生物安全柜的選擇、使用及維護(hù)1

目的掌握生物安全柜的使用和維護(hù)熟悉生物安全柜的檢測方法當(dāng)前第1頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)需要解決的六個(gè)問題為什么選擇生物安全柜？選擇什么樣的生物安全柜？怎樣放置生物安全柜？怎樣使用生物安全柜？怎樣維護(hù)生物安全柜？怎樣檢測生物安全柜？當(dāng)前第2頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)選擇生物安全柜的理由工作對象具有生物危害原代培養(yǎng)物、菌毒種以及診斷性標(biāo)本等-------具有潛在感染性的實(shí)驗(yàn)材料屬于《人間傳染的病原微生物名錄》中第一、二、三和四類微生物當(dāng)前第3頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)人間傳染的病原微生物名錄當(dāng)前第4頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)類與級對應(yīng)表------GB19489-2004《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》第一類第二類第三類第四類當(dāng)前第5頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)選擇生物安全柜的理由容易產(chǎn)生氣溶膠的工作行為對液體或半流體進(jìn)行搖動(dòng)、傾注或攪拌操作時(shí)，將液體滴加到固體表面上或另一種液體中時(shí)，在對瓊脂板劃線接種、用吸管接種細(xì)胞培養(yǎng)瓶，采用多道加樣器將感染性試劑的混懸液轉(zhuǎn)移到微量培養(yǎng)板中，對感染性物質(zhì)進(jìn)行勻漿及渦旋振蕩，對感染性液體進(jìn)行離心，進(jìn)行動(dòng)物操作時(shí)。當(dāng)前第6頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)選擇生物安全柜的理由生物安全柜能夠阻止工作中所產(chǎn)生的氣溶膠對外環(huán)境或者操作者本身產(chǎn)生危害，還可以減少樣本之間由于氣溶膠產(chǎn)生的交叉污染。當(dāng)前第7頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜基本工作原理定向氣流：風(fēng)幕HEPA濾器：

一種一次性使用，框架內(nèi)有多重褶迭的干性過濾材料的過濾器，對0.3微米氣溶膠的過濾效能達(dá)到99.97%。保證排出氣體和內(nèi)循環(huán)氣體的無菌狀態(tài)。當(dāng)前第8頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的選擇要素：樣品的生物危害第一、二、三和四類病原微生物保護(hù)樣品I級生物安全柜不保護(hù)樣品其他是否涉及到揮發(fā)性、放射性核素或化學(xué)品當(dāng)前第9頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的選擇（一）當(dāng)前第10頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的選擇（二）當(dāng)前第11頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)II級A2型生物安全柜室內(nèi)空氣污染的空氣HEPA濾過的空氣正壓污染空氣當(dāng)前第12頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的選擇（三）生物安全柜的寬度：工作需要；空間費(fèi)用：安全柜本身；運(yùn)輸費(fèi)用；附件費(fèi)用（支架，紫外燈，椅子等）；排風(fēng)和送風(fēng)系統(tǒng)：風(fēng)機(jī)和管道（II級B2）認(rèn)證：

NSF49美國

EN12469歐洲

YY0569－2005中國當(dāng)前第13頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜放置五個(gè)遠(yuǎn)離點(diǎn)（氣流）門風(fēng)扇空調(diào)開著的窗戶人員活動(dòng)頻繁的區(qū)域擺放要求穩(wěn)固的平臺或支架兩側(cè)、后面和上端留30cmAirRegister設(shè)備首選位置候選位置工作臺設(shè)備視頻當(dāng)前第14頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)反面教材當(dāng)前第15頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用要求個(gè)人防護(hù)要求柜內(nèi)物品的擺放紫外燈明火工作前準(zhǔn)備工作中操作及溢出處理工作結(jié)束后處理當(dāng)前第16頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用個(gè)人防護(hù)要求：在使用生物安全柜時(shí)必須穿個(gè)人防護(hù)服，戴手套（手套應(yīng)套在隔離衣的外面）最好帶口罩和帽子，根據(jù)需要帶防護(hù)眼罩或者面罩。視頻當(dāng)前第17頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用生物安全柜內(nèi)物品擺放原則按照從潔凈區(qū)到污染區(qū)的方向擺放所有物品盡可能放在工作臺后部將廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤子以及吸濾瓶等體積較大的物品放在柜內(nèi)某一側(cè)前進(jìn)氣格柵不能被紙、儀器設(shè)備或者其他物品阻擋當(dāng)前第18頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用潔凈區(qū)半污染區(qū)污染區(qū)當(dāng)前第19頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用對紫外燈的三點(diǎn)要求：每周進(jìn)行清潔，除去可能影響殺菌效果的灰塵和污垢每次生物安全柜的認(rèn)證，要檢查紫外線強(qiáng)度，以確保有適當(dāng)?shù)墓獍l(fā)射量房間中有人時(shí)一定要關(guān)閉紫外燈，以保護(hù)眼睛和皮膚，避免因不慎暴露而造成傷害當(dāng)前第20頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用工作前需要準(zhǔn)備的內(nèi)容：

首先紫外燈照射30分鐘關(guān)紫外燈，打開安全柜的日光燈和風(fēng)機(jī)，用消毒劑對生物安全柜的內(nèi)表面進(jìn)行消毒擦拭將實(shí)驗(yàn)中需要用到的物品集中用消毒劑擦拭后放在臺面相應(yīng)位置上（切記勿阻擋風(fēng)口?。┑却?min，凈化工作區(qū)的空氣污染物視頻當(dāng)前第21頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用工作時(shí)操作規(guī)范：雙臂垂直緩慢進(jìn)入前面的開口，在生物安全柜中等待大約一分鐘，以使安全柜調(diào)整完畢后才可對物品進(jìn)行處理。所有操作應(yīng)在離前窗10cm以外的工作區(qū)進(jìn)行。廢棄物應(yīng)丟棄在生物安全柜內(nèi)的處理容器中視頻當(dāng)前第22頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用操作時(shí)注意事項(xiàng)：避免胳膊在前開口處快速移動(dòng)和頻繁進(jìn)出。盡量避免污染的物品進(jìn)入潔凈區(qū)。在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行操作時(shí)，不能進(jìn)行文字工作。盡量減少操作者身后的人員活動(dòng)。視頻當(dāng)前第23頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用溢出處理：

GB19489—2007《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》中生物安全柜內(nèi)溢出時(shí)的處理方法滴狀溢出或體積不足1mL的，可簡單地用消毒劑擦洗。當(dāng)前第24頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用大量溢出，則要做特殊的處理：1、使生物安全柜保持開啟狀態(tài)。2、在溢出物上覆蓋浸有消毒劑的吸水材料，作用大約10分鐘以發(fā)揮消毒作用。3、在安全柜內(nèi)對污染的手套消毒后，脫下手套。如果衣服已經(jīng)污染，也要先脫下消毒。穿戴干凈的手套和衣服作如下進(jìn)一步的清潔工作。當(dāng)前第25頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用4、用消毒劑噴灑或擦拭安全柜內(nèi)壁、工作表面以及前視窗的內(nèi)側(cè)。作用20min后，擦干消毒劑并將擦拭物置于生物危害袋中。5、如果溢出情況需要浸泡接液槽，則不得現(xiàn)場清理接液槽。應(yīng)報(bào)告實(shí)驗(yàn)室主管后采用適當(dāng)?shù)臍怏w消毒方式。當(dāng)前第26頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用6、將所有清理用物品以及防護(hù)服進(jìn)行高壓消毒。用消毒肥皂和水洗手和暴露皮膚。7、立即通知實(shí)驗(yàn)室主管。如果溢出物流入安全柜內(nèi)，可能需要對安全柜進(jìn)行更為廣泛的消毒處理。視頻當(dāng)前第27頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的使用工作結(jié)束后的要求：將安全柜繼續(xù)運(yùn)行至少3min來完成“凈化”過程。將柜內(nèi)物品移出前，應(yīng)使用有效的消毒劑擦拭每天實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對生物安全柜的內(nèi)壁和臺面進(jìn)行擦拭。等待5分鐘后，關(guān)閉前窗，關(guān)燈，關(guān)風(fēng)機(jī)，紫外燈照射30分鐘。視頻當(dāng)前第28頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的維護(hù)保持生物安全柜表面清潔和無污染狀態(tài)用70%酒精或者合適的消毒劑擦拭內(nèi)壁和工作臺面；如果使用漂白劑等腐蝕性消毒劑后，需要用無菌水再次進(jìn)行擦拭除去殘余的消毒劑；定期抬起工作臺面對其下面的區(qū)域進(jìn)行清潔；消毒后，用玻璃清潔器對前窗玻璃和紫外燈進(jìn)行清潔。當(dāng)前第29頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的維護(hù)定期保養(yǎng)：用濕布擦拭內(nèi)壁和工作臺面；每年按需要更換紫外燈和日光燈；每年至少認(rèn)證一次

——《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室—安全要求》——YY0569-2005生物安全柜

——《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊》（第三版，2004）視頻當(dāng)前第30頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的維護(hù)生物安全柜的污染清除甲醛、過氧化氫熏蒸等方法應(yīng)由有資質(zhì)的專業(yè)人員來進(jìn)行在以下情況下需要進(jìn)行熏蒸：①在檢查和維修之前②在更換HEPA濾器之前③在移動(dòng)安全柜之前④安全柜被嚴(yán)重地污染⑤變換使用目的⑥長時(shí)間未用⑦需要熏蒸的其它時(shí)間當(dāng)前第31頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的檢測什么情況下需要檢測？應(yīng)該由什么人來進(jìn)行檢測？需要進(jìn)行哪些內(nèi)容的檢測？當(dāng)前第32頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的檢測生物安全柜的檢測的情況發(fā)生在：最初的購買安裝完畢年檢移動(dòng)修理當(dāng)前第33頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的檢測生物安全柜的檢測應(yīng)由有資質(zhì)的單位檢測在美國必須有美國NSF授權(quán)的單位；沒有NSF授權(quán)，也得有以下經(jīng)歷的：有過檢測經(jīng)驗(yàn)；參加過技術(shù)課程或者廠商培訓(xùn)會(huì)；參加過象CETA水平的商業(yè)會(huì)議；檢測設(shè)備擁有的校準(zhǔn)證書在我國有檢測資質(zhì)的單位：國家食品藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心和軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院當(dāng)前第34頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的檢測安全柜防護(hù)效果的評估涉及到以下內(nèi)容：①安全柜的完整性②人員、產(chǎn)品及交叉污染保護(hù)③HEPA過濾器的泄漏④向下氣流的速度⑤正面氣流的速度⑥負(fù)壓／換氣次數(shù)⑦氣流的煙霧模式⑧警報(bào)和互鎖系統(tǒng)⑨電氣安全⑩光照度還包括紫外線強(qiáng)度、噪聲水平、震動(dòng)性、集液槽泄漏、柜體穩(wěn)定性（包括柜體抗翻倒、柜體抗變形、工作臺面抗變形、柜體抗向前傾倒）、溫升、電機(jī)與風(fēng)機(jī)等性能的測試。當(dāng)前第35頁\共有38頁\編于星期四\19點(diǎn)生物安全柜的檢測①人員、產(chǎn)品和交叉污染保護(hù)測試②下降氣流流速測試③流入氣流流速測試④工作舒適度有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)：噪音、照度和震動(dòng)測試⑤高效過濾器完整性測試⑥柜體泄漏的測試⑦氣流煙霧