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實(shí)驗(yàn)六雙波長(zhǎng)分光光度法測(cè)定第一頁,共十七頁,編輯于2023年,星期二一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
1.掌握雙波長(zhǎng)分光光度法測(cè)定原理。2.學(xué)習(xí)雙波長(zhǎng)分光光度法在復(fù)方制劑分析中的應(yīng)用。第二頁,共十七頁,編輯于2023年,星期二復(fù)方磺胺甲噁唑片的處方為:磺胺甲噁唑(SMZ)400g甲氧芐啶(TMP)80g制成1000片每片含SMZ:360~440mg(Chp2000)第三頁,共十七頁,編輯于2023年,星期二二、基本原理
當(dāng)吸收光譜重疊的a、b兩組分共存時(shí),若要消除a組分的干擾測(cè)定b組分,可在a組分的吸收光譜上選擇兩個(gè)吸收度相等的兩波長(zhǎng)λ1和λ2,測(cè)定混合物的吸光度差值。然后根據(jù)ΔA值計(jì)算b的含量。
第四頁,共十七頁,編輯于2023年,星期二第五頁,共十七頁,編輯于2023年,星期二磺胺甲噁唑(SMZ)在257nm波長(zhǎng)處有最大吸收;甲氧芐啶(TMP)在此波長(zhǎng)吸收最小并在304nm波長(zhǎng)附近有一等吸收點(diǎn),故選定257nm為SMZ的測(cè)定波長(zhǎng)(λ2),在304nm波長(zhǎng)附近選擇參比波長(zhǎng)(λ1)。
第六頁,共十七頁,編輯于2023年,星期二A257=AS,257+AT,257A304=AS,304+AT,304ΔA=A257-A304∵AT,257=AT,304
=AS,257-AS,304
=ΔECSMZlΔA與CSMZ有線性關(guān)系。第七頁,共十七頁,編輯于2023年,星期二在λ2與λ1兩波長(zhǎng)處分別測(cè)定供試品溶液與SMZ對(duì)照品溶液的吸收度,求出供試品溶液吸收度差值(ΔAx)、SMZ對(duì)照品溶液的吸收度差值(ΔAs),計(jì)算,即得。第八頁,共十七頁,編輯于2023年,星期二每片中含SMZ的毫克數(shù)Cs=0.505mg/mlW稱=0.06960gW=552.64mg第九頁,共十七頁,編輯于2023年,星期二
由于參比波長(zhǎng)對(duì)測(cè)定影響較大,故采用對(duì)照品溶液來確定。此波長(zhǎng)可因儀器不同而異,測(cè)定時(shí)應(yīng)仔細(xì)選擇。第十頁,共十七頁,編輯于2023年,星期二三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1、供試品溶液的制備(教師準(zhǔn)備)取本品10片,精密稱定,研細(xì),精密稱取適量(約相當(dāng)于磺胺甲噁唑50mg與甲氧芐啶10mg),置于100mL量瓶中,加乙醇適量,振搖15分鐘使磺胺甲噁唑與氧芐啶溶解,加乙醇至刻度,搖勻,濾過,取續(xù)濾液作為供試品溶液。第十一頁,共十七頁,編輯于2023年,星期二二、對(duì)照品溶液的制備(教師準(zhǔn)備)精密稱取在105℃干燥至恒重的磺胺甲噁唑?qū)φ掌?0mg與甲氧芐啶對(duì)照品10mg,分別置于100mL瓶中,各加乙醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,分別作為對(duì)照品溶液(1)與對(duì)照品溶液(2)。第十二頁,共十七頁,編輯于2023年,星期二三、磺胺甲噁唑的測(cè)定精密量取供試品溶液與對(duì)照品溶液(1),(2)各2mL,分別置于100mL量瓶中,各加0.4%氧化鈉溶液稀釋至刻度,搖勻。第十三頁,共十七頁,編輯于2023年,星期二取對(duì)照品溶液(2)的稀釋液,以257nm為測(cè)定波長(zhǎng)(λ2),在304nm波長(zhǎng)附近(每間隔0.5nm)選擇等吸收點(diǎn)波長(zhǎng)為參比波長(zhǎng)(λ1),要求ΔA=Aλ2-Aλ1=0。第十四頁,共十七頁,編輯于2023年,星期二再在λ2與λ1兩波長(zhǎng)處分別測(cè)定供試品溶液的稀釋液與對(duì)照品溶液(1)稀釋液的吸收度,求出各自的吸收度差值(ΔA),計(jì)算,即得。第十五頁,共十七頁,編輯于2023年,星期二四、操作注意事項(xiàng)測(cè)定之前應(yīng)先檢查儀器波長(zhǎng)是否準(zhǔn)確。第十六頁,共十七頁,
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