頁\總數一百四十五頁\編于二十點99EDCs暴露結局黃體酮女嬰生殖器男性化畸形滴滴涕及其衍生物雄性美洲鱷雌性化魚群性反轉、雄性比例下降狄氏劑、多氯聯苯、毒殺芬雌激素作用，雄性動物雌性化1.EDCs與性分化異常BJUinternational,2010JBiochem,1998EHP,1997(DisordersofSexDifferentiation)目前九十九頁\總數一百四十五頁\編于二十點100EDCs暴露可導致性分化異常

作者收集了在1977到1996年期間潛在暴露于TCDD環(huán)境中的人群血清樣本，其中包括239名男性樣本。研究發(fā)現隨著男性血清樣本中TCDD濃度增高，其子代女性出生比例顯著增高(p=0.008)。(MocarelliP,Lancet，2000)

作者研究發(fā)現在1954-1959年日本水俁市二甲基汞嚴重污染期間，高暴露人群子代男嬰出生率降低，其中男嬰2238名，女嬰2312名(p=0.002)。(MineshiSakamoto,EnvironResSect，2001)

作者通過流行病學調查發(fā)現，安大略省近Sarnia的Aamjiwnaang第一國立社區(qū)近五年內男嬰出生比例嚴重降低，懷疑與長期暴露于周邊工廠排放的化學物質有關，其中包含了大量EDCs類化學物質(二噁英、農藥等)。(ConstanzeMackenzie,EnvironHealthPerspect，2005)目前一百頁\總數一百四十五頁\編于二十點1012.EDCs與生殖道畸形（ReproductiveTractAbnormality）EDCs暴露結局己烯雌酚、雙酚A女性生殖道畸形滴滴涕隱睪癥、男性泌尿生殖道畸形林丹、滅蟻靈尿道下裂BJUinternational,2010EnvironHealthPerspect,2007目前一百零一頁\總數一百四十五頁\編于二十點102EDCs暴露可誘發(fā)生殖道畸形

出生前暴露于己烯雌酚的雌性小鼠，出生后12-18周出現陰道過度角化、尿道下裂。(McLachlanJA,CancerRes,1980)

研究發(fā)現，患有隱睪癥或尿道下裂新生兒的母體胎盤中o,p’-DDT(OR=2.25)、p,p’-DDT(OR=2.63)、林丹(OR=3.38)、滅蟻靈(OR=2.85)的水平均顯著高于正常新生兒。(FernandezMF,EnvironHealthPerspect,2007)

通過人群研究發(fā)現，母親暴露于DDT，會增加子代患泌尿生殖道畸形的風險(OR=1.33)。(BornmanR,BJUInt,2010)目前一百零二頁\總數一百四十五頁\編于二十點103DBPTreatedControlTestisoffoetusrat(Proteinogram)Ahypospadiasratmodelhasbeenestablishedanditiseasilyreproducible目前一百零三頁\總數一百四十五頁\編于二十點104EDCs暴露結局阿特拉津精子生成減少,生育力下降多氯聯苯精子發(fā)生異常四氧二苯二氧雜環(huán)己二烯精子質量下降三氯殺螨醇精子運動能力下降氯氰菊酯精子數量下降，精子畸形3.EDCs與生精障礙(SpermatogenesisFailure)PNAS,2010

JToxicolEnvironHealthA,2010ReprodToxicol,2009Toxicology,2007目前一百零四頁\總數一百四十五頁\編于二十點105

在佛羅里達，雄性幼年短吻鱷暴露于三氯殺螨醇(dicofol)和DDT后可降低血清睪酮(T)水平，發(fā)生睪丸組織結構損害及小陰莖。(Guillette,EHP,

1994)

在加拿大，雄性白鯨暴露于河水中高濃度的植物類固醇后可導致成熟年齡延遲，性腺體積變小，缺乏第二性征和血清T水平下降。(Martineau,SciTotalEnviron,1994)

在英國，發(fā)現污水處理湖水中雌雄同體魚，暴露于含有壬基酚和辛基酚乙氧基化物降解產物的雄性虹鱒，其睪丸發(fā)育障礙，作為雌性激素暴露生物標志物的血清卵黃素（VTG)水平升高。(Schubert,AquatToxicol,2008)EDCs暴露可引起生精障礙目前一百零五頁\總數一百四十五頁\編于二十點106EDCs與性功能異常（SexualDysfunction）EDCs暴露結局滴滴涕（DDT）勃起功能障礙(ED)多氯聯苯（PCBs）勃起功能障礙(ED)雙酚A(BPA)性欲減退（hyposexuality）、勃起功能障礙(ED)、射精障礙（EjaculationDisorder）JournalofUrology,2000JournalofAndrology,2002HumanReproduction,2010目前一百零六頁\總數一百四十五頁\編于二十點107

利用大鼠作為動物模型研究發(fā)現，殺蟲劑DDT的代謝產物p,p-DDE可以顯著引起動物勃起功能障礙。(BrienSE,JUrol,2000)

在阿根廷進行的病例對照研究顯示，有殺蟲劑（DDT、多氯聯苯等）暴露史的人群發(fā)生勃起障礙的風險更高。(OR=7.1,95%CI,1.5-33.0）(Alejandrooliva,JAndrol,2002)

在中國進行的雙酚A職業(yè)暴露人群的隊列研究發(fā)現，雙酚A暴露人群與正常對照比較，發(fā)生性欲減退(OR=3.9,95%CI,1.8-8.6)、勃起障礙(OR=4.5,95%CI,2.1-9.8)、射精障礙(OR=7.1,95%CI,2.9-17.6)的風險明顯增高。(LiD,HumRopod,2010)EDCs暴露可造成性功能異常目前一百零七頁\總數一百四十五頁\編于二十點1085.EDCs與生育力下降（FertilityDecline/Infertility）

全世界約有8～15%的育齡夫婦具有不同程度的生育障礙，不孕不育呈增長趨勢。近50年來，健康成年男性的平均精子數大約減少了50%，射精精液體積減少。這種變化很可能與日益增多的環(huán)境內分泌干擾物（EDCs）有關。EDCs暴露結局鄰苯二甲酸酯

精子密度和活力下降多氯聯苯精子密度下降、精子畸形率增高雙酚A精子DNA損傷多環(huán)芳烴精子密度、一次射精總數下降滴滴涕胚胎發(fā)育障礙、精子染色質缺損、睪丸細胞凋亡增加ToxicolLett,2010HumReprod,2009EnvironSciTechnol,2009Epidemiology,2006FertilSteril,2010EHP,1996,2003,2006,2010目前一百零八頁\總數一百四十五頁\編于二十點109EDCs暴露可引起生育力下降

在青春期前的大鼠染毒實驗中，發(fā)現滴滴涕的代謝產物（p,p'-DDE）通過Fas/FasL通路增加了睪丸細胞的凋亡。(ShiYQ,ToxicolLett,2010)

通過人群橫斷面研究，發(fā)現暴露鄰苯二甲酸單丁酯（MBP）與精子活力下降(P=0.04)及精子密度下降(P=0.04)顯著相關。(HauserR,Epidemiology,2006)

在IVF中測定了卵泡液中多氯聯苯的含量研究中，發(fā)現高暴露組比低暴露組卵母細胞的受精率減少了15%，冰凍胚胎的數量減少了27%。(SimonaJirsová,FertilSteril,2010)目前一百零九頁\總數一百四十五頁\編于二十點1106.EDCs與自然流產(SpontaneousAbortion)/死胎(Stillbirth)EDCs結局滴滴涕自然流產聚氯聯二苯自然流產,死胎雙酚A自然流產γ-六氯環(huán)己烷自然流產多氯代二苯并呋喃自然流產，死胎ClinBiochem,2010EHP,2008JReprodDevelop,2007AmJEpidemiol,2005目前一百一十頁\總數一百四十五頁\編于二十點111EDCs暴露可增加發(fā)生自然流產/死胎的風險

通過病例對照研究，發(fā)現患者血清中的BPA水平(Mean±SD:2.59±5.23ng/ml)明顯高于正常妊娠者(0.77±0.38ng/ml,P=0.024),高水平BPA暴露會增加發(fā)生自然流產的風險。(MayumiSugiura-Ogasawara,HumReprod,2005)

通過病例對照研究發(fā)現，PCBs/PCDFs的人群高水平暴露,會增加發(fā)生自然流產的風險

(OR

=2.28;95%CI,1.09–4.75)/(OR

=1.60;95%CI,1.10–2.33)。(KiyomiTsukimori,EHP,2008)

通過隊列研究發(fā)現，暴露于DDT(36.6-113.3ng/g)

后發(fā)生自然流產的風險明顯升高(OR

=2.12;95%CI,1.26–3.57)。血清中DDT水平每增加10ng/g,發(fā)生自然流產的相對危險性增加1.17(95%CI,1.05–1.29)。(ScottA.Venners,AmJEpidemiol,2005)目前一百一十一頁\總數一百四十五頁\編于二十點112EDCs出生缺陷氨基甲酸甲酯神經管缺陷,無腦畸形,脊柱裂多氯聯苯先天性心臟病橙劑脊柱裂,尖顱畸形二惡英脊柱裂,唇裂,先天性心臟病7.EDCs與出生缺陷(BirthDefects)ToxicolSci.2008AmJEpidemiol.

2006EurJEpidemiol.2010CongenitAnom.2008目前一百一十二頁\總數一百四十五頁\編于二十點113EDCs暴露可增加胎兒出生缺陷的風險

通過分析研究發(fā)現，父親暴露于橙劑，發(fā)生胎兒脊柱裂的風險高于對照組(OR=2.02)。(NgoAD,EurJEpidemiol.2010)

通過病例對照研究發(fā)現，母親暴露酰胺(OR=3.3)，苯并咪唑(OR=2.7)，氨基甲酸甲酯(OR=1.7)，發(fā)生胎兒脊柱裂的風險高于對照組。(RullRP,AmJEpidemiol.2006)

通過斑馬魚染毒模型研究發(fā)現，暴露于PCB126會產生包括房室瓣形成異常和動脈球減少的心臟畸形。(GrimesAC,ToxicolSci.2008)

通過小鼠染毒模型研究發(fā)現，暴露于TCDD會導致內側緣上皮細胞形態(tài)學和分子機制的改變，從而產生唇腭裂畸形。(FujiwaraK,CongenitAnom.2008)目前一百一十三頁\總數一百四十五頁\編于二十點114第四節(jié)發(fā)育毒性和致畸作用

試驗與評價目前一百一十四頁\總數一百四十五頁\編于二十點115致畸的物種個體差異

任何環(huán)境有害因素的損害效應都存在物種及個體差異。但在致畸作用中較突出。同一物種動物的不同品系對一種致畸物敏感性的差別很大。物種及種間差異，可能是由于遺傳因素，即基因型差異。化學物的致畸作用以及發(fā)育毒性的評定，主要通過動物試驗得出評定結果后推論到人類。致畸作用物種品系差異，可能存在對動物不具致畸,但對人類有致畸作用，動物致畸試驗結果推論到人類造成某些困難。所以對致畸作用的全面評定，必須采用兩種動物進行試驗，還要進行人群調查。目前一百一十五頁\總數一百四十五頁\編于二十點116一、動物發(fā)育毒性試驗致畸是發(fā)育毒性中最重要的一種表現。所以發(fā)育毒性的評定，主要是通過致畸試驗。傳統(tǒng)常規(guī)致畸試驗是評定致畸作用的標準方法。1966年FDA提出人體使用藥物生殖毒性安全性評價的三段試驗1995年提出檢測人用醫(yī)藥產品生殖毒性的ICH三階段試驗1998年美環(huán)保署發(fā)布了改進的發(fā)育神經毒性的大鼠試驗程序目前一百一十六頁\總數一百四十五頁\編于二十點117明確受試物是否有生殖發(fā)育毒性，而且要在已知其具有發(fā)育毒性時，確定其對后代的NOAEL及劑量-反應關系。最佳聯合方案是對成年動物進行染毒并包括子代從受精卵到性成熟所有生長發(fā)育階段；觀察期應貫穿一個完整的生命周期，以檢測近、遠期效應。最常選用的方案為三階段一代繁殖試驗食品添加劑要求多代實驗目前一百一十七頁\總數一百四十五頁\編于二十點118

I階段（生育力與生殖功能試驗）：雌雄性交配前-受孕-雌性受精-雌性著床期間染毒，研究對成年雌雄性生殖功能、配子的發(fā)生及成熟、交配行為、受精、著床前的發(fā)育和著床的影響II階段（致畸作用和胚胎毒性的評定）：從著床到硬顎閉合期間染毒，研究對成年雌性生殖功能、胚胎發(fā)育、器官形成期的發(fā)育毒性。III階段（圍生期及出生后發(fā)育情況試驗）：從著床到幼仔斷乳期間對孕母(及乳母)染毒，研究包括從著床到子代性成熟的母體生殖毒性和子代的發(fā)育毒性目前一百一十八頁\總數一百四十五頁\編于二十點119二、流行病學研究和人類證據人類證據的獲得：病例報告、出生缺陷登記28個人類化學致畸物中有23個是病例報告提出了第一證據。11個人類化學致畸物，發(fā)育毒性的人類證據領先于發(fā)表的動物證據。對老污染物采用回顧性或橫斷面調查。發(fā)育毒性研究的2個方案！目前一百一十九頁\總數一百四十五頁\編于二十點120妊娠前出生后發(fā)育毒性相關隊列研究子代結局妊娠期暴露目前一百二十頁\總數一百四十五頁\編于二十點121美軍噴灑“落葉劑”

胡志明市的一位畸形兒越戰(zhàn)后出生的殘疾兒童越戰(zhàn)“橙劑”后遺癥

目前一百二十一頁\總數一百四十五頁\編于二十點122越戰(zhàn)初期，美軍屢遭藏匿在森林中的越南游擊隊突襲，傷亡慘重。于是，美軍開始使用“橙劑”，即“落葉劑”。1962年至1971年，美軍通過空中噴灑、水道灌輸等方式，共向越南投放了4000萬升“橙劑”。1969年動物試驗發(fā)現，“橙劑”會導致動物的后代出現生理缺陷，于是尼克松總統(tǒng)在1970年下令美軍停止噴灑這種落葉劑。目前一百二十二頁\總數一百四十五頁\編于二十點123越戰(zhàn)1973年結束后，越南境內身患怪病的人數劇增，至少100萬人身染怪疾，如精神錯亂、各種癌癥、生育能力降低或喪失等，此后誕生的畸形兒數量也達到十幾萬之巨。研究發(fā)現，二惡英污染是使大量越南和美國新生兒出現四肢畸形、發(fā)育遲緩、腦力遲鈍等缺陷的主要原因，而“橙劑”中就含有被認為是世界上毒性最大的物質之一的二惡英。目前一百二十三頁\總數一百四十五頁\編于二十點124橙劑具有致畸副作用被美國政府掩蓋起來。直到七八十年代，許多越戰(zhàn)老兵得了不知名的怪病，而他們的后代也出現了不同程度的生理缺陷后，一個代表兩萬名老兵的團體狀告生產落葉劑的DOW化學公司和MONSANDO公司，并最終獲得了1.8億美元的賠償。盡管越戰(zhàn)結束已30多年了，但越戰(zhàn)中的落葉劑不僅使大批美國和越南軍人深受其害，而且給許多越南平民的后代帶來遺傳病患。目前一百二十四頁\總數一百四十五頁\編于二十點125據越南調查結果顯示，越戰(zhàn)中因沾染化學毒劑而造成各種后遺癥的人至今仍有近4萬名，有1.4萬個家庭生下了2萬多名先天殘疾的后代，其中包括畸形、癱瘓和神經性疾病患者。研究表明，在噴灑過橙劑的地區(qū)，死胎和流產現象猛增３倍。美國政府一直拒絕承認“橙劑”是導致越南人所生孩子有缺陷的原因，也不承認“橙劑”造成越南人罹患的種種怪病。目前一百二十五頁\總數一百四十五頁\編于二十點126發(fā)育毒性資料的使用-常見有致畸作用的10類藥物抗驚厥和抗癲癇藥：苯妥英鈉可引起先天性畸形：短鼻，鼻梁寬而扁平、眼距過寬、眼瞼下垂、斜視、短頸、唇裂或腭裂、小頭畸形、智力低下等。苯巴比妥類與苯妥英鈉類合用可能加重致畸作用，碳酸鋰：治療躁狂癥的常用藥物。特別是心血管畸形的發(fā)生率明顯高于正常人群。目前一百二十六頁\總數一百四十五頁\編于二十點127己烯雌酚：治療更年期綜合征?？梢鹦律鷥荷称骰?。大部分畸形在青春期開始顯現，90%以上在15-28歲有明確診斷，平均年齡為19歲?？诜茉兴帲菏悄壳笆褂米顝V泛的女性避孕方法之一。但孕婦使用此類藥物可引起包括肢體、心血管和神經系統(tǒng)的多種畸形。

目前一百二十七頁\總數一百四十五頁\編于二十點128抗生素：鏈霉素可能導致新生兒第八對腦神經損害，其損害程度與使用時間有關。四環(huán)素可引起胎兒牙齒和骨骼發(fā)育不全。維生素A類：具有廣泛的生物活性和重要生理功能。過量的維生素A類可引起不同種屬實驗動物的先天性畸形，妊娠期每日5000國際單位維生素A的需求完全可在攝食中獲得，不必另外補充。一次大劑量或長時間大劑量服用均屬不當?？鼓帲壕S生素K、肝素和香豆素類等臨床常用的抗凝藥中香豆素已被肯定具有致畸作用。目前一百二十八頁\總數一百四十五頁\編于二十點129抗惡性腫瘤藥：甲氨蝶呤已肯定具有致畸作用，引起畸形的機制是干擾人體葉酸代謝，補充適量的葉酸可能有預防作用。糖皮質激素：妊娠早期使用糖皮質激素的孕婦，可引起新生兒腭裂。地塞米松、倍他米松和去炎松能使小鼠產生腭裂，而強的松龍和氫化可的松很少使小鼠產生腭裂。抗甲狀腺藥：硫氧嘧啶類抗甲狀腺藥可使先天性畸形增加，表現為頭皮和頭發(fā)缺損。目前一百二十九頁\總數一百四十五頁\編于二十點130前蘇聯切爾諾貝利核電站物理因素的發(fā)育毒性目前一百三十頁\總數一百四十五頁\編于二十點13110倍：綠色和平組織稱切爾諾貝利核泄漏危害被低估10倍；800年：專家稱消除切爾諾貝利核泄事故漏后遺癥需800年；9.3萬人：20年前的切爾諾貝利核電站事故造成致癌死亡人數約為9.3萬人左右；27萬人：27萬人因切爾諾貝利核泄漏事故患上癌癥，其中致死9.3萬人；34萬人：核泄漏事故發(fā)生后，前蘇聯立即疏散了11萬多人，隨后數年，又從污染嚴重地區(qū)搬遷了23萬人，前后共疏散34萬余人；20億人：建立在白俄羅斯國家科學院研究成果上的報告說，全球共有20億人口受切爾諾貝利事故影響。目前一百三十一頁\總數一百四十五頁\編于二十點13220年過去了，切爾諾貝利核事故造成的生態(tài)災難后果遠未消逝。烏克蘭全國4800萬人口中，目前共有包括47.34萬兒童在內的250萬核輻射受害者處于醫(yī)療監(jiān)督之下。導致甲狀腺癌的發(fā)病率增加了10倍多。更令人擔憂的是，核輻射受害者中殘疾病例上升：1991年至今，核事故導致殘疾的人數增加了1.6倍，達10萬人。而核事故發(fā)生時1歲至18歲的受害者健康問題最為突出，這一群體甲狀腺癌的發(fā)病率比核事故前高10至60倍。

目前一百三十二頁\總數一百四十五頁\編于二十點133三、發(fā)育毒性的替代試驗實驗方法的限制動物福利的需要實驗準確性的要求目前一百三十三頁\總數一百四十五頁\編于二十點134替代方法的概念與內涵在生物醫(yī)學研究、檢測或教育中凡是能替代實驗動物、減少所需動物數量或使動物實驗程序得以優(yōu)化而減少動物痛苦的任何一種方法或程序，都被認定為是替代方法（Alternativesmethods）代替替代（Replacementalternative）減少替代（Reductionalternative）優(yōu)化替代（Refinementalternative）包括用組織學、胚胎學、細胞學或計算機等方法取代整體動物實驗，以低等動物取代高等級動物目前