計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查項(xiàng)目報(bào)告

##技師學(xué)院應(yīng)用生物系《計(jì)數(shù)培育基適用性檢查》工程報(bào)告項(xiàng)目名稱：計(jì)數(shù)培育基適用性檢查項(xiàng)人：第一大組班指導(dǎo)教級(jí)：12生物J4班師： 余展旺教師2023327日目 錄34五、檢驗(yàn)工作日志〔進(jìn)程表〕5六、計(jì)數(shù)培育基的適用性檢查備料單816小組成員：許麗鑾〔組長(zhǎng)〕馬歡、雷長(zhǎng)運(yùn)、趙萌、宋俊發(fā)、劉潔婷、蔡淇因一、工程介紹及根本信息一、工程介紹10/16報(bào)告等。工程任求本次驗(yàn)證工程，我們一大組〔7工程任求序號(hào)任務(wù)名稱任務(wù)要求任務(wù)成果備注1承受工程明確內(nèi)容與要求參考資料和文件名目任務(wù)能分析工程要完成的任務(wù)完成任務(wù)工作流程了解能獵取資料的途徑相關(guān)學(xué)問(wèn)2查閱相關(guān)查閱培育基適用性驗(yàn)證的相流程圖資料學(xué)問(wèn)分析工程所涉及的微生物操驗(yàn)證方法示意圖作技術(shù)要點(diǎn)通過(guò)多種途徑收集兩個(gè)以上工作分工與打算進(jìn)程表3制定打算工程案例，進(jìn)展總結(jié)分析和方案培育基適用性驗(yàn)證方案閱歷備料、滅菌依據(jù)驗(yàn)證方案和進(jìn)程表純化、接種、培育完成操作并記錄4實(shí)施驗(yàn)證操作觀看、記錄結(jié)果分析和報(bào)告驗(yàn)證結(jié)果分析和總結(jié)補(bǔ)充、訂正工作日志5工程總結(jié)學(xué)習(xí)工程總結(jié)的撰寫方法撰寫驗(yàn)證總結(jié)和報(bào)告和報(bào)告能撰寫工程總結(jié)PPT6工程資料學(xué)習(xí)過(guò)程資料的收集以及分文本資料的匯總與裝訂匯總與存類方法檔收集工程資料并存檔電子資料的匯總與存檔請(qǐng)檢單品名品名養(yǎng)分瓊脂批號(hào)/編號(hào)3102199規(guī)格——有效期20230427生產(chǎn)單位##環(huán)凱微生物科技##請(qǐng)檢部門12J4請(qǐng)檢日期2023310請(qǐng)檢人第一大組請(qǐng)檢目的計(jì)數(shù)培育基適用性是否符合要求備注——品名品名養(yǎng)分玫瑰紅鈉批號(hào)/編號(hào)3102345規(guī)格——有效期20230702生產(chǎn)單位##環(huán)凱微生物科技##請(qǐng)檢部門請(qǐng)檢日期2023310請(qǐng)檢人第一大組請(qǐng)檢目的計(jì)數(shù)培育基適用性是否符合要求備注——二、被檢培育基信息1、養(yǎng)分瓊脂1〕規(guī)格/包裝規(guī)格：——2、玫瑰紅鈉瓊脂1〕規(guī)格/包裝規(guī)格：——2〕批號(hào)/編號(hào)：31021993〕貯藏：擰緊瓶蓋，貯存于避光枯燥2〕批號(hào)/編號(hào)：31023453〕貯藏：擰緊瓶蓋，貯存于避光枯燥處〕產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)號(hào)：YZB/0089-2023處4〕產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)號(hào)：Q/HKSJ035〕有效期：202304276〕生產(chǎn)商：##環(huán)凱微生物科技##5〕有效期：202307026〕生產(chǎn)商：##環(huán)凱微生物科技##7〕產(chǎn)品類型：——7〕產(chǎn)品類型：——二、驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)2023XIJ：微生物限度檢查細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)培育基的適用性檢査培育基或按處方配制的培育基均應(yīng)檢査。菌種試驗(yàn)用菌株的傳代次數(shù)不得超過(guò)5代〔從菌種保藏中心獲得的冷凍枯燥菌種為第0大腸埃希菌〔EscherichiacoliCMCC(B)44101〕金黃色葡萄球菌〔StaphylococcusaureusCMCC(B)26003〕枯草芽孢桿菌〔BacillussubtilisCMCC(B)63501〕白色念珠菌〔CandidaalbicansCMCC(F)98001〕黑曲霉〔AspergillusnigerCMCC(F)98003〕菌液制備接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的穎培育物至養(yǎng)分肉湯培育18?2424?480.9%無(wú)菌氯化鈉溶液制的菌懸液。接種黑曲霉的穎培育物至改進(jìn)馬丁瓊脂斜面培育基上，培育5~73?5ml0.05%(ml/ml)800.9%無(wú)菌氯化鈉溶液，將孢0.05%(ml/ml)800.9%lml50?100cfu22?8℃，242~8℃，在驗(yàn)證過(guò)的貯存期內(nèi)使用。適用性檢查取大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌各50~lOOcfu，分別注入無(wú)230~35℃50~100cfu，分別注人無(wú)菌平皿中，馬上傾注223?28℃72時(shí)，計(jì)數(shù)；取白色念珠菌50~100cfu，注人無(wú)菌平皿中，馬上傾注酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂223?28℃；72應(yīng)的比照培育基替代被檢培育基進(jìn)展上述試驗(yàn)。假設(shè)被檢培育基上的菌落平均數(shù)不小于比照培育基上的菌落平均數(shù)的70%,落形態(tài)大小與比照培育基上的菌落全都，判該培育基的適用性檢查符合規(guī)定。三、工程檢驗(yàn)程序細(xì)菌總數(shù)檢驗(yàn)程序如圖：55種試驗(yàn)菌種復(fù)蘇適用性檢查30~35℃23~28℃培育18~24h48~72h報(bào)告結(jié)果四、計(jì)數(shù)培育基的適用性檢查報(bào)告書養(yǎng)分瓊脂&玫瑰紅鈉瓊脂J4—327SOR—ZL—327—001負(fù)責(zé)人：余展旺教師 復(fù)核人：許麗鑾檢驗(yàn)人：小組成員五、檢驗(yàn)工作日志〔進(jìn)程表〕計(jì)數(shù)培育基的適用性檢查品名

養(yǎng)分瓊脂、玫瑰紅鈉瓊脂 批號(hào)—— 工作內(nèi)容 數(shù)量

3102199&3102345操作—— 備注1樣日0150310

1210查閱工作依工作打算，實(shí)施檢驗(yàn)操作；

21320驗(yàn)證依據(jù) 2023版《中國(guó)藥典》附錄XIJ：微生物限度檢查檢驗(yàn)工程 試驗(yàn)菌種 菌落形態(tài) 回收率% 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定 結(jié)論大腸埃希菌 全都 100% 符合規(guī)定被檢培育基上的菌落平金黃色葡萄球菌全都74%均數(shù)不小于符合規(guī)定比照培育基上的菌落平計(jì)數(shù)培育70%,基的適用枯草芽孢桿菌全都100%且菌落形態(tài)符合規(guī)定性檢查大小與比照培育基上的白色念珠菌全都107%該培育基的符合規(guī)定適用性檢查符合規(guī)定。黑曲霉全都84%符合規(guī)定符合規(guī)定備注：2、檢驗(yàn)操作預(yù)備1〕菌種復(fù)蘇的備料2〕菌液計(jì)數(shù)的備料培育基/放。3、試驗(yàn)菌種復(fù)蘇一代，搖床培育。分別將試驗(yàn)菌種接種至相應(yīng)的肉湯中，，150r/min，29±1℃搖床振蕩培育一天。2 202303111、試驗(yàn)菌種復(fù)蘇二代，搖床培育。除黑曲霉外，分別將復(fù)蘇一次的試驗(yàn)菌100ml培育1ml150r/min，29±1℃搖床振蕩培育一天。3202303121、菌液制備及計(jì)數(shù)11ml9ml液備用；2323〕做陰性比照；30℃48h。202303141、菌液計(jì)數(shù)培育結(jié)果觀看，點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)；2、陰性特別，分析緣由。202303161、菌液計(jì)數(shù)的備料〔其次次〕培育基/放。202303171、菌液制備及計(jì)數(shù)〔其次次〕11ml9ml液備用；23

生物限度檢查。3〕做陰性比照；30℃48h。202303191、菌液計(jì)數(shù)培育結(jié)果觀看，點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)；2、適用性檢查的備料培育基/放。8 202303201、適用性檢查1ml50~100cfu1ml2個(gè)平皿；進(jìn)展上述試驗(yàn)；3〕分別做陰性比照；430~35℃48h72h。9 202303221、適用性檢查計(jì)數(shù)培育的結(jié)果觀看，點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)；2、兩種培育基陰性特別，分析緣由。10 202303231、適用性檢查的備料〔其次次〕培育基/放。11 202303241、適用性檢查1ml50~100cfu1ml2個(gè)平皿；進(jìn)展上述試驗(yàn)；3〕分別做陰性比照；430~35℃48h23~28℃

12202303261、適用性檢查計(jì)數(shù)培育的結(jié)果觀看，點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)；2、回收率計(jì)算并進(jìn)展結(jié)果判定。1320230327202303281、數(shù)據(jù)記錄、整理，填寫原始記錄，報(bào)告書等。解；3、工程總結(jié)及分析。工程計(jì)數(shù)培育基的適用性檢查工程計(jì)數(shù)培育基的適用性檢查檢驗(yàn)日期2023310/3102199&31023452023326品名規(guī)格報(bào)告日期數(shù)量滅菌條件備注第一次菌種復(fù)蘇其次次菌種復(fù)蘇及菌種備料第一次菌液計(jì)數(shù)刻度吸管1ml/支7180℃1h 20230310養(yǎng)分肉湯100ml/瓶3121℃30min改進(jìn)馬丁液體培育基100ml/瓶2121℃30min刻度吸管1ml/支7180℃1h 2023031020mmEP10ml/支2121℃30min50%甘油支1121℃30min養(yǎng)分肉湯100ml/瓶3121℃30min改進(jìn)馬丁液體培育基100ml/瓶2121℃30min空試管支7*5180℃1h 20230310刻度吸管1ml/支9*5180℃1h刻度吸管10ml/支2*5180℃1h培育皿套10*5180℃1h75%酒精棉球//121℃30min0.9%生理鹽水100ml/瓶5121℃30min養(yǎng)分瓊脂250ml/瓶3121℃30min玫瑰紅鈉250ml/瓶2121℃30min其次次菌液計(jì)數(shù)第一次適用性檢查其次次適用性檢查

七、計(jì)數(shù)培育基適用性檢查原始記錄

20230316空試管支7*5180℃1h刻度吸管1ml/支空試管支7*5180℃1h刻度吸管1ml/支9*5180℃1h刻度吸管10ml/支2*5180℃1h培育皿套10*5180℃1h75%酒精棉球//121℃30min0.9%生理鹽水100ml/瓶5121℃30min養(yǎng)分瓊脂250ml/瓶3121℃30min玫瑰紅鈉250ml/瓶2121℃30min空試管支6*5180℃1h刻度吸管1ml/支8*5180℃1h刻度吸管10ml/支1*5180℃1h培育皿套6*5180℃1h75%酒精棉球//121℃30min0.9%生理鹽水100ml/瓶5121℃30min養(yǎng)分瓊脂60ml/瓶3121℃30min玫瑰紅鈉60ml/瓶2121℃30min比照品養(yǎng)分瓊脂60ml/瓶3121℃30min比照品玫瑰紅鈉60ml/瓶2121℃30min空試管支6*5180℃1h刻度吸管1ml/支8*5180℃1h刻度吸管10ml/支1*5180℃1h培育皿套6*5180℃1h75%酒精棉球//121℃30min0.9%生理鹽水100ml/瓶5121℃30min養(yǎng)分瓊脂60ml/瓶3121℃30min玫瑰紅鈉60ml/瓶2121℃30min比照品養(yǎng)分瓊脂60ml/瓶3121℃30min比照品玫瑰紅鈉60ml/瓶2121℃30min2023031920230323〔一〕試驗(yàn)菌計(jì)數(shù)結(jié)果記錄表檢驗(yàn)工程試驗(yàn)菌計(jì)數(shù)消毒時(shí)間檢驗(yàn)工程試驗(yàn)菌計(jì)數(shù)消毒時(shí)間30min檢驗(yàn)日期20230312記錄日期20230314檢驗(yàn)依據(jù)2023XIJ：微生物限度檢查√□細(xì)菌總數(shù)培育基名稱養(yǎng)分瓊脂培育溫度30～35℃培育時(shí)間18~24h√□霉菌總數(shù)培育基名稱玫瑰紅鈉培育溫度23～28℃培育時(shí)間48~72h結(jié)果陰性結(jié)果特別，需查明緣由并重進(jìn)展檢驗(yàn)。結(jié)論----備注----1110-5稀釋2310-6稀釋1 2 3101-7稀釋2 3陰性1備注大腸埃希菌9298117426743131634654特別金黃色葡萄球菌不行計(jì)數(shù)成片3463成片2182成片特別枯草芽孢桿菌1721399958成片4470804648特別1110-4稀釋2310-5稀釋1 2 310-6稀釋1 2 3陰性1備注白色念珠菌不行計(jì)數(shù)2862512435462563特別黑曲霉---------------------------------復(fù)核人：許麗鑾檢驗(yàn)人：小組成員檢驗(yàn)工程試驗(yàn)菌計(jì)數(shù)消毒時(shí)間檢驗(yàn)工程試驗(yàn)菌計(jì)數(shù)消毒時(shí)間30min檢驗(yàn)日期20230317記錄日期20230319檢驗(yàn)依據(jù)2023XIJ：微生物限度檢查√□細(xì)菌總數(shù)培育基名稱養(yǎng)分瓊脂培育溫度30～35℃培育時(shí)間18~24h2110-5稀釋23110-6稀釋23110-7稀釋231備注大腸埃希菌264184--106118--1517--0--培育基名稱玫瑰紅鈉培育溫度23～28℃培育時(shí)間48~72h2110-4稀釋23110-5稀釋23110-6稀釋231備注白色念珠菌不行計(jì)數(shù)--208185--5256--0--黑曲霉1115133543120--金黃色葡萄球菌198金黃色葡萄球菌198201--3451--712--0--枯草芽孢桿菌不行計(jì)數(shù)--109180--20--0--√□霉菌總數(shù)結(jié)果經(jīng)檢驗(yàn)細(xì)菌酵母菌10-6霉菌10-4能用來(lái)檢驗(yàn)結(jié)論符合要求備注〔二〕菌種傳代及試驗(yàn)菌計(jì)數(shù)結(jié)果總表試驗(yàn)用菌種菌種菌種接種至試驗(yàn)用菌種菌種菌種接種至稀釋用溶液稀釋級(jí)計(jì)數(shù)□大腸埃希菌［CMCC(B)44102］［CMCC(B)26003］□枯草芽孢桿菌［CMCC(B)63501］□白色念珠菌［CMCC(F)98001］□黑曲霉［CMCC(F)98003］2改進(jìn)馬丁液體培育基0.9%無(wú)菌生理鹽水10-61改進(jìn)馬丁液體培育基0.9%無(wú)菌生理鹽水10-4傳代至cfu/ml2養(yǎng)分肉湯培育基0.9%無(wú)菌生理鹽水10-6162養(yǎng)分肉湯培育基0.9%無(wú)菌生理鹽水10-6102養(yǎng)分肉湯培育基0.9%無(wú)菌生理鹽水10-654〔三〕培育基適用性檢查結(jié)果記錄表編號(hào)：20230320試驗(yàn)菌株試驗(yàn)菌株平皿號(hào)被檢培育基比照培育基回收率%被檢培育基與形態(tài)大小比較埃希菌13131--223√□全都□不全都平均值27--陰性0成片特別11361602160280--平均值148220陰性01特別11011052120106--平均值陰性03特別1606126858107.6%平均值64陰性00--1982121784%平均值陰性00--葡萄球菌葡萄球菌√□全都□不全都孢桿菌√□全都□不全都念珠菌√□全都□不全都菌√□全都□不全都判定標(biāo)準(zhǔn)結(jié)論70%，且菌落形態(tài)、大小應(yīng)與比照培育基上的菌落全都□被檢培育基符合規(guī)定?！醣粰z培育基不符合規(guī)定。試驗(yàn)菌株平皿號(hào)被檢培育基試驗(yàn)菌株平皿號(hào)被檢培育基比照培育基回收率%被檢培育基與形態(tài)大小比較11114√□大腸埃希菌2平均值12991.3%√□全都□不全都陰性00--√□金黃色1101373.7%√□全都246平均值7陰性00--1211821922100%平均值2020陰性00--1----2------平均值----陰性------1------2------平均值------葡萄球菌□不全都葡萄球菌□不全都孢桿菌√□全都□不全都念珠菌□全都□不全都菌□全都□不全都陰性------判定標(biāo)準(zhǔn)結(jié)論70%，且菌落形態(tài)、大小應(yīng)與比照培育基上的菌落全都√□被檢培育基符合規(guī)定?！醣粰z培育基不符合規(guī)定。序號(hào)日期滅菌內(nèi)容滅菌時(shí)間&條件/℃操作人序號(hào)日期滅菌內(nèi)容滅菌時(shí)間&條件/℃操作人備注1202303100.9%生理鹽水養(yǎng)分肉湯改進(jìn)馬丁液體培育基養(yǎng)分瓊脂培育基30min121℃玫瑰紅鈉瓊脂22023031750%甘油0.9%生理鹽水30min121℃養(yǎng)分瓊脂培育基玫瑰紅鈉瓊脂3202303190.9%生理鹽水養(yǎng)分瓊脂培育基30min121℃玫瑰紅鈉瓊脂4 20230323 0.9%生理鹽水玫瑰紅鈉瓊脂

30min 121℃序號(hào)日期滅菌內(nèi)容序號(hào)日期滅菌內(nèi)容滅菌時(shí)間&條件/℃操作人備注120230310試管2h180℃220230316刻度吸管2h180℃320230319培育皿2h180℃4202303232h180℃〔五〕培育箱的使用記錄儀器名稱：振蕩培育箱日期日期培育內(nèi)容儀器型號(hào)BPMJ-250F120230310大腸埃希菌枯草芽孢桿菌白色念珠菌黑曲霉培育條件消毒參數(shù)操作人/h24±2/℃29±1方式無(wú)時(shí)間/min無(wú)使用時(shí)間使用狀況----開(kāi)頭正常完畢正常220230311大腸埃希菌枯草芽孢桿菌白色念珠菌黑曲霉培育條件消毒參數(shù)操作人/h24±2/℃29±1方式滅時(shí)間/min30使用時(shí)間使用狀況----開(kāi)頭正常完畢正常儀器名稱：生化培育箱日期1 20230312

培育內(nèi)容大腸埃希菌

儀器型號(hào)培育條件

BPMJ-25F消毒參數(shù)

操作人金黃色葡萄球菌 培育時(shí)間 培育溫度枯草芽孢桿菌 /h /℃ 白色念珠菌 18~24 29±1 無(wú)黑曲霉

min無(wú)使用時(shí)間 使用狀況開(kāi)頭 -- --

開(kāi)頭 完畢正常 正常2 20230317 大腸埃希菌

培育條件 消毒參數(shù)

操作