神經(jīng)生物學(xué)緒論演示文稿

神經(jīng)生物學(xué)緒論演示文稿當(dāng)前第1頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)神經(jīng)生物學(xué)緒論當(dāng)前第2頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第3頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第4頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第5頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)61.1概念與任務(wù)

在分子、細(xì)胞、組織器官和整體等多個(gè)水平上研究神經(jīng)系統(tǒng)的形態(tài)和功能的學(xué)科。當(dāng)前第6頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)7任務(wù)：研究神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)分子水平、細(xì)胞水平和系統(tǒng)水平的變化過(guò)程，以及這些過(guò)程的整合作用，直至最復(fù)雜的高級(jí)功能，如學(xué)習(xí)、記憶等目的：了解人類(lèi)神經(jīng)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和功能，以及行為與心理活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ)，闡明行為和心理活動(dòng)的神經(jīng)機(jī)制，為改善人類(lèi)感覺(jué)與運(yùn)動(dòng)效率，提高對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)疾病的防治水平以及增進(jìn)健康服務(wù)當(dāng)前第7頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)8內(nèi)容:

神經(jīng)解剖、生理、藥理、病理、生物化學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)及分子生物學(xué)等跨學(xué)科的基本理論研究

特點(diǎn)：1、包羅了基礎(chǔ)神經(jīng)科學(xué)的諸多學(xué)科2、并非若干傳統(tǒng)學(xué)科簡(jiǎn)單和機(jī)械地組合3、在傳統(tǒng)神經(jīng)科學(xué)的基礎(chǔ)之上成長(zhǎng)和發(fā)展起來(lái)的一門(mén)新興的綜合性的邊緣學(xué)科當(dāng)前第8頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)9主要研究領(lǐng)域神經(jīng)生物化學(xué)（neurobiochemistry）神經(jīng)生理學(xué)（neurophysiology）細(xì)胞神經(jīng)生物學(xué)（cellularneurobiology）分子神經(jīng)生物學(xué)（molecularneurobiology）發(fā)育神經(jīng)生物學(xué)（developmentalneurobiology）比較神經(jīng)生物學(xué)（comparativeneurobiology）系統(tǒng)神經(jīng)生物學(xué)（systematicneurobiology）當(dāng)前第9頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)10人類(lèi)對(duì)自身學(xué)習(xí)記憶思維等能力的探索了解腦是怎樣工作對(duì)整個(gè)生物科學(xué)的激勵(lì)作用對(duì)唯心主義哲學(xué)的挑戰(zhàn)更清楚的了解人類(lèi)自身，提高人的素質(zhì)，緩解人類(lèi)矛盾為什么要重視神經(jīng)生物學(xué)？當(dāng)前第10頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)111.2神經(jīng)生物學(xué)發(fā)展和展望

當(dāng)前第11頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第12頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第13頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第14頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第15頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第16頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第17頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第18頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第19頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第20頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第21頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第22頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)23神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)研究19世紀(jì)80年代Cajal建立起神經(jīng)元理論19世紀(jì)末和20世紀(jì)初，Sherrington關(guān)于“反射”“突觸”、“神經(jīng)傳遞”的概念20世紀(jì)20到50年代通過(guò)高倍電鏡對(duì)突觸結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié)的觀察當(dāng)前第23頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第24頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第25頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)PicturesofSpanishanatomistRamonyCajal當(dāng)前第26頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)27FirstpageofSherrington’sfamousbook,TheIntegrativeActionoftheNervousSystem(1906);thisisthe5theditionof1947當(dāng)前第27頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第28頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)292.神經(jīng)興奮的電傳導(dǎo)1791年Galvani就發(fā)現(xiàn)了生物電現(xiàn)象19世紀(jì)電生理方法測(cè)定神經(jīng)電傳導(dǎo)的速度，發(fā)現(xiàn)“全或無(wú)”定律等20世紀(jì)30年代Young以烏賊大神經(jīng)纖維作為研究材料，定量的測(cè)量神經(jīng)電傳導(dǎo)的電阻、電位及其在刺激前后的變化等40年代Hodgkin、Huxley和Katz等研究Na+、K+與神經(jīng)傳導(dǎo)的關(guān)系，測(cè)定靜息電位、動(dòng)作電位等當(dāng)前第29頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)30意大利科學(xué)家伽伐尼（LuigiGalvani,1737～1798)DiagramofGalvani

'sfroglegs(~1770s)當(dāng)前第30頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)1937Young推測(cè)可以使用巨大烏賊的軸突來(lái)了解神經(jīng)細(xì)胞JohnZacharyYoung(1907-1997)當(dāng)前第31頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)32A.LHodgkinA.F.HuxleyTheysharedthe1963NobelPrizeinPhysiologyorMedicineforworkonthetransmissionofsignalsfromnervecells.JohnCarewEccles

當(dāng)前第32頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)333.神經(jīng)化學(xué)遞質(zhì)研究1905年Eliot發(fā)現(xiàn)電脈沖到達(dá)肌肉連結(jié)點(diǎn)時(shí)釋放了腎上腺素

1921年Loewi的蛙心實(shí)驗(yàn)，直接證明在心肌上的交感和副交感神經(jīng)末梢分別釋放出兩種不同的化學(xué)物質(zhì)1932年前后，Dale的系列的實(shí)驗(yàn)，取得了乙酰膽堿存在于內(nèi)臟器官神經(jīng)末梢的直接證據(jù)1934～1935年Cannon等提取交感神經(jīng)末梢遞質(zhì)，1946年Eule闡明其為去甲腎上腺素1960年以來(lái)，對(duì)腦內(nèi)遞質(zhì)開(kāi)展了不少研究，發(fā)現(xiàn)了約30種不同的遞質(zhì)20世紀(jì)70年代發(fā)現(xiàn)腦啡肽等當(dāng)前第33頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)344.腦功能研究

1893年起Sherrington研究反射弧，提出抑制的概念，并認(rèn)為抑制過(guò)程同興奮過(guò)程同等重要Pavlov在20世紀(jì)初建立起“條件反射”的概念，證明條件反射是大腦活動(dòng)的結(jié)果

19世紀(jì)有學(xué)者提出關(guān)于腦功能區(qū)的定位，部分切除狗腦皮層手術(shù)成功，并通過(guò)對(duì)尸體解剖的觀察開(kāi)始研究人大腦皮層功能區(qū)當(dāng)前第34頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)3520世紀(jì)30年代Foerster和Penfield在利用外科手術(shù)在清醒的病人身上，用電刺激大腦的不同部位引起不同反應(yīng)20世紀(jì)40年代Sperry開(kāi)始用貓和猴子做實(shí)驗(yàn)，切斷大腦兩半球間的連接，進(jìn)行觀察。60年代，對(duì)癲癇病人作兩半球割裂治療的觀察當(dāng)前第35頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第36頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)3780年代，Sperry闡明人腦的左半球除具有抽象思維、數(shù)學(xué)運(yùn)算及邏輯語(yǔ)言等各項(xiàng)重要機(jī)能外，還可以在關(guān)系很遠(yuǎn)的資料間建立想象聯(lián)系，在控制神經(jīng)系統(tǒng)方面人腦的左半球也很積極，起著主要作用。還發(fā)現(xiàn)人腦右半球也同樣具有許多高級(jí)功能，如對(duì)復(fù)雜關(guān)系的理解能力、整體的綜合能力、直覺(jué)能力、想象能力等；此外，它還被證實(shí)是音樂(lè)、美術(shù)及空間知覺(jué)的辨識(shí)系統(tǒng)，因此人的右腦蘊(yùn)藏著很大的潛力。當(dāng)前第37頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第38頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)3919世紀(jì)70年代Caton對(duì)兔、貓以及猴的實(shí)驗(yàn)表明大腦普遍存在著電的變化20世紀(jì)開(kāi)始作腦電記錄，Berger發(fā)現(xiàn)有心理活動(dòng)時(shí)（如注意等）腦電波發(fā)生變化20世紀(jì)50年代開(kāi)始，腦電的研究向探索與特定知覺(jué)有關(guān)的信號(hào)方向發(fā)展，開(kāi)始了誘發(fā)電位的研究工作60年代，引入傅里葉分析儀70年代對(duì)人的視覺(jué)、聽(tīng)覺(jué)、甚至嬰兒的感覺(jué)，都有了靈敏的檢查指標(biāo)當(dāng)前第39頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)405.神經(jīng)系統(tǒng)感知研究

20世紀(jì)發(fā)展最快的是中樞神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)外界感覺(jué)的加工、識(shí)別信號(hào)、形成感知測(cè)謊儀當(dāng)前第40頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)百年來(lái)與神經(jīng)科學(xué)有關(guān)的諾貝爾獎(jiǎng)獲得者選介(I)C.S.Sherrington(英)18571850190019502000C.Golgi(意)19261934神經(jīng)元染色方法18431852R.Cajal(西班牙)“神經(jīng)元學(xué)說(shuō)”形態(tài)190619521932?“突觸”定名?“反射”概念?“交互”抑制反射學(xué)說(shuō)生理電生理18891977?感覺(jué)神經(jīng)纖維電活動(dòng)?傳入沖動(dòng)大腦誘發(fā)電位?神經(jīng)控制骨骼肌運(yùn)動(dòng)機(jī)制E.D.Adrian(英)電生理O.Loewi(德英)196118731936（乙酰膽堿）神經(jīng)化學(xué)?蛙心灌流實(shí)驗(yàn)?“迷走物質(zhì)”19681875H.Dale(英)?神經(jīng)末梢分泌?乙酰膽堿ACh神經(jīng)化學(xué)18741965194419631888J.Erlanger(美)H.S.Gasser(美)?陰極射線示波器?神經(jīng)纖維的分類(lèi)ABC19731881W.R.Hess(瑞士)?腦立體定位儀hypothalamus方法學(xué)創(chuàng)新1949電生理OxfCambridge徒手切腦片銀染神經(jīng)元染出神經(jīng)末梢，發(fā)現(xiàn)神經(jīng)元之間無(wú)原生質(zhì)聯(lián)系生理科學(xué)進(jìn)展2001，32：187當(dāng)前第41頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)神經(jīng)藥理學(xué)分子藥理學(xué)百年來(lái)與神經(jīng)科學(xué)有關(guān)的諾貝爾獎(jiǎng)獲得者選介(II)1850190019502000J.C.Eccles(澳大利亞)191419031963A.L.Hodgkin(英)B.Katz(德英)1917A.F.Huxley(英)?細(xì)胞內(nèi)微電極?突觸后電位?抑制性遞質(zhì)突觸?電壓鉗技術(shù)?動(dòng)作電位的離子學(xué)說(shuō)?數(shù)學(xué)方程表述?NM終板電位?遞質(zhì)“量子釋放”1911動(dòng)作電位機(jī)制19051983U.VonEuler(瑞典…)?交感神經(jīng)遞質(zhì)?去甲腎上腺素1970?兒茶酚胺代謝?影響CAs的藥物電生理1912J.Axelrod(美)（兒茶酚胺）神經(jīng)化學(xué)1913(左右腦)R.W.Sperry(美)1981“腦功能側(cè)化”D.Hubel(加美)19261924T.Wiesel(瑞典美)信息加工視皮層E.Neher(德)1991B.Sakmann(德)?大腦視覺(jué)信息加工?視覺(jué)系統(tǒng)發(fā)育的可塑性膜片鉗單通道方法學(xué)?膜片鉗技術(shù)?單個(gè)離子通道電流記錄1999英，澳CambridgeCambridgeLeviMontalcini1986NervegrowthFactor(NGF)(Italy)當(dāng)前第42頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)百年來(lái)與神經(jīng)科學(xué)有關(guān)的諾貝爾獎(jiǎng)獲得者選介(3)1850190019502000192619232000P.Greengard(美)1930E.Kandel(美)A.Carlsson(瑞典)神經(jīng)系統(tǒng)中的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白磷酸化慢突觸傳遞多巴胺當(dāng)前第43頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第44頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)中國(guó)神經(jīng)科學(xué)的發(fā)展

開(kāi)創(chuàng)者:張錫鈞(協(xié)和),馮德培(協(xié)和,上海生理所),張香桐(上海生理所,腦所).兩大事件:·1950:巴甫洛夫“條件反射”學(xué)說(shuō)

·1966-1976:“文化革命”期間主要做“針刺麻醉”研究方向:·痛與鎮(zhèn)痛:北京:北醫(yī),中醫(yī)研究院上海:上醫(yī)大,中科院生理所,腦所，神科所

·視覺(jué):上海:生理所北京:生物物理所

·神經(jīng)內(nèi)分泌:西安:四軍大(垂體前葉)上海:二軍大(甾體受體),北醫(yī)大(神經(jīng)免疫) 其它（發(fā)育，再生，…）當(dāng)前第45頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)雜志:《生理學(xué)報(bào)》70%論文屬神經(jīng)生理 1927年創(chuàng)刊(上海生理所)《中國(guó)神經(jīng)科學(xué)雜志》1998年創(chuàng)刊(上海二軍大)《中國(guó)疼痛醫(yī)學(xué)雜志》1995年創(chuàng)刊(北醫(yī)大)《中國(guó)神經(jīng)解剖雜志》1985年創(chuàng)刊(四軍大解剖系）大型專(zhuān)著:《神經(jīng)科學(xué)綱要》1993年北醫(yī)大韓濟(jì)生主編 (156萬(wàn)字)

《神經(jīng)科學(xué)原理》1999年北醫(yī)大韓濟(jì)生主編 (200萬(wàn)字)當(dāng)前第46頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)1.3特點(diǎn)：（1）神經(jīng)生物學(xué)具有清晰的發(fā)展脈絡(luò)起初是對(duì)腦和神經(jīng)系統(tǒng)的形態(tài)和總體功能的描述和分析；之后有更多的學(xué)科從不同側(cè)面介入其中，日益迅速地把研究推向了細(xì)胞和分子水平。人們已經(jīng)不再停留在現(xiàn)象的描述，而是更著眼于在不同層次上的機(jī)制的分析，從現(xiàn)象深入到機(jī)制是現(xiàn)代自然科學(xué)發(fā)展的共同特點(diǎn)，神經(jīng)生物學(xué)可以說(shuō)是其縮影。當(dāng)前第47頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)（2）作為一門(mén)實(shí)驗(yàn)科學(xué)，神經(jīng)生物學(xué)研究的進(jìn)展在很大程度上有賴(lài)于研究技術(shù)和手段的發(fā)展和完善在20世紀(jì)初，Cajal對(duì)神經(jīng)元形態(tài)的清晰描述，幾乎完全仰仗于Golgi銀染法的應(yīng)用。40年代末，微電極記錄和染色技術(shù)的發(fā)展使人們對(duì)神經(jīng)活動(dòng)的認(rèn)識(shí)出現(xiàn)了革命性的變化。免疫組織化學(xué)方法的應(yīng)用，使對(duì)神經(jīng)遞質(zhì)的研究與形態(tài)學(xué)研究有機(jī)地結(jié)合起來(lái)。當(dāng)前第48頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)膜片鉗位技術(shù)在20世紀(jì)70年代末的發(fā)明和發(fā)展，大大促進(jìn)了對(duì)離子通道的研究，從而使人們對(duì)神經(jīng)活動(dòng)基本過(guò)程——信號(hào)發(fā)生、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、突觸傳遞等的了解奠定在更堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)上。分子遺傳學(xué)方法的不斷更新，不僅使不少遺傳性神經(jīng)、精神疾患的缺損基因的定位得以成功，對(duì)了解特定基因在神經(jīng)系統(tǒng)中的功能也起了重要的推動(dòng)作用。無(wú)創(chuàng)傷腦成象技術(shù)的建立和完善，為認(rèn)識(shí)活體腦的活動(dòng)及分析其機(jī)制，提供了前所未有的有力工具。當(dāng)前第49頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)（3）從神經(jīng)生物學(xué)的發(fā)展史中，找到合適的實(shí)驗(yàn)標(biāo)本很重要早期對(duì)神經(jīng)興奮和動(dòng)作電位傳導(dǎo)規(guī)律的闡明，槍烏賊大神經(jīng)標(biāo)本功不可沒(méi)；對(duì)突觸傳遞過(guò)程的了解，神經(jīng)-肌肉接頭標(biāo)本所提供的信息，則甚于其他任何標(biāo)本。近年來(lái)，對(duì)腦的高級(jí)功能—學(xué)習(xí)和記憶的基本機(jī)制的了解，在許多方面，依賴(lài)對(duì)一種低等的無(wú)脊椎動(dòng)物—海兔的簡(jiǎn)單的神經(jīng)系統(tǒng)的研究。當(dāng)前第50頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)(一)形態(tài)學(xué)方法辣根過(guò)氧化物酶法（horseradishperoxdase,HRP）：

HRP注射于神經(jīng)末梢所在部位，通過(guò)非特異性胞飲方式攝入，逆向運(yùn)至胞體，然后用組織化學(xué)方法顯示?；蚪?jīng)胞體攝入，順向運(yùn)送至末梢部位。1.束路追蹤法1.4研究方法：當(dāng)前第51頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)熒光染料法：主要用作逆向追蹤，其優(yōu)點(diǎn)是可作雙標(biāo)或多標(biāo)。如核黃標(biāo)記胞核，固藍(lán)或熒光金標(biāo)記胞質(zhì)。生物素追蹤法：

一般使用生物素的衍生物作追蹤劑，如生物胞素（biocytin）電泳導(dǎo)入腦內(nèi)被神經(jīng)元攝取，主要用于順向追蹤。該法有效范圍明確，無(wú)過(guò)路纖維吸收問(wèn)題。神經(jīng)生物素（neurobiotin）用于順行、逆行追蹤，運(yùn)送速度較快，靈敏度高。當(dāng)前第52頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)2.免疫組化法(immunohistochemistry)

用特異性抗體顯示組織化學(xué)成分的一種方法。免疫組化法的基本步驟有固定、制片、反應(yīng)三步。常用于顯示各種神經(jīng)肽。3.原位雜交法(insituhybridization)

用于顯示細(xì)胞內(nèi)的mRNA，標(biāo)記物分為同位素和非同位素，同位素有32P，35S，3H。非同位素有生物素(biotin)，地高辛等。當(dāng)前第53頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)4.激光共聚焦顯微鏡

(laserscanningconfocalmicroscopy)

用0.2m的光束可透射厚0.5~1mm的細(xì)胞組織，用于神經(jīng)遞質(zhì)、受體和轉(zhuǎn)運(yùn)體的定位；神經(jīng)元結(jié)構(gòu)的三維重建；活的神經(jīng)細(xì)胞的動(dòng)態(tài)變化；也可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行連續(xù)掃描，顯示細(xì)胞內(nèi)某種成分（如Ca2+

）的變化過(guò)程，線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、染色體等的探測(cè)和分析，DNA、RNA、酶的含量測(cè)定。當(dāng)前第54頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)(二)生理學(xué)方法1.

行為學(xué)方法

行為學(xué)方法是建立在條件反射基礎(chǔ)之上。條件反射是著名的俄國(guó)生理學(xué)家巴甫洛夫于20世紀(jì)初提出的。條件反射是動(dòng)物個(gè)體生活過(guò)程中適應(yīng)環(huán)境的變化，在非條件反射基礎(chǔ)上逐漸形成的。當(dāng)前第55頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第56頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第57頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第58頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)

2.神經(jīng)遞質(zhì)釋放量的測(cè)定腦透析法：

可測(cè)定不同腦區(qū)的多巴胺及其代謝產(chǎn)物，氨基酸，乙酰膽堿，去甲腎上腺素，5－HT等。神經(jīng)肽的測(cè)定較難，主要由于探頭半透膜要求較高。當(dāng)前第59頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)1.電壓鉗(voltageclamp)Hodgkin等，20世紀(jì)50年代電壓電極、電流電極反饋放大器(feedbackamplifer)結(jié)合藥理學(xué)方法

(三)電生理學(xué)方法當(dāng)前第60頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)2.膜片鉗(patchclamp)Neher和Sakmann，1976（nAchR單離子通道電流，1991，Noble）可測(cè)量單通道離子電流現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)：通道的開(kāi)放和關(guān)閉都是突然發(fā)生并似乎是全或無(wú)式的，開(kāi)放的持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)短不一，但都有恒定的電導(dǎo)值。當(dāng)前第61頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)當(dāng)前第62頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)(四)生物化學(xué)方法1.放射免疫法(radioimmunoassay,RIA)

用抗原－抗體反應(yīng)原理，將抗原標(biāo)記上放射性同位素，用來(lái)測(cè)定與此抗原性質(zhì)相同的物質(zhì)。RIA包括以下基本步驟：樣品采集、加樣、反應(yīng)、分離、測(cè)定抗原－抗體復(fù)合物的放射性（cpm）,與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)照計(jì)算待測(cè)物質(zhì)含量。當(dāng)前第63頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)2.高效液相層析

(highperformanceliquidchromatography,HPLC)

利用分子間特異性及可逆性的結(jié)合，將其一方固定于層析的固定相中，使流動(dòng)相中能特異性結(jié)合于該分子的物質(zhì)與其結(jié)合，然后再改變條件，使被分離物質(zhì)洗脫，用一定波長(zhǎng)紫外光檢測(cè)。HPLC是分離分析生物活性物質(zhì)和受體的重要手段。當(dāng)前第64頁(yè)\共有68頁(yè)\編于星期四\20點(diǎn)(五)分子生物學(xué)方法1.基因分子克隆及