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微生物在環(huán)境監(jiān)測(cè)中的作用
生物長(zhǎng)期生活在自然界中,不僅可反映多種因子污染的綜合效應(yīng),而且還能反映環(huán)境污染的歷史狀況。環(huán)境監(jiān)測(cè)
是測(cè)定代表環(huán)境質(zhì)量的各種指標(biāo)數(shù)據(jù)的過(guò)程。它包括環(huán)境分析、物理測(cè)定和生物監(jiān)測(cè)。生物監(jiān)測(cè)就是利用生物對(duì)環(huán)境污染所發(fā)生的各種信息作為判斷環(huán)境污染狀況的一種手段。由于微生物細(xì)胞與環(huán)境的直接性以及微生物對(duì)其反應(yīng)的多樣性和敏感性使微生物成為環(huán)境污染監(jiān)測(cè)中重要的指示生物。一、大腸菌群與環(huán)境監(jiān)測(cè)
水體中的致病菌有可能引起各種傳染病。因此,水質(zhì)的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)對(duì)于保護(hù)人群健康具有重要意義。用大腸菌群作為水質(zhì)的指示菌的原因有:①在人糞中大量存在,因此在為人糞所污染的水體中容易測(cè)到;②檢驗(yàn)方法比較簡(jiǎn)便;③對(duì)氯的抵抗力相似于致病的腸道細(xì)菌??梢哉J(rèn)為:消滅了大腸菌群,致病腸道細(xì)菌也已消滅,水可供飲用。大腸菌群:需氧及兼性厭氧,在37℃能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌。檢測(cè)大腸菌群的方法
發(fā)酵法濾膜法大腸桿菌指標(biāo)
大腸菌群指數(shù):每100ml水中所含大腸菌群細(xì)菌的個(gè)數(shù)。
大腸菌群值:指水樣中可檢出一個(gè)大腸菌群細(xì)菌的最小水樣量,此值越大表示水中大腸菌群數(shù)越少,水質(zhì)越好。
大腸菌群值=1000/大腸菌群指數(shù)
我國(guó)生活飲用水中規(guī)定的水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)為每升水中總大腸菌群指數(shù)不得超過(guò)3個(gè),即大腸菌群值不得小于333。二、腐生細(xì)菌與環(huán)境監(jiān)測(cè)
自然水體中的腐生細(xì)菌數(shù)與有機(jī)物濃度成正比。因此,測(cè)得腐生細(xì)菌數(shù)或腐生細(xì)菌數(shù)與細(xì)菌總數(shù)的比值,即可推斷水體的有機(jī)污染狀況。研究證明,這種推斷與實(shí)測(cè)結(jié)果十分吻合。根據(jù)水體中腐生細(xì)菌的數(shù)量,可以將水體劃分為多污帶、中污帶和寡污帶(如下表)。污水帶的劃分及其特征三、發(fā)光細(xì)菌與環(huán)境監(jiān)測(cè)
發(fā)光菌是一類(lèi)能運(yùn)動(dòng)的革蘭氏陰性兼性厭氧桿菌,含有熒光素、熒光酶、ATP等發(fā)光要素,在有氧條件下通過(guò)細(xì)胞內(nèi)生化反應(yīng)而產(chǎn)生微弱熒光。反應(yīng)式:
FMNH2+02+RCHO→FMH+RCOOH+H2O+光常用菌種:明亮發(fā)光桿菌特點(diǎn):操作簡(jiǎn)單,靈敏度高,結(jié)果準(zhǔn)確。發(fā)光細(xì)菌檢測(cè)有毒物質(zhì)的原理
菌體是借助活體細(xì)胞內(nèi)具有ATP、螢光素(FMN)和螢光素酶發(fā)光的。該光波長(zhǎng)在490nm左右。這種發(fā)光過(guò)程極易受到外界條件的影響。凡是干擾或損害細(xì)菌呼吸或生理過(guò)程的任何因素都能使細(xì)菌發(fā)光強(qiáng)度發(fā)生變化。當(dāng)有毒有害物質(zhì)與發(fā)光菌接觸時(shí),發(fā)光強(qiáng)度立即改變,并隨著毒物濃度的增加而發(fā)光減弱。這種發(fā)光強(qiáng)度的變化,可用一種精密測(cè)光儀定量地測(cè)定。發(fā)光細(xì)菌在環(huán)境監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用
利用發(fā)光細(xì)菌法檢測(cè)工業(yè)廢水的綜合毒性1利用發(fā)光細(xì)菌快速檢測(cè)漁業(yè)水域污染物急性毒性2發(fā)光細(xì)菌檢測(cè)農(nóng)藥殘留3發(fā)光細(xì)菌檢測(cè)致癌物質(zhì)4四、污染物致突變的微生物監(jiān)測(cè)
隨著工業(yè)的發(fā)展,人工合成的化學(xué)物質(zhì)迅速增加,一些物質(zhì)能直接損傷生物體的而使基因和染色體發(fā)生改變,這類(lèi)物質(zhì)稱為遺傳毒物。為防止遺傳毒物誘發(fā)新的突變而增加新的遺傳病,人們采用了突變性監(jiān)測(cè)技術(shù),遺傳毒性監(jiān)測(cè)方法主要有Ames試驗(yàn)和彗星試驗(yàn)。艾姆氏實(shí)驗(yàn)法
原理:某營(yíng)養(yǎng)缺陷型細(xì)菌在基本培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng),如發(fā)生回復(fù)突變稱原養(yǎng)型后則能生長(zhǎng)。
如鼠傷寒沙門(mén)氏菌的組氨酸缺陷型菌株在基本培養(yǎng)基的平板上不能生長(zhǎng),但發(fā)生回復(fù)突變后(his+)則能生長(zhǎng)。原養(yǎng)型營(yíng)養(yǎng)缺陷型檢測(cè)方法在含待測(cè)可疑三致物的試樣中加入鼠肝勻漿液。一定時(shí)間后,吸入濾紙片中,將濾紙片置于培養(yǎng)基中A、平板上無(wú)大量菌落產(chǎn)生,說(shuō)明試樣不含誘變劑B、在紙片周?chē)L(zhǎng)有大量菌落,說(shuō)明試樣中有試樣有濃度適當(dāng)?shù)恼T變劑存在C、在紙片周?chē)幸灰种迫?,其周?chē)霈F(xiàn)出現(xiàn)大量菌落產(chǎn)生,說(shuō)明試樣大量誘變劑(要有所稀釋才能誘變)彗星試驗(yàn)
彗星試驗(yàn)又稱單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn),是在單細(xì)胞水平上監(jiān)測(cè)損傷和修復(fù)的方法。
當(dāng)真核細(xì)胞受損產(chǎn)生DNA鏈斷裂時(shí),超螺旋結(jié)構(gòu)受到破壞。在堿處理和堿性電泳液作用下DNA解螺旋,使斷鏈從超螺旋結(jié)構(gòu)中釋放出來(lái),電泳時(shí)帶負(fù)電荷的向正極遷移形成“彗星”現(xiàn)象(在熒光顯微鏡下觀察受損形成的影像形似夜空中的彗星,故叫彗星試驗(yàn))。通過(guò)測(cè)定遷移部分的光密度或遷移長(zhǎng)度可測(cè)定單個(gè)細(xì)胞DNA損傷程度,從而確立因素DNA的作用劑量與損傷效應(yīng)的關(guān)系。五、生物確傳感茫器技梯術(shù)與鞠環(huán)境拆監(jiān)測(cè)生物邀傳感算器是一透種將押生物錯(cuò)敏感孩元件螞與物陵理化剖學(xué)信荒號(hào)轉(zhuǎn)蜓換器塵及電怠子信曲號(hào)處紀(jì)理器嘆相結(jié)喇合的竹儀器澡。用于富制作堪生物訂傳感膏器的臨微生儲(chǔ)物有虧酵母見(jiàn)、假等單孢譯菌、柿芽孢貪菌、侍發(fā)光般菌、些嗜熱目菌等聞。生物涉敏感赴元件賣(mài)與待跨測(cè)物寫(xiě)質(zhì)之鳥(niǎo)間的欣相互門(mén)作用水,主詢要有猾將化緒學(xué)變慶化轉(zhuǎn)疫化為算電信繡號(hào)、界將熱距變化積轉(zhuǎn)化呆為電備信號(hào)爺、將熔光效款應(yīng)轉(zhuǎn)坦化為列電信顛號(hào)等捉方式懶。六、核酸澆探針與環(huán)殲境監(jiān)粒測(cè)核酸勻探針通過(guò)幕制備篩特定彈菌種旋D緣瑞NA證序離列的靜特定遷的核泉酸熒哄光探外針來(lái)幸檢測(cè)氏環(huán)境虎中的縣特異致性污蹤蝶染物競(jìng)質(zhì),宇以此糾分析涂和辨雹認(rèn)污編染源挖的構(gòu)鴨成和催污染挺物的圣來(lái)源己??蓪⑵藕怂崽锰结槹胤譃楦呕蛳冉MD燦NA痰探針膀、c擺DN典A探批針、釀RN坦A探秋針和宗人工蓄合成漆的寡斥核苷冒酸探書(shū)等幾暴類(lèi)。利用到核酸汁探針偉技術(shù)吐,快破速精傻確檢符測(cè)環(huán)榜境中以的致蓬病菌盜,如概大腸臺(tái)桿菌株、沙剩門(mén)氏柄菌等架腹瀉衰性菌將成為饒可能蔥。此尊外,雁核酸嚴(yán)探針協(xié)技術(shù)遮在食姿品行躁業(yè)、絕化妝間品行磨業(yè)等留也越得來(lái)越河受到咬重視趟
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