生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定

【實(shí)驗(yàn)一】生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定【實(shí)驗(yàn)一】生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定1、可溶性還原糖的鑒定原理：（1）生物組織中普遍存在的可溶性還原糖種類(lèi)較多，常見(jiàn)的有葡萄糖、果糖、麥芽糖，分子內(nèi)都含有游離的具有還原性的半縮醛羥基，因此叫做還原性糖；（2）用斐林試劑只能檢驗(yàn)生物組織中可溶性的還原糖的存在與否。斐林試劑由質(zhì)量濃度為0．1g/mL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0．05g／mL的硫酸銅溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡藍(lán)色的Cu（OH）2沉淀。Cu（OH）2與加入的葡萄糖在加熱的條件下，能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀（3）用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時(shí)，溶液的顏色變化過(guò)程為：淺藍(lán)色—棕色—磚紅色（沉淀）。【實(shí)驗(yàn)原理】2、蛋白質(zhì)的鑒定原理（1）鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時(shí)，常用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質(zhì)量濃度為0．1g/mL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0．01g／mL的硫酸銅溶液。在堿性溶液（NaOH）中，雙縮脲（H2NOC-NH-CONH2）能與銅離子作用，形成紫色或紫紅色的絡(luò)合物，這個(gè)反應(yīng)叫做雙縮脲反應(yīng)。由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵，因此，蛋白質(zhì)都可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)。3．脂肪鑒定的原理：

蘇丹III染液遇脂肪的顏色反應(yīng)為橘黃色，蘇丹IV染液遇脂肪的顏色反應(yīng)為紅色。4、淀粉的鑒定：淀粉遇碘變成藍(lán)色?；衔镌噭┓磻?yīng)顏色注意事項(xiàng)還原糖（葡萄糖、果糖、麥芽糖）斐林試劑磚紅色沉淀甲、乙液要現(xiàn)混合現(xiàn)用、還要50-65℃水浴加熱蛋白質(zhì)雙縮脲試劑紫色無(wú)需加熱、但A液和B液要分開(kāi)使用、先加A液、后加B液脂肪蘇丹III染液（蘇丹IV染液）橘黃色（紅色）要用高倍顯微鏡觀察淀粉碘藍(lán)色煮2分鐘還原糖的鑒定：【實(shí)驗(yàn)步驟】脂肪的鑒定：先用低倍鏡觀察，后用高倍鏡觀察染色2-3分鐘顯微鏡下的脂肪顆粒

蛋白質(zhì)的鑒定：觀察顏色變化1．實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵在于實(shí)驗(yàn)材料的選擇。（1）可溶性還原糖的鑒定實(shí)驗(yàn)中，最理想的實(shí)驗(yàn)材料是含糖量較高的生物組織（或器官），而且組織的顏色較淺，或近于白色的。經(jīng)試驗(yàn)比較，顏色反應(yīng)的明顯程度依次為蘋(píng)果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜。（2）脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)材料最好選用富含脂肪的種子，且徒手切片要成功。（3）蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)，最好選用富含蛋白質(zhì)的生物組織，植物材料常用的是大豆，動(dòng)物材料常用的是雞蛋白?！緦?shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵及注意事項(xiàng)】（1）斐林試劑很不穩(wěn)定，故應(yīng)將組成斐林試劑的甲液（0．1g/mL的NaOH溶液）和乙液（0．05g/mL的CuSO４溶液）分別配制、儲(chǔ)存，使用時(shí)，再臨時(shí)配制，將4～5滴乙液滴入2mL甲液中，配完后立即使用。（2）雙縮脲試劑的使用，應(yīng)先加試劑A（0．1g/mL的NaOH溶液），造成堿性的反應(yīng)環(huán)境，再加試劑B（0．01g/mL的CuSO４溶液）。（3）在蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)中，若用蛋白質(zhì)作實(shí)驗(yàn)材料，必須稀釋?zhuān)悦鈱?shí)驗(yàn)后粘住試管，不易洗刷。（4）在鑒定脂肪的實(shí)驗(yàn)中，若用花生種子作實(shí)驗(yàn)材料，必須提前浸泡3～4小時(shí)，浸泡時(shí)間短了，不容易切片，浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，則組織太軟，切下的薄片不易成形，染色時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)?！咀⒁馐马?xiàng)】練習(xí)1．用蘇丹Ⅲ染液對(duì)脂肪組織進(jìn)行染色時(shí)，可用來(lái)沖洗浮色的藥品是（

）

A．HClB．H２ＯC．50%的酒精D．無(wú)水酒精2．下列哪個(gè)實(shí)驗(yàn)用到顯微鏡（

）

A．可溶性還原糖的鑒定B．蛋白質(zhì)的鑒定C．脂肪的鑒定D．淀粉的鑒定3．下列哪組試劑在使用過(guò)程中，必須經(jīng)過(guò)加熱（

）

A．斐林試劑鑒定可溶性還原糖的過(guò)程中

B．蘇丹Ⅲ和蘇丹Ⅳ染液在鑒定動(dòng)物組織中的脂肪時(shí)

C．雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)時(shí)

D．碘化鉀溶液鑒定淀粉時(shí)4．某人做實(shí)驗(yàn)時(shí)，用了放置時(shí)間很久的蔗糖，結(jié)果，此對(duì)照試管加入斐林試劑后，也出現(xiàn)了磚紅色沉淀，原因是（

）

A．蔗糖是還原性糖B．蔗糖被淀粉酶分解成還原性糖

C．蔗糖放置久了，被微生物分解成為還原性糖D．斐林試劑失效CCAC5．對(duì)斐林試劑和雙縮脲試劑的配方，敘述不正確的是（

）A．都含有NaOH溶液和CuSO４溶液B．斐林試劑的配制是將4～5滴0．05g/mL的CuSO４溶液滴入2mL0．1g/mL的NaOH溶液中即成C．雙縮脲試劑是將3～4滴0．01g/mL的CuSO４溶液滴入2mL0．1g/mL的NaOH溶液中混合而成的D．雙縮脲試劑含有兩種試劑：質(zhì)量濃度為0．1g/mL的NaOH溶液和質(zhì)量濃度為0．01g/mL的CuSO４溶液C6．不同的有機(jī)物與某些物質(zhì)反應(yīng)有特殊的顯色反應(yīng)，實(shí)驗(yàn)中常以此來(lái)鑒定不同的有機(jī)物，腎小球腎炎病人常伴隨水腫，其尿液（）

A．與二苯胺反應(yīng)呈藍(lán)色B．與斐林試劑反應(yīng)呈磚紅色

C．與蘇丹Ⅲ反應(yīng)呈橘黃色D．與雙縮尿試劑反應(yīng)呈紫色（2004年2月溫州一模理綜5題）D7、下列關(guān)于實(shí)驗(yàn)鑒定糖類(lèi)、蛋白質(zhì)和脂肪操作的敘述中，正確的是（

）A．鑒定還原性糖的斐林試劑甲液與乙液，可直接用于蛋白質(zhì)的鑒定B．鑒定脂肪的存在，要用顯微鏡觀察是否有被染成橘黃色或紅色的顆粒C．鑒定可溶性還原性糖時(shí)，先加入斐林試劑甲液搖勻后，再加入乙液D．鑒定蛋白質(zhì)時(shí)，雙縮脲試劑A液與B液要混合均勻后再加入含樣品的試管中B8、下面是一組探究生物體內(nèi)主要有機(jī)物存在與否的鑒別實(shí)驗(yàn)，按表中數(shù)字順序下列各選項(xiàng)表示正確的是（）

A．葡萄糖、蘇丹Ⅲ、紫色、二苯胺

B．蔗糖、蘇丹Ⅳ、紫紅色、碘液

C．還原糖、蘇丹Ⅳ、藍(lán)紫色、硫酸銅

D．果糖、蘇丹Ⅳ、紫色、二苯胺

D9、生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)三種有機(jī)物的鑒定實(shí)驗(yàn)中，以下操作錯(cuò)誤的是（

）

A、可溶性還原糖的鑒定，可用酒精燈直接加熱產(chǎn)生磚紅色沉淀

B、只有脂肪的鑒定需要使用顯微鏡

C、用雙縮脲試劑檢測(cè)蛋白質(zhì)不需要加熱

D、使用斐林試劑和雙縮脲試劑最好是現(xiàn)配現(xiàn)用

A37．根據(jù)“生物組織中可溶性糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定”實(shí)驗(yàn)，回答下列問(wèn)題：（1）鑒定成熟蘋(píng)果果肉中存在還原性糖所用的試劑是___________________，該試劑與細(xì)胞內(nèi)還原性糖發(fā)生作用，形成___________________沉淀，因此，可用該試劑檢驗(yàn)糖尿病人尿液中___________________的含量。（2）鑒定花生子葉中脂肪的實(shí)驗(yàn)中，能將脂肪染成橘黃色的染液是_________________，用其染色時(shí)，要用酒精沖洗浮色，這是因?yàn)開(kāi)_____________________________。（3）鑒定黃豆組織中存在蛋白質(zhì)時(shí)，向組織液中加入雙縮脲試劑A搖勻，再向樣液中加入雙縮脲試劑B搖勻。其中雙縮脲試劑B的量只有3～4滴，而不能過(guò)量，為什么？__________________________________。斐林試劑磚紅色葡萄糖蘇丹Ⅲ蘇丹Ⅲ能溶解在酒精中過(guò)量的雙縮脲試劑B會(huì)與試劑A反應(yīng)，使溶液呈藍(lán)色，而掩蓋生成的紫色（4）本實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：①斐林試劑極不穩(wěn)定，其甲液和乙液需_________________。使用時(shí)再臨時(shí)混合均勻用于實(shí)驗(yàn)。②雙縮脲試劑的使用，應(yīng)先加試劑_________________，造成堿性環(huán)境，再加試劑_________________。③在可溶性糖的鑒定中，對(duì)試管中溶液加熱時(shí)，試管底部不要觸及______________；試管口不要朝向___________，以免溶液沸騰時(shí)沖出試管造成燙傷。④蛋白質(zhì)的鑒定的樣液濃度不能_________________，以免實(shí)驗(yàn)后粘住試管壁，洗不凈。分別配制，儲(chǔ)存0．1g/mL的NaOH0．01g/mL的CuSO4燒杯底部實(shí)驗(yàn)者太大37．（1）斐林試劑磚紅色葡萄糖（2）蘇丹Ⅲ蘇丹Ⅲ能溶解在酒精中（3）過(guò)量的雙縮脲試劑B會(huì)與試劑A反應(yīng)，使溶液呈藍(lán)色，而掩蓋生成的紫色（4）①分別配制，儲(chǔ)存。/②0．1g/mL的NaOH；0．01g/mL的CuSO4。③燒杯底部；實(shí)驗(yàn)者。/④太大。2、據(jù)報(bào)道，繼“阜陽(yáng)假奶粉案”曝光后，“假牛奶案”逐漸浮出水面。一些不法商家生產(chǎn)的所謂“100%純牛奶”居然與牛沒(méi)有任何關(guān)系，只要用香精、糖、自來(lái)水和一些添加劑，就可以生產(chǎn)出“純牛奶”。更聳人聽(tīng)聞的是，不法商家利用垃圾堆里的破舊皮鞋、皮衣、皮帽及其他皮具，經(jīng)過(guò)化學(xué)、生物處理，水解出皮革中的原有蛋白（稱(chēng)“人造蛋白”），作為原料制成假牛奶。有人分析，“阜陽(yáng)假奶粉案”所造成的大頭娃娃致死，并非單純是蛋白質(zhì)含量低那么單純，很可能是添加了“人造蛋白”所致。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，探究“人造蛋白”是否比缺乏蛋白質(zhì)更有害兒童正常發(fā)育。（1）實(shí)驗(yàn)材料：幼齡大白鼠若干、真正的純牛奶、不含任何蛋白質(zhì)的假牛奶、含有“人造蛋白”的假牛奶、發(fā)育狀況測(cè)定裝置（可測(cè)定一定的發(fā)育狀況指標(biāo)）、飼養(yǎng)裝置等。（2）實(shí)驗(yàn)步驟①_________________________________________________________________________________②_____________________________________________________________________③在相同的且適宜的條件下飼養(yǎng)一段時(shí)間。④_____________________________________________________________________（3）預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，并做出相應(yīng)的結(jié)論。（寫(xiě)出其中2種即可）①_____________________________________________________________________②_____________________________________________________________________選取年齡相當(dāng)、體重相當(dāng)、發(fā)育良好的大白鼠若干，平均分為三組，標(biāo)記為A、B、C。分別飼養(yǎng)每天分別給A、B、C三組大白鼠飼喂等量的真正的純牛奶、不含任何蛋白質(zhì)的假牛奶、含有“人造蛋白”的假牛奶用發(fā)育狀況測(cè)定裝置測(cè)定A、B、C三組鼠的發(fā)育狀況。記錄各組發(fā)育狀況指標(biāo)，計(jì)算出各組的平均值，進(jìn)行比較分折①A組發(fā)育正常，B組和C組均不正常，但B、C兩組的發(fā)育狀況指標(biāo)差異不顯著。說(shuō)明“人造蛋白”并不比缺乏蛋白質(zhì)對(duì)兒童正常發(fā)育更有害②A組發(fā)育正常，B組和C組不正常，但B組比C組發(fā)育狀況指標(biāo)好，差異顯著。說(shuō)明“人造蛋白”比缺乏蛋白質(zhì)對(duì)兒童正常發(fā)育更有害（注：其他的合理答案均可）參考答案：2．（2）①選取年齡相當(dāng)、體重相當(dāng)、發(fā)育良好的大白鼠若干，平均分為三組，標(biāo)記為A、B、C。分別飼養(yǎng)②每天分別給A、B、C三組大白鼠飼喂等量的真正的純牛奶、不含任何蛋白質(zhì)的假牛奶、含有“人造蛋白”的假牛奶④用發(fā)育狀況測(cè)定裝置測(cè)定A、B、C三組鼠的發(fā)育狀況。記錄各組發(fā)育狀況指標(biāo)，計(jì)算出各組的平均值，進(jìn)行比較分折（3）①A組發(fā)育正常，B組和C組均不正常，但B、C兩組的發(fā)育狀況指標(biāo)差異不顯著。說(shuō)明“人造蛋白”并不比缺乏蛋白質(zhì)對(duì)兒童正常發(fā)育更有害②A組發(fā)育正常，B組和C組不正常，但B組比C組發(fā)育狀況指標(biāo)好，差異顯著。說(shuō)明“人造蛋白”比缺乏蛋白質(zhì)對(duì)兒童正常發(fā)育更有害（注：其他的合理答案均可）3。蛋清的主要成分是蛋白質(zhì)，在堿性的溶液中，蛋白質(zhì)與CuSO4反應(yīng)能產(chǎn)生紫色物質(zhì)，這是蛋白質(zhì)的雙縮脲反應(yīng)。請(qǐng)根據(jù)這一反應(yīng)特征，利用下列材料，設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)來(lái)證明人的唾液中含有蛋白質(zhì)。實(shí)驗(yàn)材料：5%的NaOH

溶液、3%的CuSO4溶液、水、試管、滴管、脫脂棉球、鑷子和小燒杯。實(shí)驗(yàn)步驟：（1）收集唾液________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________（2）__________________________________________________（3）_______________________________________________（4）結(jié)果觀察：_________________________________用清水將口漱凈，口含一塊脫脂棉；片刻用鑷子取出，并將其中的唾液擠入試管（或用涼開(kāi)水漱口后，略微張開(kāi)口，舌尖抵在下頜門(mén)齒的下方，約3分鐘，將下唇擱在另一小燒杯口上，唾液就就沿下唇流入燒杯中。）用滴管向試管中滴加2—3滴5%的NaOH溶液，振蕩。用滴管向試管中滴加2—3滴3%的CuSO4溶液，振蕩?kù)o置一會(huì)兒后，觀察到紅紫色，說(shuō)明唾液中含有蛋白質(zhì)驗(yàn)證生物組織中的可溶性還原糖4。某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物，產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)，可溶性糖中的還原糖（如______________________________），與斐林（Fehling）試劑（由氫氧化鈉和硫酸銅溶液配制而成）發(fā)生作用，可以生成磚紅色沉淀。（1）取一支試管，向試管內(nèi)注入2ml蘋(píng)果組織液（2）向試管內(nèi)注入2ml剛配制的斐林試劑（注意：必須將斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后使用，切勿分別加入生物組織樣液中進(jìn)行檢測(cè)），振蕩試管，使用權(quán)溶液混合均勻，此時(shí)溶液呈______________（3）將這支試管入進(jìn)盛有開(kāi)水的大澆杯中，用酒精燈加熱煮沸2分鐘左右。觀察試管中溶液的顏色變?yōu)開(kāi)___________葡萄糖、果糖、麥芽糖藍(lán)色磚紅色5、（06徐州一模）

（1）脂肪的鑒定中，常用體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液洗去浮色，這是因?yàn)?/p>

_________________________________。使用雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)時(shí)，從時(shí)間上應(yīng)先加質(zhì)量濃度為0.1g/mL的_____________溶液；從用量上需加雙縮脲試劑A____mL,而雙縮脲試劑B僅用3-4滴。（2）鑒定DNA常用于的試劑是________________________。（3）用洋蔥根尖作材料觀察植物細(xì)胞的有絲分裂，無(wú)法通過(guò)跟蹤分生區(qū)的某個(gè)特定細(xì)胞觀察有絲分裂的各個(gè)時(shí)期，原因是___________________________

。（4）用將新鮮的韭黃或者蒜黃做色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)，幾分鐘后濾紙條上不能呈現(xiàn)的色素帶名稱(chēng)是_________________________________。（5）某同學(xué)用0.5g/mL的蔗糖溶液做植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原實(shí)驗(yàn)，其結(jié)果是質(zhì)壁分離明顯，但不能復(fù)原,這是因?yàn)開(kāi)________________________________。蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ溶于酒精NaOH2二苯胺（解離后）細(xì)胞死亡葉綠素a和葉綠素b（答不全不得分）蔗糖濃度太大，細(xì)胞嚴(yán)重失水而死亡雞的血液是由血細(xì)胞和血漿組成的．在血細(xì)胞內(nèi)含有大量的蛋白質(zhì)，如紅細(xì)胞內(nèi)含有血紅蛋白，血漿中含有的蛋白質(zhì)叫血漿蛋白．請(qǐng)你利用所學(xué)知識(shí)設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)來(lái)證明血漿蛋白的存在。材料與儀器：新鮮雞血、檸橄酸鈉（可防止血液凝固）、試管及其他所齋儀器與試劑．（1）你采用的實(shí)驗(yàn)依據(jù)的原理是__________________________________（2）實(shí)驗(yàn)步驟：第一步：取新鮮雞血放入試管并加入少量的檸檬酸鈉；第二步：________________________