集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)微生物檢驗(yàn)技術(shù)講義

集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)微生物檢驗(yàn)技術(shù)

主題室內(nèi)空氣中的微生物微生物在空氣中的傳播集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)微生物衛(wèi)生指示菌的檢測(cè)室內(nèi)空氣中的微生物1、來(lái)源人的生命活動(dòng)人的勞作活動(dòng)室內(nèi)環(huán)境地面來(lái)源2、傳播附著于塵埃附著于鼻腔和口腔噴出的飛沫小滴上附著于飛沫表面蒸發(fā)后所形成的“飛沫核”上3、種類(lèi)分類(lèi)舉例細(xì)菌革蘭氏陰性細(xì)菌耶爾森氏菌屬鼠疫耶爾森氏菌軍團(tuán)菌屬嗜肺軍團(tuán)菌腸桿菌科克雷伯氏菌，枸櫞酸桿菌，變形桿菌鮑特菌屬百日咳桿菌革蘭氏陰性厭氧無(wú)芽孢桿菌無(wú)菌性肺炎立克次氏體Q熱立克次氏體衣原體鸚鵡熱衣原體革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌葡萄球菌屬金黃色葡萄球菌鏈球菌屬肺炎鏈球菌分枝桿菌屬結(jié)核分枝桿菌棒狀桿菌屬白喉棒狀桿菌需氧芽孢桿菌屬炭疽桿菌支原體肺炎支原體真菌（酵母菌、霉菌）青霉屬、枝孢菌屬、曲霉屬、金黃擔(dān)子屬、鏈格孢屬等病毒RNA病毒小RNA病毒科柯薩奇病毒?？瞬《颈遣《竟跔畈《究迫撕粑拦跔畈《菊巢《究屏鞲胁《靖闭巢《究迫傺撞《?，麻疹病毒，副流感病毒DNA病毒腺病毒科腺病毒動(dòng)物塵螨等原生動(dòng)物、昆蟲(chóng)肢體殘留物植物花粉集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)微生物衛(wèi)生指示菌的檢測(cè)冷卻水、冷凝水中的嗜肺軍團(tuán)菌空調(diào)送風(fēng)中細(xì)菌總數(shù)、真菌總數(shù)、β-溶血性鏈球菌空調(diào)風(fēng)管表面細(xì)菌總數(shù)、真菌總數(shù)中央空調(diào)與軍團(tuán)病世界上的多起軍團(tuán)病的暴發(fā)與中央空調(diào)冷卻塔有關(guān)。冷凝水同樣為軍團(tuán)菌的生長(zhǎng)提供一個(gè)適宜的環(huán)境。軍團(tuán)菌伯杰氏細(xì)菌分類(lèi)最新歸為一個(gè)科，一個(gè)屬，共有42個(gè)種，60多個(gè)血清型。其中有22種是從病人分離的。嗜肺軍團(tuán)菌占22種引發(fā)病例的絕大多數(shù)（90%）。米克戴德軍團(tuán)菌占6-8%，其它約占2%。另外較主要的還有博茲曼軍團(tuán)菌、杜莫夫軍團(tuán)菌、長(zhǎng)灘軍團(tuán)菌、約旦軍團(tuán)菌、高爾曼軍團(tuán)菌、非利軍團(tuán)菌、阿尼沙軍團(tuán)菌、詹姆斯敦軍團(tuán)菌、紅光軍團(tuán)菌及橡樹(shù)嶺軍團(tuán)菌等。嗜肺軍團(tuán)菌目前已發(fā)現(xiàn)有15個(gè)血清型，從病人分離最多的是1型。軍團(tuán)菌分布

極其廣泛，但都與水有關(guān)。野外的池、溪、河、泉水都能分離出此菌，在生活環(huán)境中的自來(lái)水、貯水箱水、淋浴水、桑拿浴水、鍋爐房排氣管的冷凝水中都有此菌存在。特別是空調(diào)系統(tǒng)冷卻塔、循環(huán)貯水池、冷凝水幾乎是此菌的“長(zhǎng)住地”。軍團(tuán)菌抵抗力

在無(wú)芽孢細(xì)菌中此菌屬對(duì)自然環(huán)境因素抵抗力較強(qiáng)。能在自然水體和空調(diào)、水暖設(shè)備的水中長(zhǎng)期存活。在普通自來(lái)水中可存活400天以上，在60℃左右甚至在火山口附近的水塘里都能發(fā)現(xiàn)軍團(tuán)菌的蹤跡。波恩大學(xué)的研究人員發(fā)現(xiàn)該菌是醫(yī)院下水道的“生物膜”組成成分之一。對(duì)常用消毒劑敏感。軍團(tuán)菌生物學(xué)性狀革蘭氏染色陰性桿菌，無(wú)芽孢、無(wú)莢膜，菌體大小為0.3-0.9X2-20微米，有一至數(shù)根極或次極鞭毛，其細(xì)胞壁中側(cè)鏈脂肪酸占有高比例（80%-90%，一般為20%），這點(diǎn)與其它革蘭氏染色陰性桿菌不同。軍團(tuán)菌培養(yǎng)物特性1、軍團(tuán)菌的生長(zhǎng)繁殖，除一般細(xì)菌要求的營(yíng)養(yǎng)外，需要半胱氨酸和鐵鹽。2、鈉對(duì)其生長(zhǎng)不利。3、對(duì)PH的要求嚴(yán)格，培養(yǎng)接種前培養(yǎng)基的PH要控制在6.9～7.0。（有機(jī)緩沖劑ACES，PH很穩(wěn)定，不用調(diào)都可以。）4、最適生長(zhǎng)溫度35℃，生長(zhǎng)溫度范圍25～42℃。培養(yǎng)物特性5、專(zhuān)性需氧6、代謝很慢7、菌落特點(diǎn)通常在3天（72小時(shí)）可見(jiàn)小菌落，4天（96小時(shí)）則發(fā)育成圓形，邊緣整齊，表面稍隆起，光滑、濕潤(rùn)，在黑色培養(yǎng)基的背景下，呈乳白色微帶藍(lán)灰的典型軍團(tuán)菌菌落，此時(shí)菌落直徑一般可達(dá)2～３mm。菌落有光澤，粘稠，用接種環(huán)可拉起粘絲。培養(yǎng)物特性軍團(tuán)菌屬的典型生物學(xué)共性有8項(xiàng)：BCYE瓊脂上生長(zhǎng)；血瓊脂上不生長(zhǎng)；革蘭氏染色陰性；生長(zhǎng)需要L-半胱氨酸；硝酸鹽還原陰性；脲酶陰性；不發(fā)酵糖；過(guò)氧化氫酶陽(yáng)性軍團(tuán)菌的檢驗(yàn)程序

采樣樣品富集樣品處理

BCYEα或GVP瓊脂平板上兩天以后生長(zhǎng)的菌落作G染色次日生長(zhǎng)的菌落棄去球菌和G+桿菌都不是軍團(tuán)菌G-桿菌

缺半胱氨酸的BCYEα瓊脂BCYEα瓊脂

生長(zhǎng)的不是軍團(tuán)菌不生長(zhǎng)生長(zhǎng)

極可能是軍團(tuán)菌,應(yīng)作玻片凝集及全面鑒定

軍團(tuán)菌的檢驗(yàn)程序1、采樣2、富集：膜過(guò)濾法、離心法3、處理：直接涂布、酸處理、熱處理4、鏡下觀(guān)察：（菌落形態(tài)、革蘭氏染色）5、菌落驗(yàn)證6、鑒定顯微鏡觀(guān)察菌落生長(zhǎng)情況，初步在BCYE瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落為毛玻璃樣，具有多型性，一般革蘭氏染色不易著色的陰性小桿菌。軍團(tuán)處菌病桂的流兇行病隙學(xué)傳染嶼源：被遣污染末的各鬧種水頭源。傳播滑途徑：含序軍團(tuán)撐菌的灣氣溶參膠通飽過(guò)空覺(jué)氣由尸人直我接吸選入肺氏泡發(fā)懂病，愧這是段傳播盲軍團(tuán)奇菌病嚇最主遺要的長(zhǎng)形式偷。但秧只<生5um的氣貍?cè)苣z盯微粒賄才能虛進(jìn)入晌肺泡攤引起電發(fā)病兇。能產(chǎn)職生氣盜溶膠朋的情吉況有禁許多舞，較漠重要探的是暗空調(diào)韻冷卻潛塔，市已證托明這報(bào)是多苦次軍披團(tuán)菌悔病爆遇發(fā)流瓣行的貴污染鄙源。迷生活踐飲用范供水垮系統(tǒng)慘帶菌醒也已括證明縫是許晚多醫(yī)以源性投爆發(fā)蕉流行俗的來(lái)嘉源。老因營(yíng)軍團(tuán)舞菌病卸從人談到人憶的傳策播從禿未發(fā)誘生過(guò)家，故探本病胡無(wú)需評(píng)隔離愛(ài)。軍團(tuán)雪菌病彈的流龜行病腰學(xué)易感木人群警：一般嬸來(lái)說(shuō)抄，生輕活用桶水中廟污染瀉了軍代團(tuán)菌懲，對(duì)秒于免門(mén)疫力漠正常鵲的健修康人利，其規(guī)感染班軍團(tuán)挑菌的瞞危險(xiǎn)市性是增很小份的。果但如優(yōu)果菌所株的詳毒力夜增強(qiáng)撓，或標(biāo)者年測(cè)老體叢衰者豪或有困慢性啦消耗團(tuán)性疾徒病等笨抵抗妻力低挽下的男人，迷尤其氏是細(xì)夠胞免巧疫力制低下除者（常如各逆種癌旋癥、旬腎衰知、器血官移雷植患顆者、兩愛(ài)滋徑病等沾），戶(hù)即引四起發(fā)況病或干流行潮。戀現(xiàn)認(rèn)沈?yàn)檐姺艌F(tuán)病甲是人消畜共年患病虜。流行默季節(jié)：夏召、秋完季（末６－拍１０陰月）軍團(tuán)蘋(píng)菌病府的流趙行病陵學(xué)發(fā)病屈率：WH旅O估計(jì)懇為1債2/屈10投萬(wàn)，羅醫(yī)源伍性肺均炎占擇第二舒位，爸25付%，CA略P歐盟絹資料民約1于0%茶。死亡摸率：未旱經(jīng)正范確治遍療時(shí)蒸高達(dá)橫20駝%。串本病狹分布滅于全暮世界娘，但燈流行熔和散沾發(fā)病屑例多復(fù)見(jiàn)于孟美、滑歐各山國(guó)。軍團(tuán)唉菌病軍團(tuán)牢菌病憂(yōu)，共蝕有2諷種臨愧床類(lèi)掠型a、輕型Po吐nt東ia捧c粥fe擾ve糾rb、重癥如肺炎拔型軍團(tuán)傭病的醒一般宗臨床見(jiàn)癥狀遭特征咳嗽拍9慕0%發(fā)熱移9庫(kù)9%呼吸縮慧困難喇5憑0%胸痛喚3殲5%頭痛潑3剛5%肌肉豬疼痛柴3節(jié)5%腹瀉鋸3期5%神經(jīng)成癥狀須3凱5%軍團(tuán)投菌病席的預(yù)探防和嶼治療特效館藥：紅霉斯素、利節(jié)福平界、阿碗奇霉狗素等友脂溶問(wèn)性高董的抗尚生素只有賣(mài)能穿供透細(xì)備胞膜跟而達(dá)睬到胞假內(nèi)高杰濃度想的抗艇生素鳴才有鏈治療確作用信。預(yù)防渾措施唯有麻加強(qiáng)售水源再管理湊，因只為沒(méi)旱有疫悉苗，租空氣葡傳播依也難旨以控梳制?；瘜W(xué)否消毒暈劑：盤(pán)長(zhǎng)期度高濃買(mǎi)度才孫有效挺，但敗易腐扇蝕管斃道，歪只消爭(zhēng)毒表粱面。仍如二皆氧化逮氯等排。物理潤(rùn)消毒咱：如糧紫外惕照射異法，深熱沖夾洗法奧等。生物威消毒財(cái)劑：莫目前淹最好亭方法程，其匯消毒狼效果慰好，冰但費(fèi)筋用高彈。一些稱(chēng)國(guó)家廊關(guān)于竿軍團(tuán)怠軍控北制值刮的規(guī)炎定各類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)水中軍團(tuán)菌安全值的規(guī)定歐洲E.W.G.L.標(biāo)準(zhǔn)冷卻塔系統(tǒng)：軍團(tuán)菌≤1，000cfu/l總菌數(shù)≤10000cfu/ml荷蘭自來(lái)水標(biāo)準(zhǔn)自來(lái)水系統(tǒng)：軍團(tuán)菌≤50cfu/l新加坡標(biāo)準(zhǔn)冷卻塔、噴泉系統(tǒng)：軍團(tuán)菌≤10，000cfu/l日本厚生勞動(dòng)省標(biāo)準(zhǔn)溫泉水標(biāo)準(zhǔn)：軍團(tuán)菌≤100cfu/l澳大利亞標(biāo)準(zhǔn)冷卻塔系統(tǒng)：軍團(tuán)菌≤10，000cfu/l總菌數(shù)≤100000cfu/ml中國(guó)大陸衛(wèi)生部標(biāo)準(zhǔn)冷卻水、冷凝水：嗜肺軍團(tuán)菌不得檢出β-鋤溶血童性鏈調(diào)球菌定義靈：經(jīng)（演35津~3螞7）桐℃，希（2擦4~蹈48座）h培養(yǎng)豬，在粗血平避板上題形成職呈灰副白色偵，表輛面突昌起直秧徑的聚細(xì)小澆菌落殼，菌像落透圓明或蹄半透杏明，攜表面腰光滑鑄有乳肥光；親菌落怖周?chē)饔忻鲬{顯的叉（2蓋~4鉗）mm界限繡分明取、完戀全透咐明的拆的無(wú)信色溶箏血環(huán)羊。鏡醫(yī)檢為確革蘭芳氏陽(yáng)院性無(wú)抽芽孢始球菌寺，圓放形或越卵圓避形，畝呈鏈陵?duì)钆畔擦?。?義溶血嘆性鏈維球菌β-過(guò)溶血秘性鏈任球菌墾屬鏈菌球菌泛屬，檔血清書(shū)型為藏A、今B、時(shí)C、崖E、未F、劣G、差H、躁K、傍L、農(nóng)M、黑O、逗P、褲Q、宵R、堅(jiān)S、疤T（回C多動(dòng)糖體什分型千），賴(lài)其中呈對(duì)人啟致病秀菌約個(gè)90掀%屬料A群雄。注意粘與甲劃型和急丙型稱(chēng)鏈球?yàn)榫捻瀰^(qū)分泥?？照{(diào)非送風(fēng)短中的暮細(xì)菌洽總數(shù)定義用儀臂器法緩采集先集中秒空調(diào)駛通風(fēng)革系統(tǒng)旗送風(fēng)土中的血細(xì)菌賭，計(jì)夾數(shù)在令營(yíng)養(yǎng)潛瓊脂斃培養(yǎng)轎基上獻(xiàn)經(jīng)3悉5~閱37抹℃、蝴48話(huà)小時(shí)團(tuán)培養(yǎng)溜所形懂成的伙菌落符數(shù)，壤以每鑰立方奧米空票氣中致菌落毀形成殿單位劃（cf棚u/周m3)報(bào)告鋪?？照{(diào)蓬送風(fēng)鐮中的杯真菌蕩總數(shù)定義用撞妥擊式猛空氣捆采樣柳器法鳥(niǎo)采集懲室內(nèi)滔空氣富，計(jì)謹(jǐn)數(shù)在侄沙氏垮瓊脂都培養(yǎng)吵基上影經(jīng)2尚8℃蓮(5性~7挑)天佩培養(yǎng)科所形扔成的項(xiàng)菌落毒數(shù)，帖換算精為每束立方樸米室暮內(nèi)空揮氣中棍真菌慚總數(shù)晝，以cf并u/膏m3報(bào)告睛。空調(diào)暮風(fēng)管駝細(xì)菌摟總數(shù)浸和真奧菌總凱數(shù)檢羊測(cè)原理施：通嚷過(guò)擦劇拭法梁或機(jī)兄器人蕩采樣婚法，驅(qū)采集儉風(fēng)管漢表面踢單位嫂面積站(5場(chǎng)0cm2)的微予生物龍，得晴出空斥調(diào)風(fēng)傾管細(xì)伙菌總機(jī)數(shù)和暢真菌父總數(shù)騙，以cf睛u/轟m2報(bào)告空調(diào)郊風(fēng)管嶺細(xì)菌倦