醫(yī)學(xué)專題-國(guó)家藥品審評(píng)中心

注射劑的無菌保證

與工藝(gōngyì)研究

國(guó)家(guójiā)食品藥品監(jiān)督管理局

藥品審評(píng)中心黃曉龍

2008.10第一頁，共三十八頁。編輯ppt藥品(yàopǐn)管理法與藥品(yàopǐn)生產(chǎn)2001年2月28日修訂的《藥品管理法》第十條，經(jīng)修訂后明確要求：“藥品必須按照(ànzhào)（原法規(guī)：工藝規(guī)程）國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)和國(guó)務(wù)院藥品監(jiān)督管理部門批準(zhǔn)的生產(chǎn)工藝進(jìn)行生產(chǎn)，…。改變影響藥品質(zhì)量的生產(chǎn)工藝的，必須報(bào)原批準(zhǔn)部門審核批準(zhǔn)?！鄙a(chǎn)工藝的源頭：藥品研發(fā)中經(jīng)工藝研究與驗(yàn)證獲得的申報(bào)工藝第二頁，共三十八頁。編輯ppt目錄一、注射劑的特點(diǎn)二、注射劑的無菌三、相關(guān)知識(shí)(zhīshi)簡(jiǎn)介四、注射劑的無菌保證工藝研究五、總結(jié)第三頁，共三十八頁。編輯ppt一、注射劑的特點(diǎn)(tèdiǎn)不通過人體固有的保護(hù)屏障，直接(zhíjiē)進(jìn)入血液起效快、安全性要求高。無菌嚴(yán)格控制熱原及雜質(zhì)第四頁，共三十八頁。編輯ppt二、注射劑的無菌歷史的教訓(xùn)：1970-1975年，美國(guó)因輸液污染(wūrǎn)導(dǎo)致敗血癥400多起，但問題產(chǎn)品全部通過了無菌檢查。2006年，安徽華源的“欣氟”事件：滅菌工藝與無菌檢查第五頁，共三十八頁。編輯ppt方法本身是否經(jīng)過充分驗(yàn)證——05版藥典的新要求。檢測(cè)結(jié)果有無代表性。抽檢，樣本數(shù)一般為20/批。樣本數(shù)、污染率及通過無菌檢查（取不到(bùdào)污染樣）的概率遵循二項(xiàng)式定律（泊松分布）通過無菌檢查(jiǎnchá)的概率P=(1-q)n式中：q為批產(chǎn)品污染率

n為樣本數(shù)無菌檢查(jiǎnchá)的局限性第六頁，共三十八頁。編輯ppt計(jì)算實(shí)例假設(shè)當(dāng)某批藥品的實(shí)際染菌率為5%時(shí)，如果根據(jù)(gēnjù)通常取樣的數(shù)量為20支，則該批藥品通過無菌檢查的概率P=(1-q)n=（1-0.05）20=0.359

即有35.9%的可能性，該批藥品將會(huì)被判定為無菌。

第七頁，共三十八頁。編輯ppt無菌檢查(jiǎnchá)特性數(shù)據(jù)表編號(hào)污染率通過無菌檢查的概率n=1n=2n=4n=10n=15n=20n=30001595908160463621090816635211231585725220944208064411141577.6422.36560.1%5%中國(guó)藥典現(xiàn)取樣(qǔyàng)數(shù)為：20，如污染率為5%，從曲線得，檢出概率為64%。第八頁，共三十八頁。編輯ppt如何(rúhé)保證注射劑無菌合格呢？第九頁，共三十八頁。編輯ppt質(zhì)量控制(kòngzhì)的三種模式檢驗(yàn)控制質(zhì)量（QualitybyTest）不夠全面生產(chǎn)控制質(zhì)量（QualitybyManufacture）將質(zhì)控延伸(yánshēn)到生產(chǎn)環(huán)節(jié)設(shè)計(jì)控制質(zhì)量（QualitybyDesign，QbD）

全方位的控制、發(fā)展的方向三者互為補(bǔ)充，后者包括前者

第十頁，共三十八頁。編輯ppt保證(bǎozhèng)注射劑無菌的措施研究階段研究設(shè)計(jì)出符合無菌要求的產(chǎn)品（包括合適的劑型、滅菌工藝、包裝材料）——前提與源頭生產(chǎn)(shēngchǎn)階段批產(chǎn)后應(yīng)嚴(yán)格按照研究驗(yàn)證后的工藝進(jìn)行生產(chǎn)第十一頁，共三十八頁。編輯ppt三、相關(guān)知識(shí)(zhīshi)簡(jiǎn)介D值（微生物的耐熱參數(shù)(cānshù)）：在一定溫度下，將微生物殺滅90%所需的時(shí)間，以分鐘為單位。一般小于1分鐘。F0值：產(chǎn)品在121℃下的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間。滅菌率L：某溫度下滅菌1分鐘所對(duì)應(yīng)的F0值。第十二頁，共三十八頁。編輯pptZ=10℃時(shí)，不同(bùtónɡ)溫度下的滅菌率和所相當(dāng)?shù)臏缇鷷r(shí)間溫度（℃）滅菌率L滅菌時(shí)間（分鐘）1211.001.001200.7941.2591150.2513.9841100.07912.6001050.02540.0001000.008125.00第十三頁，共三十八頁。編輯ppt濕熱滅菌法：將物品置于滅菌柜內(nèi)利用高壓(gāoyā)飽和蒸汽、過熱水噴淋等手段使微生物菌體中的蛋白質(zhì)、核酸發(fā)生變性而殺滅微生物的方法。濕熱滅菌法通常分為過度殺滅法和殘存概率法兩種。第十四頁，共三十八頁。編輯ppt過度(guòdù)殺滅法F0不低于12適用于熱穩(wěn)定性好的產(chǎn)品以徹底殺滅任何(rènhé)污染的微生物為實(shí)現(xiàn)無菌的手段無菌保證值不小于6第十五頁，共三十八頁。編輯ppt殘存(cáncún)概率法滅菌(mièjūn)過程8≤F0<12分鐘適用于熱穩(wěn)定性不很好的產(chǎn)品通過控制工藝過程的微生物污染和滅菌工藝參數(shù)使產(chǎn)品無菌無菌保證值不小于6第十六頁，共三十八頁。編輯ppt其它濕熱滅菌(mièjūn)工藝F0值低于8的滅菌工藝熱穩(wěn)定性很差的產(chǎn)品以無菌生產(chǎn)工藝為基礎(chǔ)，滅菌是提高無菌保證(bǎozhèng)水平的輔助手段不計(jì)算F0值，污染概率不大于0.1%除血液制品外，發(fā)達(dá)國(guó)家的大容量注射劑很少采用此類工藝小容量注射劑也較少采用第十七頁，共三十八頁。編輯pptSAL

（無菌保證水平）：產(chǎn)品經(jīng)滅菌后微生物殘存概率的負(fù)對(duì)數(shù)。國(guó)際上規(guī)定，濕熱(shīrè)滅菌法的SAL不得低于6。SAL＝F0/D121–lgN0N0：滅菌前的染菌量

SAL除了和F0有關(guān)，還與染菌量（N0）及所染菌的耐熱參數(shù)（D121）有關(guān)。第十八頁，共三十八頁。編輯pptF0和SAL的關(guān)系：

F0=8N0=100SAL＝8/1–lg100

=6D121=1時(shí)注意：污染菌在不同的產(chǎn)品中的耐熱性可能不同，故驗(yàn)證時(shí)應(yīng)采用實(shí)際的藥液。

eg:嗜熱脂肪芽孢桿菌（常規(guī)D值在分鐘）在復(fù)方(fùfāng)氨基酸注射液中的D值為0.8分鐘左右，在30％的葡萄糖溶液中的D值為2.2分鐘。第十九頁，共三十八頁。編輯ppt無菌保證水平應(yīng)用(yìngyòng)實(shí)例1假定N0為100cfu/瓶，D值為1分鐘，要達(dá)到(dádào)SAL不小于6，滅菌F0值應(yīng)達(dá)到多少？相當(dāng)于115℃下滅菌多少分鐘？F0=（SAL＋lgN0）×D=（6+lg100）×1=8分鐘。換算成115℃下的F0/L115=8/0.25=32分鐘。殘存概率法有效的基礎(chǔ)：N0≤100，D≤1。第二十頁，共三十八頁。編輯ppt某輸液(shūyè)采用110℃，30分鐘的滅菌程序，起始污染微生物仍為100cfu/瓶，D值為0.5分鐘，經(jīng)計(jì)算此時(shí)的無菌保證值和殘存微生物污染的概率為：SAL=F0/D-lgN0=L110×t/D-lg100=0.08×30/0.5-2=2.8殘存微生物的概率為10-2.8＝0.158％通過無菌檢查的概率為(1-0.158％)20=96.9%。無菌檢查的結(jié)果不能保證產(chǎn)品的SAL符合要求（

≤6）。無菌保證水平應(yīng)用(yìngyòng)實(shí)例2第二十一頁，共三十八頁。編輯ppt四、注射劑的無菌保證工藝(gōngyì)研究無菌保證理化指標(biāo)滅菌(mièjūn)和化學(xué)指標(biāo)的平衡點(diǎn)？第二十二頁，共三十八頁。編輯ppt工藝選擇的考慮(kǎolǜ)要點(diǎn)無菌產(chǎn)品必須達(dá)到規(guī)定的無菌保證水平。不得以理化性質(zhì)等硬指標(biāo)來壓無菌的軟指標(biāo)?？勺罱K滅菌產(chǎn)品一定(yīdìng)要首選最終滅菌方式，以保證產(chǎn)品的無菌特性。無菌制造工藝的基本特征是：低安全+高成本。應(yīng)盡可能避免采用。當(dāng)滅菌可能會(huì)造成副產(chǎn)物等問題時(shí)，盡可能從工藝上創(chuàng)造條件，使滅菌成為可行。第二十三頁，共三十八頁。編輯ppt國(guó)食藥監(jiān)注[2008]7號(hào)通知(tōngzhī)

08年1月10日國(guó)家局發(fā)布了化學(xué)藥品注射劑基本技術(shù)要求。國(guó)家局已受理但尚未批準(zhǔn)注冊(cè)的化學(xué)藥品注射劑應(yīng)參照《技術(shù)要求》進(jìn)行研究。已經(jīng)批準(zhǔn)注冊(cè)的化學(xué)藥品注射劑也應(yīng)參照《技術(shù)要求》進(jìn)行相關(guān)研究（完善滅菌工藝等），并在申報(bào)(shēnbào)再注冊(cè)時(shí)提供相關(guān)研究資料。第二十四頁，共三十八頁。編輯ppt劑型(jìxíng)選擇的合理性要權(quán)衡考慮各劑型的無菌保證水平、雜質(zhì)的控制水平、工藝的可行性、臨床使用的方便等。首先要考慮被選劑型可采用(cǎiyòng)的滅菌工藝的無菌保證水平的高低。原則上首選劑型應(yīng)能采用(cǎiyòng)終端滅菌工藝，并保證SAL不小于6。對(duì)于有充分的依據(jù)證明不適宜采用終端滅菌工藝且臨床必需注射給藥的品種，可考慮選擇采用無菌生產(chǎn)工藝的劑型。通常無菌生產(chǎn)工藝僅限于粉針劑或部分小容量注射劑。

第二十五頁，共三十八頁。編輯ppt輸液產(chǎn)品滅菌(mièjūn)工藝的選擇原則

應(yīng)采取終端滅菌工藝，建議首選過度殺滅法（F0≥12）。例如：氯化鈉大輸液。如產(chǎn)品不能耐受，可采用殘存概率法(8≤F0<12)，但均應(yīng)保證產(chǎn)品滅菌后的SAL不小于6。采用其它F0值小于8的終端滅菌條件的工藝，原則上不予認(rèn)可。如產(chǎn)品不能耐受終端滅菌工藝條件，應(yīng)盡量?jī)?yōu)化處方工藝，以改善(gǎishàn)制劑的耐熱性。如確實(shí)無法耐受，則應(yīng)考慮選擇其他劑型，而非大容量注射劑。

第二十六頁，共三十八頁。編輯ppt工藝(gōngyì)驗(yàn)證要求主要包括以下試驗(yàn)：滅菌前微生物污染水平測(cè)定，包括滅菌前產(chǎn)品中的污染菌及其耐熱性；熱穿透試驗(yàn)；微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)：生物指示劑的耐熱性及數(shù)量應(yīng)對(duì)滅菌工藝構(gòu)成(gòuchéng)必要的挑戰(zhàn)。過度殺滅法（F0≥12）不要求此項(xiàng)驗(yàn)證

第二十七頁，共三十八頁。編輯ppt粉針劑的工藝(gōngyì)與驗(yàn)證粉針劑的無菌保證水平應(yīng)能保證SAL不大于10-3。常規(guī)的工藝驗(yàn)證試驗(yàn)包括：培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)：至少在線灌裝三批，每批的批量詳見附表，每瓶產(chǎn)品(chǎnpǐn)均應(yīng)進(jìn)行無菌檢查。除菌過濾系統(tǒng)適應(yīng)性驗(yàn)證：包括過濾系統(tǒng)相容性測(cè)試、過濾前后濾膜完整性測(cè)試，必要時(shí)尚需進(jìn)行濾膜的微生物截留量測(cè)試。

第二十八頁，共三十八頁。編輯ppt附表：培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)的批量(pīliànɡ)與判斷合格的標(biāo)準(zhǔn)批量（瓶）3000475063007760允許染菌的數(shù)量（瓶）0123第二十九頁，共三十八頁。編輯ppt小容量注射劑的工藝(gōngyì)與驗(yàn)證應(yīng)首選終端滅菌工藝，相關(guān)技術(shù)(jìshù)要求同大容量注射劑。如有充分的依據(jù)證明不能采用終端滅菌工藝，且為臨床必需注射給藥的品種，可考慮采用無菌生產(chǎn)工藝，相關(guān)技術(shù)要求同凍干粉針劑。

第三十頁，共三十八頁。編輯ppt歐盟1999年8月正式開始執(zhí)行滅菌方法選擇的決策樹決策樹的作用是在考慮各種復(fù)雜因素的情況下，輔助(fǔzhù)選擇最佳的滅菌方法歐盟滅菌(mièjūn)方法選擇的決策樹第三十一頁，共三十八頁。編輯ppt第三十二頁，共三十八頁。編輯ppt決策樹越往下，風(fēng)險(xiǎn)越大需要提供(tígōng)的研究與驗(yàn)證的證據(jù)也越多第三十三頁，共三十八頁。編輯ppt工藝選擇的基本原則:無菌產(chǎn)品應(yīng)在灌裝到最終容器后進(jìn)行(jìnxíng)最終滅菌（首選）如因產(chǎn)品對(duì)熱不穩(wěn)定不能進(jìn)行最終滅菌時(shí)，可采用最終滅菌方法的替代方法--過濾除菌和/或無菌生產(chǎn)工藝（退而求其次）第三十四頁，共三十八頁。編輯ppt四、研究(yánjiū)中的常見問題劑型選擇不合理無菌保證工藝(gōngyì)選擇不合理無菌保證工藝研究不夠全面與細(xì)致驗(yàn)證不充分或未經(jīng)驗(yàn)證第三十五頁，共三十八頁。編輯ppt五、總結(jié)(zǒngjié)無菌檢查是有局限性的。質(zhì)量源于設(shè)計(jì)(shèjì)、過程控制質(zhì)量對(duì)于保證注射劑的無菌至關(guān)重要。第三十六頁，共三十八頁。編輯ppt謝謝不當(dāng)之處歡迎(huā