常用培養(yǎng)基的制備（動物微生物與免疫）

常用培養(yǎng)基的制備目錄/CONTENTS1培養(yǎng)基的類型3制備培養(yǎng)基的基本程序2制備培養(yǎng)基的基本要求培養(yǎng)基是用人工方法將多種物質(zhì)按照各類微生物生長的需要而合成的一種混合營養(yǎng)基質(zhì)。01培養(yǎng)基的類型培養(yǎng)基類型液體培養(yǎng)基將細(xì)菌生長繁殖所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)直接溶解于水，不加凝固劑制成的培養(yǎng)基為液體狀態(tài)，即為液體培養(yǎng)基。用于擴(kuò)增純培養(yǎng)的細(xì)菌確定生長曲線

培養(yǎng)基類型固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入2%-3%的瓊脂，使培養(yǎng)基凝固成固體狀態(tài)，固體培養(yǎng)基可根據(jù)需要制成平板培養(yǎng)基、斜面培養(yǎng)基和高層培養(yǎng)基等。細(xì)菌的分離、菌落特征觀察、藥敏試驗以及活菌計數(shù)用于菌種保存用于細(xì)菌的某些生化試驗培養(yǎng)基類型半固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入少量（通常為0.3%-0.5%）的瓊脂，凝固后培養(yǎng)基呈半固體狀態(tài)。細(xì)菌運(yùn)動性觀察菌種短期保存

培養(yǎng)基類型基礎(chǔ)培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基含有細(xì)菌生長繁殖所需要的最基本的營養(yǎng)成分，可供大多數(shù)細(xì)菌人工培養(yǎng)用。肉湯培養(yǎng)基普通瓊脂培養(yǎng)基蛋白胨水

培養(yǎng)基類型營養(yǎng)培養(yǎng)基在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入葡萄糖、血液、血清、酵母浸膏及生長因子等，用于培養(yǎng)營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌。鮮血瓊脂培養(yǎng)基血清瓊脂培養(yǎng)基巧克力培養(yǎng)基

培養(yǎng)基類型基礎(chǔ)培養(yǎng)基利用各種細(xì)菌分解糖、蛋白質(zhì)的能力及其代謝產(chǎn)物不同，在培養(yǎng)基中加人某種特殊營養(yǎng)成分和指示劑，以便觀察細(xì)菌生長后發(fā)生的變化，從而鑒別細(xì)菌。伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基麥康凱培養(yǎng)基三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基

培養(yǎng)基類型選擇培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某些化學(xué)物質(zhì)，有利于需要分離的細(xì)菌的生長，抑制不需要細(xì)菌的生長，用來將某種或某類細(xì)菌從混雜的細(xì)菌群體中分離出來。SS瓊脂培養(yǎng)基

培養(yǎng)基類型厭氧培養(yǎng)基專性厭氧菌不能在有氧環(huán)境中生長，將培養(yǎng)基與空氣及氧隔絕或降低培養(yǎng)基中的氧化還原電勢，可供厭氧菌生長。肝片肉湯培養(yǎng)基皰肉培養(yǎng)基02制備培養(yǎng)基的基本要求制備培養(yǎng)基的基本要求選擇所需的營養(yǎng)物質(zhì)

制備的培養(yǎng)基應(yīng)含有細(xì)菌生長繁殖所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)。制備培養(yǎng)基的基本要求調(diào)整pH

培養(yǎng)基的pH應(yīng)在細(xì)菌生長繁殖所需的范圍內(nèi)。細(xì)菌最適pH7.2-7.6。制備培養(yǎng)基的基本要求均質(zhì)透明

均質(zhì)透明的培養(yǎng)基便于觀察細(xì)菌生長性狀及生命活動所產(chǎn)生的變化。制備培養(yǎng)基的基本要求不含抑菌物質(zhì)

制備培養(yǎng)基所用容器不應(yīng)含有抑菌物質(zhì)，所用容器應(yīng)潔凈，無洗滌劑的殘留，最好不用鐵制或銅制容器。所用的水應(yīng)是蒸餾水或去離子水。制備培養(yǎng)基的基本要求滅菌處理

培養(yǎng)基及盛培養(yǎng)基的玻璃器皿必須徹底滅菌，避免雜菌污染，以獲得純的目標(biāo)菌。03制備培養(yǎng)基的基本程序制備培養(yǎng)基的基本程序配料溶化測定及糾正PH值過濾分裝滅菌無菌檢驗冷藏備用制備培養(yǎng)基的基本程序以配制基礎(chǔ)培養(yǎng)基（1000ml固體）為例：配料表1、牛肉膏：3-5g2、蛋白胨：10g3、氯化鈉:5g4、蒸餾水：1000ml5、瓊脂：20-30g制備培養(yǎng)基的基本程序溶化1、在白瓷缸中加入80%蒸餾水放在電爐上加熱至40度左右；2、加入蛋白胨和氯化鈉，攪拌溶解；3、將帶有牛肉膏的稱量紙扔入溶液中，攪拌溶解，將稱量紙取出；4、加入瓊脂粉，攪拌溶解,定容1000ml。5、攪拌過程中，白瓷缸一直放在電爐上加熱，可適當(dāng)調(diào)節(jié)電爐溫度，防治液體沸騰溢出；注意玻璃棒的攪拌方向應(yīng)一直為順勢針或逆時針，攪拌頻率適中，防止糊底。制備培養(yǎng)基的基本程序測定及糾正PH值（1）將溶化的培養(yǎng)基稍冷卻至60℃左右，快速用精確pH值試紙測量溶液的pH值；（2）如為酸性，滴加1mol/L氫氧化鈉中和酸。在滴加1mol/L氫氧化鈉后，應(yīng)充分搖勻，再用試紙測定，直至調(diào)到pH在所需的范圍內(nèi)。調(diào)節(jié)pH值至7.4-7.6之間。注：培養(yǎng)基在高溫滅菌后pH值會降低0.2個單位。制備培養(yǎng)基的基本程序過濾（1）在分裝器上固定2-3層的紗布；（2）將白瓷缸中的液體趁熱通過紗布倒入分裝器中。制備培養(yǎng)基的基本程序分裝（1）通過控制分裝器膠管上的閥門進(jìn)行分裝；（2）斜面培養(yǎng)基：分裝到試管中，分裝量為試管總長度的1/4，蓋上膠塞，幾個為一捆用牛皮紙包扎好待滅菌。（3）平板培養(yǎng)基：先分裝到三角瓶中，分裝量為三角瓶容積的1/2，蓋上膠塞，用牛皮紙包扎好滅菌；滅完菌后，在無菌環(huán)境下趁熱倒入無菌的平皿（高度3-5mm）中，放置在水平臺上輕輕晃勻，冷卻。制備培養(yǎng)基的基本程序滅菌

通常采用高壓蒸汽滅菌法，可殺滅包括芽胞在內(nèi)的所有微生物，是滅菌效果最好、應(yīng)用最廣的滅菌方法。滅菌的溫度為121.3℃，壓強(qiáng)是0.103MP，作用時間為15-30分鐘。制備培養(yǎng)基的基本程序無菌檢驗

將滅菌的培養(yǎng)基放置37℃培養(yǎng)箱中24-48小時，無菌落或者菌苔長出，證明滅菌成功。制備培養(yǎng)基的基本程序冷藏備用

經(jīng)過無菌檢驗的培養(yǎng)基可放置在4℃冰箱中冷藏，保質(zhì)期1個月。細(xì)菌的革蘭氏染色操作注意事項(1)矯正全部培養(yǎng)基pH時，不可應(yīng)用低濃度的氫氧化鈉溶液，否則由于加入的量較大，培養(yǎng)基