2023年生物技術(shù)期末復(fù)習(xí)-基因工程原理（生物技術(shù)）歷年考試真題試卷摘選答案

2023年生物技術(shù)期末復(fù)習(xí)-基因工程原理（生物技術(shù)）歷年考試真題試卷摘選答案（圖片大小可自由調(diào)整）卷I一.綜合考核題庫(共90題)1.大腸桿菌聚合酶I具有幾種酶活性A、1種B、2種C、3種D、4種2.X-gal顯色反應(yīng)的基本原理是使載體上與受體互補(bǔ)的α肽失活。3.利用DNA自動測序時通常進(jìn)行標(biāo)記的是()A、ddNTPB、引物C、dATPD、dNTP4.用人工合成的含有所需堿基變化的寡聚核苷酸，可以將特殊突變引入克隆的基因。5.所有限制性核酸內(nèi)切酶的最適反應(yīng)溫度為37℃。6.外源DNA離開染色體是不能復(fù)制的，將外源DNA與____________連接，構(gòu)建成重組DNA分子，外源DNA則可被復(fù)制。7.原核啟動子在轉(zhuǎn)錄起始點上游有一段富含A和T的區(qū)域稱為A、-15區(qū)B、-35區(qū)C、-45區(qū)D、-10區(qū)8.下列哪一種限制性核酸內(nèi)切酶的酶蛋白分子組成只有一單一亞基A、II型B、III型C、IV型D、I型9.將攜帶有外源基因并能持久傳遞給子代的動物稱為_________。10.限制酶主要是從_________中分離純化出來的。11.核酸分子雜交探針必須滿足的條件不包括A、單鏈結(jié)構(gòu)B、足夠長度C、不含互補(bǔ)區(qū)D、只能是DNA12.在序列5'-CGAACATATGGAGT-3'含有一個6bp的Ⅱ類限制性內(nèi)切核酸酶的識別序列，該位點的序列可能是什么？13.基因工程的三大基本元件是供體基因、受體細(xì)胞、_____________。14.人類基因組計劃___________年啟動的。15.下列哪一種疾病是獲得性免疫缺陷綜合癥A、血友病BB、心血管疾病C、艾滋病D、囊性纖維化16._________是指利用基因工程技術(shù)，將人們想要研究的基因在動物體實現(xiàn)表達(dá)。17.pUCl8質(zhì)粒是目前使用較為廣泛的載體,pUC系列的載體是通過________和M13兩種質(zhì)粒改造而來。18.下列關(guān)于限制酶命名的表示方法，正確的是A、B.amHIB、pstIC、HindIIID、Sau.3AI19.PCR循環(huán)時按什么方式擴(kuò)增A、n2B、2nC、2n-1D、2n+120.下列哪一種結(jié)構(gòu)形態(tài)的外源蛋白表達(dá)量高A、包涵體型蛋白B、分泌型蛋白C、融合蛋白D、復(fù)合蛋白21.原核表達(dá)系統(tǒng)中通常使用的可調(diào)控的啟動子Trp又稱為A、乳糖啟動子B、乳糖和色氨酸的雜合啟動子C、噬菌體的左向啟動子D、色氨酸啟動子22.外源基因經(jīng)pET載體的表達(dá)，其表達(dá)量往往超過總蛋白的A、40%B、20%C、30%D、50%23.個體之間DNA限制性片段長度的差異叫_________。24.Cre-loxP系統(tǒng)兩個loxP位點位于不同的DNA鏈或染色體上，Cre重組酶誘導(dǎo)loxP間的序列互換。25.基因工程的兩個基本特點是分子水平上的操作和_________。26._________是一種借助顯微鏡將外源DNA直接注入受體細(xì)胞的方法。27.下面幾種序列中你認(rèn)為哪一個(哪些)最有可能是Ⅱ類酶的識別序列：GAATCG，AAATTT，GATATC，ACGGCA？為什么？28.試述cos質(zhì)粒載體的特點？29.下列哪一項不具有吸附DNA的功能A、經(jīng)特殊處理的濾紙B、尼龍膜C、玻璃膜D、硝酸纖維素膜30.限制性核酸內(nèi)切酶在基因工程中有何作用？31.末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶起作用時需要A、二價陽離子B、一價陰離子C、二價陰離子D、一價陽離子32.請寫出天然DNA提取的三個主要步驟。33.Ptrp表示（）A、噬菌體啟動子B、色氨酸啟動子C、乳糖和色氨酸復(fù)合啟動子D、乳糖啟動子34.基因組文庫中包括有內(nèi)含子和外顯子，而cDNA文庫中則不含_________。35.pBR322是一種改造型的質(zhì)粒，它的復(fù)制子來源于_______。36.下列是構(gòu)建基因組文庫的常用載體，哪一種載體需要用的受體細(xì)胞和其余三種不一樣A、柯斯質(zhì)粒B、YACC、BACD、噬菌體37.關(guān)于II類限制酶說法正確的是A、具內(nèi)切核酸酶和甲基化酶活性B、僅有內(nèi)切核酸酶活性C、識別序列為回文對稱結(jié)構(gòu)D、II類限制酶反應(yīng)條件只需要Mg2+E、II類限制酶反應(yīng)需要Mg2+,ATP38.甲醇酵母表達(dá)系統(tǒng)有幾個乙醇氧化酶基因A、2個B、3個C、4個D、1個39.如果PCR的每一次循環(huán)都把上一次循環(huán)中合成的DNA增加了1倍，那么10個循環(huán)就擴(kuò)增了1000 倍，20個循環(huán)就擴(kuò)增了100萬倍，30個循環(huán)就擴(kuò)增了10億倍。40.下列哪一項不屬于cDNA的第二條鏈的合成的方法A、自身引導(dǎo)合成法B、置換合成法C、引導(dǎo)合成法D、隨機(jī)引物合成法41.通常可在三種溫度下保存DNA：4～5℃、-20℃、-70℃，其中以_________最好。42.用Sanger雙脫氧鏈終止法進(jìn)行DNA測序時，必須具有幾個反應(yīng)系統(tǒng)A、5個B、2個C、3個D、4個43.II型限制性核酸內(nèi)切酶的切割位點是A、識別序列1000bp以外B、識別位點下游24－26bp處C、DNA分子任一位點D、識別序列內(nèi)44.RNA分子經(jīng)凝膠電泳后按大小不同分開，然后被轉(zhuǎn)移到一張硝酸纖維素膜(尼龍膜)上，同一放射DNA探針雜交的技術(shù)稱________。45.何謂基因組文庫？46.核酸雜交探針可分為兩大類：DNA探針和_______。47.目前應(yīng)用最廣泛的原核表達(dá)系統(tǒng)是A、酵母菌表達(dá)系統(tǒng)B、枯草桿菌表達(dá)系統(tǒng)C、大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)D、葡萄球菌表達(dá)系統(tǒng)48.Kan表示A、氨芐青霉素B、卡那霉素C、潮霉素D、四環(huán)素49.表達(dá)載體的結(jié)構(gòu)元件包括哪些A、具備與克隆載體相同的復(fù)制原點、多克隆位點、篩選標(biāo)記B、啟動子C、轉(zhuǎn)錄終止子D、核糖體識別位點E、翻譯起始密碼子和終止密碼子50.原核表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)效率最高的是A、色氨酸啟動子B、乳糖啟動子C、乳糖和色氨酸的雜合啟動子D、T7噬菌體啟動子51.基因治療一般都是通過體內(nèi)法這一途徑進(jìn)行的。52.試述免疫共沉淀技術(shù)的原理？53.最早被研制成功的兩個基因工程激素藥物是______________和生長激素。54.要對一雙鏈的DNA分子進(jìn)行3’端標(biāo)記，可用A、DNA聚合酶IB、T4DNA聚合酶C、T7DNA聚合酶D、Klenow酶55.在_________的作用下，含目的基因的DNA片斷與克隆載體連接成為重組DNA分子。56.控制細(xì)菌合成抗生素的基因、控制放線菌主要性狀的基因、控制病毒抗原特異性的基因依次在①核區(qū)大型環(huán)狀DNA②質(zhì)粒上③細(xì)胞染色體上④衣殼內(nèi)核酸上A、①③④B、①②④C、②①④D、②①③57.何謂cDNA文庫？58.AIDS是由哪種病毒引起的全身性傳染疾病A、AVB、AAVC、HIVD、HSV59.藍(lán)白斑篩選重組子時，白色菌落不一定就是陽性克隆。60.YAC的最大容載能力是_______。61.質(zhì)粒是基因工程最常用的運載體，它的主要特點是：①能自主復(fù)制②不能自主復(fù)制③結(jié)構(gòu)很小④蛋白質(zhì)⑤環(huán)狀RNA⑥環(huán)狀DNA⑦能“友好”地“借居”A、①③⑤⑦B、②④⑥C、①③⑥⑦D、②③⑥⑦62.同位素標(biāo)記探針是指在探針上連接下列哪一種物質(zhì)A、32PB、生物素C、熒光素D、酶63.關(guān)于多克隆位點，下列敘述正確的是A、是外源基因的插入部位B、由許多酶切位點組成C、是宿主細(xì)胞上的一段特殊序列D、是人工合成的一段DNA序列E、含有藥物抗性基因64.構(gòu)建重組子時中不需要A、基因載體B、DNA連接酶C、核酶D、限制酶65.pGEM質(zhì)粒與pUC質(zhì)粒的區(qū)別主要在于A、抗藥性基因的不同B、復(fù)制起點不同C、MCS不同D、前者有啟動子66.構(gòu)建cDNA文庫的首要步驟是A、分離既定組織或者細(xì)胞的DNAB、分離既定組織或者細(xì)胞的mRNAC、逆轉(zhuǎn)錄合成cDNAD、cDNA的克隆67.基因工程的設(shè)計施工是在什么水平上進(jìn)行的A、細(xì)胞B、組織C、分子D、原子68.westernblot是屬于下列哪一種檢測方法A、表型檢測法B、蛋白質(zhì)雜交檢測法C、序列鑒定法D、物理特性檢測法69.能夠產(chǎn)生防御病毒侵染的限制性內(nèi)切核酸酶的細(xì)菌，其本身的基因組中沒有被該核酸酶識別的序列。70.cDNA文庫的特點是什么？71.PCR特異性與引物濃度成反比。72.大腸桿菌是研究真核生物DNA復(fù)制、重組、基因表達(dá)及調(diào)控等過程的理想材料。73.試述分子雜交技術(shù)的原理？74.YAC載體基本組成元件有_________，著絲粒，端粒，MCS，篩選標(biāo)記。75.PCR技術(shù)的應(yīng)用在哪些方面？76.基因工程中所用的大腸桿菌菌株是__________的菌株，這樣可以避免從中分離出來的DNA，不被限制性核酸內(nèi)切酶完全消化或完全不被消化。77.Northern雜交時，探針與膜上的（）雜交A、DNAB、RNAC、蛋白質(zhì)D、染色體78.連接反應(yīng)中，那種組分是為連接體系提供合適的pHA、DTTB、Tris-HCLC、MgCl2D、ATP79.在非最適反應(yīng)條件下，有些限制性核酸內(nèi)切酶能切割和識別與特定識別序列相似的序列，這種改變的特殊活性叫做______。80.EcoRI切割載體DNA和供體DNA所產(chǎn)生的片段在用于重組連接前要A、用CIP處理載體DNA防止自身環(huán)化B、進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測C、上述說法都正確D、用65℃處理5～10min使限制性內(nèi)切核酸酶失活81.把那些沒有可檢測表型的質(zhì)粒稱為_________。82.Klenow大片段酶具有幾種酶活性A、1種B、2種C、3種D、4種83.Amp是（）的表示A、氨芐青霉素B、卡那霉素C、氯霉素D、四環(huán)素84.目前已知持續(xù)合成能力最強(qiáng)的酶是A、大腸桿菌聚合酶IB、Klenow片段C、T4DNA聚合酶D、T7DNA聚合酶85.首例細(xì)胞基因治療方案是對哪一種病的基因治療A、血友病BB、艾滋病C、囊性纖維化D、重癥聯(lián)合免疫缺陷86.試述理想質(zhì)粒載體的構(gòu)建原理？87.ES細(xì)胞是_________。88.采用原核細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)點之一是可以與下面什么過程直接相連A、發(fā)酵工程B、轉(zhuǎn)基因動物C、轉(zhuǎn)基因植物D、基因治療89.人類基因組是指人體DNA分子所攜帶的全部遺傳信息。人類基因組計劃就是分析測定人類基因組的核苷酸序列。其主要內(nèi)容包括繪制人類基因的遺傳圖、物理圖、序列圖和轉(zhuǎn)錄圖?？茖W(xué)家應(yīng)對多少染色體進(jìn)行分析A、46條B、24條C、23條D、22條90.在基因工程中，為了在細(xì)菌細(xì)胞中表達(dá)真核生物的基因產(chǎn)物，為什么通常要用cDNA而不用基因組DNA？為什么要在cDNA前加上細(xì)菌的啟動子？卷I參考答案一.綜合考核題庫1.正確答案:C2.正確答案:正確3.正確答案:A4.正確答案:正確5.正確答案:錯誤6.正確答案:克隆載體7.正確答案:D8.正確答案:B9.正確答案:轉(zhuǎn)基因動物10.正確答案:原核生物11.正確答案:D12.正確答案:回文序列是：5'-CATATG-3'。13.正確答案:載體14.正確答案:199015.正確答案:C16.正確答案:轉(zhuǎn)基因動物17.正確答案:pBR32218.正確答案:C19.正確答案:B20.正確答案:C21.正確答案:D22.正確答案:D23.正確答案:限制性片段長度多態(tài)性24.正確答案:錯誤25.正確答案:細(xì)胞水平上的表達(dá)26.正確答案:顯微注射法27.正確答案:GATATC；AAATTT；因為它們是回文序列。28.正確答案:具有質(zhì)粒的性質(zhì)；含有cos位點；能承載較大的外源DNA片段。29.正確答案:C30.正確答案:扮演了如裁縫的“剪刀”的角色，它使研究人員可以按照預(yù)期目標(biāo)將核酸分子切割開來，獲取所需要的核酸序列片段。31.正確答案:A32.正確答案:（1）準(zhǔn)備生物材料；（2）裂解細(xì)胞；（3）分離和抽提DNA。33.正確答案:B34.正確答案:內(nèi)含子35.正確答案:pMBl36.正確答案:B37.正確答案:B,C,D38.正確答案:A39.正確答案:正確40.正確答案:D41.正確答案:-70℃42.正確答案:D43.正確答案:D44.正確答案:Northern雜交45.正確答案:指將某生物的全部基因阻DNA切割成一定長度的DNA片段克隆到某種載體上而形成的集合。46.正確答案:RNA探針47.正確答案:C48.正確答案:B49.正確答案:A,B,C,D,E50.正確答案:D51.正確答案:錯誤52.正確答案:以抗體和抗原之間的相互作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。53.正確答案:胰島素54.正確答案:B55.正確答案:DNA連接酶56.正確答案:C57.正確答案:指某生物某一發(fā)育時期所轉(zhuǎn)錄的mRNA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄形成的cDNA片段與某種載體連接而形成的克隆的集合。58.正確答案:C59.正確答案:正確60.正確答案:1000kb61.正確答案:C62.正確答案:A63.正確答案:A,B,D64.正確答案:A65.正確答案:D66.正確答案:B67.正確答案:C68.正確答案:B69.正確答案:正確70.正確答案:基因特異性、器官特異性、代謝或發(fā)育特異性、不均勻性、各cDNA均可獲得表達(dá)。71.正確答案:正確72.正確答案:錯誤73.正確答案:將標(biāo)記的核酸探針以堿基互補(bǔ)配對原則與組織細(xì)胞中的待測核酸進(jìn)行特異性的雜交組合，形成探針標(biāo)記與待測核酸的雜交體，然后利用各種標(biāo)記物的顯色技術(shù)，在光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下探察待測目標(biāo)核酸的存在及位置。74.正確答案:復(fù)制起點75.正確答案:遺傳疾病的診斷、傳染病的診斷、基因的快速克隆、基因突變、序列分析、檢測基因表達(dá)、進(jìn)化分析。76.正確答案:甲基化酶失活突變77.正確答案:B78.正確答案:B79.正確答案:星活性80.正確答案:A81.正確答案:隱性質(zhì)粒82.正確答案:B83.正確答案:A84.正確答案:D85.正確答案:D86.正確答案:選擇合適的原始質(zhì)粒；減少限制性內(nèi)切酶切點；適當(dāng)增加篩選標(biāo)記；選擇或用強(qiáng)復(fù)制起始子代替，提高拷貝數(shù)；滅活或去除nic/born基因及毒性蛋白編碼區(qū)域，提高質(zhì)粒的安全；進(jìn)行性狀表達(dá)的改造。87.正確答案:胚胎干細(xì)胞88.正確答案:A89.正確答案:B90.正確答案:這是因為細(xì)菌沒有內(nèi)含子剪接系統(tǒng)，并且不能識別真核生物的啟動子之故。卷II一.綜合考核題庫(共90題)1.__________通常是指通過基因工程、抗體工程、細(xì)胞工程技術(shù)等制備生物藥品用于疾病診斷、預(yù)防和治療的行業(yè)。2.基因組文庫和cDNA文庫的區(qū)別？3.原核啟動子是由兩端緊密連接且又高度保守的核苷酸序列組成。4.Nick和Gap的含義是不同的，前者指DNA的單鏈中有較小的缺失，后者僅是斷開了一個磷酸二酯鍵。5.轉(zhuǎn)基因技術(shù)導(dǎo)致的生物安全威脅屬于生態(tài)環(huán)境破壞。6.pUC質(zhì)粒包括哪些組成部分A、復(fù)制起點B、氨芐青霉素抗性基因C、lacZ的啟動子D、多克隆位點E、潮霉素抗性基因7.基因工程是_________年代發(fā)展起來的遺傳學(xué)的一個分支學(xué)科。8.分離既定組織或者細(xì)胞的_____________是構(gòu)建cDNA文庫的首要步驟。9.甲醇酵母表達(dá)系統(tǒng)具有的抗藥性基因是A、氨芐青霉素和卡那霉素B、四環(huán)素和氨芐青霉素C、氨芐青霉素和慶大霉素D、四環(huán)素和慶大霉素10.cDNA合成中所涉及的三種工具酶：IT4-DNA連接酶IIKlenow聚合酶IIIS1核酸酶IVBal31核酸酶V逆轉(zhuǎn)錄酶A、I+II+IIIB、II+III+IVC、II+III+VD、III+IV+V11.從EscherichiacoliK中分離的限制性內(nèi)切核酸酶命名為E.coK。12.試述基因敲除技術(shù)的原理？13.切口平移法標(biāo)記DNA探針時，需用的酶是：A、DNaseIB、RnaseC、DNA連接酶D、限制酶14.受體細(xì)胞的感受態(tài)是___________。15.基因敲除的應(yīng)用有哪些前景和展望A、基因功能研究B、建立人類疾病模型C、疾病的基因治療培育新的生物品種16.λ噬菌體載體根據(jù)外源基因整合的方式不同，分為____________和置換型載體兩大類。17.__________________是指那些既能在真核細(xì)胞中繁殖又能在原核細(xì)胞中繁殖的載體。18.DNA經(jīng)限制性內(nèi)切酶切割后可產(chǎn)生兩種末端：___________和平頭末端。19.融合蛋白實際上就是雜合蛋白，含有兩個或多個蛋白質(zhì)的氨基酸序列。20.高血壓屬于（）類型的疾病A、心血管疾病B、艾滋病C、惡性腫瘤D、血友病21.一個帶有反向重復(fù)序列的雙鏈DNA經(jīng)變性后，復(fù)性時其單鏈可形成發(fā)夾環(huán)。22.基因工程又叫遺傳工程、____________、分子克隆。23.現(xiàn)在科研人員又開發(fā)了紅色熒光蛋白、黃色熒光蛋白、_________等新型的熒光蛋白。24.Southern印跡是用DNA探針檢測DNA片段，而Northern印跡則是A、用RNA探針檢測RNA片段B、用DNA探針檢測RNA片段C、用DNA探針檢測蛋白質(zhì)片段D、用RNA探針檢測DNA片段25.向有功能缺陷的細(xì)胞補(bǔ)充相應(yīng)功能基因，以糾正或補(bǔ)償其基因缺陷，達(dá)到治療的目的。這個過程叫做A、基因治療B、基因置換C、基因修正D、基因激活26.含有多種限制性內(nèi)切核酸酶識別序列的DNA片段稱為_________。27.在DNA分離過程中，通常要進(jìn)行透析，其目的是_________。28.對外源基因進(jìn)行百萬倍的擴(kuò)增可采用________技術(shù)29.融合表達(dá)載體中擔(dān)體蛋白比較常用的有（）A、GSTB、六聚組氨酸肽C、綠色熒光蛋白D、LacZE、親水性多肽30.基因工程的核心是______________。31.在cDNA技術(shù)中，所形成的DNA發(fā)夾環(huán)可用A、限制性內(nèi)切核酸酶切除B、3’切核酸酶切除C、S1核酸酶切除D、5’切核酸酶切除32._________是指以精子為載體，通過動物受精過程將外源基因?qū)肱咛?，產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因動物。33.啟動子從轉(zhuǎn)錄模式上可分為哪兩種？表達(dá)系統(tǒng)常選用哪一種？其機(jī)理是什么？34.黏粒(cosmid)質(zhì)粒中，COS位點的功能是A、限制酶切位點B、參與包裝進(jìn)入病毒外殼C、選擇標(biāo)記D、復(fù)制起點35.帶有多個不同類型的復(fù)制起始區(qū)的質(zhì)粒是A、表達(dá)質(zhì)粒B、整合質(zhì)粒C、多拷貝質(zhì)粒D、穿梭質(zhì)粒36.真核生物基因組上有些DNA序列能將基因及基因簇隔開，阻止鄰近基因之間的相互作用，這些功能序列被稱為_________。37.YAC是至今最大容量的克隆載體。38.同尾酶即識別位點不同但切出的DNA片段具有相同的末端序列。39.反向PCR是以mRNA為模板進(jìn)行的一類特殊PCR。40.原核啟動子在轉(zhuǎn)錄起始點上游35bp處，有一段長10bp的區(qū)域稱為A、-10區(qū)B、-15區(qū)C、-35區(qū)D、-45區(qū)41.T4DNA連接酶是從T4噬菌體感染的E．coli中分離的，這種連接酶A、催化連接反應(yīng)時既能以ATP又能以NAD作為能量來源B、既能催化平末端連接又能催化黏性末端連接C、是一種單肽酶，分子質(zhì)量為74kDaD、既能催化單鏈DNA

連接又能催化雙鏈DNA

連接

42.具平末端的DNA片段的連接方法主要有？43.下列哪一種酶不能標(biāo)記DNA分子探針A、Klenow片段B、T4DNA聚合酶C、DNA連接酶D、大腸桿菌聚合酶I44.第一個用于構(gòu)建重組體的限制性內(nèi)切核酸酶是____。45.在微生物遺傳學(xué)和分子遺傳學(xué)研究領(lǐng)域中的技術(shù)上的三大發(fā)明對基因工程的誕生起到了決定性的作用，這三大發(fā)明是下列哪些A、利用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶體外切割和連接DNA片段B、遺傳密碼子的破譯C、質(zhì)粒改造成載體以攜帶DNA片段克隆D、逆轉(zhuǎn)錄酶的使用E、明確了DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)和半保留復(fù)制機(jī)制46.westernblot雜交時，探針與膜上的（）雜交A、DNAB、RNAC、蛋白質(zhì)D、染色體47.________________包括基因組文庫和cDNA文庫。48.1986年第一例植物基因工程產(chǎn)品----_________問世。49.“基因表達(dá)”是指該基因在大腸桿菌內(nèi)A、能進(jìn)行自我復(fù)制B、能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄C、能控制合成生長抑制素釋放因子D、能合成人的生長激素50.用不同的產(chǎn)生黏性末端的限制性內(nèi)切核酸酶分別切割載體和外源DNA，得到的黏性末端是不親和的黏性末端。51.評估基因文庫完備性的數(shù)學(xué)公式是A、N=lg（P+1）/lg（f+1）B、N=ln（1-P）/ln（1-f）C、N=lg（1-P）/ln（1-f）D、N=lg（1-f）/ln（1-P）52.DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_________切割DNA聚合酶I得到的分子量為76kDa的大片段。53.不是基因工程載體中的報告基因的是A、lacZB、GFPC、AmpD、ori54.______________是遺傳物質(zhì)的基本單位,也是作為遺傳物質(zhì)的核酸分子上的一段片段。55.利用限制性核酸內(nèi)切酶降解基因組DNA，通常選擇幾個堿基識別序列的限制性核酸內(nèi)切酶A、4B、5C、6D、756.限制性內(nèi)切酶可特異性識別A、雙鏈DNA的特定堿基對B、雙鏈DNA的特定堿基序列C、單鏈RNA的特定堿基序列D、單鏈DNA的特定堿基序列57.下面關(guān)于多克隆位點MultipleCloneSite（MCS)的描述錯誤的一項是A、僅位于質(zhì)粒載體中B、具有多種酶的識別序列C、不同酶的識別序列可以有重疊D、一般是人工合成后添加到載體中58.欲將某一具有突出單鏈末端的雙鏈DNA分子轉(zhuǎn)變成平末端的雙鏈形式，通常可采用S1核酸酶切割或_________。59.如果知道某一基因的功能及其相應(yīng)的蛋白質(zhì)的氨基酸序列組成，可以通過何種方法克隆該基因？60.一個完整的基因克隆過程應(yīng)包括：目的基因的獲取，克隆載體的選擇與改造，____________的連接，重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞，篩選出轉(zhuǎn)化子。61.用于基因治療的基因不需要滿足A、外源基因能在靶細(xì)胞中長期穩(wěn)定存留B、導(dǎo)入基因的方法及載體對宿主細(xì)胞安全無害C、基因需要大量表達(dá)才能改善癥狀D、外源基因可有效導(dǎo)入靶細(xì)胞62.Klenow酶在有_________情況下，呈現(xiàn)DNA聚合酶活性，63.不同的表達(dá)載體需要不同的受體系統(tǒng)進(jìn)行基因表達(dá)，受體系統(tǒng)根據(jù)宿主細(xì)胞的性質(zhì)可以分為兩大類：________________和真核表達(dá)系統(tǒng)。64.關(guān)于cDNA的最正確的說法是A、同mRNA互補(bǔ)的單鏈DNAB、同mRNA互補(bǔ)的雙鏈DNAC、以mRNA為模板合成的雙鏈DNAD、以上都正確

65.影響限制性核酸內(nèi)切酶酶切的反應(yīng)條件有哪些A、溫度B、鹽離子濃度C、緩沖體系D、反應(yīng)體積和甘油濃度E、限制性核酸內(nèi)切酶反應(yīng)的時間66.連接酶通常使用的連接反應(yīng)溫度是A、37℃B、20℃C、16℃D、50℃67.轉(zhuǎn)基因植物技術(shù)在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域主要有哪些應(yīng)用？就其中一方面應(yīng)用進(jìn)行舉例說明。68.大腸桿菌DNA聚合酶I是一種多功能酶，具有哪些酶活性A、3’-5’聚合酶活性B、5’-3’聚合酶活性C、5’-3’DNA外切酶活性D、3’-5’外切酶活性E、末端轉(zhuǎn)移酶活性69.基因重組的載體必須具備下列哪些特點：A、本身是一個復(fù)制單位，能在受體細(xì)胞中復(fù)制B、插入外源DNA后也不影響自身的復(fù)制C、易于進(jìn)入受體細(xì)胞D、通過自身的酶系在受體細(xì)胞中復(fù)制E、通常帶有抗性基因，易于篩選和鑒定70.I型和III型限制性核酸內(nèi)切酶在同意蛋白酶分子中兼有甲基化酶及依賴ATP的限制性核酸內(nèi)切酶活性。71.T4DNA連接酶和E．coli連接酶作用時都需要ATP和NAD+作為輔助因子。72.什么是生物制藥？73.Southern印跡的DNA探針()雜交。A、可與任何含有相同序列的DNA片段B、可與任何含有互補(bǔ)序列的DNA片段C、可與用某些限制性內(nèi)切核酸酶切成的DNA片段D、只與完全相同的片段74.迄今發(fā)現(xiàn)的質(zhì)粒DNA都是環(huán)狀的。75.在基因工程的DNA分子連接，最合適連接的末段是A、相同黏性末端B、不同黏性末端C、平末端D、不同限制性核酸內(nèi)切酶形成的DNA分子末端76.外源基因(或DNA片段)插入到某一基因內(nèi)的位點后，這個基因不再有任何功能。77.常規(guī)PCR反應(yīng)程序中，子鏈延伸的溫度一般設(shè)置為A、94℃B、65℃C、55℃D、72℃78._________是指轉(zhuǎn)錄因子用于識別靶DNA的蛋白結(jié)構(gòu)域。79.克隆羊多莉是通過哪一個技術(shù)制備的A、顯微注射法B、逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法C、胚胎干細(xì)胞法D、體細(xì)胞核移植法80.基因治療通常采用哪種載體比較合適A、逆轉(zhuǎn)錄病毒B、Ti質(zhì)粒C、噬菌體D、質(zhì)粒pBR32281.PCR反應(yīng)中的復(fù)性溫度要求高于A、37℃B、55℃C、72℃D、96℃82.何謂YAC？主要特性是什么？83.請寫出基因工程的基本操作順序？84.通過比較用不同組合的限制性內(nèi)切核酸酶處理某一特定基因區(qū)域所得到的不同大小的片段，可以構(gòu)建顯示該區(qū)域各限制性內(nèi)切核酸酶切點相互位置的_________。85.基因克隆中低拷貝數(shù)的質(zhì)粒載體是不起作用的。86.當(dāng)載有文庫的菌落被轉(zhuǎn)移到雜交膜上用于篩選時，需要堿性溶液處理的步驟，這一步驟的意義何在?A、啟動雜交探針與互補(bǔ)序列間的反應(yīng)B、標(biāo)記DNA，便于檢測C、裂解菌體細(xì)胞，并使DNA變性D、促使文庫DNA結(jié)合到雜交膜上87.對pBR322描述正確的是()A、經(jīng)人工改造的酵母質(zhì)粒B、天然的大腸桿菌質(zhì)粒C、經(jīng)人工改造的大腸桿菌質(zhì)粒D、天然的酵母質(zhì)粒88.下列哪種克隆載體對外源DNA的容載量最大A、黏粒B、酵母人工染色體(YAC)C、λ噬菌體D、質(zhì)粒89._________讓外源DNA沿著花粉管經(jīng)過珠心進(jìn)入尚未形成正常細(xì)胞壁的卵子、合子或早期胚胎細(xì)胞中，從而實現(xiàn)基因的轉(zhuǎn)移。。90.________主要是根據(jù)蛋白質(zhì)的氨基酸序列設(shè)計一組混合引物來合成相應(yīng)的基因。卷II參考答案一.綜合考核題庫1.正確答案:生物制藥2.正確答案:cDNA文庫是有時效性的，cDNA文庫構(gòu)建時的信息供體是某一時空條件下的細(xì)胞的總mRNA，它是在轉(zhuǎn)錄水平上反映該生物在某一特定發(fā)育時期、某一特定組織在某種環(huán)境條件下的基因表達(dá)情況，并不能包括該生物有機(jī)體的全部基因。3.正確答案:錯誤4.正確答案:錯誤5.正確答案:錯誤6.正確答案:A,B,C,D7.正確答案:20世紀(jì)70年代8.正確答案:mRNA9.正確答案:A10.正確答案:C11.正確答案:錯誤12.正確答案:是一種遺傳工程技術(shù)，針對某個序列已知但功能未知的序列，改變生物的遺傳基因，令特定的基因功能喪失作用，從而使部分功能被屏蔽，并可進(jìn)一步對生物體造成影響，進(jìn)而推測出該基因的生物學(xué)功能。13.正確答案:A14.正確答案:接受外源DNA的生理狀態(tài)15.正確答案:A,B,C,D16.正確答案:插入型載體17.正確答案:穿梭載體18.正確答案:黏性末端19.正確答案:正確20.正確答案:A21.正確答案:正確22.正確答案:DNA重組技術(shù)23.正確答案:藍(lán)色熒光蛋白24.正確答案:B25.正確答案:A26.正確答案:多克隆位點27.正確答案:除去小分子的無機(jī)離子28.正確答案:PCR29.正確答案:A,B,C,D,E30.正確答案:構(gòu)建基因表達(dá)載體31.正確答案:C32.正確答案:精子載體法33.正確答案:啟動子從轉(zhuǎn)錄模式上分為：組成型啟動子和誘導(dǎo)型啟動子，表達(dá)系統(tǒng)常選用誘導(dǎo)型啟動子，機(jī)理：指在某些特定的物理或化學(xué)信號的刺激下，該種類型的啟動子可以大幅度的提高基因的轉(zhuǎn)錄水平。34.正確答案:B35.正確答案:D36.正確答案:絕緣子37.正確答案:正確38.正確答案:正確39.正確答案:錯誤40.正確答案:C41.正確答案:B42.正確答案:直接連接法；同聚物加尾法；銜接物連接法。43.正確答案:C44.正確答案:EcoRl45.正確答案:A,C,D46.正確答案:C47.正確答案:基因文庫48.正確答案:除草劑耐受煙草49.正確答案:C50.正確答案:錯誤51.正確答案:B52.正確答案:枯草桿菌蛋白酶53.正確答案:D54.正確答案:基因55.正確答案:A56.正確答案:B57.正確答案:A58.正確答案:DNA聚合酶補(bǔ)平59.正確答案:可以通過合成核苷酸探針或設(shè)計簡并PCR引物從cDNA文庫或基因組文庫中篩選?；蛘呃孟鄳?yīng)的抗體從cDNA表達(dá)文庫中篩選相應(yīng)的克隆。60.正確答案:目的基因與克隆載體61.正確答案:C62.正確答案:Dntp63.正確答案:原核表達(dá)系統(tǒng)64.正確答案:C65.正確答案:A,B,C,D,E66.正確答案:C67.正確答案:抗蟲轉(zhuǎn)基因作物；抗病毒轉(zhuǎn)基因作物；抗菌轉(zhuǎn)基因植物；抗逆轉(zhuǎn)基因植物；抗除草劑轉(zhuǎn)基因植物；改良作物品質(zhì)。具體實例可以從這幾個方面挑一項進(jìn)行說明，比如：抗除草劑轉(zhuǎn)基因植物，這類植物轉(zhuǎn)入了抗除草劑基因，表現(xiàn)出抗不同類型除草劑的性狀，目前已獲得了一些抗除草劑作物，如抗草丁膦轉(zhuǎn)基因作物冬油菜，抗草甘膦轉(zhuǎn)基因作物大豆、玉米、棉花、油菜、向日葵、甜菜，抗磺酰脲類除草劑轉(zhuǎn)基因作物大豆，棉花。68.正確答案:B,C,D69.正確答案:A,B,C,E70.正確答案:正確71.正確答案:錯誤72.正確答案:指通過基因工程、抗體工程、細(xì)胞工程技術(shù)等制備生物藥品用于疾病診斷、預(yù)防和治療的行業(yè)，核心是通過重組DNA技術(shù)生產(chǎn)具有藥用功能的生物制品。73.正確答案:B74.正確答案:錯誤75.正確答案:A76.正確答案:錯誤77.正確答案:D78.正確答案:鋅指結(jié)構(gòu)域79.正確答案:D80.正確答案:A81.正確答案:B82.正確答案:(1)含有來自其他生物DNA的酵母人工染色體，叫YAC；(2)主要特性是可以克隆較大的外源片段。83.正確答案:目的基因的制備；目的基因與載體連接；目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；目的基因的表達(dá)與檢測。84.正確答案:限制性酶切圖譜85.正確答案:錯誤86.正確答案:C87.正確答案:C88.正確答案:B89.正確答案:花粉管導(dǎo)入法90.正確答案:簡并引物PCR卷III一.綜合考核題庫(共90題)1.基因組文庫的構(gòu)建一般包括下列基本步驟A、細(xì)胞染色體大分子DNA的提取和大片段DNA的制備B、載體DNA的準(zhǔn)備C、載體與外源大片段DNA的連接D、體外包裝機(jī)基因組DNA文庫的擴(kuò)增E、重組DNA的篩選和鑒定2.原核表達(dá)系統(tǒng)中通常使用的可調(diào)控的啟動子有A、LacB、TrpC、TacD、RecE、Tra3.能防止載體自連的酶是A、T4噬菌體DNA連接酶B、逆轉(zhuǎn)錄酶C、堿性磷酸酶D、末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶4.具有EcoRI末端的外源DNA片段可以以兩個方向插入到EcoRI末端的載體中。5.基因工程中常用的DNA聚合酶有A、大腸柑橘聚合酶IB、Klenow大片段酶C、T4噬菌體聚合酶D、T7噬菌體聚合酶E、逆轉(zhuǎn)錄酶6.常規(guī)PCR反應(yīng)程序中，高溫變性一般設(shè)置多高的溫度A、94℃B、65℃C、55℃D、72℃7.一般來說，完全切割質(zhì)粒或病毒DNA，要比切割線狀DNA需要更多的酶，最高的需要20倍。8.在基因工程中，堿性磷酸酶多與下列那種工具酶一起標(biāo)記DNA分子的5‘-末端A、末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶B、核酸外切酶C、T4多核苷酸激酶D、S1核酸酶9.下面有關(guān)限制酶的敘述正確的是（）A、限制酶是外切酶而不是內(nèi)切酶B、限制酶在特異序列（識別位點）對DNA進(jìn)行切割C、同一種限制酶切割DNA時留下的末端序列總是相同的D、一些限制酶在識別位點內(nèi)稍有不同的位置切割雙鏈DNA，產(chǎn)生黏末端E、一些限制酶在識別位點內(nèi)相同的位置切割雙鏈DNA，產(chǎn)生平末端10.pSC101質(zhì)粒是第一個成功克隆真核DNA的載體，屬于松弛控制型的質(zhì)粒。11.將抗體、抗原或細(xì)胞因子的基因?qū)氩∪梭w內(nèi)，改變病人免疫狀態(tài)，從而達(dá)到預(yù)防和治療疾病的目的。這是基因治療策略中的哪一項A、基因增補(bǔ)B、基因激活C、基因失活D、免疫調(diào)節(jié)12.DNA聚合酶I_________的是用枯草桿菌蛋白酶切割DNA聚合酶I得到的分子質(zhì)量為76kDa的大片段。13.在生物制藥研發(fā)方面，下列哪個國家最為領(lǐng)先A、中國B、英國C、美國D、法國14.下列哪一型限制性核酸內(nèi)切酶占比例最大A、I型B、II型C、III型D、IV型15.第一個被分離的Ⅱ類限制性核酸內(nèi)切酶是：A、EcoKB、HindⅢC、HindⅡD、EcoB16.限制性內(nèi)切酶通常保存在_________濃度的甘油溶液中。17.限制酶命名采用Smith和Athens提議的方案，第一個字母大寫取自來源細(xì)菌的屬名的第一個字母；第二、三個字母取自來源細(xì)菌的種名的前兩個字母；第四個字母（如果有）取自來源菌的____。18.Sanger雙脫氧末端終止法和化學(xué)降解法的應(yīng)用原理是一樣的。19.染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)是研究生命體組織或細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)與DNA相互作用的一種技術(shù)方法20.對DNA變性描述正確的是：A、包括DNA雙螺旋的解鏈B、可以由低溫產(chǎn)生C、是可逆的D、是磷酸二酯鍵的斷裂E、包括氫鍵的斷裂21.DNA片段之間的連接方式有哪些？22.在實驗室研究中，重組大腸桿菌的培養(yǎng)基常使用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。23.關(guān)于重組體的敘述，下列哪項不正確：A、重組體可直接表達(dá)外源基因B、重組體只能在宿主細(xì)胞或體外表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)外源基因C、重組體是由目的基因和載體通過連接酶連接而成的D、重組體中含有外源基因24.一般質(zhì)粒DNA的構(gòu)型有哪幾種？在瓊脂糖凝膠電泳中有何特點？25.PCR反應(yīng)中Taq酶常常沒有錯配堿基糾錯功能，因為它沒有A、5’－3’聚合酶活性B、5’－3’外切酶活性C、3’－5’外切酶活性D、3’－5’聚合酶活性26.Watson和Crick兩位科學(xué)家于1953年提出來的DNA是以一種_______________形式存在。27.基因工程中常用的DNA聚合酶有哪些？28.限制與修飾現(xiàn)象是宿主的一種保護(hù)體系，它是通過對外源DNA的修飾和對自身DNA的限制實現(xiàn)的。29.表達(dá)載體和基因工程克隆一般載體在元件構(gòu)成上有何差別？30.重組DNA技術(shù)領(lǐng)域常用的質(zhì)粒DNA是A、細(xì)菌染色體DNA的一部分B、細(xì)菌染色體外的獨立遺傳單位C、病毒基因組DNA的一部分D、真核細(xì)胞染色體DNA的一部分31.目的基因通常是指A、擬進(jìn)行研究或利用的基因B、人工合成的基因C、載體DNA分子D、具有編碼序列的DNA分子32.反轉(zhuǎn)錄酶能夠以單鏈RNA或單鏈DNA為模板，在引物的引發(fā)下合成一條互補(bǔ)的DNA鏈。33.下列屬于基因工程步驟的是（）A、提取目的基因B、目的基因與運載體結(jié)合C、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞D、目的基因的表達(dá)34.質(zhì)粒具備的特征不包括A、賦予宿主細(xì)胞某種可檢測的特性B、獨立復(fù)制的能力C、可復(fù)制自身DNA以及插入的外源DNAD、甲基化防止宿主的限制性內(nèi)切核酸酶對其降解

35.雙酶切或多酶切時，一般先用低鹽濃度的酶切，再用高鹽濃度的酶切。36._________是植物細(xì)胞出去細(xì)胞壁后的部分，是一個質(zhì)膜包圍的裸露細(xì)胞。37.下列測序方法哪個是屬于經(jīng)典的DNA測序方法A、ABISOLID測序B、Illumina測序C、Roche454D、雙脫氧終止法38.Southernblot檢測的是RNA分子。39.柯斯質(zhì)粒是一類人工構(gòu)建的質(zhì)粒-噬菌體雜合載體，它的復(fù)制子來自_________，cos位點序列來自λ噬菌體。40._________---阿爾茨海默病神經(jīng)系統(tǒng)疾病模型。41.下列具有生物活性的外源蛋白是A、包涵體型蛋白B、分泌型蛋白C、融合蛋白D、復(fù)合蛋白42.質(zhì)粒具有下列哪幾項生物學(xué)特性A、質(zhì)粒的復(fù)制B、拷貝數(shù)C、不相容性D、轉(zhuǎn)移性E、表達(dá)性43.M1載體在多克隆位點的兩側(cè)引入了T7和T3兩個噬菌體的啟動子，這樣增加了該載體的功能，下述四種功能中哪一種是不正確的?A、可以對插入到多克隆位點的外源片段進(jìn)行轉(zhuǎn)錄分析B、利用這兩個啟動子的通用引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增C、利用通用引物進(jìn)行序列分析D、利用這兩個啟動子進(jìn)行定點突變44._________是由磷脂組成的膜狀結(jié)構(gòu)，用它包裝外源DNA分子，然后與植物原生質(zhì)體共保溫。45.植物基因轉(zhuǎn)化受體系統(tǒng)應(yīng)具備的條件？46.下列對建立cDNA文庫的描述不正確的是A、從特定組織或細(xì)胞中提取DNA或RNAB、用反轉(zhuǎn)錄酶合成mRNA的對應(yīng)單鏈DNAC、以新合成的單鏈DNA為模板合成雙鏈DNAD、新合成的雙鏈DNA甲基化47.核酸分子雜交的探針只能是標(biāo)記的小片段DNA分子48.應(yīng)用藥物敏感基因轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞，以提高腫瘤患者細(xì)胞對藥物的敏感性。這是基因治療策略中的哪一項A、基因激活B、基因失活C、免疫調(diào)節(jié)D、藥物敏感療法49.下列含有內(nèi)含子的生物是A、青霉B、放線菌C、藍(lán)藻D、大腸桿菌50.噬菌體能夠克隆多大的DNA片段A、5KbB、20kbC、30kbD、40kb51.T4DNA聚合酶具有幾種酶活性A、2種B、3種C、4種D、1種52.用同一種酶切割載體和外源DNA得到黏性末端后，為防止它們自身環(huán)化，要用CIP將它們脫磷酸。53.重組DNA技術(shù)中常用的限制性內(nèi)切酶為A、I類限制性內(nèi)切酶B、II類限制性內(nèi)切酶C、III類限制性內(nèi)切酶D、IV類限制性內(nèi)切酶54.限制性核酸內(nèi)切酶和甲基化酶一起稱為限制-修飾系統(tǒng)。55.顯性質(zhì)粒56.Westernblot又稱為RNA印跡法。57.基因工程的基本流程是A、目的基因的分離、獲取與制備B、目的基因與載體連接構(gòu)建成為重組載體分子C、重組DNA分子導(dǎo)入到受體細(xì)胞D、外源目的基因陽性克隆的鑒定和篩選E、外源目的基因的表達(dá)58.免疫共沉淀技術(shù)是檢測（)的技術(shù)A、RNA－蛋白相互作用B、蛋白－蛋白相互作用C、RNA－RNA相互作用D、DNA－蛋白相互作用59.核酸雜交探針就是帶有放射性標(biāo)記的DNA分子。60.Sanger雙脫氧末端終止法膠板上的鏈就是模板鏈。61.什么是動物乳腺生物反應(yīng)器？62.基因治療是把健康的外源基因?qū)階、有基因缺陷的染色體中B、有基因缺陷的細(xì)胞器中C、有基因缺陷的DNA分子中D、有基因缺陷的細(xì)胞中63.組成型啟動子64.pBR322是一種改造型的質(zhì)粒，含有兩個抗性基因，其中四環(huán)素抗性基因來自A、ColElB、Ri質(zhì)粒C、pSCl01D、pUCl865.在長模板鏈的指導(dǎo)下，引物延伸合成長的DNA互補(bǔ)鏈時應(yīng)選用A、T4DNA聚合酶B、Klenow酶C、大腸桿菌DNA聚合酶ID、T7DNA聚合酶66.Ti質(zhì)粒67.單個細(xì)胞中所含有的質(zhì)粒DNA分子數(shù)目即為質(zhì)粒的_________。68.就克隆一個基因(DNA片段)來說，最簡單的質(zhì)粒載體也必需包括三個部分：復(fù)制區(qū)；________；克隆位點。69.基因重組只能通過人工進(jìn)行。70.常用的DNA探針標(biāo)記方法是切口平移法和隨機(jī)引物法。71.下面關(guān)于松弛型質(zhì)粒(relaxedplasmid)性質(zhì)的描述不正確的是A、質(zhì)粒的復(fù)制只受本身的遺傳結(jié)構(gòu)的控制，而不受染色體復(fù)制機(jī)制的制約，因而有較多的拷貝數(shù)B、可以在氯霉素作用下進(jìn)行擴(kuò)增C、通常具有較少的拷貝數(shù)D、同嚴(yán)緊型質(zhì)粒整合后，雜合質(zhì)粒優(yōu)先使用松弛型質(zhì)粒的復(fù)制子

72.pGEM質(zhì)粒有幾個啟動子A、0個B、2個C、3個D、4個73.蛋白質(zhì)的融合表達(dá)式指外源基因與載體已有的擔(dān)體蛋白的編碼基因拼接在一起，并作為一個新的____________進(jìn)行表達(dá)。74.在引物存在的情況下才能發(fā)揮作用的酶是A、限制性核酸內(nèi)切酶B、末端轉(zhuǎn)移酶C、逆轉(zhuǎn)錄酶D、DNA連接酶75.Cre-loxP系統(tǒng)兩個loxP位點位于同一條DNA鏈上且方向相同，Cre重組酶敲除loxP間的序列76.已知某一內(nèi)切核酸酶在一環(huán)狀DNA上有三個切點，因此，用此酶切割該環(huán)狀DNA，可得到三個片段。77.生命科學(xué)發(fā)展的歷史場合中，經(jīng)歷了從描述生物學(xué)、_________到創(chuàng)造生物學(xué)三個發(fā)展階段。78.巴斯德畢赤氏酵母表達(dá)系統(tǒng)較釀酒酵母表達(dá)系統(tǒng)具有哪些優(yōu)勢？79.用限制性內(nèi)切核酸酶HaeIII分別切割載體DNA和供體DNA后，可用E.coliDNA連接酶進(jìn)行連接。80.HIV為逆轉(zhuǎn)錄病毒。81.一般情況下，質(zhì)粒既可以整合到染色體上，也可以獨立存在。82._________是利用同源重組去改變內(nèi)源性基因，通過基因打靶可以成功剔除一個基因外顯子，增加一個基因和引起點突變。83.說明SangerDNA測序法的原理。84.某限制性內(nèi)切核酸酶按GGCCGCCC方式切割，產(chǎn)生的末端突出部分含A、3個核苷酸B、4個核苷酸C、5個核苷酸D、2個核苷酸85.PCR特異性與模板特異性成反比。86.質(zhì)粒作為載體使用時必須具備如下條件A、拷貝數(shù)較高B、分子