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文檔簡介
實驗一血涂片的制作及免疫細胞的形態(tài)觀察第一頁,共十二頁,編輯于2023年,星期二一、實驗目的①掌握微量采血及血涂片的制作方法②學習使用光學顯微鏡觀察免疫細胞第二頁,共十二頁,編輯于2023年,星期二二、實驗原理
血涂片是臨床化驗中最常規(guī)的技術,也是血液學研究中的最基本技術。將血液樣品制成單層細胞的涂片標本,經(jīng)瑞氏(Wright)染液染色后,不同免疫細胞中的顆粒可以呈現(xiàn)不同的顏色。根據(jù)細胞中顆粒的顏色、大小及多少,再結(jié)合細胞的大小及細胞核的形態(tài),就可以將免疫細胞進行分類計數(shù)。
第三頁,共十二頁,編輯于2023年,星期二三、實驗器材器材:醫(yī)用一次性采血針、酒精棉球、鑷子、經(jīng)脫脂洗凈的載玻片等試劑:瑞氏(Wright)染液,瑞特氏染料0.1克溶于60ml
甲醇中,過濾。貯褐色瓶中備用。(配置時,要先將瑞特氏染料置研缽體內(nèi)邊研邊滴加甲醇,使染料溶液得更好。)第四頁,共十二頁,編輯于2023年,星期二四、實驗步驟1.采血采血前用70%酒精棉球消毒人的指腹或耳垂,干后用采血針刺破指腹或耳垂的皮膚;動物采血時先將耳部剪毛,酒精消毒后,刺破動物耳部皮膚,擠去第一滴血不要(因含單核細胞較多)。第五頁,共十二頁,編輯于2023年,星期二第六頁,共十二頁,編輯于2023年,星期二2.涂片擠出第二滴血置于載玻片的一端,再取另一張邊緣光滑的載玻片,斜置于血涂片的前緣,先向后稍移動輕輕觸及血滴,使血液沿玻片端展開成線狀,兩玻片的角度以30~40O為宜(角度過大血膜較厚,角度小則血膜?。?,輕輕將載玻片向前推進,即涂成血液薄膜(如圖),推進時速度要一致,否則血膜成波浪形,厚薄不勻。第七頁,共十二頁,編輯于2023年,星期二第八頁,共十二頁,編輯于2023年,星期二3.染色待涂片在空氣中完全干燥后,滴加數(shù)滴瑞氏染液蓋滿血膜為止,染色1~3min。然后滴加等量的緩沖液(pH6.4)或蒸餾水沖去染液,吸水紙吸干,鏡檢。第九頁,共十二頁,編輯于2023年,星期二4.封片經(jīng)染色的涂片完全干燥后,用中性樹膠封片保存。第十頁,共十二頁,編輯于2023年,星期二5.觀察分別用低倍、高倍和油鏡觀察血涂片,分辨不同的血細胞類型。第十一頁,共十二頁,編輯于2023年,星期二五、實驗報告
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