
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生物化學(xué)酶的動(dòng)力學(xué)酶化學(xué)之三酶化學(xué)之三§3.4酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)§3.5酶的分離提純及活力測(cè)定§3.6重要的酶3.4酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)§3.4酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)p349酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)(kineticsofenzyme-catalyzedreactions)是研究酶促反應(yīng)速度及其影響因素的科學(xué)。酶促反應(yīng)的影響因素主要包括底物的濃度、酶的濃度、pH、溫度、抑制劑激活劑§3.4酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)
1902年,Henri用蔗糖酶水解蔗糖的實(shí)驗(yàn)中觀察到:在蔗糖酶酶的濃度一定的條件下測(cè)定底物(蔗糖)濃度對(duì)酶反應(yīng)速度的影響,它們之間的關(guān)系呈現(xiàn)矩形雙曲線(rectangularhyperbola)。如下圖所示:一、底物濃度對(duì)反應(yīng)速度的影響(一)單底物的酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)§3.4酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)§3.4酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)在底物濃度很低時(shí),反應(yīng)速度隨底物濃度的增加而急驟加快,兩者呈正比關(guān)系,表現(xiàn)為一級(jí)反應(yīng)。隨著底物濃度的升高,反應(yīng)速度不再呈正比例加快,反應(yīng)速度增加的幅度不斷下降。繼續(xù)加大底物濃度,反應(yīng)速度不再增加,表現(xiàn)為零級(jí)反應(yīng)。此時(shí),無論底物濃度增加多大,反應(yīng)速度也不再增加,說明酶已被底物所飽和。所有的酶都有飽和現(xiàn)象,只是達(dá)到飽和時(shí)所需底物濃度各不相同而已。§3.4酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)為解釋酶被底物飽和現(xiàn)象,Michaelis和Menten做了大量的定量研究,積累了足夠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),提出了酶促反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)方程:§3.4酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)1、米氏方程的推導(dǎo)根據(jù)中間產(chǎn)物學(xué)說:(中間產(chǎn)物學(xué)說的證據(jù)p356)E+SESE+Pk1k2k3k4米氏方程是在三個(gè)假設(shè)的基礎(chǔ)上建立的:1、反應(yīng)初期,產(chǎn)物的生成量極少,E+P→ES可忽略不計(jì);2、〔S〕>>〔E〕,[S]-[ES]≈[S]3、反應(yīng)系統(tǒng)處于穩(wěn)態(tài)平衡狀態(tài),即〔ES〕的形成速度等于〔ES〕的分解速度:d〔ES〕/dt=-d〔ES〕/dtBriggs和Haldane“穩(wěn)態(tài)平衡”理論(1)(2)穩(wěn)態(tài)平衡理論:反應(yīng)進(jìn)行一段時(shí)間后,系統(tǒng)的ES濃度,由零逐漸增加到一定數(shù)值,在一定時(shí)間內(nèi),盡管底物濃度和產(chǎn)物濃度不斷變化,復(fù)合物ES的濃度也在不斷的生成和分解,但當(dāng)系統(tǒng)中ES的生成速率和ES的分解速率相等時(shí),ES的濃度不變。米氏方程的推導(dǎo)在Michaelis和Menten的酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)基礎(chǔ)上,1925年,Briggs和Haldane提出酶反應(yīng)分兩步進(jìn)行,即“穩(wěn)態(tài)平衡”理論:第一步:第二步:(1)(2)ES的濃度與(1)(2)都有關(guān)系
[E]為酶的總濃度
[ES]為中產(chǎn)物濃度
[E]-[ES]為游離酶濃度[S]為底物濃度由于[S][E]所以[S]-[ES][S]
ES的形成速度為:(3)ES的分解速度:(4)實(shí)際應(yīng)為:[S]-[ES]令:Km所以ES的生成速率和ES的分解速率相等時(shí),ES的濃度不變。(5)(2)所以:(6)當(dāng)所有的酶被底物飽和時(shí),[ES]=[E]則:Vmax=K3[E](7)Vmax=K3[E](7)
(6)將(7)代入(6)得:米氏方程當(dāng)[S]Km時(shí),v=Vmax/Km[S]當(dāng)[S]Km時(shí),v=Vmax當(dāng)[S]=Km時(shí),v=Vmax/2§3.4酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)Vmax指該酶促反應(yīng)的最大速度,[S]為底物濃度,Km是米氏常數(shù),VO是在某一底物濃度時(shí)相應(yīng)的反應(yīng)速度。從米氏方程可知:
當(dāng)?shù)孜餄舛群艿蜁r(shí)[S]<<Km,則V≌Vmax[S]/Km,反應(yīng)速度與底物濃度呈正比;
當(dāng)?shù)孜餄舛群芨邥r(shí),[S]>>Km,此時(shí)V≌Vmax,反應(yīng)速度達(dá)最大速度,底物濃度再增高也不影響反應(yīng)速度。米氏方程Km即為米氏常數(shù),Vmax為最大反應(yīng)速度當(dāng)反應(yīng)速度等于最大速度一半時(shí),即V=1/2Vmax,Km=[S]上式表示,米氏常數(shù)是反應(yīng)速度為最大值的一半時(shí)的底物濃度。因此,米氏常數(shù)的單位為mol/L。1913年前后,Michaelis和Menten提出“米氏學(xué)說”§3蘿.4合酶促殺反應(yīng)須動(dòng)力唇學(xué)2.米氏勻常數(shù)止的意奶義p3屋59(1).物理協(xié)意義截:Km值等釘于酶權(quán)反應(yīng)菊速度筑為最抽大速栗度一刻半時(shí)鏈的底樹物濃志度。(2).雹Km值愈大沈,酶與看底物徐的親和體力愈籌小;Km值愈小,酶棗與底傲物親和擠力愈竹大。酶與毯底物親和鎮(zhèn)力大,表坑示不需要址很高客的底禍物濃鴿度,朱便可梢容易鞠地達(dá)碰到最勻大反筐應(yīng)速箱度。§3箭.4郵酶促假反應(yīng)綁動(dòng)力知學(xué)(3).干Km值是魚酶的距特征肅性常辟數(shù),柜只與僚酶的狼性液質(zhì),嶺酶所故催化青的底物和酶兩促反祝應(yīng)條癥件(如溫度幕、pH、有無們抑制鬼劑等)有關(guān)助,與維酶的冷濃度盡無關(guān)伍。不同條的酶艷,Km值不恐同,同一歡種酶螺與不同兩底物作用鵝時(shí),Km值不崗?fù)?。同一也種酶膽與相同搜底物作用而時(shí),作用戲的條良件奏不紀(jì)同(Ph、溫度臥、有賴無抑帽制劑批)Km值不濁同。各種醋酶的Km值范壯圍很好廣,海大致畫在10-1~10-6M之間左。p3嚼59§3露.4大酶促檢反應(yīng)拉動(dòng)力因?qū)W3.田K雅m在實(shí)永際應(yīng)輛用中喇的重鉗要意圓義p3禿59軋~3撐60(1).鑒定觸酶:通過倚測(cè)定撥可以咬鑒別逗不同抄來源膛或相踏同來扣源但廚在不用同發(fā)匆育階鄰段、條不同何生理桐狀態(tài)鄙下催菊化相閃同反首應(yīng)的扭酶是麻否屬蒜于同籠一種級(jí)酶。(2).判斷親酶的鬧最佳隱底物止:如果奇一種衫酶可澇作用后于多肯個(gè)底速物,就有潑幾個(gè)Km值,身其中Km最小糕對(duì)應(yīng)殖的底害物就卸是酶駛的天惱然底急物。革如蔗岔糖酶敲既可艘催化練蔗糖愉水解(K威m=鋒28盯mm濟(jì)ol蘇/L合),也可奮催化僻棉子妙糖水縫解(K斜m=貌35尿0m哄mo乒l/安L)妙,兩者綁相比新,蔗拋糖為炭該酶特的天桶然底遭物。(3).計(jì)算毅一定曬速度妖下的舒底物遙濃度牧:如某久一反拐應(yīng)要哭求的飯反應(yīng)舊速度側(cè)達(dá)到假最大暑反應(yīng)讓速度愿的99寬%,則[S電]=顧99跳Km§3噸.4零酶促退反應(yīng)紋動(dòng)力被學(xué)(4).了解佩酶的棄底物蠶在體容內(nèi)具刻有的測(cè)濃度隸水平紅:一般蝦地,勸體內(nèi)圓酶的疤天然上底物殃的[S小]體內(nèi)≈Km,如果[S支]體內(nèi)<<甜K寇m,那么VO<<輕Vma釣x,細(xì)胞菌中的減酶處冊(cè)于“婦浪費(fèi)屬”狀趴態(tài),拳反之林,[S使]體內(nèi)>>喪K濾m,那么VO≈Vma屑x,底物騾濃度誼失去短生理孫意義誘,也孕不符綁合實(shí)側(cè)際狀女態(tài)。(5).判斷碰反應(yīng)容方向?qū);蜈吽?shì):催化驚正逆胞反應(yīng)魂的酶犧,其饒正逆肥兩向炕的反涌應(yīng)的Km不同器,如遺果正伐逆反普應(yīng)的堂底物償濃度氏相當(dāng)引,則吼反應(yīng)潑趨向盒于Km小對(duì)蹲應(yīng)底恢物的哥反應(yīng)圍方向饞?!?妻.4棄酶促李反應(yīng)鑰動(dòng)力魂學(xué)4.紹Km求法元:p3附61AB.§3詞.4闖酶促懲反應(yīng)周動(dòng)力挽學(xué)稱為Li露ne冊(cè)we壁av煙er-B壇uc律k方程沾(或面雙倒戴數(shù)方刪程)(d青ou濁bl元e橡re遷ci祖pr屈oc呢al憤p膀lo再t義orLi回ne矛we固av思er韻B薪ur目kpl倍ot撫)方程腸:用1/麻V0對(duì)1/掉[S攝]的作頌圖得叮一直線,p3波62鳥-3屠63斜率是Km塞/Vma耽x,,在縱信軸上砌的截距為1/決Vma筐x,橫軸蠟上的別截距構(gòu)為-1羞/Km。此作算圖除愚用來求Km和Vma必x值外,慶在研議究酶的尚抑制蛇作用方面沉還有沃重要議價(jià)值姑?!?殲.4宣酶促辰反應(yīng)陪動(dòng)力兔學(xué)雙倒援?dāng)?shù)作鞠圖法3.甜4酶促丈反應(yīng)迅動(dòng)力為學(xué)§3擱.4掉酶促葉反應(yīng)鑒動(dòng)力組學(xué)務(wù)p3未49酶促償反應(yīng)償動(dòng)力士學(xué)(k廣in曉et順ic漏s彩of訪e要nz摸ym食e-ca悼ta貢ly罪ze發(fā)d撲re茶ac錫ti培on句s)是研引究酶促灶反應(yīng)湊速度及其影響潮因素的科港學(xué)。P3步49酶促雹反應(yīng)表的影數(shù)響因腰素主柳要包家括底物信的濃扶度、酶的沒濃度、溫度誕、pH、激活尾劑抑制政劑§3飼.4錘酶促睛反應(yīng)章動(dòng)力諷學(xué)二.酶濃歉度的姑影響在一戀定溫霞度和pH下,劉酶促爹反應(yīng)爽在底物斧濃度愛大大駐超過刪酶濃姨度時(shí),速車度與敢酶的墨濃度牛呈正比。酶濃耳度對(duì)禿速度疲的影疏響機(jī)住理:酶濃擠度增視加,[E鴿S]也增翁加,呆而V0=k3[E錯(cuò)S],故反脅應(yīng)速移度增丙加。三.溫度憲的影橫響一方烘面是拒溫度食升高,酶促濟(jì)反應(yīng)汗速度剃加快(溫度旨系數(shù)Q10:反應(yīng)呆溫度鑰提高10C,其反首應(yīng)速灶度與碌原來恩的反魄應(yīng)速臭度之唇比)。另一悠方面,溫度術(shù)升高,酶的尾高級(jí)固結(jié)構(gòu)憑將發(fā)倉生變轉(zhuǎn)化或探變性付,導(dǎo)均致酶跪活性罪降低斗甚至臉喪失奔。因此橡大多皺數(shù)酶涂都有漁一個(gè)尼最適漏溫度針。藍(lán)在最已適溫際度(o摸pt定im同um版t拴em別pe革ra升tu蹈re臟)條件斃下,反應(yīng)房誠速度琴最大摸。酶對(duì)夏溫度惱的耐幟受力洋與其赴存在術(shù)狀態(tài)聯(lián)有關(guān)朝?!?預(yù).4允酶促奇反應(yīng)辟動(dòng)力濁學(xué)§3衰.4隆酶促顆反應(yīng)喜動(dòng)力抗學(xué)溫度珍對(duì)酶崖促反亂應(yīng)速鵲度的金影響欲機(jī)理零:1.溫度結(jié)影響逢反應(yīng)忌體系魂中的活化寇分子鞠數(shù):溫民度增妖加,疊活化堵分子梅數(shù)增信加,疤反應(yīng)餐速度愉增加曲。2.溫度撥影響酶的涌活性:過憲高的烈溫度乞使酶冤變性滔失活五,反插應(yīng)速禮度下犯降。最適醫(yī)溫度Tm不是酶的痛特征飯常數(shù)幻玉,因罵為一竟種酶鞠的最后適溫忍度不樣是一作成不組變的確,它徑要受太到酶的油純度幼、底飛物、踩激活吧劑、夏抑制媽劑、薪酶反漁應(yīng)時(shí)貼間等浸因素的影牛響。穩(wěn)因此逝,酶的升最適殼溫度彼與其閃它反若應(yīng)條議件有呀關(guān)。四.丹pH的影魯響在一月定的pH下,酶具輔有最選大的堆催化據(jù)活性,通常瞇稱此pH為最疾適pH。a.過酸稻或過聞堿影薯響酶脊蛋白般的構(gòu)菊象,弟使酶鄙變性弓失活香。b.影響討酶分峽子中此某些看基團(tuán)懸的解療離狀凳態(tài)(賣活性根中心膠的基威團(tuán)或鳴維持齊構(gòu)象共的一遇些基慚團(tuán))喜。c.影響栽底物戀分子迷的解捏離狀跪態(tài)緩沖穗液體糾系木瓜蕩蛋白攻酶膽堿倉脂酶胃蛋戚白酶§3它.4勸酶促膽反應(yīng)送動(dòng)力朱學(xué)動(dòng)物體內(nèi)恒多數(shù)押酶的疤最適pH值接近夾中性,但似也有塔例外磚,如歲胃蛋側(cè)白酶懂的最形適pH約1.辰8,肝輝精氨頌酸酶肺最適pH約為9.瓶8(見下留表)。一些針酶的仙最適pH§3浩.4什酶促哪反應(yīng)盛動(dòng)力糊學(xué)五.激活眾劑對(duì)貫酶反今應(yīng)速淘度的屆影響能使巷酶活床性提記高的劈燕物質(zhì)許,都稼稱為激活裙劑(a橋ct鼻iv牲at禮or兆),其中棉大部殘分是離子鵲或簡(jiǎn)駕單的靜有機(jī)冷化合姜物。如Mg++是多翼種激拉酶和玩合成游酶的梅激活近劑,估動(dòng)物償唾液乒中的α-淀粉宅酶則緒受Cl-的激絨活。通常洗,酶惹對(duì)激癢活劑有一惡定的究選擇怕性,且劑有一廚定的坐濃度況要求咳,一酸種酶惱的激瞧活劑似對(duì)另閱一種奸酶來裙說可盞能是溝抑制倆劑,骨當(dāng)激泳活劑平的濃拋度超匪過一靠定的彈范圍椅時(shí),貧它就贏成為繡抑制聯(lián)劑。原理壺:a.酶活楚性中粱心的疑必需漫基團(tuán)b.酶-底絡(luò)咸合物薯形成唉的橋嘗梁c.作為奮某些走酶的蝴輔助竄因子d.保護(hù)-S若H酶不判被氧訓(xùn)化§3虛.4蹈酶促襪反應(yīng)事動(dòng)力托學(xué)激活雪劑§3瞞.4伶酶促依反應(yīng)愚動(dòng)力雕學(xué)六、熔抑制煙劑對(duì)雄反應(yīng)嫩速度偏的影播響p3濾68凡能造使酶箱的活性棵下降而不引起酶蛋榆白變京性的物閥質(zhì)稱嶼為酶的女抑制器劑(i友nh案ib錦it奸or沃)。使酶壁變性關(guān)失活(稱為謊酶的揉鈍化)的因稠素如桌強(qiáng)酸聯(lián)、強(qiáng)研堿等平,不漠屬于己抑制身劑。通常抑制哥作用分為可逆滑性抑制傅和不可蛙逆性抑制篇兩類艷?!?懇.4擺酶促醬反應(yīng)璃動(dòng)力揀學(xué)(一卷)不吳可逆狂性抑禁制作司用(i復(fù)rr貫ev較er旺si紀(jì)bl評(píng)ein肅hi地bi愁ti嘆on女)膝不可先逆性插抑制躍作用煎的抑悲制劑鏈,通猛常以共價(jià)溫鍵方式敬與酶玻的必察需基宗團(tuán)進(jìn)疑行不私可逆渾結(jié)合敲而使酶喪炮失活浴性。匙常見鴨的不攀可逆綠抑制沸劑如增下圖亡所示。背按其浴作用尋特點(diǎn)禾,又笑分專一驚性及非專端一性兩種謎?!?他.4木酶促飛反應(yīng)鐮動(dòng)力賢學(xué)§3洲.4隱酶促嚼反應(yīng)濟(jì)動(dòng)力挎學(xué)1.非專應(yīng)一性維不可爐逆抑節(jié)制抑制水劑與暑酶分渴子中一類錢或幾妹類基團(tuán)里作用淺,不唯論是必需誤基團(tuán)吹與否判,皆匯可共訴價(jià)結(jié)龜合,調(diào)由于榜其中養(yǎng)必需執(zhí)基團(tuán)也被再抑制促劑結(jié)旱合,老從而迫導(dǎo)致河酶的尿抑制喉失活比。某些猴重金浮屬(P攔b2+、Cu2+、Hg2+)及對(duì)氯先汞苯醬甲酸等,皇能與翼酶分肯子的萬巰基(-歷SH艙)進(jìn)行塵不可繭逆適膚合,稿許多扎以巰獎(jiǎng)基作寶為必幅需基晉團(tuán)的裹酶(通稱菜巰基宏酶),會(huì)團(tuán)因此投而遭喜受抑揚(yáng)制,俱屬于皂此種揀類型醉。用二查巰基肚丙醇(br笨it鏈is伶han頃ti滋l含ew仔is每it榴e,慢BA思L)或二壩巰基袖丁二勵(lì)酸鈉脆等含怎巰基早的化評(píng)合物凱可使索酶復(fù)討活?!?醬.4踐酶促幅反應(yīng)常動(dòng)力半學(xué)§3徑.4蘿酶促特反應(yīng)恢動(dòng)力父學(xué)2.專一際性不量可逆閉抑制抑制罩劑專惱一地超作用毫于酶棟的活性憶中心陰或其湊必需查基團(tuán),進(jìn)速行共價(jià)結(jié)合頃,從利而抑江制酶悠的活倍性。有機(jī)崇磷殺龜蟲劑能專躲一作投用于膽堿尼酯酶活性修中心敗的Se寬r,使其暑磷酰摩化而好不可疫逆抑確制酶余的活塑性。當(dāng)膽堿孟酯酶被有機(jī)撤磷殺蟲抹劑抑班制后盯,乙??誓憠A不能怎及時(shí)關(guān)分解眉成乙遞酸和難膽堿頃,引察起乙椒酰膽止堿的怖積累露,使憤一些父以乙雅酰膽弄堿為乖傳導(dǎo)搞介質(zhì)乖的神遵經(jīng)系屬統(tǒng)處賄于過蔽度興進(jìn)奮狀嶺態(tài),佛引起亮神經(jīng)婆中毒削癥狀宵。解磷骨定等奏藥物可與饞有機(jī)維磷殺閘蟲劑硬結(jié)合占,使辛酶和稻有機(jī)供磷殺殘蟲劑收分離沉而復(fù)丹活。膽堿引酯酶(Ch飛E或CH仗E)正常姓范圍必:比獅色法銅:13喜0~31跟0U/L;酶法焦:御兒童套和成瞎人男晌性、軟女性話(40歲以逮上)54知10~32投00觸0U/L;女舉性(16~39歲)43痛00~11縫50懷0U/L。檢查貍介紹殊:膽佳堿酯戒酶有赤兩類否,它賽們都竹能水意解乙濤酸膽蠻堿。亞一類滋是乙怠酰膽耀堿酯慶酶。頂另一傻類是麥羥基趴膽堿屢酯酶夫。臨床確意義認(rèn):增除高:君見于價(jià)神經(jīng)烈系統(tǒng)木疾病習(xí)、甲白狀腺伸功能的亢進(jìn)贈(zèng)、糖吩尿病積、高社血壓舌、支匯氣管粗哮喘碌、Ⅳ型高機(jī)脂蛋選白血全癥、皇腎功優(yōu)能衰剝竭等忍。減低喘:見若于有幫機(jī)磷壁中毒花、肝誤炎、居肝硬策化、滋營養(yǎng)潔不良蛙、惡煉性貧幼血、非急性嚇感染熟、心兄肌梗清死、伶肺梗給死、圈肌肉夕損傷領(lǐng)、慢剝性腎徹炎、倘皮炎旋及妊宏娠晚灰期等帳,以案及攝燈入雌搶激素職、皮游質(zhì)醇正、奎色寧、墊嗎啡隱、可停待因某、可統(tǒng)可堿工、氨織茶堿從、巴躬比妥儲(chǔ)等藥畜物?!?昏.4爐酶促碑反應(yīng)修動(dòng)力惹學(xué)§3算.4鉛酶促計(jì)反應(yīng)猛動(dòng)力貴學(xué)(二)可逆載性抑禍制(r箏ev仗er胡si憶bl切e兼in考hi閑bi坐ti千on洋)抑制惡劑與謹(jǐn)酶蛋要白以非共價(jià)撓方式詢結(jié)合趙,引訂起酶附活性龍暫時(shí)嚷性喪阻失。圍抑制掃劑可準(zhǔn)以通搞過透析資等方段法被除太去,桐并且暈?zāi)懿控暦只蛘Z全部辰恢復(fù)樹酶的徹活性童。根幻玉椐抑偵制劑烘與酶摩結(jié)合廁的情說況,獅又可拳以分鉛為三腹類竟?fàn)帞囆砸钟抑?c復(fù)om耀pe綠ti趟ti她ve炒i滔nh攜ib醫(yī)it脂io惜n)非竟泡爭(zhēng)性捉抑制(no案nco叔mp流et霸it瓣iv得e氏in病hi珍bi銹ti翼on爭(zhēng))反競(jìng)?cè)笭?zhēng)性迎抑制(unco季mp旁et夾it彩iv列ein源hi剪bi模ti屢on似)竟?fàn)幠绦砸謻|制(c像om亦pe川ti踏ti脈ve陡i評(píng)nh記ib等it師io醒n)p3騎68某些樓抑制崗劑的冷化學(xué)京結(jié)構(gòu)燈與底高物相減似,狀因而妄能與擺底物棒竟?fàn)幧琅c酶詞活性涌中心跡結(jié)合襲。當(dāng)飛抑制均劑與夸活性挎中心玻結(jié)合陽后,硬底物丙被排常斥在瀉反應(yīng)移中心流之外阿,其罵結(jié)果芹是酶但促反雜應(yīng)被攜抑制慰了。p3揭69竟?fàn)幒列砸謯^制通蔥??裳阋酝н^增神大底膚物濃響度,即提午高底倡物的厚競(jìng)爭(zhēng)品能力般來消池除。P3宴69圖9-17§3撥.4慨酶促佳反應(yīng)子動(dòng)力銜學(xué)P3巷69圖9-17§3該.4怠酶促拔反應(yīng)紛動(dòng)力丸學(xué)(2)特窮點(diǎn):①抑制岸劑I與底雄物S在化逗學(xué)結(jié)飯構(gòu)上相似篩,能含與底徑物S競(jìng)爭(zhēng)題酶E分子陵活性砍中心興的結(jié)合蓄基團(tuán).例如今,丙碑二酸訂、蘋僻果酸倒及草資酰乙抹酸皆賽和琥士珀酸拖的結(jié)旋構(gòu)相建似,此是琥珀江酸脫波氫酶音的競(jìng)潤爭(zhēng)性橋抑制鄭劑?!?削.4押酶促兆反應(yīng)量動(dòng)力賭學(xué)②抑制泳程度娛取決復(fù)于抑誤制劑遍與底貪物的濃度土比、〔E蛋S〕和〔E貫I〕的相桃對(duì)穩(wěn)嗎定性;③加系大底脅物濃鉛度,支可使申抑制夜作用順減弱榮甚至麥消除?!?砍.4饒酶促亭反應(yīng)脖動(dòng)力誼學(xué)(3)競(jìng)丸爭(zhēng)性膽抑制叮劑的獲動(dòng)力險(xiǎn)學(xué)方巷程p3作70笨-3匆71E+腫S錢E刮S毒E酸+P下E回+I誓EIk1k2k3由米氏圖方程盤得:Km=①Ki=②〔E驗(yàn)〕=〔Ef璃〕+嘴〔E簽S〕各+〔終EI〕甩③〔Ef日〕〔諒S〕〔E涌S〕〔Ef睬〕〔欲I〕〔E錦I〕kiEfen至zy葡me多f培re溫eKmES的解蠢離常箏數(shù)Efen弦zy巴me鵲f診re勿eKiEi的解左離常是數(shù)§3廚.4埋酶促猜反應(yīng)圓動(dòng)力鑒學(xué)解方程員①②怨③得喚:〔E訓(xùn)S〕賞=〔E駐〕t(1肢+)+1Km〔S尸〕〔I共〕Ki又因vi=k3〔E壯S〕秧,代入污上式偶得:Vi=(1得+)+〔S尚〕Km〔I偵〕KiVma扒x〔S炒〕§3乎.4服酶促括反應(yīng)折動(dòng)力湯學(xué)競(jìng)爭(zhēng)路性抑殲制劑雙倒凡數(shù)曲廉線,如下蜂圖所裕示:有競(jìng)摩爭(zhēng)性切抑制竭劑存紋在的窩曲線錄與無復(fù)抑制桿劑的鍵曲線環(huán)相交久于縱坐育標(biāo)I/禁Vm墻ax處,港但橫坐甘標(biāo)的還截距,因字競(jìng)爭(zhēng)天性抑刺制存鳥在變虧小,悼說明土該抑怎制作冒用,土并不嫌影響吸酶促驢反應(yīng)勺的最銜大速誕度Vm來ax,而使Km值變璃大。1vi=?。?現(xiàn)+)KmVma襯x〔S狠〕1+Vma隸x1〔I倚〕Ki§3駝.4姑酶促家反應(yīng)臭動(dòng)力矩學(xué)很多申藥物重都是慨酶的尸競(jìng)爭(zhēng)排性抑寨制劑。例如磺胺始藥與對(duì)氨漫基苯刊甲酸具有聽類似戒的結(jié)蹲構(gòu),份而對(duì)板氨基忍苯甲謀酸、蕩二氫賤喋呤脫及谷字氨酸班是某罪些細(xì)丈菌合宿成二氫納葉酸的原牢料,淋后者愛能轉(zhuǎn)削變?yōu)樗臍浒踩~酸,它睡是細(xì)貌菌合殿成核酸不可連缺少蕉的輔說酶。由于磺胺離藥是二氫屠葉酸伸合成優(yōu)酶的競(jìng)狂爭(zhēng)性歉抑制段劑,致進(jìn)而取減少饞細(xì)菌捉體內(nèi)采四氫虜葉酸憐的合潤成,頌使核駕酸合唯成障住礙,贊導(dǎo)致展細(xì)菌校死亡谷。增效竿聯(lián)磺缺(抗匙菌增店效劑-甲氧床芐氨樂嘧啶(T守MP趣))能特心異地鬧抑制宏細(xì)菌維的二聚氫葉院酸還醒原為繞四氫捎葉酸陷,故尸能增中強(qiáng)磺系胺藥嘩的作嗽用?!?敏.4枝酶促值反應(yīng)條動(dòng)力樣學(xué)磺胺盯藥物足的抑驕菌作駛用非竟幫爭(zhēng)性霞抑制(n皇on窯co雜mp召et剃it懶iv追e友in紫hi較bi圍ti遇on屈)冬p3泳71酶可叼同時(shí)符與底紅物及送抑制驕劑結(jié)攏合,蜓即底杰物和熱抑制宿劑沒座有競(jìng)指爭(zhēng)作刺用??兔概c呆抑制封劑結(jié)凱合后脂,還罰可與誤底物速結(jié)合烘;酶月與底懂物結(jié)欲合后哀,也結(jié)可再溝結(jié)合圖抑制勺劑,壩但是刻三元礙的中蚊間產(chǎn)揚(yáng)物不駝能進(jìn)圈一步婆分解街為產(chǎn)抱物,叔所以糟酶活宅性降桶低。如某怖些金阻屬離柔子(Cu2+、Ag+、Hg)通常身能與廚酶分遙子的窄調(diào)控體部位胃中的-S竭H基團(tuán)患作用踩,改哄變酶茫的空愁間構(gòu)編象,切引起之非競(jìng)冬爭(zhēng)性際抑制麗;ED誤TA結(jié)合睜金屬棍離子藝引起猜的抑士制作劇用也雨屬于擊非競(jìng)斬爭(zhēng)性五抑制肉。非競(jìng)旱爭(zhēng)性遇抑制乳劑與深酶活跳性中瀉心以域外的型基團(tuán)來結(jié)合串。這捎類抑予制作汽用不思會(huì)因串提高的底物拌濃度盟而減圾弱§3廳.4濤酶促持反應(yīng)艱動(dòng)力扶學(xué)(2)特稠點(diǎn):①I和S在結(jié)揮構(gòu)上一般縱無相薪似之鎮(zhèn)處,I常與鐮酶分嗓子上漆結(jié)合肌基團(tuán)婆以外該的化狂學(xué)基樓團(tuán)結(jié)單合,很這種煌結(jié)合犬并不盤影響譽(yù)底物速和酶少的結(jié)吩合,閥增加怎底物篩濃度攻并不隆能減車少I對(duì)酶夏的抑蓬制。②非競(jìng)兵爭(zhēng)性糊抑制場(chǎng)劑的雙倒用數(shù)曲升線:有非梢競(jìng)爭(zhēng)猴性抑概制劑羞存在狂的曲和線與腐無抑指制劑概的曲賺線相外交于掛橫坐柴標(biāo)-1懂/K據(jù)m處,捐但縱激坐標(biāo)垃的截距,因豈競(jìng)爭(zhēng)余性抑號(hào)制存牢在變廟大,聰說明禿該抑解制作題用,并不楚影響詳酶促艦反應(yīng)吧的Km值,刮而使Vm娛ax值變?cè)坌?,如客下圖墾所示例:§3盛.4叢酶促絮反應(yīng)挑動(dòng)力撿學(xué)非競(jìng)極爭(zhēng)性調(diào)抑制Vi=Vma膚x〔S埋〕(宰1+牢)〔I業(yè)〕KiKm+(督)〔S句〕1Vi=(1+)〔I啞〕Ki×(腥+慎)1Vma泊xKmVma咸x1〔S低〕3反競(jìng)套爭(zhēng)性洗抑制(u噴nc刃om繭pe韻ti醫(yī)ti蓬ve竄i儉nh席ib粘it妥io蕉n貼)酶只估有與露底物量結(jié)合趙后才與假抑制辟劑結(jié)頌合,雹從而洪導(dǎo)致豬酶活翻性下嫩降。溫這類晴抑制蠻作用匙最不重嫂要?!?跨.4玩酶促私反應(yīng)剪動(dòng)力銜學(xué)§3翼.4誼酶促甩反應(yīng)源動(dòng)力涉學(xué)(2)特倚點(diǎn):反競(jìng)集爭(zhēng)性智抑制虧劑存奸在下聾,Km、Vma蕉x都變祥小。1Vi=KmVma惜x1〔S惜〕+1Vma僚x〔I統(tǒng)〕Ki(1犧+烘)Vi=Vma貴x〔S寸〕〔S歡〕〔I筆〕Ki(1+龜)Km+§3乞.4飛酶促鑰反應(yīng)源動(dòng)力謠學(xué)§3雜.4俗酶促期反應(yīng)施動(dòng)力扁學(xué)七.酶的里過渡邪態(tài)類嚴(yán)似物裙是酶質(zhì)的一雀種潛似在抑制劑過渡至態(tài)底面物是蜘酶與睜底物繞形成允的反師應(yīng)活幸性很緩高的中凡間產(chǎn)抱物,珠過渡斗態(tài)類暈似物膚是它肚的結(jié)堂構(gòu)類殃似物境。過渡孟態(tài)類信似物夢(mèng)能專恒一性丹地結(jié)傅合在頸酶的噴活性踏中心位置鉤從而種對(duì)酶指產(chǎn)生寬抑制錄作用縱。3.需5酶諸的膛分離竭純化米及活滅力測(cè)若定§3隔.5焰酶的匪分離俗提純旗及活憶力測(cè)茂定一、撿酶的勤分離貝提純(一尊)酶放在細(xì)玻胞中困的分鄉(xiāng)豐布:胞外杰酶:水解門酶類床,易缸收集百,不桑必破灘碎細(xì)邊胞,棋緩沖晌液或粥水浸荒泡細(xì)畢胞或助發(fā)酵脅液離寸心得狼到上坑清液萄即為狗含酶文液。胞內(nèi)持酶:除水仗解酶唐類外籮的其倦它酶濤類,覺需破裹碎細(xì)嬸胞,屆不同他的酶存分布姿部位赴不同統(tǒng),最只好先縱將酶別存在銀的細(xì)梅胞器昂分離伙后再率破碎匪該細(xì)斷胞器款,然些后將筒酶用讀適當(dāng)伶的緩板沖溶怖液或攝水抽責(zé)提?!?午.5牢酶的輕分離業(yè)提純微及活象力測(cè)控定(二平)分旬離材壇料:動(dòng)植憲物原嶼料或碑微生沈物的煌發(fā)酵帳液。微生歲物發(fā)宵酵液財(cái)是用祖于分巧離酶住的最缺常用盛材料胃,因篩為微旱生物她種類襲多,心繁殖核快,目培養(yǎng)臺(tái)時(shí)間凍短,延含酶棉豐富卵。由踩微生休物發(fā)名酵產(chǎn)垮生的賠酶或揚(yáng)其它懂生物茫組織繳中的門酶因椅含有配大量延的其干它物喘質(zhì),狀所以麥必須序經(jīng)過恨分離會(huì)、提程純、兄結(jié)晶么等階剃段才逮可做袋實(shí)際此應(yīng)用倦。對(duì)于灰某種耐酶的木具體釣制備可方案乎,應(yīng)業(yè)通過封了解酶的突來源徐、性列質(zhì)及桃純度軌需要來確蛛定,括無固數(shù)定的樹方案蠻?!?獄.5抬酶的城分離芳提純唯及活游力測(cè)里定(三珠)原廳則:在增女加酶何得率枕和純喬度的捐同時(shí)餡,盡以可能避免羅高溫存、過極酸、唐過堿絹、劇態(tài)烈的關(guān)震蕩常及其扭它可能騾使酶伴喪失培活力普的一巧切操購作過擦程。詠盡最扭大可少能保別存酶壞的活籍力。(四震)分粥離提這純:1.酶的斤抽提禍:將酶刷溶解毫出來鏟就稱朱為抽則提。胞外企酶:固體援培養(yǎng)倘的菌蒸體加兇水或社適當(dāng)叨緩沖純?nèi)芤厚劷菥^安濾即延可。罵液體搬培養(yǎng)納的菌止體將阿發(fā)酵榮液離粗心分單離除慨去菌蠟體收柳集恰離心胸液即她可。胞內(nèi)滴酶:先破匯碎細(xì)痛胞,繭再用繩水或礦適當(dāng)頃的緩暴沖溶候液抽恰提?!?皇.5和酶的紹分離若提純折及活節(jié)力測(cè)番定2.酶的如純化例:純化葬的關(guān)鍵是維陣持酶帝的活酷性,說因?yàn)檎S著捏酶的弟逐漸繭提純束,一踏些天袍然的哈可保想持酶邪活力咳的其斗它成觀分逐數(shù)漸減攝少,臣酶的煌穩(wěn)定覺性變手差,焰所以冰整個(gè)側(cè)純化蛙過程響應(yīng)維持笨低溫。(1)酶育的沉材淀方惜法:與蛋帆白質(zhì)通的沉皇淀方恒法相己同,胃常用玩:①鹽析輝法:常用淚硫酸湖銨鹽頑析,文有分炎段鹽法析和合一次夸性鹽碼析兩差種方賣法。②有機(jī)鋤溶劑懂沉淀適法:用乙暮醇、盆丙酮宣等。繪應(yīng)低壩溫操仗作,菠溶劑葬少量真分批貫加入暑。③等刃電點(diǎn)背沉淀槳法§3及.5蔑酶的版分離挽提純奴及活眨力測(cè)邊定(2)酶孕的純掏化方糧法:有吸局附層仁析、稀離子極交換謀層析見、凝取膠過據(jù)濾層溜析、持親和攻層析等.3.酶的蘿結(jié)晶鑄:純化涂以后適的酶合液再刑次沉搭淀,蘆仍采湖用沉傲淀法草。4.酶的局保存再:一般炒在-2烘0℃以下枕低溫殲保存擁?!?務(wù).5余酶的捏分離還提純限及活矮力測(cè)費(fèi)定二、秤酶活蒸力的諒測(cè)定定性夾鑒定提取材物中位某一摩酶是走否存害在,醬一般串是根忍據(jù)此酶提引起嶼的化亡學(xué)反海應(yīng)來判鐵斷,秀如檢未驗(yàn)在許提取撐物中也是否暗存在失淀粉胳酶。喘則用島提取鏟物與躍淀粉猴反應(yīng)頭,一蘋段時(shí)套間以定后,伯用碘-碘化捎鉀與調(diào)反應(yīng)要液反技應(yīng),敢若變?nèi)谒{(lán),脈說明忠提取蜜物無惠淀粉鵝酶活題力;巨反之掙,提強(qiáng)取物圣有淀林粉酶屆的活倡力。酶活防力的勞測(cè)定:實(shí)尿際上缸是酶爆定量腦測(cè)定槳的方局法,酶制辭劑因百含雜墊質(zhì)多蒼易失綢活等冰原因薪,故衛(wèi)不能數(shù)用稱眼重或謎測(cè)量腸體積例來定踐量?!?還.5掃酶的亮分離磨提純痕及活魄力測(cè)語定(一遙)酶搭活力喂的概種念:指酶部催化焦特定板化學(xué)否反應(yīng)顛的能休力。其大小通??p用在一仔定條倉件下勵(lì)酶催渾化某悠一特唱定化毒學(xué)反皆應(yīng)的痰速度來表噴示。礙一定托量的串酶制宅劑催泡化某閣一化伍學(xué)反紛應(yīng)速取度快管,活邊力大姓;反休之,花活力義小。速度帝表示歷法常用-dS馬/d笑t或dP香/d臨t,測(cè)初岡速度局,多嗽用后陵者。燙因?yàn)辇X反應(yīng)跌初期墳底物濤過量麻,底柜物的螺減少嗚量不曉容易側(cè)測(cè)定詠,而升產(chǎn)物按從無饅到有鄙,易每測(cè)定凍?!?有.5默酶的尺分離認(rèn)提純厲及活莊力測(cè)爪定(二很)酶底的活切力單帝位:p3愉3519僻61年國分際生犧化協(xié)惕會(huì)酶鉤學(xué)委沖員會(huì)統(tǒng)一賄規(guī)定個(gè),酶陷的國翻際單距位(IU)規(guī)定皮為:冊(cè)在最委適反誤應(yīng)條赤件(摸溫度25鴨℃)下乞,每樸分鐘饑內(nèi)催愈化1微摩最爾(μm殺ol)底物饒轉(zhuǎn)化且為產(chǎn)季物所慘需的君酶量礎(chǔ)(或1分鐘瘦內(nèi)轉(zhuǎn)擇化底胳物生染成1微摩豈爾產(chǎn)鉤物的亂酶量饅)稱半為1標(biāo)準(zhǔn)妨單位。測(cè)定暫條件焰:最佳邁的反謹(jǐn)應(yīng)條柔件,惡如最適復(fù)的T(或25嗓℃)、肌最適pH、[S控]掉>>宗[初E]、初速資度下。19至72年國情際生租化協(xié)摔會(huì)又推淘薦一掙種新都單位塘,即Ka聰ta科l(向Ka刮t)單位。規(guī)僻定:傍在最咽適溫信度下園,每溉秒鐘柔能催軟化1摩爾斥底物巨轉(zhuǎn)化貝為稱奇為所撲需要牙的酶朱量定炮義為1街Ka幅t。1閥Ka與t=避60歇×1稀06IU.§3漢.5喬酶的熱分離匹提純顧及活棒力測(cè)傭定(三)酶的余比活隊(duì)力:每單傷位酶言蛋白償所含住的活力指單位歲數(shù)。對(duì)固體酶:涉用活力所單位/m睜g酶蛋剝白、或活力求單位/m途g酶蛋約白氮來表籌示;對(duì)液體酶:謝用活力祥單位/m鴨l酶液來表督示。很明箏顯,席比活館力越激大,晚酶的正活力蹄越大固。(四橫)酶央的轉(zhuǎn)羊換數(shù)酶的欣轉(zhuǎn)換初數(shù)是鐮指在〔E堪〕t一定比、[S隔]彈>>活[掏E]的條莫件下,瞇當(dāng)被螺底物單飽和配時(shí),薦單位茶時(shí)間冠內(nèi)每連一活漿性中驕心或攪每分子酶詢所能防轉(zhuǎn)換就的底副物分若子數(shù)辰?!?麥.5漏酶的鋼分離卷提純禍及活幣力測(cè)航定(五系)酶乓活力杠的測(cè)揪定方食法1、分撿光光僚度法寒:產(chǎn)物牲與適奏當(dāng)?shù)淖嗷瘜W(xué)農(nóng)試劑鈴生成習(xí)有色身物質(zhì)或產(chǎn)遍物有讀紫外句吸收閣的能漠力可粱采用笑此法崇。2、測(cè)碑壓法踏:產(chǎn)物諸中有謹(jǐn)氣體便,測(cè)普氣壓濤增加純量。3、滴亞定法香:產(chǎn)物蠅中有敲酸生驢成,蘆用堿結(jié)滴定蹈。4、熒奇光法嗽:產(chǎn)物舍中有且熒光管物質(zhì)攪生成賊或產(chǎn)挖物與爸熒光浪試劑反應(yīng)擊生成奸熒光歐產(chǎn)物柜可用花此法邀。5、旋母光法愿:產(chǎn)物閃中有乏旋光組物質(zhì)族可采鮮用此閉法。除了浙以上循方法暢外,記還可心根據(jù)產(chǎn)物色的性扁質(zhì)采用績(jī)其它跌方法旬?!?雅.5欠酶的樹分離耀提純排及活君力測(cè)擱定三、駁回收矮率和鵲純化斜倍數(shù)回收笨率=×1蘭00%每次紐奉總活勿力第一授次總素活力純化史倍數(shù)梅=每次通比活?yuàn)A力第一御次比緒活力酶的回收側(cè)率和危純化咬倍數(shù)燈的測(cè)揉定常敬在酶芬分離鉆過程澤中的筒每個(gè)滲環(huán)節(jié)斑中進(jìn)行椅。一未個(gè)正助常、媽合理添的純鎮(zhèn)化程欣序,平隨著狠純化軍的進(jìn)程行,躁總蛋稱白量逐漸擴(kuò)減少饅,比怕活力持不斷廚增加勤,純舒化倍片數(shù)提庭高了潛,但括回收擁率降必低。3.狠6重要垮的酶§3圓.6謙重要另的酶一、醉變構(gòu)息酶與鉤變構(gòu)沫調(diào)節(jié)p4偉18(一滲)概洪念變構(gòu)茅酶又稱餐為別構(gòu)冠酶,指酶分克子的非催化焦部位椒與某吐些化晃合物可逆地非共吹價(jià)結(jié)合氣后,喘引起縣酶的酸構(gòu)象代的改尚變,挨進(jìn)而乞改變營酶的朽活性躺狀態(tài)槐,酶獅的這闊種調(diào)討節(jié)作趙用稱撐為變構(gòu)氏調(diào)節(jié)(al珍lo呆st率er據(jù)icre泛gu懷la縱ti供on陵),具有被變構(gòu)祖調(diào)節(jié)立的酶蹈稱變構(gòu)軋酶(al等lo溪st研er借icen狡zy菜me福)。凡能痕使酶木分子班發(fā)生邪別構(gòu)名作用拾的物刻質(zhì)稱販為變棒構(gòu)劑(ef辯fe廉ct廚or)。變構(gòu)掃酶多鍵為寡聚覽酶,含富的亞緒基數(shù)脫一般銀為偶筋數(shù);宰且分硬子中桃有催化清部位(結(jié)茅合底鈴物)敘與調(diào)節(jié)杯部位(結(jié)誼合變甩構(gòu)劑年),責(zé)這兩渴部位墾可以奮在不獨(dú)同的溜亞基展上,難或者窗在同開一亞踩基的派兩個(gè)柄不同鏡部位遲?!?拘.6腥重要鬧的酶§3兩.6榮重要習(xí)的酶(二暮)變至構(gòu)酶刷作用臟特點(diǎn)p4他181、一般驚變構(gòu)邀酶分番子上棋有二榮個(gè)以足上的別底物屬結(jié)合謊位點(diǎn)隨。當(dāng)?shù)卒佄锱c微一個(gè)鼻亞基稼上的防活性存中心劉結(jié)合株后,串引起孕酶分譽(yù)子構(gòu)霸象的姜改變嗎,使衰其它佛亞基辯的活錘性中蓮心與亂底物事的結(jié)維合能搶力發(fā)望生改憐變,篇或出澤現(xiàn)正協(xié)棕同效鍬應(yīng)(po歌si欠ti總ve陷c撲oo熊pe苦ra幻玉ti派ve纖e肌ff喘ec塵t),或出毒現(xiàn)負(fù)協(xié)炊同效鴉應(yīng)(ne億ga覺ti熄ve遼c北oo膽pe刪ra勇ti氣ve運(yùn)e亡ff敏ec單t)。2、正協(xié)同同效教應(yīng)的基變構(gòu)蚊酶其速度-底物忌濃度船曲線呈S形,即更底物辟濃度散較低亮?xí)r,暖酶活甚性的瘦增加栽緩慢臺(tái),底護(hù)物濃偷度高催到一什定程撫度后法,酶腸活性鳳顯著難加強(qiáng)校,最歉終達(dá)百到最畢大值Vm皮ax。如大膚腸桿額菌的天冬褲氨酸些轉(zhuǎn)甲吊酰基由酶(AT玩Ca曠se)對(duì)底員物天品冬氨繩酸的評(píng)結(jié)合薦表現(xiàn)涼為正協(xié)邊同效晌應(yīng)?!?余.6熊重要余的酶3、負(fù)協(xié)林同效招應(yīng)的設(shè)變構(gòu)惡酶其速度-底物頭濃度協(xié)曲線為類似鋪雙曲植線。底物惰濃度誓較低漠時(shí),酶表船現(xiàn)出端較大內(nèi)活性撫,但底物離濃度厚明顯肅增加變時(shí),其反絹應(yīng)速釋度無呼明顯康變化奴。如3-磷酸伯甘油廟醛脫璃氫酶呆對(duì)NA朗D+的結(jié)終合為助負(fù)協(xié)掌同效遮應(yīng),互其意義撒在于無論見細(xì)胞滿內(nèi)酶撕的底拿物濃辱度如寺何變尿化,軍酶始航終能道以一跑個(gè)較剩恒定買的速透度進(jìn)蠶行以袋滿足急細(xì)胞烈的基傲本需彩要?!?捕.6敬重要布的酶4、變林構(gòu)酶定除活藍(lán)性中堪心外伸,還畝存在抄著能楚與變腳構(gòu)劑蠻作用躬的亞膊基或挽部位鞋,稱調(diào)節(jié)皺亞基(或部對(duì)位)。變宿構(gòu)劑昂與調(diào)壘節(jié)亞燙基以非共字價(jià)鍵特異滔結(jié)合配,可集以改琴變調(diào)術(shù)節(jié)亞槍基的車構(gòu)象誦,進(jìn)世而改釘變催譯化亞飛基的涼構(gòu)象務(wù),從根而改嚴(yán)變酶證活性行。凡鍵使酶爆活性美增強(qiáng)禁的變疫構(gòu)劑腹稱變構(gòu)揚(yáng)激活籃劑(al瘡lo向st攀er著icac嬸ti湯vi場(chǎng)to雪r),它能非使上扎述S型曲薪線左叢移,勤飽和側(cè)量的置變構(gòu)評(píng)激活幅劑可錫將S形曲崇線轉(zhuǎn)貫變?yōu)榻o矩形驅(qū)雙曲尊線。恨凡使融酶活大性減懂弱的默變構(gòu)數(shù)劑稱變構(gòu)葛抑制窩劑(al畝lo采st岸er榨icin燥hi禽bi役to哪r),能使S形曲王線右膊移。省例如優(yōu),AT毛P是磷溫酸果隊(duì)糖激綁酶的麗變構(gòu)菠抑制日劑,他而AD童P、AM噸P為其場(chǎng)變構(gòu)永激活化劑。矩5、由于變構(gòu)默酶動(dòng)貍力學(xué)不符次合米-曼氏蓄酶的動(dòng)駁力學(xué)器,所瘦以當(dāng)笨反應(yīng)速鋸度達(dá)殿到最悼大速怠度一脫半時(shí)玩的底長物的易濃度怕,不蝦能用Km表示宴,而帽代之蠟以K0.奮5S表示府?!?之.6桃重要辮的酶p4誕19§3沿.6折重要炮的酶正協(xié)象同效宰應(yīng)的褲變構(gòu)痕酶底會(huì)物活婆性曲踏線⊙不刮加變樹構(gòu)劑⊙加追變構(gòu)略激活結(jié)劑警⊙加如變構(gòu)大抑制圾劑+-§3握.6咸重要匪的酶(三狗)生馬理意嚇義1、在償正協(xié)勺同效盾應(yīng)的擠變構(gòu)飯酶的S形曲歌線中龍段,底得物濃誤度稍診有降熱低,陜酶的挪活性判明顯扯下降腎,多基酶體梳系催客化的壇代謝塞通路硬可因榴此而挨被關(guān)育閉;下反之賽,底筆物濃兄度稍辱有升渡高,冰則酶和活性饑迅速單上升敏,代叉謝通碌路又返被打色開,膠因此枝可以浴通過細(xì)胞犧內(nèi)底采物濃伙度的叼變化來靈派敏地等控制序代謝成速度悼。2、變構(gòu)笛抑制醉劑常是客代謝帽通路鬧的終頑產(chǎn)物口,變鹿構(gòu)酶友常處遭于代阻謝通合路的周入口鏡,通訴過反饋潤抑制,可熔以及紀(jì)早地繼調(diào)節(jié)摟整個(gè)逮代謝江通路持,減題少不貞必要皂的底繼物消最耗。筋§3惠.6園重要業(yè)的酶§3葬.6核重要筐的酶例如葡萄并糖的執(zhí)氧化臣分解可提讓供能革量使AM憂P、AD裁P轉(zhuǎn)變輪成AT緩P;當(dāng)AT正P過多濟(jì)時(shí),通過貸變構(gòu)棕抑制允劑AT盯P抑制聰磷酸獎(jiǎng)果糖召激酶抄的活勉性,天可限們制葡抽萄糖援的分莖解,藏而AD湯P、AM額P增多狐時(shí),則帽可通滿過變嘴構(gòu)激遵活劑AM稼P、AD嶼P激活立磷酸理果糖反激酶暖的活牌性促卡進(jìn)糖金的分此解。魄隨時(shí)世調(diào)節(jié)AT乘P/奧AD紀(jì)P的水禾平,彎可以維持法細(xì)胞逝內(nèi)能圈量的正園常供借應(yīng)。§3統(tǒng).6孩重要宿的酶§3煤.6族重要糖的酶§3禽.6亮重要沸的酶二、歲共價(jià)剃調(diào)節(jié)嘗酶1、概奔念:也稱狹共價(jià)敵修飾少酶,
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