DB35T 1793-2018海水中縮二脲的測定分光光度法和液相色譜-串聯(lián)質譜法

ICS07.060A45DB35福建省地方標準DB35/T1793—2018海水中縮二脈的測定

分光光度法和液相色譜-串聯(lián)質譜法Detenninationofbiuretinseawater一SpectrophotometricmethodandLC-MS/MSmethod2018-11-22發(fā)布 2019-02-22實施福建省市場監(jiān)督管理局福建省"地方標準

海水中縮二月尿侖価定g

分光光度法和液相色譜一串聯(lián)質譜法，DB35/T1793—2018*2018年11月第一版2018年11月第一次印刷DB35/T1793—2018目次TOC\o"1-5"\h\z前言 II1范圍 12規(guī)范性引用文件 13試驗方法 1附錄A（資料性附錄）縮二脲的多反應監(jiān)測（MRM）色譜圖和質譜圖 6DB35/T1793DB35/T1793—2018DB35/T1793DB35/T1793—2018本標準按照GB/T1.1—2009給岀的規(guī)則起草。本標準由福建省海洋與漁業(yè)局提岀并歸口。本標準起草單位：莆田市海洋與漁業(yè)環(huán)境監(jiān)測站、福建省海洋環(huán)境與漁業(yè)資源監(jiān)測中心。本標準主要起草人：張麗、張?zhí)炻劇⒅茺?、陳金飛、黃東仁、林秋生、林振華、顏志山、李青俞。DB35/T1793DB35/T1793—201822DB35/T1793DB35/T1793—201822DB35/T1793DB35/T1793—201811海水中縮二脈的測定分光光度法和液相色譜-串聯(lián)質譜法1范圍本標準規(guī)定了海水中縮二脲的測定方法：分光光度法和液相色譜-串聯(lián)質譜法。本標準適用于河口及近岸海水中縮二脲的測定。分光光度法適用于縮二脲含量較高的海水；液相色譜-串聯(lián)質譜法適用于縮二脈含量較低的海水。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的應用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB17378.3—2007海洋監(jiān)測規(guī)范第3部分：樣品采集、貯存與運輸3試驗方法3.1一般規(guī)定除非另有說明，在分析中使用的化學試劑為分析純，水為符合GB/T6682規(guī)定的一級水。3.2分光光度法3.2.1方法原理縮二月尿在硫酸銅、酒石酸鉀鈉的堿性溶液中生成紫紅色絡合物，在波長為550nm處測定其吸光值，計算樣品中縮二脈的濃度。'3.2.2試劑和溶液3.2.2.1氫氧化鈉(NaOH)?3.2.2.2四水合酒石酸鉀鈉(NaKCMCV4H：0)七3.2.2.3五水合硫酸銅(CuS04-5H20)?3.2.2.4無水碳酸鈉(Na"。3.2.2.5酒石酸鉀鈉堿性溶液(100g/L):稱取80.0g氫氧化鈉(32.2.1夕溶解于500mL水中，冷卻后，加入100g酒石酸鉀鈉(3.2.2.2)，待完全溶解后，用水稀釋至1L,混勻.靜置過夜，使用前用定性濾紙過濾。3.2.2.6硫酸銅溶液(30g/L):稱取30g硫酸銅(3.2.2.3)溶解于水中，用定性濾紙過濾，用水稀釋至1L?3.2.2.7縮二脈(GHN0/標準物質(CAS：108-19-0):純度〉98.0%?3.2.2.8縮二月尿標準溶液(2000mg/L):準確稱取2.000g縮二月尿(3.2.2.7)溶解于水，轉移至L容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。該標準溶液臨用前配制。2.3儀器設備2.3.1恒溫水浴鍋：可控溫度30°C±5°C。2.3.2分光光度計：可見光分光光度計（具3cm吸收池）。2.3.3分析天平：分度值為0.0001go2.3.4天平：分度值為0.01go2.3.5定性濾紙。2.3.6玻璃器皿：100mL具塞比色管，100mL量筒，100mL燒杯。2.4樣品采集和保存按照GB17378.3—2007執(zhí)行，采集250mL海水于棕色具塞玻璃瓶中，于4C下密閉冷藏。2.5分析步驟2.5.1標準曲線具體步驟如下:a） 分別移取0mL、0.50mL>1.00mL>2.50mL、5.00mL、10.0mL、20.0mL、30.0mL縮二脲標準溶液（3.2.2.8），置于100mL比色管中，用適量水稀釋。依次加入10.0mL酒石酸鉀鈉堿性溶液（3.2.2.5）和10.0mL硫酸銅溶液（3.2.2.6），稀釋至刻度，搖勻。各比色管中縮二脈濃度依次為0mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、50.0mg/L、100mg/L、200mg/L、400mg/L、600mg/L。b） 將上述比色管于30°C+5°C水浴20min,期間多次搖動混勻。水浴后30min內，選550nm波長，3cm吸收池，以水作參比，測定上述溶液的吸光值4,其中零濃度為標準空白吸光值』0。c） 以吸光值（4—』。）為縱坐標，相應的縮二月尿濃度（mg/L）為橫坐標，得線性回歸方程。2.5.2樣品的測定具體步驟如下：a） 量取80.0mL（K）水樣于10QrL燒效，依次加入0.15g碳酸鈉（3.2.2.4）和0.60g氫氧化鈉（3.2.2.1），混勻，靜置2h后，用定性濾紙過濾；b） 將過濾后的水樣移入100mL比色管中，依々%'入10.9mL酒石酸鉀鈉堿性溶液（3.2.2.5）和10.0mL硫酸銅溶液（3.2.2.6）,用水定容至刻度，搖勻。按3.2.5.1b）的步驟測定上述溶液的吸光值4。2.5.3空白試驗用水，按3.2.5.2的步驟測定分析空白吸光值4。2.6結果計算與表示根據(jù)標準曲線線性回歸方程計算得測定樣中縮二脈的濃度，如式（1）所示。DB35/T1793DB35/T1793—2018#C=Aw-Ab-b

'a式中：C—測定樣中縮二脲的濃度，單位為毫克每升(mg/L)；A—測定樣的吸光值；A——分析空白吸光值；a——標準曲線中的斜率；b——標準曲線中的截距。水樣中縮二脈濃度計算如式(2)所示：八CxVC=V2 (2)式中：C——測定樣中縮二脲的濃度，單位為毫克每升(mg/L)；C——水樣中縮二脲的濃度，單位為毫克每升(mg/L)；V——量取水樣的體積，單位為毫升(mL)；佑——定容體積，單位為毫升(mL)。3.2.7精密度和準確度本方法測定結果的相對標準偏差小于5%，回收率90.0%?110%。本方法檢岀2.00mg/L，定量限6.70mg/Lo3.3液相色譜-串聯(lián)質譜法3.3.1方法原理水樣中的縮二月尿經固相萃取柱富集凈化，乙月青溶液定容，液相色譜-串聯(lián)質譜儀測定，外標法定量。3.3.2試劑和溶液3.3.2.1氮氣(霧化氣):純度N99.999%。3.3.2.2氮氣(輔助氣)：純度N9時。3.3.2.3縮二脈(GHNCU標準物質(。辱.：108-T9-0):純度〉98.0%?3.3.2.4乙臘(CH3CN):色譜純。3.3.2.5冰乙酸(CH3C00H):優(yōu)級純。3.3.2.6無水乙酸饑(CH3C00NH4)優(yōu)級純。3.3.2.7乙酸饑緩沖溶液(0.2mmol/L):稱取0.0154g無水乙葛咬(3.3.2.6)溶解于1000mL水中，用冰乙酸(3.3.2.5)調pH到4.0。3.3.2.8乙月青溶液(4+1):將4體積的乙月青(3.3.2.4)同1體積的水混勻。3.3.2.9縮二月尿標準儲備溶液(500mg/L):準確稱取0.0500g縮二月尿(3.3.2.3)溶解于水中，轉移至100mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。置4°C冰箱中保存。3.3.2.10縮二脈標準工作溶液(20mg/L):移取縮二脈標準儲備溶液(3.3.2.9)2.00mL至50mL容量瓶中，用乙月青溶液(3.3.2.8)稀釋至刻度，搖勻。該標準工作溶液臨用前配制。3.3.3儀器設備3.3.3.1分析天平：分度值為0.0001go3.3.3.2濾膜：0.45卩m醋酸纖維濾膜。3.3.3.3pH計。3.3.3.4固相萃取柱：OasisHLB，6mL，500mg，或性能相當者。3.3.3.5固相萃取裝置。3.3.3.6氮氣吹干儀。3.3.3.7針頭過濾器：備孔徑0.45卩m有機相濾膜。3.3.3.8液相色譜串聯(lián)質譜儀：配備電噴霧離子源(ESI)o3.3.4樣品采集和保存樣品采集和保存按照3.2.4。3.3.5分析步驟3.3.5.1儀器條件3.3.5.1.1色譜參考條件色譜柱：POLARISNH2柱(2.1mmX100mm,3.0卩m,或性能相當者)；柱溫：35°C；進樣量：10uL；流動相：A相乙酸俊緩沖溶液(3.3.2.7)；B相乙臘(3.3.2.4)；等度洗脫，流動相比例A：B=45：55(V/V),流速：0.2mL/min?3.3.5.1.2質譜參考條件電噴霧電離ESI正離子模式；電噴霧電壓：4000V；霧化氣：氮氣(3.3.2.1),30psi；輔助氣：氮氣(3.3.2.2),流速10L/min；加熱毛細管溫度：300°C,掃描模式：多反應監(jiān)測(MRM),母離子m/z104,定量子離子m/z61,定性子離子m/z44.1；裂解電壓：60V；碰撞能量：m/z104—61為5eV,m/z104—44.1為38eV?3.3.5.2標準曲線分別移取0.250mL、0.500mL、1.00mT、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL縮二脈標準工作溶液(3.3.2.10),置于10mL容量瓶中，用乙月青溶液(3.3.2.8)稀釋至刻度，搖勻。各容量瓶中縮二脈濃度依次為0.500mg/L、1.00mg/L、2.00mg/L、400舞,L、6.00mg/L、8.00mg/L、10.0mg/L,用液相色譜-串聯(lián)質譜儀測定。標準溶液色譜圖參見附錄A3.3.5.3樣品的測定具體步驟如下：水樣用0.45皿濾膜過濾，量取10.0mL過濾后的水樣，過HLB固相萃取柱(過柱前依次用5mL甲醇，5mL純水活化)，流速不超過3mL/min,棄去流岀液，真空狀態(tài)下將固相萃取柱抽至近干，用6mL乙臘(3.3.2.4)分兩次洗脫，流速不超過2mL/min；將洗脫液收集到10mL具塞玻璃管中，于60。氮氣吹干，用1.0mL乙臘溶液(3.3.2.8)復溶，過0.45皿有機相濾膜，用液相色譜-串聯(lián)質譜儀測定。3.3.5.4空白試驗用水，按3.3.5.3的步驟測定分析空白。3.3.6結果計算與表示采用外標法定量，單位為mg/"水樣中縮二脲濃度計算如式（3）所示:(3)式中：C——水樣中縮二脲的濃度，單位為毫克每升（mg/L）；C——標準曲線得到的色譜濃度，單位為毫克每升（mg/L）；V——提取液濃縮后定容體積，單位為毫升（mL）；V——量取水樣的體積，單位為毫升（mL）。3.3.7精密度與準確度本方法測定結果的相對標準偏差小于5%，0.35mg/L?；厥章?0.0%?110%。本方法檢岀限0.10mg/L，定量限3.4注意事項本方法執(zhí)行中應注意如下事項：—接觸過高濃度樣品的樣品瓶及器皿需用銘酸洗液浸泡洗滌；—縮二脈常溫下微溶于水，所以配制縮二脈標準溶液時要適當加熱溶解。附錄A