臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)緒論

教學(xué)目標(biāo)與要求一、掌握臨床免疫學(xué)與臨床免疫檢驗(yàn)的定義，掌握抗原、抗體及免疫細(xì)胞等免疫學(xué)基本要素的基本特征。二、掌握臨床免疫檢驗(yàn)在臨床醫(yī)學(xué)中的重要價(jià)值。三、熟悉臨床免疫檢驗(yàn)的現(xiàn)狀。四、了解臨床免疫檢驗(yàn)中值得關(guān)注的幾個(gè)問(wèn)題。五、了解臨床免疫檢驗(yàn)的發(fā)展方向。當(dāng)前第1頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)CongenitalHarelip當(dāng)前第2頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)Causeofcongenitalharelip(1)nutrientdeficiency:vitamindeficiency(2)medicinetherapy:suchasaspirinandhormone.(3)depression(4)geneticfactors.

(5)infection:suchasrubellavirus.(6)otherfactors:suchasradioactivitysubstance,smokinganddrinketc.當(dāng)前第3頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)TORCH感染T：弓形蟲（toxoplasmagondii）O：其它病原微生物(others)R：風(fēng)疹病毒（rubellavirus）C：巨細(xì)胞病毒（cytomegalovirus）H：?jiǎn)渭儼捳畈《荆╤erpessimplexvirus）TORCH感染病原體?？赏ㄟ^(guò)胎盤傳給胎兒，引起圍生期感染，導(dǎo)致流產(chǎn)、死胎、早產(chǎn)、先天畸形和智力障礙等各種異常結(jié)果。當(dāng)前第4頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)當(dāng)前第5頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)如何發(fā)現(xiàn)TORCH感染呢？

臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)！臨床分子生物學(xué)檢驗(yàn)！病原體分離、培養(yǎng)與鑒定！當(dāng)前第6頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)免疫學(xué)（Immunology）研究免疫系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)與功能,研究免疫應(yīng)答的機(jī)制,研究有效的免疫措施,實(shí)現(xiàn)以防病、治病為目的的一門現(xiàn)代生命科學(xué)。感染性疾病疫苗肝臟疾病腫瘤

……當(dāng)前第7頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)臨床免疫學(xué)澳大利亞于30年前即成立了臨床免疫學(xué)科,將臨床免疫學(xué)工作定為三種形式,即(1)臨床診斷和治療,(2)臨床實(shí)驗(yàn)免疫學(xué),(3)前兩者兼而有之。英國(guó)將臨床免疫學(xué)定義為“對(duì)那些在發(fā)病或治療過(guò)程中涉及免疫系統(tǒng)的疾病的診斷和處理工作”。臨床免疫學(xué)是將免疫學(xué)基礎(chǔ)理論與免疫學(xué)技術(shù)相結(jié)合,用于研究臨床疾病的發(fā)病機(jī)制、診斷與鑒別診斷、治療與預(yù)后判斷等領(lǐng)域的新興的邊緣學(xué)科。當(dāng)前第8頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)臨床免疫學(xué)范疇臨床免疫檢驗(yàn)內(nèi)科免疫學(xué)外科免疫學(xué)兒科免疫學(xué)生殖免疫學(xué)感染免疫學(xué)移植免疫學(xué)免疫病理學(xué)……當(dāng)前第9頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)臨床免疫檢驗(yàn)

(Clinicalimmunoassay)采用免疫學(xué)的技術(shù)與方法檢測(cè)人體內(nèi)的免疫活性物質(zhì)或其它生命化學(xué)物質(zhì),為臨床疾病的診斷，治療方案的選擇以及疾病的預(yù)后判斷提供有效的實(shí)驗(yàn)室依據(jù).當(dāng)前第10頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)SwineInfluenzaA(H1N1)outbreakVirusisbeingdescribedasanewsubtypeofA/H1N1notpreviouslydetectedinswineorhumans當(dāng)前第11頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)SwineFlu:CaseDefinitionsSource:AmericanCDC當(dāng)前第12頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)

學(xué)好臨床免疫檢驗(yàn)，必須掌握“一個(gè)核心，三個(gè)要素與四個(gè)標(biāo)記”。一個(gè)核心：抗原抗體反應(yīng)(Antigen-antibodyinteraction)三個(gè)要素：抗原、抗體和免疫細(xì)胞四個(gè)標(biāo)記：酶標(biāo)記技術(shù)、放射免疫標(biāo)記技術(shù)、熒光素標(biāo)記技術(shù)與化學(xué)發(fā)光標(biāo)記技術(shù)。當(dāng)前第13頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)抗原（Antigen）抗原：能夠刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體和致敏淋巴細(xì)胞，并能在體內(nèi)外與抗體或致敏淋巴細(xì)胞發(fā)生特異性反應(yīng)的物質(zhì)。蛋白質(zhì)脂多糖核酸等當(dāng)前第14頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)抗原的基本特性免疫原性(Immunogenicity):指抗原能夠刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體和致敏淋巴細(xì)胞等免疫活性物質(zhì)的特性.抗原性(Antigenicity):指抗原能在體內(nèi)外與抗體或致敏淋巴細(xì)胞發(fā)生特異性反應(yīng)的特性。當(dāng)前第15頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)抗原特異性的物質(zhì)基礎(chǔ)是抗原決定族（Antigenicitydeterminant）抗原決定族：指存在于抗原表面決定抗原特異性的特殊化學(xué)基團(tuán)。是TCR/BCR及抗體特異性結(jié)合的基本單位，啟動(dòng)免疫應(yīng)答，又稱表位（epitope）。其化學(xué)性質(zhì)、數(shù)目和空間構(gòu)象決定了該抗原的特異性和免疫原性的強(qiáng)弱。當(dāng)前第16頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)當(dāng)前第17頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)抗體

定義：抗體（Antibody，Ab）是機(jī)體在抗原刺激下，由漿細(xì)胞合成與分泌的，能與抗原特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白?；窘Y(jié)構(gòu)（1）四肽鏈（2）NH2-端和COOH-端（3）V區(qū)與C區(qū)當(dāng)前第18頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)當(dāng)前第19頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)可變區(qū)(variableregion):即VL和VH,位于Ig分子的N端,,該區(qū)氨基酸組成與排列順序有較大差異,并決定Ag與Ab的特異性.高變區(qū)(Hypervariableregion):VL和VH中3個(gè)區(qū)域氨基酸組成與排列順序特別容易變化,又稱互補(bǔ)決定區(qū)(CDR),此乃Ag與Ab特異性結(jié)合的部位.恒定區(qū)(Constantregion):同一種屬中,恒定區(qū)氨基酸組成與排列順序恒定.當(dāng)前第20頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)當(dāng)前第21頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)多克隆抗體

（polyclonalantibody）用含多種抗原決定族的抗原物質(zhì)免疫動(dòng)物，刺激多個(gè)B細(xì)胞克隆所獲得的免疫血清（含多種單克隆抗體的混合物），此為多克隆抗體當(dāng)前第22頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)單克隆抗體

（monoclonalantibody,McAb）借助小鼠B細(xì)胞雜交瘤（hybridoma）技術(shù)，所制備的高度均一（屬同一類、亞類、型別）、單一特異性（僅針對(duì)特定抗原表位）的抗體。

當(dāng)前第23頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)當(dāng)前第24頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)基因工程抗體

（EngineerAntibody）借助于基因重組技術(shù)和蛋白表達(dá)技術(shù),按照人們的意愿在基因水平對(duì)Ig進(jìn)行切割、連接或修飾，組裝成新穎Ab分子，稱為基因工程抗體。當(dāng)前第25頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)鼠IgG的DNA人IgG的DNA

VmCmVhCh

VmCh

鼠源性單抗的V區(qū)，人Ig的C區(qū)。

人-鼠嵌合抗體(chimericantibody)

當(dāng)前第26頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)免疫細(xì)胞免疫細(xì)胞:包括所有參與免疫應(yīng)答或與免疫應(yīng)答有關(guān)的細(xì)胞及其前體細(xì)胞.如造血干細(xì)胞、淋巴細(xì)胞，肥大細(xì)胞以及紅細(xì)胞等。免疫活性細(xì)胞：具有特異性抗原受體，被抗原刺激后能活化、增殖、分化并產(chǎn)生免疫物質(zhì)，發(fā)生特異性免疫應(yīng)答的細(xì)胞。當(dāng)前第27頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)免疫細(xì)胞具有不同的表面標(biāo)志

B細(xì)胞T細(xì)胞BCRTCRCD19、CD21和CD81CD3，CD4或CD8

CD40CD40LB7CD28補(bǔ)體受體CD2絲裂原受體絲裂原受體……

……

當(dāng)前第28頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)當(dāng)前第29頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)免疫細(xì)胞數(shù)目的檢測(cè)免疫細(xì)胞功能的檢測(cè)免疫細(xì)胞的分離當(dāng)前第30頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)二、臨床免疫檢驗(yàn)在臨床醫(yī)學(xué)中具有重要價(jià)值當(dāng)前第31頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)疾病的診斷療效的觀察復(fù)發(fā)的評(píng)估預(yù)后的判斷當(dāng)前第32頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)hepatitisCausesofhepatitisViralHepatitis,A,B,C,D,E,F,G,TTVetc.Otherviruses-CMV,EBV,HSV,Dengueetc.DrugsAlcoholIschaemiaSystemicDiseasesandInfections當(dāng)前第33頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)HBVserologicmarker當(dāng)前第34頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)SLE(Systemiclupuserythematosus)SLEisanautoimmunediseasecharacterizedbyimmunedysregulationresultingintheproductionofantinuclearantibodies(ANA),generationofcirculatingimmunecomplexes,andactivationofthecomplementsystem.InSLEthereisapredilectionforclinicalinvolvementofthejoints,skin,kidney,brain,serosa,lug,heartandgastrointestinaltract.

Butterflyerythema當(dāng)前第35頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)TheAmericanRheumatologyAssociation(ARA)criteria

當(dāng)前第36頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)ANA

當(dāng)前第37頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)ArealstoryabouttumormarkerCharacter:ApastcolleagueworkingintheUniversityofAlabamaatBirmingham.Hydatidiformmole(葡萄胎)?Suggection:TimeThefrequencyofdetectingβ-hCGFirstthreemonth1/weekNextninemonth1/monthNextyear1/halfyear當(dāng)前第38頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)當(dāng)前第39頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)HIVandAIDS當(dāng)前第40頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)CD4+CellcountandCD4+/CD8+InpatientswithAIDS,totalTcellsand

CD4+Cellsdecreasesignificance(<1.5×109/Land<2.0~4.0×108/L,furthermore,

CD4+/CD8+<1.0.)Monitorcurativeeffect.當(dāng)前第41頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)當(dāng)前第42頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)當(dāng)前第43頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)對(duì)應(yīng)的章節(jié)二十二章:感染免疫及其免疫檢測(cè)二十三章:超敏反應(yīng)疾病及其免疫檢測(cè)二十四章:自身免疫性疾病及其免疫檢測(cè)二十五章:免疫增殖性疾病及其免疫檢測(cè)二十六章:免疫缺陷性疾病及其免疫檢測(cè)二十七章:腫瘤免疫及其免疫檢測(cè)二十八章:移植免疫及其免疫檢測(cè)當(dāng)前第44頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)三、臨床免疫檢測(cè)的現(xiàn)狀近年來(lái)，隨著生物學(xué)、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和計(jì)算機(jī)技術(shù)，特別是單克隆抗體技術(shù)與免疫標(biāo)記技術(shù)的快速發(fā)展，免疫學(xué)檢驗(yàn)取得了明顯的進(jìn)步，大量新的檢測(cè)方法及檢測(cè)指標(biāo)不斷出現(xiàn)，并向自動(dòng)化、微量化及定量化方向飛速發(fā)展.當(dāng)前第45頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)早期的免疫檢驗(yàn)方法逐漸退出檢驗(yàn)市場(chǎng)。免疫標(biāo)記技術(shù)在免疫檢測(cè)中占主導(dǎo)地位。免疫檢驗(yàn)自動(dòng)化已逐漸普遍。免疫檢驗(yàn)的對(duì)象不斷增加。當(dāng)前第46頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)早期的免疫檢驗(yàn)方法逐漸退出檢驗(yàn)市場(chǎng)早期的一些免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)，常通過(guò)肉眼觀察是否有沉淀、凝集以及溶血現(xiàn)象的發(fā)生來(lái)進(jìn)行免疫學(xué)分析，如免疫擴(kuò)散、凝集實(shí)驗(yàn)以及經(jīng)典的補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)等，盡管這些方法具有成本低廉，操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，但是大部分只是半定量、定性實(shí)驗(yàn)，且需要耗費(fèi)較長(zhǎng)時(shí)間，越來(lái)越難以滿足臨床診斷的需要，已慢慢地被隨后發(fā)展起來(lái)的各種先進(jìn)的免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)所代替。當(dāng)前第47頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)凝集反應(yīng)（Agglutinationreaction）當(dāng)前第48頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)當(dāng)前第49頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)免疫標(biāo)記技術(shù)

在免疫檢測(cè)中占主導(dǎo)地位

標(biāo)記免疫技術(shù):所謂免疫標(biāo)記技術(shù)是將可微量檢測(cè)的標(biāo)記物，如放射性核素、熒光素以及酶等，標(biāo)記一定的抗原或抗體，用以檢測(cè)未知的抗體或抗原,如放射免疫技術(shù),酶標(biāo)記免疫技術(shù),熒光素標(biāo)記免疫技術(shù)等.當(dāng)前第50頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)當(dāng)前第51頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)FIGURE6-15Separationoffluorochrome-labeledcellswiththeflowcytometerwhichusesalaserbeam&lightdetector.:differentAgindifferentcells/differentlevelsofAginthesametypeofcell→fluorescenceintensity/thesizeofcells.labeledwithfluorescein(green)labeledwithrhodamine(red)eachdotrepresentsacell(smallelectricalchange)(excitingthefluorochrome)↓eachdroplet(cell)emitsthefluorescence10.Flowcytometry&Fluorescence當(dāng)前第52頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)免疫檢驗(yàn)自動(dòng)化已逐漸普遍免疫自動(dòng)化分析是指用自動(dòng)化儀器對(duì)待測(cè)物進(jìn)行分析，它應(yīng)包括兩方面的內(nèi)容：一是加樣、測(cè)定以及儀器洗滌的自動(dòng)化；二是數(shù)據(jù)處理的自動(dòng)化。當(dāng)前中國(guó)已能見到一系列的全自動(dòng)免疫分析儀，

當(dāng)前第53頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)當(dāng)前第54頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)免疫自動(dòng)化分析與傳統(tǒng)的手工操作

相比較具有明顯的優(yōu)勢(shì)

免疫自動(dòng)化分析快速、標(biāo)本報(bào)告時(shí)間縮短，一般數(shù)小時(shí)內(nèi)即可向臨床匯報(bào)檢驗(yàn)結(jié)果。免疫自動(dòng)化分析尤適用于大批量樣品的測(cè)定，可節(jié)約大量的人力、物力，而且同一標(biāo)本可同時(shí)用于檢測(cè)幾種待測(cè)物，血清用量少，通常以μl計(jì)。免疫自動(dòng)化分析重復(fù)性好、干擾因素少，結(jié)果判斷更加準(zhǔn)確、客觀，更有利于質(zhì)量控制。免疫自動(dòng)化分析能夠避免標(biāo)本對(duì)人的感染及標(biāo)本之間的相互污染。當(dāng)前第55頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)免疫檢驗(yàn)的對(duì)象不斷增加

經(jīng)典的免疫活性物質(zhì)其它生命化學(xué)物質(zhì)IgGCERIgMTrfIgACRPC3AATC4α1MG當(dāng)前第56頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)

HAPATITISCANCERFERTILITYPROTEINSTDMs/DRUGSTYROID,ANEMIAHBV

HCVM1071010-1510-4

g/L

AFPFERCEACA199PRLHCGLHFSHGHMyoglobinRHFIgGC3ASOCERTRFAAGQUIGENAMIPHYFT3FT4DigT3T4TSHProg

免疫分析譜當(dāng)前第57頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)對(duì)應(yīng)的章節(jié)第二章~二十二章當(dāng)前第58頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)四、臨床免疫檢驗(yàn)中

值得關(guān)注的幾個(gè)問(wèn)題臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)如何快速應(yīng)對(duì)重大突發(fā)性傳染病？蛋白芯片用于免疫檢測(cè)值得期待。應(yīng)建立有免疫檢驗(yàn)特色的質(zhì)量控制體系。

當(dāng)前第59頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)免疫學(xué)檢驗(yàn)如何快速應(yīng)對(duì)重大突發(fā)性傳染?。拷陙?lái)，重大突發(fā)性傳染病偶有發(fā)生，如SARS，禽流感以及豬鏈球菌感染等。這些疾病不僅嚴(yán)重危害人體健康，而且具有極高的傳染性。如何盡快準(zhǔn)確地為臨床提供病原體感染的標(biāo)志物，成為廣大醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作者的重要任務(wù)。由于單克隆抗體的飛速發(fā)展，眾多的床旁測(cè)試也采用免疫學(xué)檢測(cè)，如HCG、HBsAg以及TB-AB的檢測(cè)等。因此建立重大突發(fā)性傳染病的快速檢測(cè)或床旁測(cè)試試劑值得免疫學(xué)檢驗(yàn)工作人員的關(guān)注。當(dāng)前第60頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)SARS（severeacuterespiratory

syndrome）病原體的確定與檢測(cè)現(xiàn)狀當(dāng)前第61頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)電子顯微鏡發(fā)現(xiàn)為

某種冠狀病毒當(dāng)前第62頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)基因組測(cè)序鎖定為

新型冠狀病毒當(dāng)前第63頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)復(fù)制出相應(yīng)的動(dòng)物模型當(dāng)前第64頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)建立新的檢測(cè)方法PCR法間接免疫熒光法ELISA當(dāng)前第65頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)當(dāng)前第66頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)快速免疫檢驗(yàn)與重大突發(fā)性傳染病當(dāng)前第67頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)過(guò)敏原千千萬(wàn)???當(dāng)前第68頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)蛋白芯片用于免疫檢測(cè)值得期待蛋白芯片是將大量蛋白質(zhì)分子按預(yù)先設(shè)置的排列固定于一種載體表面行成微陣列，根據(jù)蛋白質(zhì)分子間特異性結(jié)合的原理，構(gòu)建微流體生物化學(xué)分析系統(tǒng)，以實(shí)現(xiàn)對(duì)生物分子的準(zhǔn)確、快速、大信息量的檢測(cè)。當(dāng)前第69頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期五\0點(diǎn)當(dāng)前第70頁(yè)\共有80頁(yè)\編于星期